UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE
SAN MARCOS
Universidad del Perú, Decana de América
ESCUELA DE ESTUDIOS GENERALES
AREA DE CIENCIAS BASICAS
INFORME DE LABORATORIO
CURSO: Biología
TEMA: Célula procariota, reconocimiento de
bacterias.
PROFESOR: Leyda Cabrera
AULA: 103 SECCIÓN: 2
N° GRUPO: 3
o Villanueva Alarcón, Katherine
o Ramos Castillo, Jose Rolando
o Barrientos Amao, Heral
o Aranda Rosario, Marcelo
o Alvarez Alvarado, Angella
INGRESANTES 2019
I SEMESTRE 2019
Ciudad Universitaria, 13 de mayo de 2019
INTRODUCCIÓN
La práctica de laboratorio de esta clase se encontraba dirigida a observar células
procariotas y que mediante el experimento de tinción se pueda diferenciar las bacterias
gram positivas, que obtendrían un color violeta debido a la tintura del cristal violeta; de
las gram negativas, que captarían la tinta de la safranina. Simultáneamente se
observarán muestras facilitadas por el equipo para la observación de diferentes tipos de
bacterias que se encontraban extáticas para una más fácil visualización.
RECONOCIMIENTO DE BACTERIAS EN EL SARRO DENTAL
I. OBJETIVOS
Aprender la aplicación de la tinción de Gram y observar las bacterias el sarro dental,
cómo también identificar alguna de sus formas.
II. MATERIALES
2 láminas portaobjeto
4 goteros
Palitos mondadientes
cristal violeta
lugol
solución alcohol-acetona
safranina o fucsina
agua destilada
aceite de inmersión
papel lente
microscopio compuesto
III. METODOLOGÍA
1. Extraer el sarro dental con un piloto de
mondadientes, extender una capa fina
sobre una lámina portaobjeto y dejar
secar el aire 2 minutos.
2. Cubrir la superficie con solución se
cristal violeta y dejar un minuto.
3. Lavar con agua destilada inclinando
ligeramente la lámina
4. Cubrir la lámina con lugol, dejar 1
minuto.
5. Lavar nuevamente con agua destilada
inclinando ligeramente la lámina.
6. Sostener el portaobjeto entre el pulgar
entre el pulgar y el índice, inclinar la lámina y bañar la superficie con unas
gotas de decolorante alcohol cetona por 30 segundos.
7. Lavar con agua destilada inclinando la lámina
8. Cubrir la superficie de la lámina con safranina o fucsina, dejar 1 minuto
9. Lavar con agua destilada
10. Dejar la lámina en posición vertical, dejando que escurra el exceso de agua y
que se seque el extendido.
11. Examinar la lámina al microscopio con el objetivo de inmersión (1000X)
utilizando aceite de inmersión.
IV. OBSERVACIÓN
Al empezar el procedimiento, se inició aplicando la solución cristal violeta, que dio un
color violeta a la muestra, después se continuó con el lugol que actuó como mordiente,
fijando con mayor intensidad el cristal violeta a la pared de la célula bacteriana. Luego
se aplicó el alcohol cetona, con la finalidad de descolorar aquellas bacterias que son
gram negativas, las gram positivas quedaron del mismo color. Finalmente se cubrió con
safranina o fucsina para colorear de un tono rojizo o rosado a las gram negativas y
proceder a observarlo en el microscopio, siguiendo las indicaciones, a un objetivo de
100x agregándole aceite de inmersión.
V. RESULTADOS
Los resultados obtenidos fueron medianamente satisfactorios puesto que se trabajó con
poca muestra de sarro dental y no fue posible identificar los diferentes microorganismos
con claridad.
Pero aun así, al observar con el objetivo 100x se visualizó distintos tipos de bacterias
como diplococos, estreptococos, bacilococos, estafilococos y algunas dispuestos en
colonias. Ya que estos toman el colorante cristal violeta y se retiene el colorante
después de su tratamiento con lugol y alcohol acetona, se denominan Grampositivas.
VI. CONCLUSIONES
La tinción de Gram es una técnica fundamental para identificar el tipo de
microorganismo y bacterias con qué estamos trabajando.
Según el comportamiento frente a la tinción de Gram fue posible diferenciar los
grupos de bacterias presentes en la muestra estudiada debido al color que adquirió
su membrana.
Aprender a aplicar la tinción de Gram es importante para nuestra formación como
biólogos.
BACTERIAS PRESENTES EN EL YOGURT
El yogur, considerado el primer alimento probiótico de la historia, es un alimento
producido por fermentación láctica de la leche. Esta fermentación es realizada por
bacterias que oxidan la lactosa en un ambiente anaerobio y producen ácido láctico.
El efecto del ácido láctico sobre las proteínas de la leche, principalmente sobre la
caseína, da al yogur su consistencia y sabor característico.
Como se decía, la fermentación de la leche se da por el cultivo simbiótico de dos
bacterias, la Lactobacillus bulgaricus y la Streptococcus thermophilus; se dice q
simbiótico, ya que
ambas bacterias se estimulan mutuamente permitiendo una rápida acidificación de la
leche, como resultado de la producción del ácido láctico.
Siendo más específicos con el proceso, la acción de estas bacterias desencadena un
proceso por el cual el azúcar de la leche, lactosa, se transforma en ácido láctico; y que
luego se ira acumulando, permitiendo una modificación de la estructura de las proteínas
de la leche (ósea se va cuajando) ocurriendo lo mismo con la textura del producto.
El ácido láctico es también el que confiere a la leche fermentada ese sabor ligeramente
acidulado. Los elementos derivados de las bacterias ácido-lácticas producen a menudo
otros sabores o aromas característicos. El acetaldehído, por ejemplo, da al yogur su
aroma característico, mientras que el diacetilo confiere un sabor de mantequilla a la
leche fermentada. Pueden añadirse asimismo al cultivo de microorganismos, como las
levaduras, a fin de obtener sabores particulares.
LACTOBACILLUS BULGARICUS
CARACTERISTICAS
No forma esporas
Son microorganismos acidófilos
Es una bacteria termófila, el rango de su
crecimiento oscila entre los 45°C a 115°C.
No posee una capsula.
MORFOLOGIA
Son bacilos Gram positivos, caracterizados por ser largos, formando filamentos
en ocasiones.
Poseen una forma estructural compleja, ya que pueden presentarse en 3 formas:
laminar, enrollada y convoluta.
STREPTOCOCCUS THERMOPHILUS
CARACTERISTICAS
Se caracteriza por ser un anaeróbico
facultativo, ese decir que es capaz de
producir energía en forma de ATP mediante
la respiración anaeróbica con la presencia
del oxígeno, y en ausencia de la misma, lo
produce mediante la fermentación.
No soporta altas concentraciones de NaCl.
Es una bacteria acidófila, homofermentador.
MORFOLOGIA
Se puede observar como cocos de diámetro Gram positivos, que se agrupan en
pares o cadenas de longitud variable.
Puede soportar elevadas temperaturas, y esto se debe gracias a que su pared
celular está compuesta de N-acetilglucosamina y acido N-acetilmurano, unidos
por enlace de éter.
Contiene dos peptidasas únicas, oligopeptidasa y aminopeptidasa, estas enzimas
catalizan la escisión de aminoácidos específicos desde el extremo de un
polipéptido.
MUESTRAS DE LABORATORIO
ESCHERICHIA COLI
MORFOLOGÍA
Es un bacilo Gram negativo, posee una forma alargada
Su cubierta consta de tres elementos: la membrana citoplasmática, el espacio
periplásmico, y la membrana externa propia de las bacterias Gram
CARACTERISTICAS
Es no esporulante, es decir no produce esporas
Es una mesófila, su temperatura ideal se encuentra entre los 35-43 ºC, su
temperatura límite inferior es de 7 ºC y se vuelven muy vulnerables al alcanzar
los 70 ºC
Produce una gran variedad de cepas patógenas
STAPHILOCOCUS SPP
MORFOLOGIA
Es una bacteria estafilococo, Gram positiva
Carece de una capsula
CARACTERISTICAS
No forman esporas
Bacteria anaeróbica facultativa, puede crecer en medios sin oxígeno y también
con oxigeno
La especie más conocidaes el Staphylococcus Aerus
Carecen de movimiento
Presentan metabolismo fermentativo
No sobrevive a más de 60 °C
Cuestionario
1. ¿Cuál es el fundamento de la tinción de Gram en bacterias? ¿A qué se debe
la desigual capacidad de las células bacterianas para teñirse?
En la microbiología, las bacterias se pueden clasificar en dos grandes grupos según su
estructura de la pared celular, las bacterias Gram positivas y las bacterias Gram
negativas y para su mejor diferenciación se recurre a la tinción de azul oscuro o violeta
en las bacterias de Gram positiva gracias al colorante cristal violeta y Lugol, y para la
tinción de color rosa de las bacterias de Gram positiva se recurre a las soluciones de
alcohol y safranina. Pero depende el lugar de donde se sacan las muestras para su
análisis y es por esto que algunos casos se van a ver que las bacterias Gram positivas
son más abundantes que las bacterias Gram negativas, y en otros es lo contrario, son
más abundantes las bacterias Gram negativas que las bacterias Gram positivas.
2. ¿Cuál es el fundamento de cada uno de los reactivos utilizados en la técnica
de coloración de Gram?
La utilización de diferentes colorantes se debe a la cantidad de peptidoglicanos
presentes en las paredes celulares de los dos tipos de bacterias, siendo las bacterias
Gram positivas que contienen una pared celular gruesas, pero a la vez es simple,
mientras que las bacterias Gram negativo presentan una pared celular delgada pero
compleja.
3. ¿Cuáles son los errores que usted identifico que pueden influir en una
buena tinción de Gram?
Los errores que se observo fue que la solución colorante ya sea Lugol o safranina, no se
esparcía por todos los lugares de la muestra y el tiempo que se debía esperar para
obtener un buen resultado.
4. Según lo observado en la clase práctica, ¿bajo qué criterios pueden
clasificarse las bacterias? Explique
Las bacterias se pueden clasificar por la complejidad de su estructura en la pared celular
en bacteria Gram positivas y bacterias Gram negativas. Cada una de estas bacterias
presenta diferentes características como es el caso de las bacterias Gram positivas que
presentan una pared celular más gruesa que a comparación de las bacterias Gram
negativas, no solo por su estructura de la pared celular, sino, por su forma, algunos
tienen forma alargada (bacilos) y otros con forma esférica (cocos).
REFERENCIAS
1. Okdiario. LAS BACTERIAS GRAM POSITIVAS. Blogger. Publicado 26 enero
2017. [Internet]. [Consultado 12 May 2019]. Disponible en:
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2. Betellgeux. ESCHERICHIA COLI: CARACTERÍSTICAS, PATOGENICIDAD
Y PREVENCIÓN (I). Blogger. Publicado 19 enero 2016. [Internet]. [Consultado
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patogenicidad-y-prevencion-i/
3. Plock Ramirez. STAPHYLOCOCCUS SPP. Blogger. Publicado 31 Mar. 2013.
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4. SPREER, E. LAS BACTERIAS EN EL YOGUR. Blogger. Publicado 23 jun.
2007. [Internet]. [Consultado 12 May 2019]. Disponible en:
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5. Marielsa Gil. STREPTOCOCCUS THERMOPHILUS: CARACTERÍSTICAS,
MORFOLOGÍA Y BENEFICIOS. Blogger. Publicado 15 May. 2010. [Internet].
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6. Marielsa Gil. LACTOBACILLUS BULGARICUS: CARACTERÍSTICAS,
TAXONOMÍA, MORFOLOGÍA, BENEFICIOS. Blogger. Publicado 20 Mar.
2010. [Internet]. [Consultado 12 May 2019]. Disponible en:
https://www.lifeder.com/lactobacillus-bulgaricus/#Taxonomia
