UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

LIC. EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACIÓN AMBIENTAL

BIOLOGÍA CELULAR

PRÁCTICA SOBRE RESPIRACIÓN ANAEROBIA

Docente: Rolando Hernández Lazo.

Fecha de realización: 24/04/17

Brielis redondo Avendaño

OBJETIVOS:

Objetivo General:

Comprender el fundamento bioquímico de la respiración anaerobia a través de procesos

fermentativos recreados en el laboratorio.

Objetivos Específicos:

Para el Estudiante: elabore por lo menos cinco objetivos específicos relativos al desarrollo
de la práctica. Tenga en cuenta los parámetros sugeridos para la redacción y clasificación
de los mismos.

 Conocer las aplicaciones de la Fermentación Alcohólica

 Conocer las aplicaciones de la Fermentación Láctica

 Identificar los tipos de Carbohidratos que hacen parte de la Fermentación

Alcohólica

 Determinar que Carbohidratos son más eficaces en la Fermentación Alcohólica

 Observar los tipos de bacterias presentes en la Fermentación Láctica.

 INTRODUCCIÓN

Para el estudiante: Elabore la introducción de la práctica de laboratorio siguiendo los

parámetros sugeridos.

La respiración es el proceso mediante el cual se lleva a cabo la ruptura de glucosa para la

obtención de energía (ATP).En la Tierra existen dos tipos de respiración celular: la
respiración aerobia y la anaerobia. La respiración aerobia se lleva a cabo en presencia de
oxígeno y la anaerobia en ausencia de oxígeno. La respiración anaerobia consta de un
proceso de dos etapas, la glucólisis y la fermentación. La glucólisis es la degradación de la
glucosa en dos moléculas de ácido pirúvico. Se lleva a cabo en tres pasos. Primero la
activación de la glucosa, seguido de la ruptura de la glucosa y finalmente la obtención de
productos (2 ácidos pirúvicos + 2NADH + 4 ATP). La segunda etapa de la respiración
anaerobia es la fermentación. La fermentación es la vía metabólica que comprende una
serie de reacciones químicas en las que cada tipo de célula fermentadora utiliza el ácido
pirúvico para la síntesis de otros productos. Existen dos tipos de fermentación: la
etanólica, que se realiza sin oxígeno y en la que se obtienen dos moléculas de etanol; y la
láctica, que se realiza sin presencia de oxígeno y se forma el ácido láctico. En esta etapa
no se gana ni sepierde ATP. Los organismos que realizan este tipo de respiración son
algunasbacterias. Todos los organismos a excepción de algunas bacterias que realizan
respiración anaerobia, realizan este tipo de respiración, por ejemplo los humanos, los
pájaros, peces y mamíferos. El ATP es un compuesto formado por moléculas portadoras
de energía y que son muy importantes en la respiración, tanto aerobia como anaerobia,
porque gracias a esta molécula la célula obtiene la energía que necesita. En el ensayo de
la Fermentación Alcohólica se experimentara con diferentes tipos de Carbohidratos: dos
monosacáridos (Sacarosa y Fructosa) y dos disacáridos (Galactosa y Maltosa ) para
calcular cual genera mayor cantidad de CO2

y como consecuencia determinar el tipo de azúcar que resulta ser un buen fermentador.
Y en la práctica de Fermentación Láctica se observaran las bacterias presentes en la
muestra de un yogurt, elaborado con anterioridad y se le medirá el pH.

FUNDAMENTO TEÓRICO

Las células llevan a cabo diversos procesos para mantener su funcionamiento normal,
muchos de los cuales requieren energía. La respiración celular es una serie de reacciones
mediante las
Cuales, la célula degrada moléculas orgánicas y produce energía. Todas las células vivas
llevan a cabo respiración celular para obtener la energía necesaria para sus funciones.
Usualmente se usa glucosa como materia prima, la cual se metaboliza a bióxido de carbono y
agua, produciéndose energía que se almacena como ATP (trifosfato de adenosina).

C6H12O6 + 6 O2 + 6 H2O 6 CO2 + 12 H2O + Energía (ATP)

La molécula de ATP está formada por adenina, ribosa y tres grupos fosfatos con enlaces ricos
en energía. Cuando la molécula se hidroliza, el fosfato terminal se separa para formar ADP
(difosfato de adenosina) y se libera energía. El ATP es la fuente de energía que se usa como
combustible para llevar a cabo el metabolismo celu
La respiración celular se divide en pasos y sigue distintas rutas en presencia o ausencia de
oxígeno. En presencia de oxígeno sucede respiración aeróbica y en ausencia de oxígeno
sucede respiración anaeróbica. Ambos procesos comienzan con la glucólisis.

La Glucolisis es el primer paso de la respiración celular y consiste de una serie de reacciones

que ocurren en el citoplasma de la célula y por las cuales, a partir de una molécula de
glucosa, se producen dos moléculas de ácido pirúvico (piruvato). Todos los organismos llevan
a cabo la glucólisis. La glucólisis se divide en dos partes; en la primera la molécula de glucosa
se divide en dos moléculas de gliceraldehido-3-fosfato y en la segunda estas dos moléculas se
convierten en dos moléculas de ácido pirúvico (piruvato). Durante la glucólisis se producen
dos moléculas de ATP.

GLUCOSA + 2Pi + 2ADP + 2NAD+ → 2 ACIDOS PIRUVICOS + 2ATP + 2NADH + 2H+

En ausencia de oxígeno, luego de la glucólisis se lleva a cabo fermentación (respiración

celular anaeróbica). Algunas bacterias sólo llevan a cabo fermentación, mientras que la gran
mayoría de los organismos (incluidos los humanos) pueden llevar a cabo respiración celular
aeróbica y anaeróbica.

La respiración celular aeróbica es el conjunto de reacciones en las cuales el ácido pirúvico

producido por la glucólisis se transforma en CO2 y H2O, y en el proceso, se producen 36
moléculas de ATP. En las células eucariotas este proceso ocurre en el mitocondrio en dos
etapas llamadas el Ciclo de Krebs (o ciclo de ácido cítrico) y la cadena de transporte de
electrones:

Reacción de transición:

2 ACIDOS PIRUVICOS + 2 NAD+ + 2 CoA 2 Acetyl CoA + 2 NADH + 2 CO2

Ciclo de Krebs:

OXALOACETATO + Acetyl CoA Citrato + CoA

En el ciclo de Krebs se producen:

4CO2, 6NADH, 2 FADH2 y 2 ATP por cada molécula inicial de glucosa

En la cadena de transporte de electrones, los electrones producidos en glucólisis y en el ciclo

de Krebs pasan a niveles más bajos de energía y se libera energía para formar ATP. Durante
este transporte de electrones las moléculas transportadoras se oxidan y se reducen. El último
aceptador de electrones de la cadena es el oxígeno. En la cadena se producen 34 moléculas
de ATP a partir de una molécula inicial de glucosa.

La respiración celular anaeróbica ocurre en ausencia de oxígeno. Este mecanismo no es tan

eficiente como la respiración aeróbica, ya que sólo produce 2 moléculas de ATP, pero al
menos permite obtener alguna energía a partir del piruvato que se produjo en la glucólisis.
Hay dos tipos de respiración celular anaeróbica: fermentación láctica y fermentación
alcohólica.

Fermentación láctica:
La fermentación láctica ocurre en algunas bacterias y gracias a este proceso obtenemos
productos de origen lácteo tales como yogurt, crema agria y quesos. Este proceso sucede
también en el músculo esquelético humano cuando hay deficiencia de oxígeno, como por
ejemplo, durante el ejercicio fuerte y continuo.

Acido pirúvico + NADH + H+ acido láctico + NAD+

La acumulación del ácido láctico causa el dolor característico cuando ejercitamos los
músculos excesivamente.

Fermentación alcohólica:
En la fermentación alcohólica suceden dos reacciones consecutivas:

Acido piruvico acetaldehido + CO2

acetaldehido + NADH + H+ etanol + NAD+

Este tipo de fermentación ocurre en levaduras, ciertos hongos y algunas bacterias,

produciéndose CO2 y alcohol etílico (etanol); ambos productos se usan en la producción de
pan, cerveza y vino.

La diferencia básica entre la respiración celular aeróbica y la anaeróbica (a parte de suceder

en presencia o ausencia de oxígeno) es la cantidad de moléculas de ATP que se producen. En
la respiración celular anaeróbica, los hidrógenos (electrones) pasan al piruvato para formar el
ácido láctico o el etanol, mientras que en la respiración celular aeróbica los hidrógenos pasan
a la cadena de transporte de electrones para formar ATP. En la respiración celular aeróbica,
el piruvato que pasa por el ciclo de Krebs produce hidrógenos adicionales que también pasan
a la cadena de transporte de electrones para formar ATP. Por esta razón, en la respiración
celular aeróbica se producen 36 moléculas de ATP a partir de una molécula de glucosa,
mientras que en la ruta anaeróbica sólo se extraen 2 moléculas de ATP a partir de una
molécula de glucosa.

DESARROLLO METODOLÓGICO

1. Fermentación alcohólica en levaduras

En este ejercicio se estudiará el proceso de fermentación alcohólica que llevan a cabo las
levaduras. Estos organismos llevan a cabo respiración aeróbica en presencia de oxígeno y
respiración anaeróbica en ausencia de éste. La levadura que se usará es Saccharomyces
cerevisiae, la misma que se utiliza para la producción de pan, cerveza y vino. En la
fermentación alcohólica se produce bióxido de carbono y alcohol etílico (etanol). El bióxido
de carbono crea la efervescencia en la cerveza y hace que el pan “suba” dentro del horno. El
etanol que se produce es el alcohol presente en la cerveza y los vinos. Se usarán varias
soluciones de carbohidratos para determinar cuáles pueden metabolizarse mediante la
fermentación.

1.1. Materiales, insumos y reactivos por grupo de trabajo

 Gradilla para tubos de ensayo

 Cuatro tubos de ensayo grandes
 Cuatro pipetas Pasteur desechables
 Lápiz de cera
 Un sobre de levadura
 Azúcar o melaza
 4 Vasos de precipitación de 1000 mL
 Sacarosa
 Galactosa
 Maltosa
 Lactosa

1. 2. Procedimiento

1. Rotule cada uno de los vasos de precipitación de 1000 mL con los nombres de los cuatro
carbohidratos: sacarosa, galactosa, maltosa y lactosa.
2. Prepare una suspensión de levadura en cada uno de los vasos usando para ello 200 mL de
agua destilada tibia, 10 gr. de levadura y 2gr. del carbohidrato que aparece en el rótulo del
vaso.
3. Deje transcurrir 10 minutos con el fin de que la levadura se active.
4. Llene hasta el tope un tubo de ensayo con el fermento que contiene sacarosa, tape con el
dedo pulgar, inviértalo y deposítelo de manera vertical en el vaso que contiene el mismo
fermento. Anote el tiempo exacto a partir de este momento, el cual corresponderá al tiempo
inicial de la experiencia.
5. Replique lo anterior para los vasos que contienen galactosa, maltosa y lactosa.
6. Estime y anote en la tabla Nº 1, el volumen de CO2 producido en cada uno de los
montajes en intervalos de 15 minutos, a partir del tiempo inicial, hasta completar una hora
de observación.
 Tiempo Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4
(en minute)
1 3.2cm 2.2cm 1.5cm 1cm
5 2.1cm 1.2cm 1cm 0.8cm
8 1.6cm 0.8cm 0.8cm 0.7cm
10 0.2cm 0.5cm 0.5cm 0.5cm

Tabla Nº 1: Producción de CO2 en cada uno de los tubos de fermentación

1.3. Resultados:

Para el estudiante: Realice una descripción de los resultados obtenidos a partir de los
hechos reales observados. Enriquezca sus resultados elaborando una gráfica con los datos
registrados en la tabla Nº1.

La sacarosa fue la mezcla que obtuvo más fermentación, su proceso de

fermentación fue más rápido y hizo más cantidad de espuma. Luego la maltosa
que no produjo la misma cantidad de fermentación y su colorido fue más clara que
el anterior.

La galactosa le sigue en cantidad de fermentación su espuma es más clara aun y

no genero tanta producción de co2, por último la lactosa y la galactosa terminaron
con cantidad de fermento aparecido, y su tiempo tarde por unos segundos.
Pero en la galactosa fue más lento se observó una liberación de CO2

1.4. Análisis de resultados

Para el estudiante: Realice una discusión de los resultados obtenidos a partir de la

explicación de los hechos observados, teniendo en cuenta los elementos conceptuales del
marco teórico de la guía o haciendo uso de bibliografía especializada.
 2. Fermentación láctica y observación de bacterias lácticas

2.1. Materiales, insumos y reactivos por grupo de trabajo

 Microscopio
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Aguja enmangada
 Papel indicador pH
 Yogur natural
 Colorante (verde de metilo o azul de metileno)
 Mechero
 Cuentagotas
 Leche
 Agua
 Alcohol al 95%

2.2. Procedimiento

a. Obtención de yogur por fermentación láctica

a) Coloque 50 ml de leche en un frasco limpio y añade una cucharadita de yogur.
b) Deje el frasco tapado a temperatura de 37 ºC durante dos días.
c) Lleve el producto elaborado al laboratorio. Tome una muestra del yogur
producido y mida su pH con el papel indicador de pH.
d) Anote el resultado del pH del yogur producido.

2.3. Resultados de la parte a:

Para el estudiante: Describa los resultados obtenidos a partir de los hechos

observados teniendo en cuenta las características físicas del producto elaborado, su
pH (fije la tira de papel indicador en el sitio indicado).

Al agregarle la mezclas de leche una cuchara de yogur a pesar de que el yogur es de

menos cantidad tuvo mas olor que la leche al medir el ph de la leche fue mas clara que la
del yogur
 Fije la tira de papel indicador de pH aquí

b. Observación de las bacterias del yogur

El yogur es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A escala
industrial esta fermentación es realizada por Streptococcus thermophillus y Lactobacillus
bulgaricus.
a) Coloque una gota de agua sobre un portaobjetos.
b) Deposite sobre ella una muestra del yogur con la ayuda de la aguja enmangada.
c) Realice un frotis con la muestra y añade una gota de alcohol al 95 para fijar la
preparación (También se puede fijar por calor).
d) Añada unas gotas del colorante y deje actuar durante 2-3 minutos.
e) Lave el exceso del colorante con agua.
f) Seque bien el portaobjetos, coloque el cubreobjetos y observe la muestra al
microscopio.
g) Dibuje las bacterias observadas e indique su morfología y sus tipos de
agrupaciones.

2.4. Resultados de la parte b.

Para el estudiante: Dibuje las bacterias observadas e indique su morfología y sus tipos de
agrupaciones.

2.5. Análisis de resultados de la parte a y b.

Para el estudiante: Discuta los resultados obtenidos de la parte 2 a y 2 b,

teniendo en cuenta los elementos conceptuales que se pueden aplicar a la
fermentación de tipo láctica.
Durante la observación del procedimiento obtuvimos que el género Estreptococos
es un grupo de bacterias formado por cocos gran positivos pertenecientes al filo
firmicutes y al grupo de las bacterias ácido lácticas. Estas bacterias crecen en
cadenas o pares, donde cada división celular ocurre a lo largo de un eje. La
producción del yogur es debido a la simbiosis entre dos bacterias, el streptococcus
thermophilus y el lactobacillus bulgaricus, las cuales se caracterizan porque cada
una estimula el desarrollo de la otra, observamos que el yogur yla leche su ph es
diferente y que poseen diferentes características químicas a pesar de que son
derivados de un mismo producto.

CONCLUSION
En esta práctica de laboratorio se pudo comprobar, que en la respiración
Anaerobia la célula obtiene energía de una sustancia sin utilizar oxígeno a lo que
se le llama Fermentación. Observamos el tipo de bacteria que lleva a cabo la
Fermentación Láctica como los Lactobacillus, Streptococcus, entre otras bacterias
utilizadas en el proceso de la obtención de yogurt, queso, mantequilla. De igual
forma, observamos que la Fermentación Alcohólica tiene como resultado Etanol o
Alcohol Etilico y co2,
observamos y contabilizamos la cantidad de co2,
liberada en este proceso, con ayuda de Levadura y Carbohidratos como la
glucosa, Fructosa, Maltosa, galactosa

CUESTIONARIO

1. ¿Por qué no es igual la producción de CO2 en cada tubo?

Xq cada uno tuvo diferentes fermentaciones al agregarle las diferentes sustancia pudimos
la cual pudimos observar sus diferentes reacciones de cada uno

2. ¿Qué tipo de fermentación ocurrió?

En la fermentación alcohólica suceden dos reacciones consecutivas: Este tipo de
fermentación ocurre en levaduras, ciertos hongos y algunas bacterias, produciéndose
CO2 y alcohol etílico (etanol); ambos productos se usan en la producción de pan,
cerveza y vino

3. ¿Cuál es la característica principal de este tipo de fermentación?

logramos observar fue el cambio físico que sufre la sustancia al fermentarse, también
observamos que en el proceso de fermentación hay mucho burbujeo, es decir es un
proceso constante hasta llegar a un máximo de fermentación

4. ¿Puede la levadura usar diferentes carbohidratos para la fermentación?

Si, en la levadura se puede utilizar varios carbohidratos ya que por glicolisis se trasforman
estos carbohidratos a glucosa y de glucosa a acido pirúvico y en la fermentación este
acido pirúvico produce etanol y CO2. La levadura es un catalizador para la desintegración
de carbohidratos a este proceso se le llama fermentación, pueden fermentar diferentes
azucares como glucosa, sacarosa, maltosa y lactosa

5. Cuál es el producto de la fermentación láctica? Explique!!!

La fermentación láctica es una ruta metabólica anaeróbica que ocurre en la matriz
citoplásmica de la célula, en la cual se fermenta la glucosa (se oxida parcialmente)
para obtener energía metabólica y unproducto de desecho que principalmente es el
ácidoláctico . en este orden de idea la fermentación láctica por medio de la respiración
anaeróbica , la cual se produce en el citoplasma debido a la fermentación de la
glucosa al ser sometida a estos procesos , la glucosa se oxida y produce un producto
de desecho que es el acido láctico permitiendo la fermentación de esta.

BIBLIOGRAFÍA

1. http://www.biology-online.org/1/3_respiration.htm
 2. Denniston, Topping and Caret (2004). General, Organic, and
3. Biochemistry , 4ta Ed. Mc Graw Hill. New York. USA
4. Boyer, B (1999). Concepts in Biochemistry, Brooks/Cole Publishing.
5. http://en.wikipedia.org/wiki/Cellular_respiration
6. Solomon, Berg & Martin (2004). Biology, 7th Ed. Brooks Cole Publ.
7. http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/C/Cellular/Respiration.html

PARÁMETROS DE EVALUACIÓN DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO

1. Para el Estudiante:

NOMBRE DE LOS ESTUDIANTES

ITEM DE EVALUACIÓN VALOR
DEL GRUPO
Brielis Redondo Usa atuendo requerido para estar en el laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer práctico
Mantiene el orden y la disciplina en el laboratorio
Intercambia opiniones con sus compañeros de
manera respetuosa y cordial
Usa atuendo requerido para estar en el laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer práctico
Mantiene el orden y la disciplina en el laboratorio
Intercambia opiniones con sus compañeros de
manera respetuosa y cordial
Usa atuendo requerido para estar en el laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer práctico
Mantiene el orden y la disciplina en el laboratorio
Intercambia opiniones con sus compañeros de
manera respetuosa y cordial
Usa atuendo requerido para estar en el laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer práctico
Mantiene el orden y la disciplina en el laboratorio
Intercambia opiniones con sus compañeros de
 manera respetuosa y cordial
Usa atuendo requerido para estar en el laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer práctico
Mantiene el orden y la disciplina en el laboratorio
Intercambia opiniones con sus compañeros de
manera respetuosa y cordial
Usa atuendo requerido para estar en el laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer práctico
Mantiene el orden y la disciplina en el laboratorio
Intercambia opiniones con sus compañeros de
manera respetuosa y cordial

2. Para el grupo:

ITEM DE EVALUACIÓN VALOR

Elaboran los objetivos de la práctica de manera correcta de acuerdo a los
parámetros establecidos.
Redactan la introducción de la guía con base en los principios establecidos en la
metodología de la investigación.
Describen sus resultados de manera clara teniendo mediante un discurso
contextualizado y coherente a partir de hechos reales observados.
Demuestran una actitud científica mediante los análisis construidos a partir de
una hipótesis acertada y el uso de elementos conceptuales teóricos, con el fin de
explicar los hechos observados.
Elaboran su pre-informe y organizan sus materiales de trabajo, previamente antes
de ingresar al laboratorio.