CAPÍTULO III RESPIRÓMETRO BODTRAK TM II
3.1 Descripción
El respirómetro BODTrakTM II consta fundamentalmente de una unidad
modular como se muestra en la siguiente figura. Está provista de un cable de
alimentación eléctrica aprobado tipo UL/CSA de 115 VCA con enchufe estilo NEMA
5-15P; un cable de alimentación eléctrica de 230 VCA armonizado con enchufe
estilo Europa Continental; y, una fuente de alimentación con modalidad de selección
automática de 115 V o 230 V.
Figura 3.1 Unidad modular BODTrakTM II
Otras partes que incluye este equipo son: 6 Botellas de 492 mL; 6 Agitadores
magnéticos para y 6 tapones herméticos.
3.2 Fundamento de operación
Las bacterias en la muestra usan el oxígeno mientras consumen materia
orgánica en las botellas de la muestra. El aire en la botella que está por encima de la
muestra contiene 21% de oxígeno y reabastece el oxígeno disuelto utilizado por las
bacterias. Durante el periodo de la prueba, barras de agitación mezclan
continuamente en cada botella. Esto mueve el oxígeno del aire hacia la muestra lo
cual ayuda a simular condiciones naturales.
El sistema BODTrak™ II está sellado para prevenir cambios de presión
atmosférica externos que afecten a la botella del examen. Sensores de presión
controlan la presión del aire dentro de la botella del examen. Cuando el oxígeno es
consumido, la presión en el espacio de la cabeza de la botella decae. La caída de la
presión está correlacionada directamente con la DBO.
Se produce dióxido de carbono cuando los microorganismos oxidan materia
orgánica en la muestra. El dióxido de carbono debe de ser eliminado del sistema
para que éste no interfiera en la medición. Se deben de colocar gránulos
comprimidos de hidróxido de potasio en el sellado de cada botella de muestra antes
de que el sistema elimine el dióxido de carbono.
3.3 Ventajas del BODTrakTM II
Las ventajas del BODTrak™ II como una alternativa al método de dilución
convencional empleado en el método de Winkler:
a) Tiempo mínimo en la preparación de la muestra.
b) Disminución del tiempo total de la prueba.
c) El método del BODTrak™ II ofrece los resultados comparativos con el
método de dilución (DBO5) en 2 o 3 días.
d) No se requiere de calibración y medición del oxígeno disuelto.
e) El BODTrak™ II es fácil de monitorear.
f) La muestra es agitada constantemente y mantenida en condiciones
naturales. Esto hace que los resultados obtenidos en el BODTrak™ II
sean similares a las ocurrencias encontradas en un ambiente natural. El
método de dilución no agrega oxígeno adicional a la muestra. Esto origina
una enorme reducción en el porcentaje de oxígeno y un posible retardo en
las reacciones bioquímicas.
g) La DBO (Demanda Biológica de oxígeno) puede ser controlada en
cualquier momento debido a que el instrumento muestra constantemente
el resultado de la DBO. Los cambios de la presión dentro del sistema
cerrado BODTrak™ II se muestran gráficamente en miligramos por litro
(mg/L) en un pantalla de LCD. El sistema suministra 360 puntos uniformes
de datos dentro de un periodo seleccionado de tiempo.
h) El sistema BODTrak™ II remueve continuamente el dióxido de carbono del
mismo con lo cual se controla la diferencia de presión la cual es
proporcional a la cantidad de oxígeno usado.
i) Desgasear puede provocar errores negativos cuando se aplica calor a la
muestra para llegar a la temperatura del experimento. El sistema
BODTrak™ II realiza ajustes para este evento. El BODTrak™ II no realiza
el examen hasta que se alcance el equilibrio en la temperatura.
3.4 Manual de operación resumido
3.4.1 Controles de operación
Los controles de
operación del BODTrak™ II se
muestran en la Figura 3.2.
1. Pantalla.
2. Teclas de selección de canales.
3. Teclas de flecha (*Las teclas
ON/OFF inician y paran la prueba.
Estas teclas no encienden o
apagan el instrumento).
4. Teclas ON/OFF*.
5. Indicador de energía.
Figura 3.2 Controles de operación del BODTrakTM II
TECLAS DE SELECCIÓN DE CANALES
Las teclas de selección del canal correspondiente (1 al 6) son utilizadas para
mostrar los datos de alguna de las 6 botellas. Las teclas de selección de los canales
también son utilizadas para elegir parámetros y editarlos en el menú de
configuración (Tabla 3.1).
Tabla 3.1 Tecla de canal, parámetros de configuración
Canal Parámetro
1 Año (0-99)
2 Mes (1-12)
3 Día (1-31)
4 Hora (0-24)
5 Minuto (0-59)
6 Duración de la prueba (5, 7 o 10 días)
TECLAS DE FLECHAS
En la pantalla aparece una gráfica con los valores de DBO en el eje vertical y
el tiempo en días en el eje horizontal. Con las teclas de flechas izquierda o derecha
es posible mover el cursor a lo largo de la curva de DBO para mostrar las
coordenadas aproximadas (datos de tiempo, y DBO) del punto de selección. Los
datos del intervalo de tiempo y la DBO se muestran en la parte inferior derecha de la
pantalla. El cursor se posiciona automáticamente en el punto del dato más reciente
del canal seleccionado en la pantalla.
Además, presionando y manteniendo las dos teclas de flechas al mismo
tiempo para ir al menú de configuración del instrumento. Las teclas de flechas así
mismo se pueden utilizar para cambiar los valores de tiempo, fecha, duración de la
prueba y rango.
TECLA ON
Sirve para acceder al menú de selección del rango desde la pantalla del
canal. Para iniciar la prueba de un canal seleccionado presione y mantenga la tecla
ON.
TECLA OFF
Cuando una prueba está en los modos de DELAY o RUN apretando y
manteniendo la tecla OFF se termina de manera manual la prueba. El instrumento
mostrará en pantalla END. La tecla OFF así mismo también se utiliza para salir del
menú de configuración o del menú de selección del rango. Cualquier cambio
realizado deberá de ser guardado antes de salir.
AJUSTE DEL RELOJ
Para realizar los ajustes de tiempo en todos los canales se procede de la
siguiente manera:
A. Todos los canales deben de mostrar END o CLEAR antes de que el reloj
pueda ser ajustado.
B. Presione y mantenga las dos teclas de flechas al mismo tiempo hasta que se
muestre en el menú de configuración del instrumento.
C. Seleccione el parámetro del reloj que desea ajustar presionando la tecla del
canal correspondiente (Tabla 3.1).
D. Utilice las teclas de flechas para editar el parámetro seleccionado.
E. Ajuste cada parámetro de la misma manera.
F. Cuando todos los ajuste de tiempo estén completos, presione la tecla OFF
para guardar los datos y regresar a la pantalla de datos.
3.4.2 Procedimientos del BODTrak™ II
Hay tres variaciones de procedimientos en el BODTrak™ II.
a) El procedimiento simplificado se recomienda cuando no es necesaria la
inoculación, nutrientes extras o buffers. Así mismo se recomienda cuando los
requerimientos de exactitud no son rigurosos.
b) El procedimiento Hach GGA (glucosa/ácido glutámico) se recomienda
para obtener precisión y un buen desempeño en los exámenes usando GGA
inoculado. Se recomienda también cuando la precisión de la prueba es
importante.
c) El procedimiento estándar Hach se recomienda cuando las muestras están
inoculadas o cuando se han agregado nutrientes o reactivos. Use este
método cuando siga métodos éstandarizados para el análisis del agua y
aguas residuales, edición número 21, método 5210 D del método
respirométrico.
Todas las variaciones de procedimiento son seguidas de pasos de
culminación para todos los procedimientos. Es posible usar una combinación de
estos procedimientos con un instrumento pero en diferentes botellas. Sólo puede ser
elegida una duración de la prueba.
Antes de comenzar el análisis es importante tener en cuenta las siguientes
consideraciones:
• Utilice las tablas de volumen para muestras que sean aplicables para cada
procedimiento.
• Si se interrumpe el suministro de energía cuando el instrumento se encuentra
en el estado DELAY, la prueba se detendrá y el estado cambiará a CLEAR
cuando la energía regrese. Comience la prueba de nuevo.
• Si se interrumpe la energía cuando el instrumento se encuentra en el estado
de RUN, la prueba se reiniciará cuando regrese la energía.
• Mantenga agua deionizada durante las noches en una incubadora a 20 ºC.
Agite el agua deionizada para saturarla con aire.
• Ponga el inóculo en la incubadora de DBO a una temperatura de 20 ºC. Sea
cuidadoso de no perturbar la mezcla inoculada. Agregue la solución desde la
parte superior con la pipeta.
• Se requiere de una disolución si las muestras tienen una DBO de más de 700
mg/L (Consideraciones especiales).
• Para elevaciones arriba de los 5000 pies (1525 m) sobre el nivel del mar el
rango de 0 a 35 mg/L de DBO se reduce a 0 a 25 mg/L DBO. No es necesario
el ajuste para otro rango de pruebas.
• Consulte las consideraciones especiales que incluyen el inoculado de la
muestra y el pretratamiento.
• Utilice solamente barras de agitación y botellas para el BODTrak™ II. Éstas
se encuentran específicamente diseñadas para ser usadas con el BODTrak™
II.
3.5 Procedimiento simplificado
3.5.1 Preparación de la muestra
1. Caliente o enfríe la muestra entre 19 y 21 ºC (66 a 70 ºF).
2. Homogenice la muestra en la licuadora si es que contiene una gran cantidad
de sólidos en suspensión o sedimentables.
3. Elija el tamaño correcto de la escala para el tamaño de su muestra (Tabla
3.2). Mida la muestra en una probeta graduada.
4. Agregue el contenido de 2 sobres de solución buffer con nutrientes a la
probeta graduada.
5. Transfiera el contenido de la probeta a la botella del BODTrak™ II.
6. Repita los pasos del 1 al 5 para muestras adicionales.
7. Continué con los pasos que complementan el proceso para todos los
procedimientos.
Tabla 3.2 Volúmenes de muestra simplificados
Escala de medición de DBO en mg/L Volumen de la muestra en mL
0 a 35 420
0 a 70 355
0 a 350 160
0 a 700 95
3.5.2 Pasos que complementan el proceso
1. Ponga una barra agitadora para BODTrak™ II dentro de la botella.
2. Ponga un tapón hermético en el cuello de la botella.
3. Utilice la cuchara de espátula para agregar 2 comprimidos de hidróxido de
potasio en el tapón hermético. Repita los pasos del 1 al 3 para cada botella
con las muestras.
4. Ponga las botellas en el chasis del BODTrak™ II. Conecte el tubo
correspondiente a cada botella con la muestra y apriete el tapón.
5. Ponga el instrumento en la incubadora. La temperatura de la incubadora debe
de ser de 20 ± 1 ºC (68 ± 1 ºF). Nota: El funcionamiento de instrumento no ha
sido probado a otras temperaturas.
6. Conecte y encienda el instrumento. Asegúrese de que todas las barras
agitadoras están rotando. Si no, levante la botella y colóquela de nuevo en su
posición.
7. Presione y mantenga las dos teclas de flechas al mismo tiempo para ir al
menú de configuración del instrumento. Nota: Ajuste el tiempo y la fecha de
ser necesario
8. Presione la tecla del canal 6 para acceder y probar el parámetro de la
duración de la prueba. Utilice las teclas de flechas para elegir una prueba de
5, 7 o 10 días. Nota: La longitud de la prueba seleccionada es para los 6
canales.
9. Presione OFF para guardar los valores y salir del menú.
10. Para iniciar la prueba, presione el número del canal aplicable a la botella.
11. Presione la tecla ON. El menú de selección del rango se muestra.
12. Utilice las teclas de flecha para elegir el rango de la prueba. Nota: Utilice la
tecla de flecha izquierda para los rangos de 0 a 35 y de 0 a 70 mg/L. Utilice la
tecla de flecha derecha para los rangos de 0 a 350 y de 0 a 700 mg/L.
13. Presione y mantenga la tecla ON para iniciar la prueba. Se desplegará una
gráfica. Nota: Para cancelar la prueba presione y mantenga la tecla OFF.
Nota: El instrumento tiene incorporado un periodo de equilibrio de 1 hora
antes de la recolección de datos, para que la muestra se adecúe. La pantalla
mostrará DELAY durante este periodo.
14. Repita los pasos del 10 al 13 nuevamente para ajustar el rango de la prueba y
comenzar con cada uno de los 6 canales. No es necesario utilizar los 6
canales, si hay menos de 6 muestras disponibles.
3.5.3 Curvas típicas
Las curvas típicas de una prueba en un periodo de 10 días se muestran en la
Figura 3.3
1 Típica con variación del substrato
2 Típica
3 Típica con retraso
Figura 3.3 Curvas típicas
3.5.4 Consideraciones especiales
Dilución de la muestra
Cuando el oxígeno requerido por una muestra es más de 700 mg/L, diluya la
muestra con agua desionizada o agua destilada de alta calidad.
Calcule los resultados incluyendo el factor de dilución adicional. Ejemplo: Si la
DBO de la muestra es de 1000 mg/L, diluya la muestra en proporción de 1:1 con
agua destilada o desionizada. La DBO estimada será ahora de 500 mg/L. Utilice el
volumen de la muestra especificado en la tabla en el rango de 0 a 700 mg/L del
método elegido. Multiplique la lectura del instrumento por 2. Si se utiliza
procedimiento estándar Hach, continúe con los cálculos restantes.
Inoculado de la muestra
Algunos tipos de muestras de DBO no contienen suficientes bacterias para
oxidar la materia orgánica en la muestra. Muchos tipos de aguas industriales son
este caso. Algunos efluentes de las plantas de tratamiento de agua del alcantarillado
están cloradas y esencialmente estériles. Una prueba de DBO no puede realizarse
en ausencia de bacterias. Para probar dichas muestras, inocule cada botella con una
fuente fiable para que contenga una población adecuada de bacterias.
El influente de aguas residuales de alguna planta de tratamiento puede ser
una de las fuentes preferidas de fertilizante para las muestras. Un licor mezclado o
un afluente sin desinfectar pueden ser usados para fertilizar, pero se recomienda un
inhibidor de la nitrificación. Algunas veces es apto el usar fuentes de fertilización
comerciales. Para prepararlas observe las instrucciones del fabricante.
Temperatura de la muestra
El Standard Methods For The Examination Of Water and Wastewater, edición
número 21, 5210 D, 2005; recomiendan una temperatura de incubación de 20 ± 1 ºC
(68 ºF) para la prueba de DBO. Ponga el BODTrak™ II en una incubadora que se
encuentre ajustada a 20 ± 1 ºC. Hach pone a su disposición una incubadora
aplicable para la prueba de DBO. Caliente o enfríe las muestras a 20 ± 1 ºC. Nota:
El funcionamiento del instrumento no ha sido validado a otras temperaturas
diferentes de los 20 ºC.
Materiales tóxicos
Muestras industriales y cloradas frecuentemente contienen sustancias tóxicas
y requieren de consideraciones especiales cuando se realicen las pruebas de DBO.
Los materiales tóxicos en la muestra pueden causar bajos valores de la DBO. Diluya
la muestra para minimizar los materiales tóxicos o sus efectos. Refiérase a los
métodos estandarizados para examinar el agua y las aguas residuales, edición 21,
5210 D.
Cloro
Cualquier rastro de cloro deberá de ser eliminado de la muestra antes de
realizar la muestra. Mantenga la muestra a temperatura de laboratorio por 1 o 2
horas antes de la prueba para disipar las concentraciones de cloro bajas. Si quedara
algún remanente de cloro después de reposar durante dos horas o si la
concentración de cloro es demasiado alta, agregue tiosulfato de sodio para eliminar
el cloro:
1. En matraz Erlenmeyer de 250 mL agregue 100 mL de muestra.
2. Agregue 10 mL de 100 g/L de solución de ioduro potásico y 10 mL de
solución estándar de 0,02 N ácido sulfúrico al matraz erlenmeyer.
3. Agregue 3 gotas de solución indicadora de almidón y revuelva hasta
mezclarlo.
4. Valore de un azul oscuro a una mezcla sin color con solución estándar 0,025
N de tiosulfato de sodio.
5. Calcule la cantidad de solución estándar de tiosulfato de sodio necesaria para
declorar la muestra remanente:
( )( ) (3.1)
=
100
6. Agregue a la muestra la cantidad necesaria de solución estándar de tiosulfato
de sodio 0,025 N y mezcle completamente. Entre 10 o 20 minutos después,
realice la prueba de la DBO.
Efecto pH
Se presentan bajos resultados bajos de la DBO cuando el pH de la muestra
está fuera del rango de 6 a 8. Mantenga este pH para simular las condiciones de una
muestra de origen o ajuste el pH neutralizándolo (tamponado a un pH 7). Utilice
ácido sulfúrico 1,0 N (o más débil) para neutralizar muestras cáusticas. Utilice
hidróxido de sodio 1,0 N (o más débil) para neutralizar muestras ácidas. Cuando la
muestra tenga el pH ajustado, podrá inocularse.
Supersaturación
Equilibre muestras frías supersaturadas (que contengan más de 9 mg/L de
oxígeno disuelto a 20 ºC) a saturación:
a) Caliente o enfríe la muestra a una temperatura aproximada de 20 ºC.
b) Llene a la mitad una botella con la muestra.
c) Agite durante 2 minutos o ventile con aire filtrado comprimido durante 2 horas
3.5.5 Curvas incorrectas
A continuación, en la figura 3.4 se muestran curvas incorrectas de la DBO
para las pruebas de 10 días de duración.
1. Alta demanda de oxígeno
2. Nitrificación
3. Excesivo retraso
4. Temperatura inicial de la muestra por
debajo de 20 ºC o supersaturada con
oxígeno
5. Fuga o derrame en la botella
Figura 3.4 Curvas de DBO erróneas
Alta demanda de oxígeno
Las muestras que están por encima del rango (por ejemplo, una DBO por
encima de los 350 mg/L cuando se está tomando una muestra de 160 mL) causarán
resultados como los mostrados en la curva 1 (Figura 3.4). Diluya la muestra
(consulte las consideraciones especiales) o utilice un rango de DBO más alto y un
volumen de muestra diferente (Tabla 3.2).
Cuando el rango de la DBO es desconocido:
a) Utilice los resultados de la prueba química de la demanda de oxígeno (DQO).
Un valor de estimado de DBO puede ser obtenido multiplicando la DQO por
0,68.
b) Utilice los resultados para series de pruebas de DBO usando la misma
muestra pero diferentes volúmenes.
c) Utilice diluciones para elegir un rango de DBO adecuado.
Típicamente, el efluente está en el rango de 0-70 mg/L mientras el influente
está en el rango de 0-700 mg/L. Cuando la DBO de la muestra es mayor de 700
mg/L, prepare una solución diluida (Consulte las consideraciones especiales).
Nitrificación
Las condiciones mostradas en la curva 2 son un ejemplo de nitrificación
(Figura 3.4). Las desviaciones de la curva típica (mostradas con la línea punteada)
son claramente evidentes por el incremento cóncavo cerca del final del periodo de la
prueba.
La oxidación biológica del nitrógeno orgánico usualmente ocurre después de
5 días con residuos domésticos. Las bacterias para la nitrificación actúan más
lentamente que los otros tipos de bacterias.
Sin embargo, algunas muestras contienen una alta concentración de bacterias
para la nitrificación y los resultados de la nitrificación suceden de manera más
rápida. Controle los problemas de la nitrificación con el inhibidor para la nitrificación
de Hach. Agregue el polvo inhibidor dentro de una botella vacía para las muestras y
a continuación agregue la muestra. Con la tapa dispensadora Hach, agregue 6
cargas (aproximadamente 0,48 gramos) dentro de la botella vacía.
Retardo excesivo
La curva 3 (Figura 3.4) muestra una prueba que no inició con la suficiente
cantidad de bacterias durante el periodo de incubación. Para realizar una prueba con
una muestra sin la cantidad suficiente de bacterias, inocule la muestra.
La aclimatación de las bacterias así mismo puede causar resultados como los
de la curva 3. Esto ocurre en ocasiones con muestras estándares e inóculo
agregado. Agregue más inóculo o elija una fuente de cultivo diferente.
Temperatura de la muestra
Los valores negativos iniciales de la curva 4 (Figura 3.4) muestran que la
temperatura inicial de la muestra estaba por debajo del rango especificado de 20 ± 1
ºC. Una muestra supersaturada con oxígeno así mismo también mostrará este tipo
de curva.
Fuga o derrame en la botella
La curva 5 (Figura 3.4) muestra una fuga en la botella. Una fuga en la botella
puede así mismo causar que no haya respuesta por parte del sistema. Si eso
ocurriese, verifique el sello de la tapa y el tapón de la botella si es que tiene algún
contaminante o daño.
