FIBRINOGEN

Fibrinógeno
Método de Clauss

Determinación cuantitativa de Fibrinógeno La muestra diluida debe ser procesada antes de 1 hora.
IVD 2. Preparar las siguientes diluciones del Calibrador en Tampón Imidazol:
Conservar a 2-8ºC Dilución del Calibrador 1/40 1/30 1/20 1/10 1/5
PRINCIPIO DEL MÉTODO Tampón Imidazol (mL) 3.9 2.9 1.9 0.9 0.4
El Fibrinógeno, en presencia de un exceso de trombina, se transforma en
Fibrina. COAGULATION CAL (mL) 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
El tiempo de formación del coágulo es inversamente proporcional a la Factor 10/40* 10/30* 10/20* 10/10* 10/5*
concentración de Fibrinógeno presente en la muestra de plasma.
La determinación de fibrinógeno por el tiempo de coagulación de trombina, está Concentración (mg/dL) 0.25* x c 0.33* x c 0.5* x c 1* x c 2* x c
basada en el método descrito por Clauss1. En presencia de altas (c = Valor del Calibrador)
concentraciones de trombina, el tiempo necesario para la formación del coágulo 3. A 0,2 mL de cada dilución añadir 20 µL de R3 y atemperar a 37ºC durante 4-6
en el plasma diluido es inversamente proporcional a la concentración de minutos.
fibrinógeno. 4. Añadir 0,1 mL de reactivo R1 y cronometrar la formación de coágulos. No
atemperar la trombina R1.
SIGNIFICADO CLÍNICO
El Fibrinógeno (Factor I), proteína sintetizada en el hígado, es un componente CÁLCULOS
de la sangre utilizado para formar el coágulo. Su determinación nos ayuda a 1. Calcular la media de los duplicados de los tiempos de coagulación,
evaluar las alteraciones en los mecanismos de coagulación. inmediatamente después de finalizar la reacción. Utilizar los cinco puntos del
La concentración de fibrinógeno se incrementa en inflamaciones agudas y calibrador para crear una curva de los tiempos obtenidos (s) frente a los valores de
embarazo; por el contrario se observan valores bajos en terapias trombolíticas, concentración de Fibrinógeno de cada dilución del Calibrador (mg/dL).
enfermedades hepáticas, disfibrinogenia congénita, DIC (Coagulación 2. Trazar la mejor curva. Examinar la curva y, si es necesario, omitir los puntos no
intravascular diseminada) y pancreatitis1. lineales. La curva final debe constar de tres puntos consecutivos como mínimo. La
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos creación de la curva sólo con los puntos más lineales producirá la mejor
clínicos y de laboratorio. recuperación en los controles y las muestras de paciente.
3. La siguiente curva de calibración es sólo orientativa, variando en función del lote y
REACTIVOS concentración del calibrador, así como del instrumento utilizado.
R1 Trombina bovina  100 u NIH/mL
Tiempo (s) Concentración (mg/dL) Concentración (g/L)
R2 Tampón Imidazol, Azida sódica
18.1 608 6.08
R3 Solución Caolín
26.4 304 3.04
COAGULATION CAL REF: 1709101 49.6 152 1.52
Opcional CONTROL NORMAL REF: 1709104 84.7 76 0.76
CONTROL PATHOLOGIC REF: 1709106 153 38 0.38

PRECAUCIONES 4. La concentración de Fibrinógeno en la muestra se calcula por interpolación de

R2: H290- Puede ser corrosivo para los metales. H302-Nocivo en caso de su tiempo de coagulación en la curva de calibración. La dilución 1/10 del plasma
ingestión. H360-Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. H412-Nocivo para representa el 100% del valor asignado.
los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos. 5. Si los tiempos de dilución 1/10 se encuentran fuera de la curva lineal, preparar
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto. diluciones a 1/5 ó 1/20, según sea necesario. Si la muestra se diluye a 1/5 dividir
el resultado de la curva por 2; si la muestra se diluye a 1/20, multiplicar el
PREPARACIÓN resultado por 2 para obtener el resultado final.
R1: Reconstituir (  ) en 2,0 mL de agua destilada. Tapar y mezclar
CONTROL DE CALIDAD
suavemente hasta disolver su contenido. Estabilidad: 7 días a 2-8ºC o 1 mes a Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
–20ºC, si se congela inmediatamente y se conserva en el frasco original. No
volver a congelar. CONTROL NORMAL REF: 1709104
R2: Agitar antes de usar. CONTROL PATHOLOGIC REF: 1709106
R3: Listo para su uso. Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el
instrumento, los reactivos o la técnica.
TRAZABILIDAD Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
El Calibrador de Coagulación es trazable para el Fibrinógeno al estándar de la correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
OMS, 2º Estándar Internacional para Fibrinógeno, plasma (98/612).
VALORES DE REFERENCIA
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD 200 - 400 mg/dL1 ( 2.00 – 4.00 g/L)
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC propios valores de referencia.
y se evita su contaminación.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
Indicadores de deterioro de los reactivos: Precisión:
- Presencia de partículas y turbidez. Interserie (n= 30)
- Resultados en el Control de calidad fuera de los rangos establecidos. Media (U/L) 144 294 488
- Variaciones de color. CV (%) 5,9 3,4 2,9
MATERIAL ADICIONAL Exactitud: Los reactivos SPINREACT no muestran diferencias sistemáticas
- Coagulómetro o cronómetro y baño a 37ºC ± 0,5ºC. significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales.
- Equipamiento habitual de laboratorio(Nota 1). INTERFERENCIAS Y LIMITACIONES
MUESTRAS Se han observado interferencias relevantes en muestras con productos de
Plasma obtenido por punción venosa diluido 1/10 en solución de citrato degradación del Fibrinógeno. Las reacciones inflamatorias agudas pueden aumentar
trisódico 3,8% (105 mmol/L). el fibrinógeno circulante. La hemólisis puede causar activación de los factores de
Mezclar inmediatamente la sangre con el anticoagulante. Evitar la formación de coagulación e interferir en la detección del punto final. Los niveles altos de
espuma.
paraproteína,y de fármacos que activan el sistema fibrinolítico pueden interferir en las
Centrifugar la muestra a 3000 x g 10 min y transferir el plasma.
Usar sólo contenedores de vidrio siliconado o plástico. determinaciones de fibrinógeno..Se han descrito varias drogas y otras substancias que
Los plasmas turbios, ictéricos, lipémicos o hemolizados pueden dar resultados interfieren en su determinación2,3.
erróneos.
BIBLIOGRAFÍA
La muestra es estable 4 horas a temperatura ambiente (15-25ºC) o 28 días si
1. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
se congela inmediatamente a –20ºC.
2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
NOTAS 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
1. El material de laboratorio usado debe estar libre de restos de detergente.
PRESENTACIÓN
2. Seguir minuciosamente las instrucciones del fabricante del instrumento, los
resultados obtenidos deben ser validados por el laboratorio. R1: 8 x 2 mL
Cont.
Ref: 1709211 R2: 1 x 100 mL
PROCEDIMIENTO R3: 1 x 3.5 mL
El reactivo puede emplearse en técnica manual, mecánica, fotoóptica o con
cualquier instrumento apto para detectar la formación del coágulo(Nota 2).
1. Preparar una dilución 1/10 de la muestra y los Controles en Tampón
Imidazol: 50 L muestra + 450 L Tampón Imidazol.

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