C A P Í T U L O

DESARROLLO DE LA
IMPRESIÓN LATENTE
BRIAN YAMASHITA Y
MIKE FRENCH
Autores colaboradores:

Stephen Bleay, Antonio Cantu,

Vici Inlow, Robert Ramotowski,

Vaughn Sears y Melissa Wakefield

CONTENIDO

3 7.1 Introducción 31 7.10 Examinación de Fluorescencia

6 7.2 La Composición del Residuo 36 7.11 Depósito de Metal al Vacío

de la Impresión Latente

12 7.3 Polvos de Impresión Latente 40 7.12 Técnicas de Mejoramiento

de la Sangre

15 7.4 Ninhidrina y Análogos 46 7.13 Técnicas Acuosas

20 7.5 1,8-Diazafluoreno-9-uno (DFO) 57 7.14 Formulaciones para

Soluciones Químicas

22 7.6 1,2-Indanediona 59 7.15 Revisores

23 7.7 5-Metiltioninhidrina (5-MTN) 60 7.16 Referencias

24 7.8 Modificaciones para el uso en 71 7.17 Información Adicional

Papeles Tratados Químicamente

25 7.9 Extracción de Cianoacrilato

7–1
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

CAPÍTULO 7
DESARROLLO DE LA
7.1 Introducción
El revelado de la huella dactilar latente puede lograrse con

IMPRESIÓN LATENTE
una amplia gama de procesos ópticos, físicos y químicos,
la mayor parte evolucionados durante el siglo pasado. De­
bido a que algunas técnicas están a menudo íntimamente
BRIAN YAMASHITA Y relacionadas y en continuo cambio, es imperativo que los
MIKE FRENCH involucrados en el laboratorio y el procesamiento del lugar
de los hechos estén bien capacitados y hayan practicado
Autores colaboradores: bien (Trozzi et al, 2000, pág. 4-9; Kent, 1998).
Stephen Bleay, Antonio Cantu,
Vici Inlow, Robert Ramotowski, Para los que participan en el lugar de los hechos y en el
Vaughn Sears y Melissa Wakefield trabajo de laboratorio, la seguridad es primordial. Es impor­
tante seguir las prácticas de trabajo seguras al utilizar los
procedimientos descritos en este capítulo. Esto se puede
lograr mediante la observación de las advertencias del
fabricante, la lectura de las hojas de datos de seguridad de
materiales y la observación de las propias políticas insti­
tucionales de manejo de pruebas y desarrollo de huellas
dactilares. También es importante para los que trabajan con
materiales o equipos potencialmente peligrosos llevar el
equipo de protección personal adecuado, como guantes,
batas de laboratorio, gafas protectoras y respiradores;
utilizar controles de ingeniería, tales como campanas de
extracción; y practicar los procedimientos adecuados de
laboratorio para reducir la exposición a agentes patógenos
o sustancias químicas nocivas (Masters, 2002).

7.1.1 Tipos de Impresiones

Las huellas dactilares encontradas en el lugar de los
hechos o reveladas en el laboratorio se clasifican por
parte de algunos examinadores como visibles, latentes o
impresiones negativas (Lee y Gaennslen, 2001, pág. 106),
aunque los tres tipos se asocian habitualmente con el
término impresión latente.

Una impresión visible es simplemente una impresión

patente. Muchos de estos tipos de impresiones son total­
mente perceptibles a simple vista y sólo se necesita algún

7–3
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

tipo de formación de imágenes para su conservación. Un curvatura de la superficie o forma, temperatura de la super-
buen ejemplo de una impresión visible sería una impre- ficie, la condensación, los contaminantes y residuos en la
sión grasienta en un cristal. Las impresiones visibles superficie. La presión aplicada durante el contacto (presión
también pueden dejarse en sangre, pintura, tinta, barro o de deposición), incluyendo la fuerza lateral, contribuye
polvo. La iluminación es una consideración muy impor- también a transferir condiciones.
tante en la búsqueda de este tipo de huellas dactilares;
una buena lámpara de mano o una fuente de luz forense Las condiciones de post-transferencia, también llama-
son especialmente útiles en la búsqueda de impresiones dos factores ambientales, son las fuerzas que afectan la
visibles. calidad de las impresiones latentes después del depósito
(Olsen, 1978, pág. 121-122). Ejemplos de estos factores
La palabra latente significa oculto o invisible. Las huellas son el contacto físico de otra superficie, el agua, la hume-
latentes son indetectables hasta que se descubren con un dad y la temperatura.
proceso físico o químico diseñado para mejorar el residuo
de la impresión latente. Muchos de estos procesos y técni- 7.1.3 Tipos de Superficie
cas se discuten en el resto de este capítulo.
Identificar correctamente el tipo de superficie que se
Una impresión negativa se crea cuando el sustrato es espera lleve una huella dactilar es un paso importante
lo suficientemente flexible en el momento de contacto hacia un revelado exitoso. Las superficies están general-
para registrar los aspectos tridimensionales de la piel de mente separadas en dos clases: porosas y no porosas.
fricción. Estas impresiones se forman cuando las crestas Se requiere esta separación para seleccionar la técnica
de fricción planteadas son empujadas físicamente en el adecuada o el reactivo y el orden secuencial adecuado
sustrato, creando un molde de la estructura de las cres- para su procesamiento.
tas de fricción en la piel. La arcilla, masilla, cera blanda,
Los sustratos porosos son generalmente absorbentes e
plástico derretido, grasa pesada y pintura pegajosa son
incluyen materiales como el papel, cartón, madera y otras
todos sustratos conductivos a la formación y retención de
formas de celulosa. Las huellas dactilares depositadas
impresiones negativas. Las impresiones negativas están
sobre estos medios se absorben en el sustrato y son algo
generalmente fotografiadas bajo una iluminación oblicua
duraderas. Las técnicas de aminoácidos son especialmente
que mejora el contraste de las crestas y surcos. Estas
útiles aquí porque los aminoácidos tienden a permanecer
impresiones también se pueden conservar con materiales
estacionarios cuando se absorben y no migran (Almog,
de fundición de tipo silicón.
2001, pág. 178).

7.1.2 Factores de Depósito Las superficies no porosas no absorben. Estas superficies

repelen la humedad y con frecuencia aparecen pulidas. Es-
Los factores de depósito que influyen en la calidad, o
tas incluyen vidrio, metal, plástico, madera lacada o pintada
incluso la presencia, de huellas latentes son las condicio-
y caucho. Las impresiones latentes sobre estos sustratos
nes que rodean el contacto entre la piel de fricción y los
son más susceptibles al daño debido a que el residuo de
objetos que se tocan. Estas condiciones se describen de la
la huella dactilar permanece en la superficie más externa.
siguiente manera:
El cianoacrilato (CA), las manchas de tinte, polvos y el
Las condiciones de pre-transferencia incluyen la condición depósito al vacío de metal suelen ser las mejores opciones
o la salud de la piel de fricción del donante y la cantidad para utilizarse en estas superficies.
y tipo de residuos en la piel (Olsen, 1978, pág. 118-120).
Un tipo de sustrato que no encaja fácilmente en las dos
Estas condiciones se ven afectadas por la edad, el género,
primeras categorías, pero debe ser mencionado, es consid-
los estímulos, la ocupación, la enfermedad y las sustancias
erado semiporoso. Las superficies semiporosas se carac-
que el sujeto puede haber tocado antes del depósito.
terizan por su naturaleza para resistir y absorber residuos
Las condiciones de transferencia también dictan si se de huellas dactilares. El residuo de huellas dactilares sobre
dejará una impresión adecuada (Olsen, 1978, pág. 117-122). estas superficies puede o no absorberse a causa de las
Estas son las condiciones de la superficie (sustrato) que propiedades absorbentes del sustrato y las propiedades
ha sido tocada, incluyendo la textura, el área de superficie, viscosas variables del residuo de huellas dactilares. Estas

7–4
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

superficies incluyen el cartón satinado, portadas de revis­ con los distintos organismos y profesionales, tanto en la
tas satinadas, algunas maderas con acabados y algunos escena del crimen como en el laboratorio. Los siguientes
celofanes. Las superficies semiporosas se deben tratar factores pueden influir en la elección de las técnicas de
con procesos destinados a ambas superficies no porosas revelado, así como el nivel de los recursos utilizados en
y porosas. cualquier situación:

Los sustratos texturizados pueden ser porosos o no poro­ • Tipo de residuo de la huella latente sospechosa
sos y presentar el problema de contacto incompleto entre
las crestas de fricción en la piel y la superficie a tocarse. • Tipo de sustrato
(Un ejemplo podría ser el plástico en forma de piedras
• Textura del sustrato
de algunos monitores de computadora.) Esto a menudo
resulta en huellas dactilares discontinuas y carentes de • Estado de sustrato (limpio, sucio, viscoso, pegajoso,
detalle fino cuando se revelan. Además, estas superficies grasoso, etc.)
a menudo no responden bien a un cepillo convencional y
al polvo. La acción de cepillado y la elevación de la cinta • Las condiciones ambientales durante y después del
revelan típicamente la textura del sustrato, dejando huellas depósito de la impresión latente
dactilares difíciles o imposibles de visualizar.
• Lapso de tiempo desde que la evidencia fue tocada
Diversas técnicas, tales como el uso de polvo muy fino
• Consecuencias de los métodos de procesamiento
o medios de elevación flexibles, se pueden utilizar para
destructivos
reducir los problemas causados por superficies texturiza­
das (Guerrero, 1992; Kelly et al., 2001, pág. 7-12; Knaap y • Exámenes forenses posteriores
ADACH, 2002, pág. 561-571).
• Ordenamiento secuencial de reactivos

7.1.4 Selección del Proceso • Gravedad del delito

Los reactivos de huellas dactilares y las técnicas de
revelado están generalmente destinados a ser utilizados 7.1.5 Manejo de Evidencia
en combinación y orden secuencial. Estos métodos son a El manejo adecuado de evidencia comienza con el uso
menudo específicos a sustratos porosos o no porosos; sin de látex, nitrilo, PVC u otros guantes adecuados. Algunos
embargo, algunas técnicas tienen aplicaciones universales. fabricantes de guantes o distribuidores de suministros de
La desviación del orden recomendado podría hacer los pro­ seguridad, mencionarán una lista de guantes recomenda­
cesos posteriores ineficaces. Consulte Trozzi et al. (2000), dos para su uso con diversos productos químicos. El uso
Kent (1998) y Champod et al. (2004, pág. 217-225) para de guantes protege la evidencia de la contaminación y al
ejemplos de directrices para la ordenación secuencial y a usuario de la exposición a agentes patógenos o sustan­
Champod et al. (2004, pág. 105-179) para una revisión re­ cias químicas peligrosas. Sin embargo, no garantiza que
ciente que incluye muchas técnicas de revelado de huellas las huellas latentes serán preservadas porque incluso
dactilares. Los siguientes procedimientos generales son una mano enguantada puede destruir las huellas latentes
apropiados durante una búsqueda sistemática de pruebas frágiles en contacto. Esto es especialmente cierto en
de huellas dactilares latentes: superficies no porosas donde la huella latente reside en
la superficie extrema de las pruebas. Para evitar daños
• Inspección visual con una luz brillante, una fuente de luz
en las huellas dactilares en estas superficies, la evidencia
forense o láser
debe ser manejada en zonas que normalmente no han sido
• El proceso de impresión latente secuencial expuestas al tacto o en superficies incapaces de producir
huellas viables. También hay que señalar que el uso de
• Documentación de las impresiones reveladas en cada guantes no impide la transferencia de detalles de la cresta
paso de fricción del examinador a la exposición (Willinski, 1980,
pág. 682-685; St-Amand, 1994, pág. 11-13; Hall, 1991, pág.
Es importante tener en cuenta que no todos los procesos
415-416).
se utilizan invariablemente. Alguna discreción permanecerá

7–5
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

7.1.6 Embalaje 7.2 La Composición del Residuo de

El embalaje ayuda a garantizar la integridad de las pruebas Impresión Latente
manteniendo los contaminantes lejos, manteniendo evi-
dencia de pistas intacta y ayudando a garantizar la cadena 7.2.1 Introducción
de custodia. Las cajas de cartón, bolsas de papel y bolsas
de plástico son las formas más comunes de embalaje de La composición del sudor que es depositado cuando la
pruebas. La mayoría de expertos recomiendan los envases cresta de fricción en la piel hace contacto con una super-
de papel, ya que es transpirable y rentable, a pesar de las ficie es una mezcla compleja (Ramotowski, 2001, pág.
bolsas de plástico son también ampliamente utilizadas. 63-104; Bramble y Brennan, 2000, pág. 862-869). Estudios
Cualquier artículo que ha sido mojado se debe permitir que recientes han identificado cientos de compuestos presen-
antes del envasado sea secado al aire, porque el exceso tes en el sudor humano (Bernier et al., 1999, pág. 1-7; Ber-
de humedad atrapado en cualquier paquete aumentará la nier et al., 2000, pág. 746-756). Un número considerable de
probabilidad de crecimiento de hongos destructivos. La hu- estudios en la naturaleza del sudor se han llevado a cabo
medad también puede ser atrapada en bolsas de plástico por parte de las comunidades de dermatología y de ciencia
cuando se reúnen pruebas en ambientes de alta humedad. forense. En particular, un número de estudios han inves-
tigado cómo la composición química de estos residuos
A los artículos de pruebas no porosas no se les debe per- cambia con el tiempo, lo cual es un problema crítico para
mitir que se froten juntos. Las pruebas no porosas deben el examinador de huella dactilar. Aunque el conocimiento
ser almacenadas por separado, aseguradas dentro de un de la composición del sudor producido en las diferentes
paquete de tamaño adecuado de manera que se impida el glándulas a lo largo del cuerpo es de interés y provee una
desplazamiento y frotamiento. Bajo ninguna circunstancia base para propósitos de comparación, esta información no
se debe utilizar rellenos tales como papel picado, virutas representa exactamente lo que está sucediendo realmente
de madera o cacahuetes de embalaje dentro del paquete en la impresión depositada en el lugar de los hechos. Los
con la evidencia, ya que pueden limpiar fácilmente las huel- estudios han mostrado que empiezan a ocurrir cambios
las frágiles. (Sin embargo, pueden ser utilizadas fuera del significativos en la impresión latente casi inmediatamente
contenedor de prueba, dentro del contenedor de correo.) después del depósito. Si la impresión latente llegara ser
La evidencia porosa se puede asegurarse en cajas, bolsas visualizada exitosamente, se necesita un entendimiento
y sobres, y se puede almacenar junta porque las huellas la- exhaustivo de estos cambios.
tentes no son susceptibles a borrarse al contacto. Una vez
que la evidencia está asegurada, el paquete se debe sellar Esta sección comenzará con un muy breve vistazo de la
con cinta de evidencia de manera que no haya puntos de anatomía de la piel, lo cual será necesario para obtener un
entrada. La cinta debe ser firmada por la persona que ase- mejor entendimiento de cómo los compuestos químicos
gura la evidencia y la información de identificación apropia- en una impresión latente se secretan sobre la superficie de
da debe ser colocada en el paquete según lo especificado la cresta de fricción de la piel. Después, habrá una mirada
por la dependencia responsable de la recolección. detallada a la composición química de las secreciones de
cada una de las glándulas responsables de contribuir al
El resto de este capítulo pretende describir, con cierto residuo de la impresión latente. Otra sección cubrirá cómo
detalle, la naturaleza de los residuos de impresión latente y la composición de algunas de estas secreciones cambia a
las técnicas de revelado de huellas dactilares más utiliza- medida que el donante envejece. Finalmente, se resumirán
das. Las técnicas experimentales y novedosas no han sido estudios recientes que han investigado cómo el residuo de
incluidas, ni los procesos considerados por los autores son la impresión latente cambia con el tiempo.
redundantes, poco prácticos o excesivamente peligrosos.
Sin embargo, la omisión de la referencia a una técnica 7.2.2 Anatomía de la Piel
particular no indica su falta de idoneidad como una técnica
Este tema se cubre con más detalle en otra sección en este
de desarrollo de huellas dactilares. Varias formulaciones
libro de referencia, por lo que el tratamiento aquí será muy
para diversas soluciones químicas se han recolectado en la
breve. Los lectores serán dirigidos con Ramotowski (2001,
Sección 7.14.
pág. 63-104) para más detalles.

7–6
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

La piel es el órgano más grande el cuerpo humano (Odland, ha reportado variaciones desde 7.2 (extraído directamente
1991). El área total de la piel en el cuerpo excede los 2 m2; desde la glándula) hasta 5.0 (recuperado desde la super-
aun así, en la mayoría de partes del cuerpo, el grosor no es ficie de la piel a un ritmo de sudor bajo), hasta entre 6.5 y
de más de 2mm. La piel hace muchas funciones, incluyendo 7.0 (recuperado desde la superficie de la piel a un ritmo de
la regulación de la temperatura corporal, retención de hume­ sudor alto) (Kaiser y Drack, 1974, pág. 261-265).
dad, protección contra organismos invasores (por ejemplo,
virus, bacterias) y sensación. Se compone de dos capas La glándula ecrina también secreta compuestos orgáni­
primarias y distintas, epidermis y dermis. cos. Los aminoácidos son de primaria importancia para el
revelado del detalle de la cresta de impresión latente. La
La epidermis se compone de muchas capas distintas (Ra­ tabla 7-1 resume los valores promedio de abundancia de
motowski, 2001, pág. 63-104; Odland, 1991). La capa situada los aminoácidos listados (Hadorn et al., 1967, pág. 416-417;
justo por debajo de la dermis es el estrato germinativo Hamilton, 1965, pág. 284-285; Gold y Skewes, 1965, pág.
(capa celular basal) y la capa superior es el estrato córneo 1042-1045). La cerina es el aminoácido más abundante y
(capa cornificada). Es este estrato, la eleidina se convierte por lo tanto todos los otros valores se normalizan al valor
en queratina, la cual es continuamente desplazada hacia la de 100 para este compuesto. Las proteínas también se
superficie de la epidermis, resultando en una necesidad con­ encuentran en el sudor ecrino (Nakayashiki, 1990, pág.
stante de reponer la queratina que se ha perdido. Una célula 25-31; Uyttendaele et al., 1977, pág. 261-266). Un estudio
que comienza en el estrato germinativo viaja típicamente a encontró presentes más de 400 componentes de polipép­
través del estrato corneo en aproximadamente 28 días. tido diferentes (Marshall, 1984, pág. 506-509).

La dermis se compone de una variedad de tejidos conecti­ Los lípidos también han sido detectados en el sudor ecrino.
vos diferentes, incluyendo colágeno, fibras de elastina y un Hay un poco de dificultad en determinar exactamente las
gel inter fibrilar compuesto de glucosamina-proteoglicanos,
sales y agua (Odland, 1991). Esta capa también contiene las
dos mayores glándulas sudoríparas y sebáceas
Tabla 7–1
7.2.3 La producción de Sudor Abundancia relativa de aminoácidos en el sudor.

Tres glándulas primarias contribuyen a la producción

Amino Acid Average Abundance
del sudor. Estas son las glándulas sudoríparas (ecrinas
y apocrinas) y las glándulas sebáceas. Cada glándula Cerina 100
contribuye a una única mezcla de compuestos químicos. Glycine 60
Estos compuestos exudan desde los poros hacia las cres­
Ornitina-Lisina 45
tas de fricción o son transferidos a las crestas de fricción
a través del tocamiento de un área (por ejemplo, la frente, Ornithine 41
el antebrazo, etc.). Alanina 30

La glándula ecrina es una de los dos tipos de glándulas Aspartic acid 18

sudoríparas presentes en el cuerpo. Algunos millones de Treonina 15
estas glándulas están distribuidas a lo largo del cuerpo,
Histidine 15
más comúnmente en las palmas de las manos y en las
plantas de los pies y algunas menos en el cuello y espalda Valina 10
(Anderson et al., 1998, pág. 1561). Estas glándulas produ­ Leucine 9
cen una secreción que es mayormente agua pero contiene
Ácido glutámico 8
muchos compuestos en cantidades detectables (Brusilow
y Gordes, 1968, pág. 513-517; Mitchell y Hamilton, 1949, Isoleucine 7
pág. 360; Sato, 1979, pág. 52-131; Bayford, 1976, pág. Fenilalanina 6
42-43; Olsen, 1972, pág. 4). La cantidad promedio de
Lysine 7.5
secreciones producidas durante un periodo típico de 24
horas varía entre los 700 y 900 gramos. El pH del sudor Tirosina 5

7–7
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

cantidades de estos compuestos presentes en las secre­ abundantes en el cuero cabelludo, la cara, el ano, la nariz,
ciones ecrinas porque el sudor generalmente se mezcla la boca y las partes externas de la oreja (Anderson et al.,
con compuestos sebáceos en la superficie de la piel. Sin 1998, pág. 1,464). No se encuentran en las palmas de
embargo, un estudio reportó cantidades detectables tanto las manos o las plantas de los pies. Las secreciones de
de ácidos grasos como de compuestos de esterol (Boysen las glándulas sebáceas normalmente desembocan en un
et al., 1984, pág. 1302-1307). folículo de cabello antes de llegar a la superficie de la piel,
aunque en algunas regiones llegan a la superficie de la piel
Otros compuestos variados, incluyendo fármacos, han sido directamente (por ejemplo, los labios). El propósito de las
encontrados en las secreciones ecrinas (Sato, 1979, pág. secreciones sebáceas parece ser la de ayudar a prevenir la
52-131; Lobitz y Mason, 1948, pág. 908; Förström et al., evaporación del sudor (y así retener el calor corporal) y para
1975, pág. 156-157). Un estudio reportó la presencia de lubricar el pelo y la piel circundante.
sulfonamidas, antipirina y aminopirina (Johnson y Maibach,
1971, pág. 182-188). Otro informó que se habían detectado Los compuestos primarios presentes en las secreciones
L-dimetilanfetamina y su metabolito L metanfetamina (Vree sebáceas son lípidos. La Tabla 7-2 enumera los valores de
et al., 1972, pág. 311-317). El etanol también se ha detecta­ porcentaje aproximado para las diversas clases de lípidos
do en el sudor ecrino (Naitoh et al., 2000, pág. 2797-2801), presentes en las secreciones sebáceas, según lo infor-
lo que ha llevado a la sugerencia de utilizar el sudor como mado por Goode y Morris (1983). Knowles (1978, pág.
un medio para determinar de forma no invasiva la concen­ 713-721) informó intervalos de concentración similares.
tración de etanol en el suero de una persona (Hawthorne y
Los ácidos grasos libres en el sebo se derivan principal­
Wojcik, 2006, pág. 65-71). El acetaminofén también ha sido
mente de la hidrólisis de los triglicéridos y ésteres de cera.
reportado en el sudor de una persona un día después de
Alrededor de la mitad de los ácidos grasos son saturados,
tomar el medicamento (Mong et al., 1999).
de cadena lineal con C16 y C14 siendo la más común
La otra glándula sudorípara presente en la piel es la glán­ (Green, 1984, pág. 114-117). Los ácidos grasos monoinsatu­
dula apocrina. Estas glándulas sudoríparas están asociadas rados comprenden aproximadamente el 48% de sebo y
con el pelo grueso de las axilas y la zona púbica. Estas los ácidos poliinsaturados comprenden del 2-3% restante
son más grandes que las glándulas ecrinas y secretan un (Nicolaides y Ansari, 1968, pág. 79-81). Los ácidos grasos
fluido más espeso (Anderson et al., 1998, pág. 1561). El de cadena ramificada también se reportaron (Green, 1984,
conducto de la glándula normalmente desemboca en un pág. 114-117).
folículo piloso (arriba en donde estaría un conducto de la
Los ésteres de cera comprenden aproximadamente el
glándula sebácea) antes de que las secreciones alcancen
20-25% de sebo. Estos compuestos contienen un ácido
la superficie de la piel (Robertshaw, 1991). Debido a que el
graso que ha sido esterificado con un alcohol graso. Un
contenido de la glándula apocrina a menudo se mezcla con
porcentaje significativo de estos compuestos (≈27%) se ha
las secreciones sebáceas antes de llegar a la superficie de
informado que contiene ácidos grasos de cadena ramifica­
la piel, es difícil obtener secreciones apocrinas no contami­
da (Nicolaides et al., 1972, pág. 506-517). Los ésteres
nadas, “puras” para su análisis. Uno de los pocos estudios
publicados de las secreciones apocrinas las describió con
un aspecto lechoso y declaró que se secaban como un Tabla 7–2
sólido parecido al plástico, que es fluorescente y tiene un
olor (Shelley, 1951, pág. 255). Los compuestos que habrían Porcentaje aproximado de lípidos en secreciones sebáceas.
sido aislados a partir de las secreciones apocrinas incluyen
proteínas, hidratos de carbono, colesterol, hierro (Knowles, Lípido Porcentaje
1978, pág. 713-721), C19­ sulfatos de esteroides y Δ16­ Glicéridos 33
esteroides (Toth y Faredin, 1985, pág. 21-28; Labows et al.,
Ácidos grasos 30
1979, pág. 249-258).
Ésteres de cera 22
Las glándulas sebáceas son órganos relativamente peque­
Ésteres de colesterol 2
ños en forma de saco y se pueden encontrar en la capa
de la dermis de la piel. Se encuentran en todo el cuerpo Colesterol 2
y se asocian con el pelo del cuerpo. Son especialmente Escualeno 10

7–8
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

de esterol se cree que se producen secundariamente por disminuyendo hasta el 2.1% en sujetos postadolescentes
ciertas cepas de bacterias (Puhvel, 1975, pág. 397-400). (hasta los 45 años de edad).
El escualeno, que comprende aproximadamente 10% de
Aunque la composición de escualeno cambia con la edad del
sebo, es un precursor importante para la producción de es­
donante, el rango no es muy significativo. La concentración
teroides en el cuerpo (incluyendo los alcoholes esteroides,
de escualeno comienza al 9.9% para los recién nacidos y
lanosterol y colesterol).
alcanza un bajo 6.2% en niños de entre 2-4 años de edad.
La concentración entonces comienza lentamente a aumen­
7.2.4 Variación en la Composición del Sebo
tar en los niños de 4-8 años de edad (7.7%) y alcanza su
Según la Edad del Donador máximo a un valor del 12% en los postadolescentes.
La composición de ácidos grasos libres en el sebo cambia
dramáticamente con la edad del donador (Ramasastry et 7.2.5 Residuo de la Impresión Latente
al., 1970, pág. 139-144). El porcentaje aproximado de ácidos
Una impresión latente es una mezcla de algunas o todas
grasos en los recién nacidos (aproximadamente a los 5 días
las secreciones de los tres tipos de glándulas. La cantidad
de edad) se ha informado que es sólo alrededor del 1.5% de
de material contenida en un depósito de impresión latente
la composición global de sebo. Este valor se eleva dramáti­
es bastante pequeña, típicamente menos de 10 μg y tiene
camente aproximadamente del 20 a 23% en niños de corta
un espesor medio de aproximadamente 0.1 μg (Scruton
edad (de 1 mes a 4 años de edad). El valor se estabiliza del
et al., 1975, pág. 714-723). La secreción de la impresión
16-19% para los sujetos adolescentes y postadolescentes
latente es un complejo de emulsificación de estos numero­
(hasta aproximadamente los 45 años de edad).
sos y diversos compuestos. Cuando se deposita sobre
Los triglicéridos también varían significativamente. Se una superficie, casi el 99% de la impresión se compone
encontró que los recién nacidos tienen triglicéridos que de agua. A medida que esta agua comienza a evaporarse
constituyen aproximadamente el 52% de su sebo. Este rápidamente desde el depósito, la impresión comienza a
valor se redujo al 38% en lactantes (de 1 mes a 2 años de secarse. Este proceso comienza a alterar la capacidad de
edad). Posteriormente, el valor alcanzó el 50% en los niños ciertos reactivos para visualizar la impresión. El polvo de las
pequeños (de los 2-4 años de edad) y luego, poco a poco huellas dactilares, por ejemplo, no funcionará tan bien en
se redujo hasta el 41% en sujetos postadolescentes. una impresión latente reseca, pero otros procesos, como
la ninhidrina y el revelador físico, han revelado impresiones
En los recién nacidos, el 26.7% de sebo se compone de por varios años (McDiarmid, 1992, pág. 21-24).
ésteres de cera. Este valor comenzó a disminuir en los
lactantes (17.6%) y continuó hasta llegar a un mínimo de El residuo de la impresión latente se divide generalmente
6.9% en sujetos de edades comprendidas entre los 4 y 8 en dos categorías básicas, solubles en agua e insolubles en
años. Los valores a continuación comenzaron a aumentar agua. La porción soluble en agua del depósito de impresión
en los preadolescentes (17.8%) y siguieron aumentando normalmente se compone de secreciones ecrinas como
hasta alcanzar un máximo del 25% en postadolescentes sales (por ejemplo, NaCl) y aminoácidos (por ejemplo,
(hasta los 45 años de edad). serina, glicina). Los productos químicos como la ninhidrina
(que reacciona con los aminoácidos) y el nitrato de plata
El valor de colesterol en el sebo tiende a alcanzar su punto (que reacciona con cloruro de sodio) son reactivos eficaces
máximo en preadolescentes (7.2%). Se informó que los para la visualización de esta porción soluble en agua del
recién nacidos tienen 2.5% de colesterol en su sebo, residuo. Sin embargo, una huella latente rica en ecrinas
mientras los postadolescentes tuvieron los valores más que se expone al agua más probable a no recuperarse con
bajos, del 1.4%. La composición de éster de colesterol estos métodos. Es por ello que, antes de la introducción
tiende a variar de un modo impredecible. Un valor del 6.1% del revelador físico en la década de 1970, no existía un
se informó en los recién nacidos, el cual aumentó hasta método fiable para la recuperación de las impresiones de
el 10.3% para los lactantes (de 1 mes a 2 años de edad). documentos empapados en agua.
Este valor se redujo hasta el 8.9% para los niños peque­
ños (de 2 a 4 años de edad) y luego aumentó al 14.6% en La porción insoluble en agua realmente se puede dividir
niños de edades de 4-8 años. Este valor se redujo drástica­ en dos subcategorías. Una fracción de este residuo está
mente hasta el 5.7% en los niños preadolescentes y siguió compuesto de moléculas grandes, insolubles en agua (por

7–9
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

ejemplo, proteínas) y la otra fracción se compone principal- febrero de 2002 entre la Universidad de Lincoln y la PSDB
mente de lípidos no polares (por ejemplo, ácidos grasos). para examinar el análisis de la espectroscopia de cromato-
Se piensa que los reactivos como reveladores físicos grafía de gases-masas (GC-MS) de la composición de
reaccionan con compuestos similares a la primera fracción los residuos de impresión latente y cómo cambia con el
y los reactivos como Oil Red O o Rojo Nilo reaccionan con tiempo.
lípidos a partir de la segunda fracción.
7.2.8 Oficina Central de Servicios de
7.2.6 Envejecimiento del Residuo de la Ciencias Forenses (Reino Unido)
Impresión Latente La Oficina Central de Servicios de Ciencias Forenses de
Varios laboratorios han examinado el estudio de los cam- Reino Unido (FSS) también ha estado activa en el área
bios en la composición de los residuos de impresiones de la química de la impresión latente. La FSS llevó a cabo
latentes y han determinado que la composición de los re- un estudio preliminar en conjunto con la Universidad de
siduos de impresión latente puede cambiar drásticamente Lausanne en 1999 (Jacquat, 1999). Este estudio comparó
con el tiempo. El trabajo fundamental de esta área se llevó el envejecimiento de las impresiones expuestas a la luz
a cabo durante las décadas de 1960 y 1970 por parte de y la oscuridad en el período de 1 mes. Los seis picos
la Oficina Central de la Rama de Investigación científica y más abundantes que se encuentran en el residuo fueron
Desarrollo del Reino Unido y el Establecimiento de Inves- ácido oleico, ácido palmítico, colesterol, escualeno y dos
tigación Central (Bowman et al., 2003, pág. 2-3). Estudios ésteres de cera. Los datos se recogieron a partir de cuatro
adicionales se han llevado a cabo por parte de algunos donantes en el momento del depósito (t = 0), después
de los laboratorios de la Oficina Central de Servicios de de 2 semanas y finalmente después de 4 semanas. El
Ciencias Forenses y varios Departamentos de Laboratorios ácido palmítico en una impresión mantenida en la oscu-
Nacionales de Energía. ridad y el escualeno en una impresión mantenida a la luz
mostraron una disminución significativa en las primeras
7.2.7 Oficina Central de la Rama de 2 semanas y luego se estabilizaron. El colesterol y ácido
Desarrollo Científico (Reino Unido) oleico mostraron una disminución regular en impresiones
almacenadas en la oscuridad. No se detectaron otras ten-
La Oficina Central del Reino Unido patrocinó un número de dencias observables para los otros compuestos.
esfuerzos de investigación, los cuales se llevaron a cabo
por parte de dos grupos: la Rama de Investigación Científi- Un estudio reciente financiado por el Grupo de Tra-
ca y Desarrollo (también conocida como la Rama de Desar- bajo de Apoyo Técnico (TSWG), un grupo de trabajo
rollo Científico de la Policía (PSDB) y actualmente conocida interinstitucional que financia proyectos relacionados
como la Rama de Desarrollo Científico) y Establecimiento con la lucha contra el terrorismo, observó los cam-
de Investigación Central. Un número de estudios llevados bios en el contenido de lípidos de una impresión a
a cabo a mediados y finales de la década de 1960 buscó través del tiempo y en diferentes condiciones ambien-
determinar la cantidad de ciertos compuestos inorgánicos tales (Jones et al., 2001a). El estudio de la FSS utiliza
(cloruros) (Cuthbertson, 1969) así como lípidos (Wilson and metil-N trimetilsililtrifluoroacetamida como un agente
Drake, 1978) en el residuo de la impresión latente. Estos derivativo. Las muestras fueron analizadas en los intervalos
estudios no abordan los cambios en la composición con seleccionados y almacenadas en cualquiera de las condi-
el tiempo. Sin embargo, un estudio monitoreó el cambio ciones de luz o de oscuridad a 25°C y una humedad relativa
en cloruros, aminoácidos (como la leucina) y la concen- del 20%. Se observaron varias tendencias generales. El
tración de urea en un depósito en el transcurso de 236 días escualeno se encontró degradándose bastante rápido y
(Knowles, 1978, pág. 713-721). Después de 236 días, la rara vez se detectó en impresiones más viejas. En algunos
concentración de cloruro había pasado de 0.223 μg/cm2 a casos, ciertas concentraciones de ácidos grasos aumen-
0.217 μg/cm2. El contenido de aminoácido había cambiado taron inicialmente antes de que tendieran a disminuir con
a partir de 0.083 μg/cm2 a 0.046 μg/cm2 y el contenido de el tiempo. Esto pudo haber sido debido a la ruptura de los
urea a partir de 0.083 μg/cm2 a 0.028 μg/cm2. ésteres de cera, lo que pudo haber contribuido con ácidos
grasos al residuo antes de que los compuestos comen-
La PSDB patrocinó recientemente un poco de trabajo zaran a romperse. Se observaron tendencias similares para
en esta área (Fitzgerald, 2003). Un proyecto se inició en

7–10
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

las muestras almacenadas en la oscuridad; sin embargo, 7.2.10 Centro Técnico de Savannah River
las disminuciones fueron menos rápidas que para las
El Centro Técnico de Savannah River (Savannah River
muestras almacenadas en la luz. La FSS actualmente
Technical Center, SRTC), en un proyecto financiado con­
continúa investigando este tema con una beca de investig­
juntamente por el Departamento de Energía y el TSWG,
ación emitida por el Consejo de Investigación de Ciencias
también estudió cómo los residuos de impresión latente
Físicas e Ingeniería del Reino Unido.
cambian con el tiempo (Walter, 1999). Este estudio se
Otro esfuerzo realizado por la FSS implicó el uso de centró en los cambios que se producen cuando los lípidos
sistemas de microfluidos para el análisis químico de los en la impresión comienzan a envejecer. El objetivo final fue
residuos de impresión latentes (Valussi, 2003). El objetivo determinar si alguno de los productos de degradación sería
de este trabajo fue desarrollar un dispositivo de microflui­ adecuado para la visualización mediante reactivos quími­
dos, basado en electroforesis capilar (CE), que permita el cos. Un número limitado de condiciones (por ejemplo, la
muestreo, preconcentración y el análisis de residuos de exposición a rayos UV, las condiciones de interior y al aire
impresión latentes. El micro-TAS (sistema analítico total, libre, la adición de un catalizador) también fueron evaluadas
TAS, por sus siglas en inglés) propuesto utiliza la tecnología como parte de este estudio.
del microchip para permitir separaciones ultrarrápidas y de
Se encontró que los productos de degradación principales
alta eficacia. El análisis incluyó la colocación de una impre­
para los lípidos estudiados por el SRTC son una clase de
sión directamente en un chip de CE revestido con gel. Un
compuestos conocidos como hidroperóxidos. La mezcla
voltaje aplicado causó que los componentes polares del re­
estándar utilizada en este experimento consistió en una
siduo migraran en el chip. Después de la preconcentración,
combinación de colesterol, triglicéridos, ácidos grasos,
el residuo se separó y después se analizó. El proyecto
ésteres de cera, ésteres de colesterol y un catalizador,
demostró que el método de chip CE es capaz de separar
protoporfirina IX dimetil éster (aproximadamente el 0.01%
ciertos componentes del residuo de impresión latente; sin
de la mezcla total). A continuación, esta mezcla se expuso
embargo, serán necesarios refinamientos adicionales para
a las diversas condiciones ambientales. Al igual que con el
separar compuestos específicos (o grupos de compuestos
estudio del PNNL, el SRTC encontró que los compuestos
de interés).
insaturados se agotaron rápidamente de las muestras,
incluso los almacenados en condiciones oscuras relativa­
7.2.9 Laboratorio Nacional del Pacífico
mente frías. Un experimento que observó el envejecimien­
Noroeste to del escualeno en un portaobjetos de vidrio encontró que
El Laboratorio Nacional del Pacífico Noroeste (Pacific después de 1 mes de exposición a condiciones de labora­
Northwest National Laboratory (PNNL) realizó una serie de torio ambiente, el 10% de la muestra se había convertido
experimentos de envejecimiento para impresiones latentes en hidroperóxidos. El SRTC iba a perseguir métodos de qui­
depositadas sobre papel filtro de fibra de vidrio (Mong et mioluminiscencia para la visualización de estos hidroperóxi­
al., 1999). Este esfuerzo financiado por el TSWG R&D se dos. Sin embargo, debido a que los hidroperóxidos en
realizó durante los últimos años de la década de 1990. Los sí son algo inestables, no se sabe cuánto tiempo estos
resultados obtenidos en los experimentos de envejeci­ compuestos permanecen en los residuos de impresión
miento salieron en general como se esperaba. La mayoría añejos y si los compuestos adicionales que se encuentran
de los lípidos insaturados (por ejemplo, el escualeno y los en impresiones reales podrían acelerar su descomposición.
ácidos grasos tales como los ácidos oleicos y palmitolei­
cos) disminuyeron significativamente durante el período 7.2.11 Conclusión
de estudio de 30 días. Los compuestos saturados (por
La química de los residuos de impresión latente es
ejemplo, los ácidos palmítico y esteárico) se mantuvieron
muy compleja; sin embargo, sus características físicas
esencialmente estables durante el mismo período de 30
y propiedades se deben a algo más que a los cientos
días. En general, a medida que la impresión de muestra
(o potencialmente miles) de compuestos químicos que
envejeció, hubo una tendencia a formar más productos de
componen el residuo. Estos compuestos forman una
bajo peso molecular de degradación (por ejemplo, ácidos
matriz tridimensional compleja, una emulsión de agua y
octanoico y nonanoico) a través del tiempo. Se planteó la
compuestos orgánicos e inorgánicos. La interacción de
hipótesis de que estos compuestos de bajo peso molecu­
lar se descompondrían más adelante o se evaporarían.

7–11
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

todos estos diferentes compuestos, ya que están expues- preferentemente se aferra al residuo depositado por las
tos a una variedad de condiciones ambientales durante un crestas de fricción en la piel. Es bien aceptado que la
período de tiempo, puede producir cambios dramáticos atracción mecánica entre estas partículas y la humedad y
en las propiedades físicas de la impresión latente. Estos componentes oleosos en una impresión provoca la
cambios pueden explicar por qué algunos reactivos, como adhesión, siendo la absorción un factor (Olsen, 1978, pág.
polvos y humos de yodo, tienden a trabajar en las impresio- 212-214; Lee y Gaensslen, 2001, pág. 108-109). El tamaño,
nes relativamente frescas, mientras que un reactivo como forma, área de superficie relativa (Olsen, 1978, pág.
desarrollador físico es sabido que revela impresiones con 212-214) y la carga (Menzel, 1999, pág. 143) de la partícula
décadas de antigüedad. también parecen desempeñar papeles.

Es sólo mediante la obtención de una mejor comprensión La mayoría de los polvos comerciales se basan en al
de la composición química de los residuos de impresión menos dos elementos esenciales para proporcionar
latente y cómo cambia con el tiempo que podemos hacer adhesión a los residuos de impresión latente sin “pintar” el
mejoras en los reactivos existentes y nuevos compuestos sustrato. Estos elementos se denominan pigmento y
de diseño para condiciones o superficies especiales. Estos aglutinante. El pigmento en polvo de huellas dactilares
datos también ayudarán a comprender mejor cómo los brinda visualización efectiva, ofreciendo contraste y
reactivos de revelado de la impresión latente funcionan definición contra la superficie de fondo. El aglutinante
realmente (así como a lo que en realidad reaccionan con (también referido como el portador en algunas aplicacio-
en el residuo). Sólo entonces podremos desarrollar un en- nes) ofrece la adhesión máxima y preferencial al residuo de
foque metódico para el diseño de reactivos que producirá impresión latente (Menzel, 1999, pág. 143). Algunos polvos
nuevas técnicas útiles en el futuro para la visualización de de pigmentos ofrecen suficiente adherencia para ser
los residuos de huellas latentes. utilizados de forma individual. La pintura del fondo se
produce cuando una cantidad indeseable de polvo se
adhiere al sustrato, así como a la huella latente, lo que
7.3 Polvos de Impresión Latente dificulta la detección.

La visualización se producirá a través de la luz reflejada

7.3.1 Antecedentes
(polvos de luz), luz absorbida (polvos oscuros) y luminiscen-
La visualización de la impresión latente con polvo o “es- cia (polvos fluorescentes). A veces, los polvos se combinan
polvoreo”, consiste en la aplicación de partículas finamente para la eficacia en luz y sustratos oscuros. Este es el caso
divididas que se adhieren físicamente a los componentes del polvo bicromático, que utiliza polvo de aluminio
acuosos y oleosos en los residuos de impresión latente altamente reflectante mezclado con polvo negro para lograr
sobre superficies no porosas (Sodhi y Kaur, 2001, pág. la visualización en ambas superficies claras y oscuras. Una
172-176). Esta técnica es uno de los métodos más antiguos desventaja de la mezcla de diferentes tipos de partículas
y comunes de detección de huellas latentes, con una de de pigmento es que las impresiones extremadamente
las primeras referencias que datan de 1891 (Forgeot, 1891, débiles, con pocas partículas adheridas a la impresión,
pág. 387-404). Los primeros practicantes utilizaron una pueden sufrir al tener sólo una fracción del pigmento
variedad de ingredientes disponibles localmente para hacer necesaria para la visualización. Este problema se puede
sus propios polvos, incluyendo carbón, polvo de plomo, superar mediante el etiquetado de un solo tipo de partícula
ceniza de cigarro (Moenssens, 1971, pág. 106-107), polvo de pigmento con una mancha de colorante fluorescente,
de “azul de lavado”, hierro en polvo, hollín (Rayo Polvo Inc., creando así una partícula con doble uso en lugar de la
2002, pág. 2-3) y talco (Olsen, 1978, pág. 212-214). combinación de diferentes tipos de partículas.

7.3.2 Teoría Los fabricantes comerciales de polvo tienden a etiquetar

los polvos por color: negro, blanco, plata, gris y así sucesi-
Quitar el polvo de huellas dactilares es relativamente vamente, en lugar de etiquetar los ingredientes. Las
simple y se basa en la adherencia de polvo al residuo de la partículas que sirven como buenos polvos de huellas
impresión latente para proporcionar una buena visibilidad y dactilares incluyen el negro de carbono (carbono coloidal),
definición de los detalles de las huellas dactilares. El polvo negro de humo, talco, caolín, aluminio, escamas de metal y
de impresión latente tiene una afinidad por la humedad y dolomita (Lee y Gaensslen, 2001, pág. 108-109), entre

7–12
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

otros. Los buenos aglutinantes incluyen polvo de hierro 7.3.3 Aplicación

(Lee y Gaennslen, 2001, pág. 108-109), licopodio, almidón
Todas las advertencias del fabricante, incluidas las de las
de maíz, colofonia y goma árabe (Menzel, 1999, pág. 143).
fichas de datos de seguridad de materiales, deben ser
Uno de los polvos más comunes de huellas latentes, observadas cuando se utiliza polvo de huellas dactilares.
conocido por su versatilidad y eficacia, es el negro de Aunque los proveedores comerciales de polvo de huellas
carbono. Cuando se mezcla con un portador, este polvo latente han descontinuado el uso de ingredientes pelig­
trabaja en una amplia gama de superficies y causa poca rosos conocidos como el plomo, el mercurio y el cadmio,
pintura de sustrato (Cowger, 1983, pág. 79-80). Las se recomienda encarecidamente que el experto use una
mezclas de negro de carbono producen una imagen oscura máscara para polvo o trabajar en una mesa de aspiración
(gris-negra) que puede ser visualizada en varias superficies como precauciones mínimas durante el uso de cualquier
de color. Este tipo de polvo también se mostrará en tipo de polvo.
superficies de color negro brillante, que aparece a la
Los polvos se aplican típicamente a superficies no porosas
inversa del color claro (Cowger, 1983, pág. 79-80). Curiosa­
con un cepillo suave. La pulverización no se recomienda
mente, el polvo de huellas dactilares negro también se
para superficies porosas o altamente absorbentes tales
puede preparar o “etiquetar” con una mancha de tinte
como el papel sin recubrir o la madera en bruto porque
fluorescente (Thornton, 1978, pág. 536-538), dándole así el
otros tratamientos químicos superan en su acción al polvo
doble propósito como técnica foto luminiscente.
en estas superficies. La suavidad de las cerdas es particu­
Otros polvos de impresión latente eficaces y ampliamente larmente importante para evitar daños a los residuos de
utilizados son los polvos de hojuelas metálicas hechas de impresión latente frágiles. Las huellas latentes con un alto
aluminio, zinc, cobre, latón, acero inoxidable, hierro, cobalto contenido de humedad o aceite se dañan fácilmente con
y níquel. Algunos datos indican que los polvos de hojuelas un cepillo demasiado rígido o si se utiliza con demasiada
son más sensibles que los polvos que no están hechos de fuerza. Los cepillos convencionales se hacen típicamente
hojuelas (Kent, 1998). Sin embargo, los polvos de hojuelas con pelo animal, filamentos de fibra de vidrio o, a veces,
también a veces tienden a “pintar” el sustrato más de lo plumas. Aunque los cepillos de huellas dactilares se toman
que las partículas que no están hechas de hojuelas lo hacen. en gran medida por sentado estos días, un estudio de los
cepillos se ha llevado a cabo (Bandey, 2004).
Los polvos de hojuelas son fabricados con partículas
metálicas esféricas molidas como hojuelas que van de 1 a Los polvos aplicados con un cepillo de filamentos tradi­
50 μm de diámetro (James et al., 1991, pág. 1368-1375). El cionales consisten en partículas muy finas y suelen ser
área de superficie aumentada de la hojuela con respecto al de baja densidad o “suaves” por naturaleza. Esto permite
peso de la partícula contribuye a la adhesión de este polvo. que las partículas sean fácilmente recogidas o “cargadas”
Parece que el polvo de hojuela comercialmente disponible en los filamentos del cepillo. La baja densidad de este
con un diámetro medio de 10 μm y un espesor medio de polvo también permite que se vuelva fácilmente aero­
0.5 μm es óptimo para el revelado de la impresión latente. transportada durante el proceso de formación de polvo,
También es importante señalar que la adición de ácido haciendo una máscara anti polvo o respiratoria necesaria
esteárico, destinado a influir en la morfología de la hojuela en la escena del crimen.
durante la molienda, aumenta el valor de la adherencia de
Es importante mantener las escobillas limpias, secas y rela­
los copos también (James et al., 1990, pág. 247-252). El
tivamente libres de enredos. Para aplicar el polvo de huel­
polvo de hojuelas de aluminio que se lavó de su contenido
las dactilares con un cepillo convencional, las puntas de los
de ácido esteárico dio como resultado un revelado pobre
filamentos se sumergen ligeramente en un recipiente de
de huellas dactilares, mientras que las hojuelas de aluminio
boca ancha estéril que contiene una pequeña cantidad de
producidas con aproximadamente el 10 por ciento en peso
polvo. Esto se llama “carga” del cepillo. El exceso de polvo
de ácido esteárico dieron buenos resultados (James et al.,
a continuación se agita, se gira o extrae del cepillo. El polvo
1991, pág. 1368-1375). Otro estudio indicó que una serie
se aplica entonces de manera uniforme a todas las áreas
de metales en hojuelas produjo resultados óptimos con el
del sustrato.
3-5% en peso de los niveles de ácido esteárico (James et
al., 1993, pág. 391-401).

7–13
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

Un área de la superficie (o un sustrato de naturaleza simi- menos eficaces en sustratos ferromagnéticos tales como
lar) debe ser evaluado antes de procesar completamente el acero o níquel y por lo tanto no se recomiendan en
el artículo. Esto se hace para determinar la cantidad óptima estos sustratos. La atracción magnética puede provocar
de polvo que será utilizado en ese sustrato y evitar que se el contacto entre el aplicador y el sustrato, dañando las
pinte el fondo. El cepillado se realiza con luz e incluso con huellas latentes en el proceso. Además, las partículas
trazos que asemejan la pintura. Es importante siempre para magnetizadas de polvo se adhieren al sustrato y resisten
comenzar ligeramente espolvorear y construir lentamente la remoción.
las aplicaciones más pesadas para minimizar el daño de las
Hay dos maneras de registrar o conservar una impresión
huellas dactilares.
en polvo. El método más común y simple es el levantado.
Cuando aparecen las huellas latentes, pueden ser ligera- Para levantar una impresión, se coloca cinta transparente
mente cepilladas añadiendo polvo y posteriormente cepil- de buena calidad sobre la superficie que lleva una impre-
lando el exceso de polvo de distancia. Esto se hace en la sión en polvo. El tamaño común de la cinta para el levanta-
dirección de la trayectoria de las crestas para evitar daños a miento de huellas dactilares es de 1.5-2 pulgadas de ancho.
la impresión. Mientras se está aplicando, la cinta se frota para quitar
las burbujas de aire y para asegurar una buena adherencia
Otro tipo de polvo, denominado polvo magnético o magna, a las huellas latentes. Se retira y se pone en una tarjeta
permite la aplicación con una barra imantada que no base que contraste con el color del polvo. Probablemente
tiene cerdas. Este tipo de polvo puede ser ligero, oscuro el levantamiento más común es la de polvo de huellas
o fluorescente y utiliza las propiedades ferromagnéticas dactilares negro colocado en una tarjeta base blanca. Otros
del hierro en polvo mezcladas con pigmentos en polvo. El medios adhesivos de levantamiento son los levantadores
aplicador imantado (cepillo magna) se sumerge en el polvo, de bisagra, donde el cuadro adhesivo está unido a la tarjeta
recogiendo una bola de la mezcla de hierro y partículas, base por medio de una bisagra; los levantadores de gel
esencialmente formando su propio cepillo (Figura 7-1). Esta adhesivo opaco, por lo general de color negro o blanco;
bola sirve como un vehículo eficaz para las partículas de y materiales de tipo silicón que se extienden sobre la
pigmento y se pasa hacia atrás y adelante sobre el sustrato superficie y se dejan endurecer con un medio flexible de
para revelar las impresiones latentes. goma antes de levantarse. Se debe tener cuidado durante
el proceso de comparación al señalar que las técnicas de
Es importante tener en cuenta que la bola de polvo mag-
levantamiento causan que la impresión aparezca invertida.
nético formado con un cepillo magna es mucho más suave
que los cepillos de filamentos convencionales y típicamente Si la impresión se va a fotografiar in situ, la importancia del
causa menos daño a las huellas latentes frágiles (MacDonell, color del polvo aumenta. Documentar de esta manera las
1961, pág. 7-15). Los polvos magnéticos suelen ser

FIGURA 7–1
Aplicador magnético.

7–14
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

impresiones en polvo requiere la combinación de la selec­

7.4 Ninhidrina y Análogos
ción apropiada de polvo y la iluminación fotográfica que
producirá un amplio contraste contra el sustrato.
7.4.1 Historia de la Ninhidrina
Otro tipo de polvo que produce excelentes resultados en La ninhidrina fue descrita por primera vez en 1910 cuando
una amplia variedad de superficies es el polvo fluores­ Siegfried Ruhemann preparó erróneamente el com­
cente. El polvo fluorescente se basa en el principio de puesto (Ruhemann, 1910a, pág. 1438-1449). Ruhemann
luminiscencia para proporcionar un contraste entre la huella observó que el nuevo compuesto reaccionó con la piel y
dactilar y el fondo. Los polvos fluorescentes son típica­ los aminoácidos para originar un producto de color púr­
mente creados por medio de la adición de un colorante pura (Ruhemann, 1910b, pág. 2025-2031) y publicó una
láser en la solución a un aglutinante y permitiendo que la serie de documentos que detallan ésta y otras reacciones
mezcla se evapore (Menzel, 1999, pág. 62-65). La masa (Ruhemann, 1911a, pág. 792-800; 1911b, pág. 1306-1310;
seca resultante se muele en polvo de impresión latente. 1911c, pág. 1486-1492). Propuso una estructura para el pro­
ducto de color intenso (Ruhemann, 1911c, pág. 1486-1492),
La pulverización fluorescente es muy sensible cuando se
hoy conocida como púrpura de Ruhemann y comentó
utiliza con una buena fuente de luz forense y los filtros de
sobre la posible aplicación de la reacción a la detección
barrera adecuados. En teoría, el polvo de huellas dactilares
de rastros de aminoácidos y productos de proteína en
luminiscente debe ser más sensible que los métodos
muestras biológicas (Ruhemann, 1911, pág. 792-800).
convencionales (Menzel, 1999, pág. 4-7). Es importante
probar la cinta y las tarjetas de levantamiento utilizadas con Tras el descubrimiento de Ruhemann, la ninhidrina encon­
polvos fluorescentes para cualquier fluorescencia inherente tró un amplio uso en aplicaciones de química y bioquímica
ya que la fluorescencia causada por el medio de levanta­ analíticas. Ya en 1913, la reacción con aminoácidos era una
miento interferirá con la calidad de la impresión. prueba de diagnóstico importante para la presencia de
compuestos de proteínas y amina en muestras biológicas
Otro uso del polvo de huellas dactilares, o de los com­
(Crown, 1969, pág. 258-264; Friedman y Williams, 1974,
ponentes de éste, es en una suspensión, para uso en
pág. 267-280). Con el advenimiento de la cromatografía, la
superficies mojadas o en cintas adhesivas. El reactivo
reacción se hizo aún más útil para la localización de los ami­
convencional de pequeñas partículas, para el revelado de
noácidos en los cromatogramas de papel o en fracciones
las huellas dactilares en superficies mojadas y no porosas,
producidas por cromatografía líquida (Crown, 1969, pág.
utiliza disulfuro de molibdeno en suspensión, pero otros
258-264; Smith y Agiza, 1951, pág. 623-627).
reactivos se han desarrollado (Frank y Almog, 1993, pág.
240-244). Una suspensión similar, el polvo pegajoso de un El púrpura de Ruhemann y otros subproductos de la reac­
lado (Burns, 1994, pág. 133-138), es utilizado para revelar ción de ninhidrina y aminoácidos también se utilizaron para
impresiones del lado adhesivo de la cinta, también se ha medir cuantitativamente el contenido de aminoácidos de
reformulado utilizando polvo de huellas dactilares (Bratton las muestras (Yemm et al, 1955, 209-214; Smith y Agiza,
et al, 1996, pág. 28; Wade, 2002, pág. 551-559). 1951, pág. 623-627). El reactivo era tan potente y versátil
que algunos autores sugirieron que era la reacción más
Por último, una palabra de precaución puede estar a la
utilizada en los laboratorios analíticos (Friedman y Williams,
orden. Aunque el uso del polvo de huellas dactilares es
1974, pág. 267-280).
rápido y barato, han surgido preocupaciones recientemente
en relación a la posibilidad de contaminación debido a la Este uso de ninhidrina fue frecuentemente acompa­
transferencia de ADN mediante el uso de cepillos de huel­ ñado de advertencias para evitar el contacto entre la piel
las dactilares (van Oorschot et al., 2005, pág. 1417-1422). desnuda y cualquier superficie que entre en contacto
Los examinadores del lugar de los hechos están siendo con el reactivo (Crown, 1969, pág. 258-264). Esto fue
advertidos a ser conscientes de esta posibilidad. debido a la fuerte reacción entre la ninhidrina y el sudor,
lo que provocaría la aparición de huellas dactilares en los
cromatogramas (Crown, 1969, pág. 258- 264; Oden y Von

7–15
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

Hofsten, 1954, pág. 449-450). A pesar de estas adverten- cierta cantidad (Speaks, 1970, pág. 14-17). En contacto con
cias, que indican claramente la capacidad de la ninhidrina el papel, estos aminoácidos impregnan la superficie del pa-
para revelar las huellas dactilares, el reactivo no se aplicó pel, donde son retenidos por su alta afinidad por la celulosa
en un contexto forense hasta 1954 (Oden y von Hofsten, (Champod et al, 2004, pág. 114; Almog, 2001, pág. 177-209;
1954, pág. 449-450). Hansen y Joullié, 2005, pág. 408-417).

A raíz de este informe inicial, la ninhidrina rápidamente se Debido a esta afinidad, los aminoácidos no migran significa-
convirtió en una herramienta indispensable en la detección tivamente de sus sitios iniciales de depósito; sin embargo,
de huellas dactilares latentes, con el uso generalizado en- la cantidad de aminoácidos retenida en la huella dactilar
tre los ordenamientos jurídicos, siendo documentado ya en disminuye gradualmente con el tiempo (Knowles, 1978, pág.
1959 (Speaks, 1964, pág. 11-13, 23). La técnica se encuen- 713-720). Además, los aminoácidos reaccionan con una am-
tra ahora entre los métodos más populares para la detec- plia variedad de productos químicos para producir compues-
ción de huellas dactilares en el papel y otros sustratos tos coloreados (Hansen y Joullié, 2005, pág. 408-417). Estas
porosos (Champod et al., 2004, pág. 114-136). Este método cualidades han sido explotadas para producir imágenes
tiene limitaciones; sin embargo, los químicos han abordado claras y nítidas de huellas dactilares que tenían hasta 40
estas limitaciones a través de la síntesis de análogos de años (Champod et al., 2004, pág. 114).
compuestos estructuralmente relacionados con ninhidrina
que exhiben reacciones similares con aminoácidos para Al menos 14 aminoácidos pueden estar presentes en los
mejorar la claridad de la huella dactilar revelada (Almog, residuos de huellas dactilares (Knowles, 1978, pág. 713-
2001, pág. 177-209). Varios de estos análogos fueron 720; Hier et al, 1946, pág. 327-333). Para producir la huella
altamente exitosos (por ejemplo, 1,8-Diazafluoreno-9-uno dactilar más desarrollada, el reactivo ideal debe ser no
[DFO], 1,2-Indanodiona y 5-Metiltioninhidrina), aunque específico para un aminoácido particular (es decir, reaccio-
ninguno de ellos ha sido capaz de reemplazar completa- nar bien con todos).
mente a la ninhidrina como la técnica más frecuentemente
La ninhidrina es uno de muchos productos químicos que ac-
utilizada (Almog, 2001, pág. 177-209).
túa como un reactivo de aminoácido no específico y es, por
lo tanto, muy adecuado para el revelado de la huella dactilar
7.4.2 Teoría (Champod et al, 2004, pág. 114; Almog, 2001, pág. 177-209).
7.4.2.1 Detección de huella dactilar por medio de reac-
7.4.2.2 Propiedades de la ninhidrina. La ninhidrina es un
tivos aminoácidos. Algunas huellas dactilares son creadas
sólido cristalino que va de incoloro a color amarillo pálido
por medio del depósito de sudor de los dedos cuando en-
y es altamente soluble en disolventes polares tales como
tran en contacto con una superficie. Este sudor se compone
agua y metanol (McCaldin, 1960, pág. 39-51). Cuando se
principalmente de componentes acuosos, que comprenden
calienta, el sólido se convierte de rosa a rojo en aproxima-
el 98% del volumen de una huella dactilar (Pounds y Jones,
damente 125°C (Almog, 2001, pág. 177-209), se funde de
1983, pág. 180-183). Estos depósitos acuosos contienen una
130-140°C y se descompone a 241°C. El compuesto se
pequeña, pero detectable, cantidad de aminoácidos, con un
encuentra en forma de hidrato estable en la presencia de
promedio de 250 ng por cada huella dactilar (Hansen y Joul-
cualquier agua, pero asumirá una estructura tricetona en
lié, 2005, pág. 408-417). Después de que el agua se evapora
condiciones anhidras (Hansen y Joullié, 2005, pág. 408-
de la superficie, los aminoácidos permanecen como material
417). Este equilibrio se ilustra en la Figura 7-2.
sólido (Knowles, 1978, pág. 713-720).
7.4.2.3 Reacción de ninhidrina con aminoácidos. La
Para las superficies porosas tales como papel, los aminoáci-
primera observación de la reacción de la ninhidrina con la
dos son objetivos deseables para los reactivos de revelado
piel para formar un compuesto de color morado oscuro se
de la huella dactilar (Almog, 2001, pág. 177-209). Aunque
informó en 1910 (Ruhemann, 1910a, pág. 1438-1449). Es-
las variables incontrolables (tales como la cantidad total de
tudios posteriores indicaron que el color púrpura resultante
sudor depositado por el dedo, la concentración de aminoá-
de la reacción entre ninhidrina y aminoácidos, y describier-
cidos de las excreciones del individuo y la edad de la huella
on el producto de esta reacción como dicetohidrindilideno-
dactilar) influyen en la cantidad de aminoácidos transferidos
dicetohidrindamina (Ruhemann, 1910b, pág. 2025-2031;
al papel (Everse y Menzel, 1986, pág. 446-454), los aminoá-
1911a, pág. 792-800; 1911c, pág. 1486-1492) y que ahora
cidos están siempre presentes en la transpiración en una
se conoce como púrpura de Ruhemann. Los subproductos

7–16
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

de esta reacción incluyen un derivado de aldehído del ami­ Estudios estructurales del producto de reacción han confir-
noácido y dióxido de carbono (Friedman y Williams, 1974, mado que la estructura del producto original de Ruhemann
pág. 267-280; Yemm et al, 1955, pág. 209-214). era correcta y que la reacción con aminoácidos produce
la sal de amonio del púrpura de Ruhemann (Ruhemann,
Múltiples intentos se han hecho para determinar el me­ 1911c, pág. 1486-1492; Grigg et al, 1986, pág. 421-422.;
canismo de esta reacción (Friedman y Williams, 1974, pág. 1989, pág. 3849-3862).
267-280; Hansen y Joullié, 2005, pág. 408-417; McCaldin,
1960, pág. 39-51; Retinger, 1917, pág. 1059 -1,066; Bottom Esta reacción es compleja y requiere un conjunto perfecta­
et al, 1978, pág. 4 5; Grigg et al, 1986, pág. 421-422; Grigg mente ajustado de condiciones con el fin de progresar a
et al, 1989, pág. 3.849-3.862; Joullié et al, 1991, pág. 8791 un ritmo razonable. El pH de la reacción debe estar por
a 8830; Schertz et al., 2001, pág. 7.596-7.603). El mecanis­ encima de 4 (Friedman y Williams, 1974, pág. 267-280; Bot­
mo más aceptado hoy en día es el propuesto por Grigg et tom et al, 1978, pág. 4-5.) e idealmente debe estar entre
al. (1989, pág. 3849-3862) y brevemente se ilustra en la 4.5 y 5.2 (Grigg et al, 1989, pág. 3.849 a 3862). El revelado
Figura 7-3. El ácido y el agua son otros reactivos requeridos en un ambiente de alta humedad es de suma importancia
para esta reacción se produzca. (Champod et al, 2004, pág. 116-117; Almog, 2001, pág.

O O
OH
-H2O FIGURA 7–2
O Equilibrio entre las
+H2O
OH estructuras hidratadas y
anhidras de ninhidrina.
O O

Ninhidrina
(2, 2-dihidroxi-1, 3-indanodiona) 1,2,3-indanodiona

O O FIGURA 7–3
OH Mecanismo de reacción
-H2O aceptado de ninhidrina
O con aminoácidos.
+H2O
OH

O O
+Aminoácido
-2 H2O, CO2
O O
H
+H2O, H+ +
-----­ NH
-RCHO -
------­

NH2

O O
+Ninhidrina R

O O

O O - NH4+

7–17
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

177-209) porque el agua es un reactivo necesario. Final- cromatogramas (Kawerau y Wieland, 1951, pág. 77-78). La
mente, debido a que se sabe que el púrpura de Ruhemann formación de un complejo de metal-sal altera el color del
se degrada en presencia de luz y oxígeno, la huella dactilar púrpura de Ruhemann de un color violeta oscuro a rojo o
tratada debe almacenarse en un lugar oscuro y fresco naranja, dependiendo de la sal que se utilice (Stoilovic et
(Friedman y Williams, 1974, pág. 267-280; Joullié et al, al., 1986, pág. 432-445). El tono más claro puede propor-
1991, pág. 8791-8830). Las huellas dactilares tratadas con cionar un mayor contraste contra un fondo de color oscuro,
ninhidrina son de color púrpura y presentan un excelente especialmente cuando se observa a 490-510 nm, en donde
contraste y claridad de detalle (Champod et al, 2004, pág. el metal complejo del púrpura de Ruhemann tiene un
117; Almog, 2001, pág. 177-209). máximo de absorción (Stoilovic et al., 1986, pág. 432-445).

7.4.2.4 Mejora óptica de huellas dactilares reveladas Se ha informado que el análisis de las huellas dactilares
con ninhidrina. El tratamiento con ninhidrina ofrece un con ninhidrina y complejos de zinc bajo un láser de iones
excelente contraste en condiciones ideales (por ejemplo, de argón podría inducir la fluorescencia de las impresiones
en huellas dactilares frescas sobre papel blanco). Sobre incluso débilmente reveladas (Herod y Menzel, 1982b, pág.
papel de color o con huellas dactilares viejas; sin embargo, 513-518). Este descubrimiento tuvo un profundo impacto
los resultados pueden a menudo ser inferiores al óptimo en el revelado de huellas dactilares porque los reactivos flu-
(Crown, 1969, pág. 258-264; Everse y Menzel, 1986, pág. orescentes son más sensibles que los cromogénicos y se
446-454; Speak, 1970, pág. 14-17; Grigg et al., 1989, pág. pueden ver más claramente en contra de fondos de color
3849 a 3862; German, 1981, pág. 3-4; Herod y Menzel, (Champod et al., 2004, pág. 120). Estudios posteriores
1982a, pág. 200-204; Lennard et al, 1986, pág. 323-328). revelaron que la intensa luz láser no era necesaria si las
muestras tratadas con zinc se enfriaran a la temperatura
Varios métodos han sido desarrollados para aumentar del nitrógeno líquido (-196°C o 77 K); la fluorescencia se
el contraste entre las huellas dactilares reveladas con puede observar bajo una lámpara de arco de xenón. Esta
ninhidrina y un sustrato de color o para mejorar las huellas técnica requiere la inmersión del documento en nitrógeno
dactilares débilmente reveladas. El espectro de luz UV a líquido, se coloca una placa de vidrio entre la muestra y la
visible del púrpura de Ruhemann muestra dos máximos de fuente de luz y la cámara, y una fuente de calor para evitar
absorción-longitudes de onda de la luz que están fuerte- la condensación sobre el cristal (Kobus et al., 1983, pág.
mente absorbidos por el compuesto. Estos máximos, que 161-170). La investigación posterior mostró que los comple-
se encuentran en λ = 407 nm y λ = 582 nm (Lennard et jos de cadmio presentaron una luminiscencia mejorada en
al., 1986, pág. 323-328), se pueden utilizar para aumentar estas condiciones (Stoilovic et al., 1986, pág. 432-445).
el contraste entre la huella dactilar revelada y un fondo no
absorbente. Cuando los láseres se hicieron disponibles Estudios estructurales de complejos de sales de metal del
para la comunidad forense a finales de la década de 1970 y púrpura de Ruhemann han identificado la estructura en la
principios de la de 1980, un tratamiento con cloruro de zinc figura 7-4 (Lennard et al, 1987, pág. 597-605; Davies et al,
se describió para la mejora de las impresiones de ninhid- 1995a, pág. 565-569; 1995b, pág. 1802-1805).
rina débiles mediante el uso de la luz de un láser de iones
de argón (German, 1981, pág. 3-4; Herodes y Menzel, 7.4.3 Aplicación
1982a, pág. 200-204). Este método era capaz de aumentar
7.4.3.1 Formulaciones de ninhidrina. Varias formulacio-
drásticamente el número de huellas dactilares latentes
nes de ninhidrina se han reportado en la literatura (Crown,
identificables reveladas por el proceso de ninhidrina. Con la
1969, pág. 258-264; Oden y van Hofsten, 1954, pág. 449-
ubicuidad actual de fuentes de luz forenses, ambas bandas
450; Speaks, 1964, pág. 11-13, 23; Champod et al, 2004,
de absorción del púrpura de Ruhemann pueden ser ex-
pág. 117-120; Almog, 2001, pág. 177-209; Everse y Menzel,
plotadas para producir huellas dactilares de alto contraste
1986, pág. 446-454; Clay, 1981, pág. 12-13). Las solucio-
(Champod et al., 2004, pág. 117).
nes de ninhidrina se preparan típicamente en dos pasos:
7.4.2.5 Post-tratamiento con sales metálicas. Se utilizó primero, se prepara una solución madre que tiene una alta
la reacción entre el púrpura de Ruhemann y sales de metal proporción de disolvente polar para facilitar la estabilidad
tales como zinc, cadmio, cobalto y cobre en un contexto de la mezcla; segundo, una porción de la solución madre
bioquímico para preservar los puntos de ninhidrina en se diluye con un vehículo no polar disolvente para producir

7–18
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

O
O
FIGURA 7–4
­
-- --- -- -- Estructura del complejo de
---­ N -
sal de metal del púrpura

---­
--
-------
de Ruhemann.
M O
-

O H2O
OH2 X

M: Cadmio o Zinc
X: Anión de la sal de metal

un reactivo adecuado para su aplicación a los elementos calentar la ninhidrina hasta que se sublime, permitiendo
probatorios. que la ninhidrina gaseosa se deposite en los residuos de
huellas dactilares (Schwarz y Frerichs, 2002, pág. 1274­
La aplicación de soluciones viables de ninhidrina se puede 1277). El reactivo es más adecuado para el papel, aunque
realizar por inmersión, pulverización o cepillado (Oden y cualquier sustrato poroso puede dar resultados visibles y
van Hofsten, 1954, pág. 449-450; Speaks, 1964, pág. 11-13, algunos sustratos no porosos han reportado la producción
23), con el método de inmersión preferido en la mayoría de de huellas visibles (Herod y Menzel, 1982a, pág. 200-204;
los casos. El producto a examinar se sumergió brevemente Speaks, 1966, pág. 3-5).
en la solución activa y se dejó secar al aire para evaporar el
disolvente (Champod et al., 2004, pág. 116-117). 7.4.3.2 2 Post-tratamiento de sal de metal. La aplicación
de sales de zinc o cadmio en huellas dactilares reveladas
Después del tratamiento con solución de ninhidrina, el con ninhidrina darán como resultado un cambio de color
revelado debe proceder idealmente a temperatura ambi­ inmediato de morado a naranja o rojo, respectivamente
ente, en un ambiente oscuro y húmedo (con un 50-80% (Lennard et al., 1987, pág. 597-605). Cabe destacar que se
de humedad), durante un período de 1-2 días (Champod et prefiere el uso de zinc a cadmio debido a la toxicidad del
al., 2004, pág. 116-117). Si la humedad ambiente es baja, el cadmio. La inmersión de la prueba en la solución es prefer-
revelado con una la cámara especializada de huellas dactil­ ible a la pulverización debido a la toxicidad de algunos de
ares con control de humedad puede ser necesario (Almog, los reactivos. Si la humedad es baja, una breve ráfaga de
2001, pág. 177-209). El revelado se puede acelerar medi­ vapor puede ser requerida para producir el revelado. Sin
ante la aplicación de vapor o calor, pero esto puede resultar embargo, la humedad debe controlarse cuidadosamente si
en un mayor grado de revelado del fondo y la reducción de se utilizan sales de zinc porque los niveles altos de hume­
la claridad y el contraste de las huellas dactilares resul­ dad causan la formación de un complejo rojo inestable, no
tantes (Almog, 2001, pág. 177-209). El revelado al vapor se fluorescente que reducirá el contraste de la huella dactilar
puede lograr mediante la superposición de una plancha de resultante (Stoilovic et al, 1986, pág. 432-445; Davies et al.,
vapor por encima de la exposición; el calor se puede gen­ 1995a, pág. 565-569).
erar a partir de en una prensa, horno, gabinete de revelado
de huellas dactilares o un horno de microondas y no debe Las huellas dactilares posteriormente tratadas se pueden
exceder los 80°C (Almog, 2001, pág. 177-209). mejorar aún más al verse bajo una luz de 490 nm (para los
residuos tratados con zinc) o de 510 nm de luz (para los
Los cristales de ninhidrina se pueden moler en un residuos tratados con cadmio) (Champod et al, 2004, pág.
mortero para formar un polvo fino y aplicarse directa­ 120; Stoilovic et al, 1986, pág. 432-445). La fluorescencia
mente a las huellas dactilares con un cepillo de huellas puede ser inducida sumergiendo el artículo en nitrógeno
dactilares (Almog, 2001, pág. 177-209). Este método es líquido y estimulando la huella dactilar tratada con las lon­
lento y produce sólo impresiones débiles, pero puede ser gitudes de onda de luz antes mencionadas. Las emisiones
adecuado para algunos tipos de papel sensibles al calor o fluorescentes deben ser vistas utilizando un filtro de paso
solventes (Wakefield y Armitage, 2005). La ninhidrina tam­ de banda de 550 a 570 nm o un filtro de 550 nm de paso
bién se puede aplicar mediante un método de formación largo (Champod et al., 2004, pág. 121-124).
de humos; un gabinete humeante forense se utiliza para

7–19
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

7.5 1,8-Diazafluoreno-9-uno (DFO) 2000a, pág. 87-103). En virtud de la estimulación de cu-

alquiera de estas longitudes de onda, el producto es fuerte-
mente fluorescente a temperatura ambiente, emitiendo
7.5.1 Historia
una luz intensa de 576 nm (Stoilovic, 1993, pág. 141-153).
El 1,8-Diazafluoreno-9-uno (DFO) se preparó por primera Una ilustración de una huella dactilar revelada con DFO en
vez en 1950 (Druey y Schmidt, 1950, pág. 1080-1087), luz blanca y en condiciones fluorescentes aparece en la
pero su reacción con aminoácidos no se exploró sino Figura 7-7.
hasta 1990, cuando se aplicó primero como un reactivo de
revelado de huella dactilar. Los resultados preliminares de A diferencia de la reacción de la ninhidrina, la reacción
este estudio fueron prometedores; el tratamiento con DFO del DFO requiere de una temperatura alta y un ambiente
resultó en huellas dactilares de color rojo o rosa pálido que de baja humedad (Pounds et al., 1990, pág. 169-175). El
eran intensamente fluorescentes a temperatura ambiente tratamiento posterior con sales metálicas y el subsecuente
(Pounds et al, 1990, pág. 169-175; Grigg et al, 1990, pág. enfriamiento a temperaturas de nitrógeno líquido no afecta
7215-7218). Esto presenta claras ventajas sobre el metal significativamente a la intensidad de la fluorescencia del
de fluorescencia inducido por complejidad de huellas producto de DFO (Conn et al., 2001, pág. 117-123).
dactilares reveladas con ninhidrina y el DFO se identificó
Se reporta que el DFO es un reactivo de desarrollo de huellas
rápidamente como el mejor reactivo fluorescente para el
dactilares más sensible que la ninhidrina, produciendo un
revelado de huellas dactilares (Almog, 2001, pág. 177-209).
mayor número de huellas dactilares latentes identificables
El reactivo se utiliza ahora ampliamente en secuencia con
(Wilkinson et al., 2005; Stoilovic, 1993, pág. 141-153; Cantu
ninhidrina para revelar huellas dactilares en superficies
et al, 1993, pág. 44-66). Esta sensibilidad se debe al hecho
porosas (Wilkinson et al., 2005).
de que una huella dactilar débilmente fluorescente es más
fácil de ver que una huella dactilar débilmente coloreada
7.5.2 Teoría (Almog, 2001, pág. 177-209). A pesar de esta observación,
Aunque el DFO no es un análogo directo de ninhidrina si se aplica ninhidrina después del tratamiento DFO, el
(Hansen y Joullié, 2005, pág. 408-417), las estructuras de revelado adicional se produce, resultando en púrpura de
los dos compuestos y el resultado de sus reacciones con Ruhemann. La explicación convencional para este fenó-
aminoácidos, son similares (Grigg et al., 1990, pág. 7215- meno es que, aunque las huellas dactilares reveladas con
7218; Wilkinson, 2000a, pág. 87-103). Como la ninhidrina, DFO son más visibles cuando son fluorescentes, el DFO
el DFO contiene un centro de cetona central activado por no reacciona completamente con todos los aminoácidos
la presencia cercana de grupos aceptores de electrones. en el residuo de huellas dactilares, de modo que algunos
La estructura del DFO se ilustra en la Figura 7-5; los anillos aminoácidos se encuentran disponibles para reaccionar con
nitrogenados actúan de forma similar a los grupos cetóni- ninhidrina (Wilkinson, 2000a, pág. 87-103). La combinación
cos que flanquean en la ninhidrina (Hansen y Joullié, 2005, de DFO seguido de ninhidrina revela más huellas dactilares
pág. 408-417). latentes que con DFO o ninhidrina solamente (Wilkinson et
al., 2005) y ésta es la secuencia recomendada de exámenes
Estudios mecánicos de la reacción del DFO con aminoá- para superficies porosas, tales como papel (Champod et
cidos han demostrado que la presencia de metanol es al., 2004, pág. 128-131; Almog, 2001, 177-209).
esencial. Esto permite que el DFO forme un hemiacetal
(Figura 7-6), que es menos estable que la estructura matriz 7.5.3 Aplicación
y por lo tanto más reactiva, produciendo una respuesta
más sensible a los residuos de aminoácidos en las huellas Varias formulaciones de DFO se han reportado en la
dactilares (Wilkinson, 2000a, pág. 87-103). El producto de literatura (Champod et al, 2004, pág. 230-231; Almog,
reacción de color rojo se ha caracterizado completamente 2001, pág. 177-209; Pounds et al, 1990, pág. 169-175;
y se asemeja al púrpura de Ruhemann (Grigg et al, 1990, Grigg et al, 1990, pág. 7215-7218; Wilkinson et al., 2005;
pág. 7215 hasta 7218; Wilkinson, 2000a, pág. 87-103). Wilkinson, 2000a, pág. 87-103; Stoilovic, 1993, pág. 141-
153; Didierjean et al, 1998, pág. 163-167). La solución de
El producto de esta reacción es de color rosa a rojo con DFO se puede aplicar a muestras por inmersión, pulver-
λmax de aproximadamente 560 nm y una absorción débil ización o cepillado, aunque la de inmersión es el método
a 520 nm (Pounds et al, 1990, pág. 169-175; Wilkinson, preferido (Champod et al., 2004, pág. 128-131). Se dejó la

7–20
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

O
N FIGURA 7–5
N Estructura del 1,8-Diazafluoreno-9-uno (DFO).

O
HO
N
N
OMe FIGURA 7–6
N +MeOH Formación del hemiacetal y la reacción con
N aminoácidos.
-MeOH

+aminoácido,
calor en
humedad
baja.
N N

-- - --
--- --
N
+
H
N N

FIGURA 7–7
Huella dactilar revelada con DFO. Izquierda,
bajo luz ambiental. Derecha, estimulada por
medio de una fuente de luz forense y vista a
través del filtro de visión apropiado.

exposición a secar y después se calentó para promover el Stoilovic, 1993, pág. 141-153). La reacción debe llevarse
revelado. Varios métodos de calentamiento son adec­ a cabo en un ambiente seco con baja humedad ya que
uados: el calentamiento en un horno a 100°C durante ésta interfiere con la reacción del revelado (Champod et
10-20 minutos (Champod et al., 2004, pág. 128; Almog, al, 2004, pág. 129; Almog, 2001, pág. 177-209; Wilkinson,
2001, pág. 177-209; Pounds et al, 1990, pág. 169-175; 2000a, pág. 87-103).
Didierjean et al., 1998, pág. 163-167), la aplicación de una
Después de la aplicación de DFO y calefacción, las huellas
plancha a 160°C durante 20-30 segundos (Stoilovic, 1993,
dactilares reveladas pueden observarse utilizando 530 nm
pág. 141-153) o la aplicación de una prensa de planchar
de luz de excitación y un filtro de barrera 590 nm, o 555
180°C durante 10 segundos (Almog, 2001 , pág. 177-209;

7–21
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

nm de luz de excitación y un filtro de barrera de 610 nm (Al- 7675). La estructura de la 1,2-indanodiona se caracteriza
mog, 2001, pág. 177-209). La muestra puede entonces ser (Wilkinson, 2000b, pág. 123-132) y se ilustra en la Figura
tratada con ninhidrina como se describió anteriormente. 7-8 (A).

Estudios mecánicos de la reacción de la 1,2-indanodiona

7.6 1,2-Indanediona con aminoácidos han indicado que la presencia de metanol
desensibiliza el reactivo (Wilkinson, 2000b, pág. 123 132).
Al igual que el DFO, la indanodiona forma un hemiacetal
7.6.1 Historia
con metanol; sin embargo, a diferencia del DFO, este
Las capacidades de revelado de huellas dactilares de la hemiacetal es más estable que el compuesto original y por
1,2-indanodiona se consideraron primero después de que lo tanto su formación impide la reacción con aminoácidos.
un compuesto relacionado, 6-metiltio-1,2- indanodiona, Debido a que la 1,2-indanodiona se convirtió completa-
se encontró para producir huellas dactilares fluorescentes mente en el hemiacetal menos sensible (Wilkinson, 2000b,
(Hauze et al., 1998, pág. 744-747). Esto llevó a los inves- pág. 123-132), algunos sugieren que los alcoholes se de-
tigadores a sintetizar el compuesto original y varios otros ben evitar en cualquier formulación de indanodiona (Wilkin-
análogos y a evaluar su utilidad como reactivos de huellas son et al, 2005; Wiesner et al, 2001, pág. 1082-1084). Otros
dactilares (Ramotowski et al., 1997, pág. 131-139). Los re- estudios no han corroborado esta falta de sensibilidad en
sultados fueron similares al DFO en que un producto débil la solución metanólica (Roux et al., 2000, pág. 761-769).
de color rosa que es brillantemente fluorescente a tem- Existen ambigüedades similares sobre la adición de ácido
peratura ambiente (Ramotowski et al., 1997, pág. 131-139). acético (Lennard et al, 2005, pág. 43.); algunos autores han
La investigación adicional indicó que estos reactivos son encontrado que una pequeña cantidad de ácido acético
más sensibles que otros métodos actuales y, debido a la mejora los resultados (Hauze et al, 1998, pág. 744-747;
facilidad de síntesis, pueden ser una alternativa más barata Joullié y Petrovskaia, 1998, pág. 41-44), mientras que otros
(Cava et al, 1958, pág. 2257-2263; Dayan et al, 1998, pág. han experimentado huellas dactilares borrosas y poco
2752- 2754; Joullié y Petrovskaia, 1998, pág. 41-44). En los claras cuando se utilizan soluciones acidificadas (Almog,
ocho años siguientes estos descubrimientos, la 1,2-indano- 2001, pág. 177-209; Wiesner et al., 2001, pág. 1082-1084;
diona se ha convertido en un reactivo estándar en laborato- Kasper et al, 2002). Estas discrepancias se han relacionado
rios israelíes y ha sido investigado para su uso en muchos con el contenido ácido del papel producido en varios países
otros países (Almog, 2001, pág. 177-209). del autor (Wilkinson et al., 2005).

7.6.2 Teoría La producción del compuesto mostrado en la Figura 7-8 (B)

durante la reacción entre aminoácidos y 1,2-indanodiona ha
La 1,2-indanodiona es un análogo de cierre de la ninhidrina sido confirmada. Sin embargo, este compuesto no explica
y se teoriza para reaccionar con los aminoácidos de una por completo la coloración de la impresión revelada o su
manera muy similar (Petrovskaia et al., 2001, pág. 7666- fluorescencia. La posibilidad de que un análogo de púrpura

O O
R
FIGURE 7–8
-
---

Estructura de (A) 1,2-indanodina; O --- N +

H
(B) un producto conocido de la
reacción entre 1,2-indanodina
y aminoácidos; (C) un análogo (A) (B)
púrpura de Ruhemann producido
por la reacción. O O

---- N ---
+
H

(C)

7–22
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

de Ruhemann no se ha descartado (Petrovskaia et al, 2001, La 1,2-indanodiona revela más huellas dactilares que el
pág. 7666-7675.); un compuesto de este tipo se ilustra en la DFO, ninhidrina o la secuencia combinada de DFO y nin­
Figura 7-8 (C). Otros estudios están actualmente en marcha hidrina (Wiesner et al, 2001, pág. 1082-1084; Lennard et al,
para elucidar la estructura de la especie fluorescente, que 2005, pág. 43). La secuencia de indanodiona-DFO es capaz
se espera que sea polimérico (Wallace-Kunkel et al., 2005). de visualizar las huellas dactilares latentes aún más que la
1,2-indanodiona sola (Roux et al., 2000, pág. 761-769) y la
Sea o no que el tratamiento posterior de sal de metal me­
indanodiona también puede mejorar las huellas dactilares
jore la fluorescencia de la huella dactilar revelada es otro
reveladas con ninhidrina (Kasper et al., 2002). Sin embargo,
punto de contención entre autores. Los resultados variados
el tratamiento de ninhidrina de las impresiones reveladas
con cada paso del proceso de revelado con indanodiona
con indanodiona no proporciona una mejora adicional (Wi­
indican la influencia que las condiciones ambientales
esner et al., 2001, pág. 1082-1084).
tienen sobre la técnica y cada grupo de investigación debe
establecer una fórmula óptima para su uso en su laborato­ Por último, en una nota un tanto negativa, Wilkinson et al.
rio (Wilkinson et al., 2005; Lennard et al, 2005, pág. 43). tuvieron resultados muy pobres con la indanodiona para un
estudio llevado a cabo a lo largo de Canadá (Wilkinson et
7.6.3 Aplicación al., 2003, pág. 8-18).

Debido a las variaciones regionales en humedad, el con­

tenido de ácido del papel y otros factores ambientales, una
única formulación de 1,2-indanodiona no puede ser reco­
7.7 5-Metiltioninhidrina (5-MTN)
mendada. La aplicación del reactivo 1,2-indanodiona puede La 5-Metiltioninhidrina (5-MTN) se preparó primero y se
llevarse a cabo por inmersión de la muestra o por pulver- aplicó como un reactivo de huellas dactilares en 1990
ización del reactivo. El revelado puede ocurrir a tempera­ como parte de un proyecto del Servicio Secreto (Cantu et
tura ambiente, pero puede requerir de 4-5 días (Roux et al., 1993, pág. 44-46). Este análogo reacciona con aminoá­
al., 2000, pág. 761-769). A la luz del hecho establecido que cidos en una manera idéntica a la ninhidrina debido a que el
el tratamiento térmico no causa un excesivo revelado de reactivo, núcleo cromogénico de la molécula, no se cambia
fondo, se recomienda que el calor de vapor pueda aplicarse por la adición del grupo de azufre (Figura 7-9) (Elber et al.,
a las huellas dactilares tratadas para acelerar el revelado 2000, pág. 757-760). Como resultado, la 5-MTN reveló
(Almog, 2001, pág. 177-209; Ramotowski et al, 1997, pág. huellas dactilares que son una sombra de púrpura similar a
131 -139; Joullié y Petrovskaia, 1998, pág. 41-44; Roux et las reveladas con ninhidrina.
al, 2000, pág. 761-769). Este calor puede ser aplicado en
un horno de humedad (a 100°C con una humedad relativa El revelado de las huellas dactilares tratadas con 5-MTN
del 60%) (Wiesner et al, 2001, pág. 1082-1084; Roux et requiere calor y humedad, lo mismo que el revelado con
al, 2000, pág. 761-769; Almog et al, 1999. , pág. 114-118), ninhidrina. Éste puede ser entregado en la misma manera
por planchado con vapor (Ramotowski et al, 1997, pág. 131 descrita anteriormente para la ninhidrina o mediante la
139; Joullié y Petrovskaia, 1998, pág. 41-44) o mediante exposición de microondas durante 2-3 minutos tratada
una prensa de calor (a 100°C durante 2-5 minutos [Kasper junto con un recipiente de agua (Almog et al., 1992, pág.
et al., 2002] o 165°C durante 10 segundos [Lennard et al., 688-694). Se debe tener cuidado para evitar el sobre­
2005, pág. 43]). calentamiento de la muestra, ya que puede ocurrir un
revelado de fondo significativo. La huella dactilar resultante
La fluorescencia se puede observar bajo una iluminación a debe aparecer de color púrpura oscuro, similar a una huella
520 nm y ser vista a través de un filtro de 590 nm (Joullié dactilar revelada con ninhidrina.
y Petrovskaia, 1998, pág. 41-44). El tratamiento posterior
de sal de zinc se puede aplicar para mejorar el color de En el tratamiento con una sal de zinc, la huella dactilar reve­
la huella dactilar revelada y puede aumentar la intensidad lada con 5-MTN cambia de color de púrpura a rosa (Almog
de fluorescencia (Almog, 2001, pág. 177-209 (Roux et et al., 1992, pág. 688-694). Acompañando este cambio se
al, 2000, pág. 761-769.); Hauze et al, 1998, pág. 744-747; encuentra una fuerte fluorescencia a temperatura ambien­
Ramotowski et al, 1997, pág. 131-139; Lennard et al, 2005, te cuando es estimulada por luz a 520 nm y vista a través
pág. 43; Almog et al, 1999, pág. 114-118). de un filtro de 590 nm (Cantu et al, 1993, pág. 44-66.;
Almog et al, 1992, pág. 688-694), con una intensidad que

7–23
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

FIGURA 7–9
Estructura de la 5-Metiltioninhidrina y su O
CH3
producto de reacción con aminoácidos. S
5-MTN O

+ aminoácido,
5-MTN

O O

---
-
-- --

-
N +
H

-
CH3 H3C

--
S S

--
O O

es comparable a la del DFO. Esto es una ventaja evidente ser tratados con las formulaciones de reactivos de ami-
sobre el uso continuo de ninhidrina (Cantu et al., 1993, pág. noácidos convencionales descritos anteriormente porque
44-66). Un estudio reciente confirmó que la 5-MTN podría los disolventes polares reaccionan desfavorablemente con
superar a la ninhidrina, pero produce resultados fluorescen- los tratamientos químicos aplicados al papel durante la fab-
tes más pobres que el DFO o la 1,2-indanodiona (Wallace- ricación. Esta interacción no deseada con frecuencia hace
Kunkel et al., 2006, pág. 4-13). La fluorescencia se vuelve que la superficie del papel tienda a ennegrecerse, borrando
aún más intensa si la prueba se enfría a temperaturas de las evidencias documentales que el papel contenía (Stimac,
nitrógeno líquido, pero este paso no es necesario (Almog 2003a, pág. 185-197). Para abordar esta limitación, varias
et al., 1992, pág. 688-694). formulaciones libres de disolventes o de baja polaridad
se han ideado para el tratamiento de estos sustratos
La 5-MTN se puede sintetizar en operaciones a pequeña
difíciles.
escala en el laboratorio forense siguiendo métodos descri-
tos en la literatura (Heffner y Joullié, 1991, pág. 2231-2256;
7.8.2 Aplicación del DFO al Papel Tratado
Della et al, 1999, pág. 2119-2123). Alternativamente, puede
obtenerse por parte de proveedores comerciales forenses.
Químicamente
Sin embargo, algunos proveedores ofrecen el hemiacetal El DFO se puede aplicar a papel tratado químicamente por
etanólico de la 5-MTN, que se disuelve más fácilmente un proceso conocido como “Secado de DFO” (Bratton y
pero puede requerir alguna alteración de la formulación Juhala, 1995, pág. 169-172). Esta técnica no requiere la
dada (Sección 7.14) para asegurar la concentración apro- aplicación de un disolvente a la prueba que se encuen-
piada de 5-MTN en la solución (BVDA, 2010). tra bajo examinación. En lugar de ello, el papel de filtro
se impregna con una solución de 1 g de DFO en 200 ml
de metanol, 200 ml de acetato de etilo y 40 ml de ácido
7.8 Modificaciones para el uso en acético. El papel de filtro seco se aplica a la exposición, una

Papeles Tratados Químicamente toalla se coloca en la parte superior y una plancha de vapor
llena con solución de ácido acético al 5% se aplica durante
un minuto. Esto transfiere el DFO a la prueba y proporciona
7.8.1 Papeles Tratados Químicamente
el calor para el revelado. Esta técnica resulta en un cambio
El papel tratado químicamente es una clase que abarca de color menos prominente, pero igual de fluorescente
el papel térmico y los papeles especiales sin carbón que los métodos basados en disolventes (Bratton y Juhala,
(Stimac, 2003a, pág. 185-197). Estos papeles no pueden 1995, pág. 169-172).

7–24
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

7.8.3 Técnicas de Ninhidrina La solución de 2-isononilninhidrina se aplica al papel

tratado químicamente mediante la inmersión de la muestra
7.8.3.1 Secado de ninhidrina. Este método fue descrito
en la solución en una bandeja de aluminio o de plástico.
en 1996 (McMahon, 1996, pág. 4-5) y es similar al proceso
Se permite que la prueba se seque y se revele en condi­
del “Secado de DFO” descrito anteriormente. El papel
ciones húmedas y oscuras durante 24-48 horas. Bajo
secante o filtro se empapa en una solución de 30-50 g de
estas condiciones, el hemiacetal de ninhidrina reacciona
ninhidrina disuelta en 1.5 L de acetona y se deja secar.
con el agua absorbida por el papel para formar ninhidrina
Una prueba se coloca entre dos hojas de papel impreg­
y 3,5,5-trimetil-1-hexanol. La ninhidrina liberada reacciona
nado y luego se sella en una bolsa de plástico durante 3
lentamente con los residuos en la huella dactilar para reve­
días a 1 semana. Esta técnica revela huellas dactilares de
lar una impresión que es menos intensamente coloreada
alto contraste, manteniendo la integridad y el aspecto del
que una impresión tradicionalmente revelada con ninhidri­
documento y es aplicable a cualquier tipo de papel frágil,
na. Esto puede ser debido a la concentración relativamente
incluidos los papeles tratados químicamente.
más baja de ninhidrina presente después de que ocurra la
7.8.3.2 Extracción de ninhidrina. TEl método propuesto reacción de hidrólisis (Al Mandhri y Khanmy-Vital, 2005).
por Schwarz y Frerichs (2002, pág. 1274-1277) y descrito
anteriormente se puede aplicar a papeles tratados química­
mente sin pérdida de detalle en el documento.
7.9 Extracción de Cianoacrilato
7.8.3.3 Solución no polar. Una solución de ninhidrina 7.9.1 Antecedentes
se puede preparar en una mezcla de los disolventes no
El adhesivo comercial líquido, súper pegamento (super
polares HFE 71IPA y HFE 7100. La muestra se sumerge en
glue, por su nombre en inglés), se desarrolló de forma
la solución activa y se deja revelar en condiciones húmedas
inadvertida en la década de 1950 por investigadores que
y oscuras durante 2-3 días, evitando altas temperaturas
estaban tratando de desarrollar un polímero acrílico para la
(Stimac, 2003a, pág. 185-197).
industria aeronáutica. Además de su uso como un pega­
mento, el adhesivo de CA también encontró uso como un
7.8.4 Formulación de la Indanodiona vendaje de emergencia en Vietnam en la década de 1960,
La indanodiona es suficientemente soluble en disolventes aunque nunca recibió aprobación de la FDA para este uso.
no polares, se puede aplicar de manera efectiva a papel tér- A finales de 1970, investigadores de Japón y el Reino
mico sin causar ningún ennegrecimiento (Stimac, 2003b, Unido descubrieron casi al mismo tiempo las capacidades
pág. 265-271). La muestra se sumerge en la solución pre­ de revelado de huellas dactilares latentes de los vapores
parada y se deja actuar durante al menos 1 día, en condi­ del adhesivo líquido. Poco después, los examinadores de
ciones frías y oscuras. La fluorescencia se induce como se huellas latentes del Laboratorio de Investigación Criminal
describió anteriormente. del Ejército de Estados Unidos en Japón y la Oficina de
Alcohol, Tabaco y Armas de Fuego introdujeron esta técnica
7.8.5 2-Isononilninhidrina (INON) para América del Norte. Una vez que la extracción de CA
resultó práctica, con la introducción de métodos para hacer
La 2-Isononilninhidrina, también conocida como INON, o
la técnica más rápida y más eficaz, rápidamente ganó
comercialmente como ThermaNin, es un derivado de la nin­
aceptación en todo el mundo (Alemania, 2005; Jueneman,
hidrina con gran aumento de solubilidad en disolventes no
1982, pág. 15).
polares (Takatsu et al., 1991; Joullié, 2000). Este compues­
to, que es un producto de la reacción entre 3,5,5-trimetil­ Desde aquellos primeros descubrimientos, innumerables
1-hexanol y ninhidrina (Almog, 2001, pág. 177-209; Hansen crímenes han sido resueltos a través del uso rutinario de la
y Joullié, 2005, pág. 408-417; Takatsu et al,. 1992), tiene la extracción del éster de CA (por lo general metilo o etilo) de
estructura química que se muestra en la Figura 7-10. las pruebas y una cantidad considerable de investigaciones
se han dirigido a identificar el entorno ideal para la técnica.
Las soluciones de este reactivo no tienen una larga vida
útil, por lo que las soluciones de trabajo deben ser prepara­ Hoy, la extracción de CA siendo una técnica de desarrollo
das según sea necesario (BVDA, 2010). versátil y eficaz en todas las superficies prácticamente no

7–25
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

O
FIGURA 7–10 OH
Estructura de la 2-isononilhidrina (INON).
O

FIGURA 7–11 O
H
Monómero del etilo de Cianoacrilato.
H
EtO CN

porosas, incluyendo vidrio, metal, papeles recubiertos y to- dímero en la impresión. Este reacciona con otro monómero,
das las formas de plásticos. El método es particularmente y otro, formando un polímero, una larga cadena de molécu-
eficaz en superficies rugosas, donde el contacto físico con las de CA. La fase final es cuando se termina la reacción
un cepillo de huellas dactilares tiende a desarrollar la tex- en la cadena del polímero. El tiempo total de revelado es
tura del material junto con las huellas dactilares latentes. rápido, especialmente cuando se acelera la volatilización
Los vapores de CA son extremadamente sensibles a los del pegamento líquido (Lewis et al., 2001, pág. 241-246).
residuos de la huella dactilar, adaptables a muchas situacio- El proceso de polimerización puede, sin embargo, reiniciar
nes diferentes en la escena del crimen y en laboratorio, y más tarde si las huellas dactilares demuestran ser poco
son relativamente baratos de emplear. reveladas con la primera exposición a los humos.

Los estudios sobre los iniciadores de polimerización Las impresiones completamente reveladas con CA son
explícita y el rol del agua en el revelado de las huellas una matriz tridimensional blanca, a menudo visible a simple
latentes están en curso. Estos estudios deberían eventu- vista, y puede mejorarse aún más con una variedad de
almente conducir a una mejor comprensión de la polimer- técnicas. Las impresiones reveladas con CA son general-
ización de la impresión latente, a medida que se relaciona mente más duraderas que las huellas dactilares no trata-
con la composición de la impresión latente, pH, envejeci- das, debido a la plastificación de la impresión. Gracias a
miento y humedad. esto, algunos expertos recomiendan el tratamiento de CA
en el campo antes del envasado de pruebas para proteger
7.9.2 Teoría las huellas dactilares frágiles durante el transporte y alma-
cenamiento (Perkins y Thomas, 1991, pág. 157-162).
El revelado de impresiones latentes con súper pegamento
o CA se explica mejor como un proceso de tres etapas Para las huellas dactilares normales sudoríparas ecrinas, el
para producir el crecimiento del polímero, lo que permite la CA polimerizado bajo condiciones ambientales de labora-
visualización de la impresión latente. torio aparece como estructuras fibrosas en forma de fideo
cuando se observa con un microscopio electrónico de
La primera etapa se produce cuando los vapores de
barrido (SEM) (Figura 7-12). Estas morfologías del polímero
monómeros del éster de CA (vea el diagrama del monóme-
cambian, sin embargo, cuando se alteran las variables tales
ro del etilo de CA en la Figura 7-11) se introducen a las
como la edad de la huella latente, la composición de los
huellas dactilares latentes y se unen rápidamente con
residuos y las condiciones ambientales.
sus iniciadores en el residuo. En la segunda etapa, el
monómero en el residuo de la huella dactilar reacciona con Lewis et al. (2001, pág. 241-246) observaron diferencias
otro monómero de CA en la fase de vapor para formar un entre los residuos de huellas latentes limpias y aceitosas,

7–26
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

FIGURA 7–12
Microscopía electrónica de barrido de
residuo aceitoso de cianoacrilato polim­
erizado ecrino. (Reproducido con permiso
de la Revista de Ciencias Forenses, 46 (2),
derechos de autor de ASTM International,
100 Barr Harbor Drive, West Conshohocken,
PA 19428.)

Extracción de 30 segundos

FIGURA 7–14
(A) Impresión de Cianoacrilato (CA) polim­
erizado en una envolvedora de plástico.
(B) Impresión de CA manchada con RAM*
y vista a 475 nm con un filtro de barrera
color naranja.

*RAM es una mezcla de manchas

fluorescente de rodamina 6G, Ardox y
7-(p-metoxibenzilamino)-4-nitrobenzo­
2-oxa-1,3-diazol (MBD).

y los efectos del envejecimiento en cada una. Las huel­ Curiosamente, las impresiones latentes reveladas en una
las latentes que carecen de sebo (impresiones limpias) cámara de vacío también producen formaciones esféricas
tendieron a sufrir los efectos del envejecimiento en mucha lisas o de tipo cápsulas observadas con SEM y tienden a
mayor medida que las impresiones que contienen sebo ser más translúcidas a simple vista (Watkin et al., 1994,
(impresiones aceitosas, Figura 7-13). Después de 1 día de pág. 545-554). Esto puede ser debido en parte a exponer la
envejecimiento, las impresiones limpias mostraron una impresión al medio ambiente cercano a humedad cero del
tendencia a alejarse de la morfología fibrosa mencionada aspirador, presumiblemente eliminando la humedad de las
anteriormente hacia estructuras poliméricas que pare­ huellas dactilares. El papel de la humedad en el revelado
cieron redondeadas bajo SEM. Las impresiones limpias con CA de impresiones latentes no se entiende en este
también se volvieron difíciles, si no imposibles, de revelar momento. A mediados de la década de 1990, Kent observa
después de un período de sólo 2 semanas, mientras que empíricamente que los ambientes húmedos superaron los
las impresiones contaminadas con sebo producido el cre­ entornos de vacío en el revelado de impresiones latentes
cimiento del polímero fueron distinguibles por períodos de con CA (Kent y Winfield, 1995; Kent, 2005, pág. 681-683),
hasta 6 meses. Lewis et al. (2001, pág. 241-246) también mientras que Lewis et al. (2001, pág. 241-246) observaron
observaron que un ambiente de baja humedad durante el que la humedad durante el proceso de envejecimiento
envejecimiento de la huella latente tuvo un impacto notable de la impresión latente tuvo un efecto mayor que durante
y adverso en el desarrollo de CA, mientras que las impre­ la polimerización. Claramente, el papel de la humedad
siones menores de alta humedad duraron más tiempo y durante el envejecimiento y la polimerización debe exami­
produjeron polimerización de mayor calidad. narse más.

7–27
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

Hace muy poco que se entiende a los iniciadores reales “mínimo” produce la mayor cantidad de detalle, especial-
que causan la polimerización de la impresión latente. mente cuando se usa en conjunción con las manchas de tinte
Originalmente, se creía que el CA reaccionó principalmente fluorescentes (Figura 7-14). La extracción en exceso dejará
con el agua en el residuo de la huella dactilar (Jueneman, impresiones que asemejan a una forma “congelada” con una
1982, pág. 15). Sin embargo, la investigación actual indica falta de detalle de los bordes, lo cual hará difícil de diferenci-
que las aminas solubles en agua y los grupos carboxílicos arse de fondo también revestido con polímero de CA.
en el residuo de la impresión latente son los iniciadores
principales de polimerización del CA. Estos dos grupos, A veces, dependiendo de la composición latente y las
cada uno produce pesos moleculares de crecimiento condiciones ambientales, las impresiones reveladas
significativamente más altos del polímero que el agua sola. aparecerán translúcidas o vidriosas en naturaleza y van a
Además, las aminas y el ácido carboxílico se polimerizan ser muy difíciles de detectar sin la iluminación específica
en ausencia de cualquier agua, dejando poco claro el rol o tinción de colorante fluorescente. De hecho, la mayoría
del agua durante el proceso de envejecimiento y revelado de impresiones se mejorarán de alguna forma antes del
(Wargacki et al., 2005). registro.

El pH de la humedad a la que las impresiones latentes están La extracción con CA puede ser tan simple y barata como
expuestas antes del tratamiento con CA también puede la vaporización de pegamento en una pecera con una tapa
desempeñar un papel importante al rejuvenecimiento de hermética o tan elaborada como el uso de una cámara
impresiones latentes antes del proceso de polimerización. diseñada comercialmente con controles de temperatura
Las impresiones latentes que están expuestas a vapores y humedad dinámicas. Ambos sistemas están diseñados
de ácido acético y luego a CA extraído han demostrado para lograr el mismo resultado: la vaporización de pega-
pesos moleculares más altos que los no expuestos. Por mento líquido en un medio ambiente adecuado para la
el contrario, la humedad básica producida con vapores polimerización del CA en las impresiones latentes.
de amoniaco también parece mejorar el revelado con CA.
Un enfoque común y eficaz para la volatilización de CA
La investigación actual deja claro que los ambientes de
es calentar una pequeña cantidad de pegamento líquido
ácidos y de humedad básica mejorarán individualmente el
(aproximadamente 0.5 g o menos) en un plato de evapo-
crecimiento del polímero de la impresión latente, siendo la
ración de aluminio en un calentador o una taza para café
mejora ácida la más eficaz. Aunque el mecanismo real no
caliente. Se prefiere un plato de aluminio, ya que inhibe la
se entiende completamente, se cree actualmente que la
polimerización (Olenik, 1983, pág. 9-10). Los gases calien-
exposición a vapores de amoniaco aumenta principalmente
tes se elevan pero pronto caen al fondo de la cámara como
la funcionalidad de los grupos amina, mientras que los
conjuntos de refrigeración. Por lo tanto, un ventilador de
vapores de ácido acético influyen favorablemente los inicia-
circulación se utiliza a menudo durante la extracción para
dores carboxílicos más robustos (Wargacki et al., 2005).
mantener los vapores uniformemente dispersos alrededor
de la evidencia en todos los niveles del tanque. Las impre-
7.9.3 Aplicación siones que se determine serán más tarde sub extraídas
Es importante mencionar que el CA líquido y sus vapores y podrán ser extraídas de nuevo, y en efecto reiniciar el
pueden causar daño agudo a la piel, los ojos y las membra- proceso de polimerización.
nas mucosas, y los efectos de la exposición a largo plazo
Un segundo enfoque para la vaporización de CA utiliza
no se conocen completamente. El usuario debe tener cui-
una vara de extracción disponible comercialmente. Estas
dado de utilizar la ventilación adecuada y el equipo de pro-
varas suelen utilizar gas butano para calentar un pequeño
tección personal y de practicar siempre una manipulación
cartucho de latón que contiene CA etílico (Weaver y Clary,
segura. Todas las advertencias del fabricante, incluidas las
1993, pág. 481-492). Las extracciones del cartucho calen-
que figuran en las hojas de datos de seguridad, debe pres-
tado en el extremo de la vara pueden ser dirigidas hacia la
társeles atención durante el uso.
evidencia o utilizadas para rellenar una cámara. La desven-
El resultado ideal del revelado con CA es la polimerización taja de usar una vara de extracción en un entorno abierto
en la impresión latente que dispersa la luz suficiente y es que las corrientes de aire barren fácilmente los vapores
no cubre el fondo, haciendo que la impresión blanca sea de CA lejos de las pruebas, haciendo que el revelado sea
ligeramente visible contra el sustrato. Este tipo de revelado difícil de controlar. El uso de una vara fuera una campana

7–28
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

FIGURA 7–14
(A) Impresión de Cianoacrilato (CA)
polimerizado en una envolvedora de
plástico. (B) Impresión de CA manchada
con RAM* y vista a 475 nm con un filtro
de barrera color naranja.

*RAM es una mezcla de manchas

fluorescente de rodamina 6G, Ardox y
7-(p-metoxibenzilamino)-4-nitrobenzo­
2-oxa-1,3-diazol (MBD).

de extracción también presenta algunos desafíos de salud pegamento en una capa fina a través de todo el interior de
y seguridad que deben ser considerados (Froude, 1996, las superficies de aluminio. Estas láminas se abren y se
pág. 19-31). colocan dentro de una cámara, exponiendo al aire las capas
relativamente volátiles de pegamento. El tiempo de reve­
La vaporización también se puede lograr sin una fuente de lado del CA utilizando este método puede variar significati­
calor externa. En lugar de ello, la aceleración química se vamente con el tamaño de la cámara.
produce por la reacción exotérmica que se puede lograr
mediante el vertido de pegamento líquido sobre una almo­ La extracción en una cámara de vacío también se ha
hadilla de alto contenido de celulosa previamente tratada sugerido como un método para aumentar la volatilidad del
con hidróxido de sodio. El pretratamiento implica simple­ CA (Campbell, 1991, pág. 12-16; Yamashita, 1994, pág. 149­
mente una bola de algodón preparado con unas pocas 158; Harvey et al, 2000, pág. 29-31; Bessman et al., 2005,
gotas de solución de NaOH. pág. 10-27). La presión atmosférica reducida disminuye
el punto de ebullición del pegamento líquido y puede
La extracción del CA sin aceleración se puede lograr vaporizarse más rápidamente a temperatura ambiente. La
mediante el aumento de la superficie total del pegamento presión negativa también elimina la humedad en el tanque,
líquido, aumentando así la velocidad de evaporación. Una la cual afecta a la apariencia general de las impresiones
forma de lograr esto es emparedar un cordón de pegamen­ reveladas. Las impresiones reveladas en un entorno de
to líquido entre dos láminas de papel de aluminio (Olenik, vacío a menudo aparecen translúcidas, haciéndolas difíciles
1989, pág. 302-304). Las láminas se prensan juntas y un de detectar sin manchas de colorante líquido (Watkin et al.,
rodillo de tinta se utiliza para dispersar uniformemente el 1994, pág. 545-554). Sin embargo, algunos investigadores

7–29
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

han encontrado que esta práctica es menos efectiva que el men con una fuente de luz láser o forense suele producir
uso de entornos de humedad controlada (Kent y Winfield, los resultados más dramáticos; sin embargo, no todas las
1995; Kent, 2005, pág. 681-683). impresiones polimerizadas con CA aceptarán las manchas
de tinte.
Aunque se prefiere el revelado con CA sea en una cámara
de laboratorio, las cámaras improvisadas en el campo La tinción de colorante simplemente requiere la prepara-
también se pueden crear fácilmente. Las cámaras incluyen ción de una mancha fluorescente comercialmente
cajas de cartón, pequeños cuadros con láminas de plástico disponible en solución y su aplicación a las huellas
transparente, grandes tiendas de campaña, interiores de dactilares polimerizadas. Para una referencia completa
vehículos, e incluso cuartos enteros (Weaver, 1993, pág. de recetas de tinción con manchas fluorescentes,
135-137; Bandey y Kent, 2003). La más común de estas consulte la Guía de Procesamiento para el Revelado de
cámaras de campo es probablemente el interior del au- Impresiones Latentes del FBI (FBI Processing Guide
tomóvil. Un método de extracción consiste en colocar una for Developing Latent Prints) (Trozzi et al., 2000) o el
placa caliente (alcanzando aproximadamente 60°C) en el manual de Home Office (Kent, 1998, 2004). Una vez que
centro del vehículo, con aproximadamente 1 g de pega- se elige una solución de colorante, se aplica a las su-
mento en un plato de evaporación. El interior es entonces perficies no porosas tratadas con extracción de CA por
sellado, cerrando todas las puertas y ventanas. Los vapores inmersión o utilizando una botella de lavado para rociar.
del pegamento calentado llenan rápidamente el interior Se cree que las impresiones polimerizadas por tinción
del vehículo, revelando las impresiones. Este proceso dura de colorante funcionan como un tamiz molecular, donde
aproximadamente 10-30 minutos, aunque la duración de las moléculas de colorante se atascan en el polímero
tiempo es variable. En algunos casos, a fin de no destruir llenando vacíos en el compuesto (Menzel, 1999, pág.
todo el vehículo, partes del vehículo pueden ser quitadas y 162). Por esta razón, es importante enjuagar adecuada-
extraídas por separado (por ejemplo, el volante, espejo). mente la superficie que lleva las huellas dactilares con
las manchas de colorante. El resultado será una impre-
En algunas instancias, la extracción de CA de un arma de
sión que produce intensa fluorescencia cuando se ve
fuego puede interferir en las examinaciones de armas de
con una fuente de luz forense o láser (Figura 7-14). En
fuego subsecuentes. Los examinadores de armas de fuego
esta etapa, la fotografía adecuada puede ir más allá de
pueden ser consultados antes de cualquier procesamiento
simplemente documentar la imagen para mejorar la visi-
de CA (Rosati, 2005, pág. 3-6).
bilidad de la impresión fluorescente mediante el registro
Los tiempos de extracción dependen del tamaño de la de detalle imperceptible a simple vista.
cámara, la cantidad de pegamento, la temperatura de la
La pulverización es también una buena manera de visualizar
fuente de calor y la naturaleza del sustrato y el residuo de
y documentar impresiones polimerizadas. A menudo, las
la impresión latente. Bajo todas las condiciones, la extrac-
impresiones son lo suficientemente resistentes para que
ción debe terminarse poco después de la aparición de los
pueden ser cepilladas repetidamente con polvo de huellas
primeros signos de huellas dactilares en la cámara que
dactilares y levantarse con cinta hasta que se logre el con-
vigilará el revelado de las impresiones. Esto no solo ayuda
traste justo en el levantamiento (Illsley, 1984, pág. 15).
a determinar cuando el procesamiento debe cesar pero
también actúa para asegurar que el quipo esté funcionando
7.9.5 Conclusión
adecuadamente. La extracción puede reiniciarse después
si las impresiones parecen no estar del todo reveladas. La extracción de CA es un método probado y eficaz para
revelar las impresiones de huellas latentes que contienen
7.9.4 Mejoramiento residuos ecrinos y sebáceos, que ha estado en uso desde
finales de la década de 1970. Las moléculas de CA se
Una vez que se han revelado las impresiones, se pueden unen al residuo a través de la polimerización para formar un
mejorar ópticamente con técnicas de iluminación oblicuas, compuesto visible y duradero que puede ser mejorado y
axiales, reflejantes y transmitidas; mejorarse químicamente registrado por fluorescencia, fotografía y levantamiento. Se
con las manchas de tinte fluorescentes; y mejorarse física- están realizando investigaciones en la química y la mecáni-
mente con la aplicación de polvo de huellas dactilares, en ca reales de la reacción del CA. Actualmente, la técnica
ese orden. La tinción de colorante fluorescente y el exa- acelerada por calor en alto grado de humedad controlada

7–30
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

(humedad relativa del 60-80%) es a menudo el método energía y la longitud de onda más corta (aproximadamente
sugerido de aplicación. También se recomienda que el 400 nm, donde un nanómetro es la mil millonésima parte
revelado con CA se lleve a cabo poco después del depósito de un metro), mientras que la luz roja tiene la energía más
de huellas dactilares para resultados máximos. Aunque baja y la longitud de onda más larga (aproximadamente 700
la extracción de CA ha demostrado ser eficaz para las nm), el verde, amarillo y naranja siendo intermedios en en­
duraciones de tiempo considerables después del depósito, ergía y longitud de onda (Champod et al., 2004, pág. 41-76).
la extracción con CA antes del envasado de evidencia tam­
Los átomos y las moléculas tienen diferentes arreglos úni­
bién puede ser un medio eficaz para la estabilización de
cos de electrones alrededor de su núcleo, que correspon­
impresiones latentes frágiles durante el almacenamiento y
den a diferentes “niveles de energía” discretos. Cuando la
el transporte.
luz incide sobre una superficie, un fotón de luz se absorbe
si la energía del fotón coincide exactamente con la diferen­
7.10 Examinación de Fluorescencia cia de energía entre dos de los niveles de energía de las
moléculas de la sustancia de la superficie. Si la luz de un
color o una energía particular no coinciden con la diferencia
7.10.1 Antecedentes
de energía, se refleja. El color de la superficie se compone
Ya en 1933, la examinación de fluorescencia con luz UV se de los colores de la luz que se reflejan y no del color que
sugirió como método de visualización de huellas latentes corresponde a las longitudes de onda de luz que son ab­
espolvoreadas con polvo de antraceno en superficies sorbidos. Los objetos que son de diferentes colores están
multicolores (INBAU, 1934, pág. 4). Antes de finales de absorbiendo y reflejando las diferentes longitudes de onda
la década de 1970, el polvo fluorescente UV se utilizaba de la luz. Por ejemplo, la clorofila, la cual da a las hojas su
de vez en cuando y parece haber sido el único método color verde, absorbe fuertemente en los extremos rojo y
fluorescente creíble de detección de impresiones latentes. azul del espectro visible, pero refleja la luz verde. Vemos el
En 1976, los investigadores del Centro de Investigación de mundo mediante la observación de las longitudes de onda
Xerox en Canadá descubrieron la inherente fluorescencia de luz que se refleja en los objetos que nos rodean.
de la impresión latente a través de la continua iluminación
laser de ondas de iones de argón. Poco después, se Después de que una molécula absorbe la luz y se eleva a
identificó la primera impresión latente en un caso penal, un nivel de energía más alto, tiende a relajarse de nuevo
utilizando luminiscencia inherente mediante excitación al nivel más bajo o “estado fundamental” por el despren­
láser (huella dactilar en cinta aislante color negro) (Menzel y dimiento de energía en forma de calor, generalmente
Duff, 1979, pág. 96). a través de colisiones con otras moléculas. En algunas
moléculas, sin embargo, el exceso de energía absorbida se
Desde finales de la década de 1970, los avances en la emite en forma de luz. Esta es la fotoluminiscencia. Si la
tecnología de detección de fluorescencia han contribuido emisión es inmediata, se denomina fluorescencia. Si vive
enormemente a la caza de los muchos tipos de pruebas de más, es fosforescencia. La fluorescencia se detiene
forenses. Hoy en día, la evidencia que sería apenas per- en nanosegundos cuando la fuente de luz forense está
ceptible o incluso invisible a la luz normal se intensificó de apagada, mientras que la fosforescencia continuará. Los
forma rutinaria por fluorescencia. Las manchas de sangre, números brillantes de un temporizador del cuarto oscuro
semen, contusiones, fragmentos de hueso, documentos son un ejemplo de fosforescencia.
cuestionados, residuos inflamables, fibras y huellas dacti­
lares todos ameritaron un examen con una fuente de luz La molécula excitada perderá algo de su energía antes de
forense o láser. que emita luz como fotoluminiscencia. Como resultado, la
luz emitida es de un color o longitud de onda diferente de la
7.10.2 Teoría luz de excitación (Figura 7-15). La fluorescencia se dice que
“se desplazó al rojo”, lo que significa que es el lado rojo del
La luz visible se compone de la radiación electromagnética espectro electromagnético en relación con la luz incidente
de diferentes colores y longitudes de onda. Cuando la luz desde la fuente de luz forense. La diferencia en las longi­
pasa a través de un prisma, se separa espacialmente de tudes de onda de la luz excitante y emitida se denomina
acuerdo con las longitudes de onda, lo que resulta en los desplazamiento de Stokes. Cuando se utiliza la fluorescencia
colores clásicos del arco iris. La luz violeta tiene la mayor para ver una huella dactilar, los filtros de visión o de barrera

7–31
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

FIGURA 7–15

Emisión de fluorescencia
Espectro de absorbancia y emisión

Absorbancia
de la rodamina 6G.

Longitud de onda

bloquean las longitudes de onda de la luz reflejada desde la producir fluorescencia; sin embargo, se considera general­
fuente de luz al tiempo que permiten que las longitudes de mente como el más productivo. Los resultados dramáticos
onda fluorescentes pasen a través de ellos. se consiguen de forma rutinaria mediante el uso de polvos
fluorescentes, manchas de tinte y reactivos químicos.
La examinación la fluorescencia de las impresiones lat­
entes es extremadamente sensible (Menzel, 1999, pág.
7.10.3 Aplicación
5). Mediante el uso de los filtros de barrera correctos que
bloqueen la luz de la fuente de luz forense que se utiliza, El uso de láseres y fuentes de luz forenses plantean pelig­
pero no la fluorescencia, se puede observar una propor- ros reales y, a veces, irreversibles en la salud. Los láseres
ción muy alta de señal a ruido. Si hay química fluorescente pueden generar suficiente intensidad que la luz incluso inci­
sólo en la huella dactilar, el fondo no emite ninguna señal, dental o reflejada puede dañar los ojos sin protección. Las
y la impresión se ve que con facilidad brilla intensamente lámparas filtradas también producen luz intensa y, además,
contra un fondo negro. algunas van a generar radiación UV peligrosa. La protección
adecuada para los ojos debe ser utilizada en coordinación
Los exámenes de huellas dactilares pueden producir fluo­ con las longitudes de onda de excitación que se emplea.
rescencia a partir de cuatro fuentes: Por favor, lea todas las advertencias del fabricante antes de
usar cualquier fuente de luz forense.
• Constituyentes nativos en los residuos de impresión
latente Para visualizar las impresiones latentes mediante fluores­
cencia, un ancho de banda específico de radiación debe
• Sustancias extrañas recogidas por la mano y que se
hacerse brillar tanto en una impresión latente no tratada
transfieren a través del depósito
o una tratada con un producto químico fluorescente. Las
• Mejora intencional de la química longitudes de onda elegidas serán determinadas por los
químicos involucrados y la naturaleza del sustrato luminis­
• Fluorescencia del sustrato (fondo) cente. La evidencia se examina a continuación, a través de
gafas de visión (Figura 7-16) o placas de filtro que bloquean
Algunas investigaciones han sido dirigidas a la identi­
la luz incidental desde la fuente de luz forense. Estas gafas
ficación de luminiscencia “nativa” o inherente en los
actúan como un filtro de barrera y son fundamentales en la
residuos de huellas dactilares. Esta fluorescencia es típica­
separación de la luz incidente generada por la fuente de luz
mente débil y se cree que proviene de compuestos tales
y la señal fluorescente débil emitida por la impresión latente.
como la riboflavina y piridoxina (Dalrymple et al., 1977, pág.
Esta separación de señales de luz incidente y emitida le dan
106). Los contaminantes extraños en los residuos de huel­
al examen de fluorescencia su sensibilidad. Es importante
las dactilares, tales como alimentos o residuos de medi­
utilizar las gafas correctas para obtener los resultados ópti­
camentos, también pueden aparecer luminiscentes. El
mos, así como por consideraciones de salud y seguridad.
tratamiento por medios químicos y físicos diseñados para

7–32
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

FIGURA 7–16
Gafas.

La excitación UV única no requiere necesariamente de estas fuentes de luz tiene ventajas y desventajas, dependi­
gafas de visualización debido a la invisibilidad de la ilumi­ endo de la finalidad prevista y el presupuesto que se tenga.
nación incidente al ojo humano; sin embargo, las gafas
de protección, que pueden incluir lentes de policarbonato Recientemente, las fuentes de luz “alternativas” o “forens­
transparente, se deben utilizar durante el examen de es” (lámparas filtradas) se han convertido en gran medida
evidencias para proteger los ojos contra la radiación UV en las más confiadas por los laboratorios y en el lugar de
reflejada. No todas las fuentes de luz UV producen UV los hechos a causa de las mejoras en la potencia, versatili­
pura y se requerirá de un filtro de visualización amarillo si dad, portabilidad y precio asequible en comparación con los
la luz visible está presente. La fotografía de fluorescencia láseres. Estas lámparas de alta intensidad utilizan filtros de
excitada de UV única también puede requerir el filtro de pase largo, pase corto y paso de banda frente a un bulbo
barrera UV correcto en la cámara sensible a la luz inciden­ de xenón o un haluro de metal para producir la longitud de
te, incluso cuando el ojo humano no lo es. Ropa protectora onda deseada para el examen de la evidencia (Wilkinson
debe ser utilizada para minimizar la exposición de la piel a y Watkin, 1994, pág. 632-651; Wilkinson et al., 2002, pág.
la radiación UV. 5-15). Recientemente, se han introducido “linternas de
mano” forenses, muchas basadas en tecnología de diodos
En general, los filtros amarillos se utilizan para longitudes emisores de luz (LED) (Wilansky et al., 2006).
de onda de luz incidente de UV a 445 nm, filtros de color
naranja para fuentes de luz de 445-515 nm y filtros rojos Los láseres, por otra parte, en el pasado han sido menos
de 515 a 550 nm. Las gafas y filtros específicos variarán en portátiles y asequibles, pero generan considerablemente
valores de transmisión y deben ser adaptados a la fuente más energía que las lámparas filtradas. Los láseres son
de luz que se utiliza. Las gafas de visualización están dis­ deseables cuando sólo se observa fluorescencia muy
ponibles a través de compañías de láser y luz forense y la débil. Algunos ejemplos de fluorescencia débil incluyen la
mayoría distribuidores de suministros forenses. fluorescencia inherente del residuo de huellas dactilares
latentes o huellas dactilares reveladas con reactivos tales
Una vez que se observa una imagen fluorescente, a veces como violeta cristal que emite una señal fluorescente muy
puede ser “afinada” ajustando las longitudes de onda de débil. Los nuevos láseres (532 nm), que son refrigerados
excitación emitida por la fuente de luz, y el filtro de barrera por aire y portátiles, han llegado recientemente al mer-
utilizado para ver, para minimizar la fluorescencia de fondo cado. Para una discusión más amplia sobre tipos de láser,
y maximizar el contraste. La imagen resultante debe ser funcionalidad, usos y teoría, consulte Fingerprint Detection
fotografiada utilizando un filtro fotográfico que transmita with Lasers de Menzel (Menzel, 1999, pág. 3-21) o la pub­
las mismas longitudes de onda que el filtro utilizado para la licación de Home Office, Fingerprint Detection by Floures­
visualización. cence Examination (Hardwick et al., 1990).

Además de simplemente detectar pruebas, una fuente de

7.10.4 Fuentes de luz
luz forense o láser es también a menudo un medio eficaz
Las fuentes de luz utilizadas para generar estos anchos de para la mejora de imagen. Esta mejora puede provenir de
banda estrechos vienen en diferentes variedades, incluyen­ causar intencionalmente que un fondo sea fluorescente
do lámparas UV, lámparas filtradas y láseres. Cada una de para aumentar el contraste entre una huella dactilar y su

7–33
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

sustrato, o desde el silenciamiento de patrón del fondo las huellas dactilares reveladas con cianoacrilato. Algunas
mediante la selección de un rango de longitud de onda que de estas manchas de tinte se pueden combinar para pro-
reduzca el color de fondo. ducir una mancha con fluorescencia en un amplio espectro.
Una de estas manchas es RAM, una combinación de R6G,
Las impresiones sangrientas son un buen ejemplo de la Ardrox y MBD. Debido a que la mezcla RAM se puede uti-
mejora a través de la absorción a una longitud de onda dis- lizar en diferentes longitudes de onda, el practicante puede
creta. La longitud de onda máxima de absorción para san- a menudo “afinar” antecedentes problemáticos mediante
gre seca es de aproximadamente 420 nm. La iluminación la selección de una longitud de onda que maximiza la fluo-
en esta longitud de onda hace que las crestas manchadas rescencia de huellas dactilares y suprime la fluorescencia
de sangre aparezcan más oscuras. Si el fondo es fluores- de fondo.
cente en este rango de longitud de onda, la impresión
sangrienta será mejorada significativamente (Figura 7-17) Los tratamientos para papel son igual de eficaces que los
(Stoilovic, 1991, pág. 289-296; Vandenberg y van Oorschot, utilizados en superficies no porosas e incluyen ninhidrina
2006, pág. 361-370). tonificada con cloruro de zinc y análogos de ninhidrina:
DFO, 1,2 indanodiona y 5-MTN (5-metiltioninhidrina).
7.10.5 Polvos Fluorescentes, Manchas de
Cuatro excelentes referencias que contienen recetas e
Tinte y Reactivos instrucciones para reactivos fluorescentes son the FBI
Se han desarrollado muchos procesos fluorescentes para Processing Guide for Developing Latent Prints (Trozzi et
ayudar al examinador forense con herramientas que vayan al., 2000), the Home Office Manual of Fingerprint Devel-
mucho más allá de utilizar una sola fuente de luz. Los opment Techniques (Kent, 1998, 2004), Fingerprints and
polvos fluorescentes son abundantes y están ampliamente Other Ridge Skin Impressions (Champod et al., 2004, pág.
disponibles en las empresas de suministros forenses, 142–145, 228–229) y Advances in Fingerprint Technology
con la mayoría de las empresas comercializando su propia (Lee and Gaens¬slen, 2001, pág. 105–175).
marca en particular.
La Tabla 7-3 es una lista de reactivos comunes y sus cor-
Las manchas de tinte tales como MBD [7-(p-metoxibencilamino)- respondientes longitudes de onda de pico de absorción
4-nitrobenzo-2-oxa-1,3-diazol], rodamina 6G (R6G), Ardrox, y emisión. La adherencia precisa a un pico de excitación
amarillo básico y rojo básico se pueden preparar en el y longitud de onda de absorción no siempre es posible
laboratorio y son extremadamente eficaces para mejorar (dependiendo de la fuente de luz disponible) y no siempre

FIGURA 7–17
Imagen compuesta de una huella
dactilar sangrienta en papel de copia.
El lado izquierdo fue fotografiado a
415 nm. El lado derecho fue fotogra-
fiado bajo la luz del día equilibrada
con iluminación fotográfica.

7–34
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

Tabla 7–3
Reactivos comunes y sus longitudes de onda del pico de absorción y emisión.

Reactivo/Sustancia Máximo de absorción (nm) Máximo de emisión (nm)

580
560
DFO (Champod et al., 2004, pág. 129–
(Champod et al., 2004, pág. 129-130)
130)
1,2-Indaneodina 515
550
5-MTN
(Wallace-Kunkel et al., 2006, pág. 4-13)
415–560*
Ninhidrina
(Champod et al., 2004, pág. 117-118)
540
Ninhidrina/ZnCl 490
(Champod et al., 2004, pág.120–124)
500
Ardrox 380
(Lee and Gaennslen, 2001, pág.124)
445 495
(Champod et al., 2004, (Champod et al., 2004,
pág.142–145, 228–229) pág.142–145, 228–229 )
Amarillo básico 40

440 490
(Lee and Gaennslen, 2001, pág.124) (Lee and Gaennslen, 2001, pág. 124)
515
MBD 465
(Lee and Gaennslen, 2001, pág. 124)
585
(Champod et al., 2004,
Rojo básico 28 495
pp 142–145, 228–229;
Lee and Gaennslen, 2001, pág. 124)
490–530 565
(Champod et al., 2004, (Champod et al., 2004,
pág. 142–145, 228–229) pág. 142–145, 228–229)
Rodamina 6G

525 555
(Lee and Gaennslen, 2001, pág. 124) (Lee and Gaensslen, 2001, pág. 124)
Violeta cristal 532**
550
Amarillo ácido 7 527
(Sears et al., 2005, pág. 741–763)
485–500
Amarillo ácido 7 + Sangre 445–480
(Sears et al., 2005, pág. 741–763)
415*
Sangre seca sin tratar
(Champod et al., 2004, pág. 168)

*No se hace fluorescente pero aparece obscuro.

**Fluorescencia baja que requiere iluminación láser.

7–35
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

es aconsejable debido a que muchos sustratos pueden 7.10.7 Conclusión

interferir con la visibilidad en estas longitudes de onda.
La examinación de fluorescencia está firmemente ba-
Debido a que las bandas de absorción son generalmente
sada en las técnicas de detección de impresión latentes
bastante amplias, la longitud de onda de excitación puede
y la creación de imágenes cotidianas. La sensibilidad de
diferir del máximo de absorción y aún inducir una fluores-
esta técnica garantiza la aplicación en todas las formas
cencia significativa.
de pruebas forenses. Los anchos de banda específicos
de radiación son hechos brillantes en las impresiones no
7.10.6 Tiempo – y Fase – de la Creación de
tratadas, así como en impresiones tratadas con polvos y
Imágenes Resueltas reactivos químicos. Cuando se ve con los filtros de barrera
Como se mencionó anteriormente, la fluorescencia de apropiados, la sensibilidad a través de la detección de foto-
fondo se puede generar intencionalmente para visualizar luminiscencia se puede conseguir hasta casi el fotón único.
mejor una huella dactilar que está absorbiendo la luz tenue La absorción a longitudes de onda discretas, ausente de
pero no fluorescente. Esta condición aumenta el contraste fluorescencia, es también una técnica de mejora benéfica
iluminando el fondo, haciendo que la huella dactilar más sobre sustancias tales como las impresiones de color púr-
oscura destaque. Sin embargo, la fluorescencia de fondo pura de ninhidrina o sangre seca, haciéndolas más oscuras
es más a menudo un obstáculo, compitiendo con una y más fáciles de ver y fotografiar. Debido a que la fluores-
huella dactilar fluorescente para la visualización. cencia de fondo es el mayor obstáculo para el examen de
fluorescencia, se han propuesto conceptos experimentales
La creación de imágenes resueltas por tiempo se ha defen- tales como la creación de imágenes resueltas con tiempo y
dido como un medio posible para solucionar este prob- fase para abordar este problema.
lema. Esta técnica se aprovecha de la diferencia entre el
momento de la emisión del sustrato y la huella fluorescente
(Menzel, 1999, pág. 126). Los primeros dispositivos utilizan 7.11 Depósito de Metal al Vacío
una fuente de luz con una rueda cerrada, que “corta” la luz
para explotar estas diferencias en las emisiones de rotación.
7.11.1 Historia
La luz brilla en la huella dactilar y el sustrato cuando una
abertura en la rueda está en frente de la luz. La fuente de El depósito de metal al vacío (VMD) es una técnica indus-
luz se enciende a continuación, de manera efectiva cuando trial establecida desde hace tiempo para la aplicación de
una cuchilla en la rueda pasa por delante de la fuente de luz. revestimientos de metal para componentes tales como el
Poco después, una abertura en la rueda pasa por delante vidrio para formar un espejo. En 1964, el profesor de física
de un detector. El tamaño de las aberturas en la rueda y la Samuel Tolansky (Royal Holloway College, Universidad de
velocidad con la que ésta gira, determinarán la longitud de Londres) señaló que la deposición de plata en un sistema
tiempo que la impresión es expuesta y el retardo entre la de depósito al vacío reveló huellas dactilares latentes ac-
excitación y la detección. Si la fluorescencia de fondo decae cidentalmente en un componente de vidrio. Se propuso
más rápido que la fluorescencia de la sustancia química en una investigación sobre el proceso como una técnica de
la huella dactilar latente, el fondo puede ser eliminado me- revelado de huellas dactilares. Sin embargo, esto no fue
diante el ajuste del tiempo de retardo (Menzel, 2001, pág. perseguido en su momento por el Ministerio del Interior
216; Campbell, 1993, pág. 368-377). del Reino Unido debido a que otras técnicas para la detec-
ción de huellas dactilares en el cristal se consideraron más
Diseños posteriores demostraron ser más prácticos medi- baratas, más fáciles de utilizar y suficientemente eficaces.
ante el uso de un cortador de luz electrónico en conjunción
con una cámara con un dispositivo de carga acoplada (CCD), En 1968, trabajadores franceses informaron (Theys et al.,
cada componente controlado por una computadora con la 1968, pág. 106) que el VMD de una mezcla de zinc, anti-
imagen visualizada en un monitor (Menzel, 1999, pág. 126). monio y cobre en polvo era capaz de revelar impresiones
La creación de imágenes resueltas con tiempo todavía se latentes en papel. Como consecuencia de este artículo,
considera poco práctica para la aplicación generalizada. Las el interés por la técnica fue revivido en el Reino Unido y
imágenes resueltas por fase se mantienen como el siguien- Tolansky inició un programa de investigación para inquirir
te avance tecnológico y se utilizan actualmente en otros las condiciones óptimas y las posibles aplicaciones del
campos de la espectroscopia (Menzel, 2001, pág. 216). VMD. Uno de los primeros objetivos de la investigación fue

7–36
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

establecer por qué la composición francesa fue eficaz. Un en estudios comparativos se encontró que superó a todas
examen más detallado de los revestimientos metálicos de­ las demás técnicas en el revelado de marcas en bolsas de
positados producidos por el laboratorio francés indicó que plástico (Misner, 1992, pág. 26-33; Kent et al, 1975, 1978;
el recubrimiento era casi en su totalidad de zinc, no siendo y Reynoldson Reed, 1979). También se encontró que el
necesaria la presencia de antimonio y cobre para revelar proceso reveló marcas en sustratos expuestos a agua y a
impresiones (Hambley, 1972). condiciones de alta humedad, dando ventajas sustanciales
sobre técnicas tales como la extracción de CA para los
El programa de investigación iniciado por Tolansky (Hamb­ artículos que han sido expuestos a estas condiciones.
ley, 1972) investigó las características de deposición de una
gama de metales sobre sustratos de papel, la identificación Se han hecho pocas modificaciones al proceso en sí desde
de los metales individuales y las combinaciones de metal el cambio en el segundo metal de depósito de cadmio al
que dan el revelado de impresión óptimo. La investigación zinc a finales de la década de 1970. Recientemente, ha
también se llevó a cabo en la capacidad de la técnica para habido una mayor investigación sobre el VMD en Australia,
detectar huellas latentes en los tejidos. Estos experimen­ mirando a detalle los diversos regímenes del revelado de
tos mostraron que, aunque un cierto revelado de impresión impresión que se pueden seguir en diferentes grados de
se obtuvo mediante el uso de metales individuales (por polietileno (Jones et al., 2001c, pág. 73-88) y cómo las
ejemplo oro, plata, cobre, zinc y cadmio), en general, los superficies podrían ser “reactivadas” para revelar impresio­
mejores resultados se obtuvieron mediante el uso de una nes si el exceso de depósito de metal se había producido
combinación de metales, típicamente oro o plata seguido inicialmente (Jones et al., 2001d, pág. 5-12). El trabajo
por el cadmio o zinc. Inicialmente, la combinación de oro se extendió a investigar otros sustratos poliméricos,
y cadmio fue seleccionada como la óptima, aunque las incluyendo polipropileno, cloruro de polivinilo y tereftalato
cuestiones de salud y seguridad posteriores han dado de polietileno (Jones et al., 2001b, pág. 167-177) y diferentes
como resultado la combinación de oro y zinc en su lugar. condiciones de depósito fueron recomendadas para cada
Se prefirió oro sobre la plata como el metal inicial depósito tipo de polímero, en particular, la cantidad de oro depositado
porque la plata puede ser degradada por las secreciones antes de la deposición de zinc (el tereftalato de polietileno
de huellas dactilares y contaminantes atmosféricos. y cloruro de polivinilo requieren significativamente más
oro para revelar impresiones que los polímeros o el
El trabajo experimental inicial se llevó a cabo en el equipo polipropileno).
a pequeña escala con una campana de cristal, pero la
investigación continuó desarrollando un equipo más grande Sin embargo, hay situaciones en las que el rendimiento
adecuado para su uso en un laboratorio de huellas dac­ del VMD deja mucho que desear. Se cree que su eficacia
tilares. A mediados de la década de 1970, los sistemas puede ser afectada negativamente por la presencia de flui­
modificados de equipos industriales estándar se habían dos corporales (Batey et al., 1998, pág. 165-175) y residuos
desarrollado (Kent, 1982) y estaban en uso en varias de medicamentos (Magora et al., 2002, pág. 159-165).
fuerzas policiales y los proveedores forenses en el Reino También ha sido difícil revelar impresiones en gran medida
Unido. Más tarde, los fabricantes hacen refinamientos, de polímeros plastificados (tales como película plástica y
aumentando el tamaño de la cámara de vacío y la adición vinilo plastificado) utilizando el proceso de VMD. Trabajos
de controles específicos para el proceso de revelado de recientes han indicado que el depósito de la plata como un
huellas dactilares. En la década de 1990, la técnica hizo su solo metal puede dar mejores tasas de detección sobre el
camino de Europa a América del Norte (Murphy, 1991, pág. oro y la combinación de zinc para estos tipos de sustratos
318-320; Misner, 1992, pág. 26-33; Masters y DeHaan, y el proceso de depósito de plata ha sido publicado para
1996, pág. 32-45). Los equipos de VMD especialmente su uso operacional (Home Office Scientific Development
construidos son ahora suministrados por varios fabricantes Branch, 2005, pág. 8-9).
de todo el mundo.
7.11.2 Teoría
Aunque el VMD se investigó originalmente como una téc­
nica de revelado de huellas dactilares para su uso en papel Hay un acuerdo general sobre la teoría asociada con el
y tejidos, se estableció que otros procesos son capaces revelado normal de impresiones por el método de VMD.
de dar mejores resultados en el papel. Sin embargo, el La razón de que las combinaciones de metal se postu­
VMD dio excelentes resultados en sustratos no porosos y lan para trabajar bien es debido a las características de

7–37
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

condensación de zinc (y cadmio). Estos metales no se con­ delgadas de ácido esteárico (Thomas, 1978, pág. 722-730)
densarán en grasa, tales como la que se encuentra en los demostraron que el 60% del oro penetró el ácido esteárico
residuos de huellas dactilares, incluso cuando los residuos a una profundidad mayor que la profundidad de detección
oleosos están presentes sólo como una monocapa. Sin em­ de la técnica de análisis de superficie por espectroscopía
bargo, el zinc se deposita en pequeños núcleos de metal y electrónica para el análisis químico (ESCA) y por lo tanto
esta es la razón por la que el depósito de oro o plata se lleva probablemente no serían suficientemente cercanos a la
a cabo primero. El oro y la plata se pueden depositar sobre superficie de zinc para nuclear en él.
toda la superficie y comienzan a formar núcleos, la mor-
La microscopía electrónica se ha utilizado también para
fología de los cuales depende de la naturaleza de la superfi­
confirmar que el tamaño y la distribución de núcleos de oro
cie (la energía superficial, las especies químicas presentes)
formados durante el proceso de deposición variaron mucho
sobre los que se están depositando. El recubrimiento de
según el sustrato y las especies químicas presentes
oro resultante es muy delgado (sólo varios nanómetros) y
(Kent, 1981, pág. 15). Fue esta diferencia en el tamaño y la
discontinuo. Sin embargo, en las regiones recubiertas con
distribución de núcleos, junto con la difusión de oro en los
los residuos grasos de la huella dactilar latente, el oro se
depósitos grasos, que posteriormente delineó la impresión
difunde en la grasa y por lo tanto no hay núcleos de oro
durante el VMD.
cercanos a la superficie. Como consecuencia, cuando el
zinc se deposita posteriormente, que se condensará en las En la práctica, muchas impresiones reveladas utilizando
regiones de núcleos de oro (es decir, el sustrato de fondo), VMD pueden ser “reveladas a la inversa” (es decir, el zinc
pero no en las regiones del depósito de grasa (es decir, las preferencialmente se deposita en las crestas de las huellas
crestas de la huella dactilar). Esta teoría de la nucleación se dactilares en lugar del fondo). Hay diferencias de opinión
discute en más detalle por Stroud (1971, 1972). El proceso en cuanto a por qué esto surge (Jones et al, 2001b, pág.
de revelado normal se representa esquemáticamente en la 167-177; 2001c, 73-78; Kent et al, 1976, pág. 93), pero nin­
figura 7-18 y una fotografía de una marca producida por el guna de las teorías se han demostrado categóricamente,
revelado normal se muestra en la figura 7-19. y en algunos casos se puede observar el revelado inverso
y normal en el mismo sustrato (aunque se afirma que esto
Las pruebas llevadas a cabo para determinar qué compo­
es más común para [si no exclusivos a] sustratos de polie­
nentes de la huella latente tenían más probabilidades de
tileno de baja densidad). La Figura 7-20 muestra una marca
ser responsables de la inhibición del depósito de metales
revelada a la inversa en una bolsa de polietileno.
identificó varias sustancias, incluyendo el ácido esteárico,
ácido palmítico, oleato de colesterol, trioleato de glicerol y
aminoácidos del monohidrocloruro de L-arginina, L-leucina, 7.11.3 Aplicación
y DL-treonina. La mayoría de estas sustancias son grasas El equipo utilizado para el VMD puede variar según el fab­
o ácidos no solubles al agua o de cadena larga con baja ricante, pero los elementos esenciales del sistema son los
presión de vapor, los cuales determinan su estabilidad y mismos. El equipo consta de una cámara de vacío capaz de
su no migración sobre la superficie durante el proceso de ser bombeada a una presión muy baja (<3 x 10-4 mbar), fila­
VMD. Estos resultados estaban de acuerdo con la obser­ mentos para la evaporación de oro y zinc, y una ventana de
vación de que el VMD era capaz de revelar las impresio­ visualización de manera que el depósito de zinc pueda ser
nes en sustratos expuestos al agua. Los experimentos monitoreada. La cámara también puede contener un “dedo
para estudiar la difusión de oro en forma de películas frío”, enfriado a baja temperatura para ayudar a reducir los

Residuo de la impresión Zinc

FIGURA 7–18
Diagrama esquemático del Oro
revelado normal, mostrando
el depósito de zinc donde se
encuentra disponible el nú­ Sustrato
cleo de oro en la superficie.
Revelado normal

7–38
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

FIGURA 7–19
Fotografía de una marca revelada normalmente
en una bolsa de polietileno.

FIGURA 7–20
Fotografía de una marca revelada a la inversa
en una bolsa de polietileno.

tiempos de parada de la bomba mediante la condensación Al completar el depósito de oro, la presión en la cámara se
de una parte del vapor en la cámara. Los artículos a recu­ aumenta hasta ~5x10-4 mbar y la corriente al filamento (s)
brir se adjuntan a la circunferencia interior de la cámara de de depósito de zinc se enciende. La razón para el aumento
vacío, por encima de los filamentos de revestimiento. Un de la presión en la cámara es reducir la velocidad del depósi­
sistema típico se ilustra en la figura 7-21. to de zinc mediante la introducción de más moléculas de
aire con las que el zinc pueda colisionar. Algunos sustratos
Los filamentos (“botes”) utilizados para el depósito de oro se pueden cubrir muy rápidamente, por lo que el proceso
y zinc se forman normalmente a partir de láminas delgadas de depósito más lento da al operador un mayor control.
de molibdeno. El filamento de oro por lo general consiste Los filamentos de deposición de zinc son más grandes y
en un hoyuelo poco profundo en una delgada franja de mo­ significativamente más profundos que el filamento de oro,
libdeno. La deposición de oro tiene lugar cuando la cámara y la cantidad de zinc añadida es mayor, normalmente de
ha alcanzado una presión de 3 x 10-4 mbar o inferior y la 1 g por corrida. Para la deposición de zinc, la corriente se
corriente al filamento se incrementa hasta que el filamento
incrementa hasta que el filamento se ilumina con un color
alcanza un calor de amarillo a blanco. El depósito de oro
cereza-rojo a naranja opaco. Una vez que esto ocurre, el
debe ser completado dentro de 10 segundos, pero si se
operador debe observar el proceso de deposición a través
observan residuos en el filamento a medida que la corrien­
de la ventana de visualización, dejando de depositar tan
te se reduce, la temperatura debe ser aumentada de nuevo
pronto como las marcas se hagan visibles sobre el sustrato.
hasta que todo el oro se haya evaporado.

7–39
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

FIGURE 7–21
Typical vacuum metal
deposition equipment.

Después del depósito de zinc, el filamento de oro debe ser La gama de muestras que han sido tratadas con éxito utili-
brevemente calentado con un calor de amarillo a blanco para zando VMD es extensa e incluye:
quemar cualquier tipo de contaminación de zinc. El proceso
• Bolsas de plástico y embalajes.
se describe con más detalle en otra parte (Kent, 2004).

• Vidrio y botellas de plástico.

Existe una gran variabilidad en la velocidad a la que los
diferentes sustratos se recubren y puede tomar más de 10 • Armas de Fuego.
minutos para obtener un recubrimiento adecuado en algu-
nos tipos de material. En algunos casos, puede ser nece- • Tarjeta brillante, papel fotográfico y portadas de revistas.
sario llevar a cabo múltiples corridas de deposición con el
• Artículos de cuero limpio (incluyendo bolsos y zapatos).
fin de obtener resultados satisfactorios o para revelar todas
las marcas presentes. La presencia de contaminación de la • Cintas adhesivas (lado no pegajoso).
superficie, agentes de liberación, plastificantes puede sig-
nificar que no es posible obtener un recubrimiento de zinc Es evidente que hay mucha superposición entre los tipos
en absoluto; en estas circunstancias, la deposición de 60 de artículos que pueden ser tratados con VMD y los que
mg de plata, usando las mismas condiciones de deposición son tratados con extracción de CA. En muchos casos, el
del oro, puede producir marcas adicionales. factor decisivo en cuanto a qué técnica se utilizará es si el
artículo ha sido humedecido, porque el VMD sigue siendo
La técnica VMD se adoptó inicialmente como una técnica eficaz en artículos húmedos mientras que la extracción de
operativa para la detección de huellas latentes en delgadas CA no lo es. En la práctica, es posible utilizar los dos pro-
láminas de polietileno y ha demostrado ser superior a otros cesos en secuencia y se pueden detectar más marcas de
procesos desarrollados con posterioridad a los ensayos de esta manera porque los dos procesos funcionan en diferen-
comparación iniciales. El VMD ahora se ha utilizado opera- tes constituyentes de huellas dactilares. Sin embargo, en la
cionalmente durante muchos años y ha demostrado ser una actualidad, todavía parece que hay cierto debate sobre cuál
técnica eficaz para una gama más amplia de materiales que de las dos técnicas se debe hacer primero.
el polietileno. Resultados recientes han demostrado que el
VMD puede producir resultados en una gama de sustratos
(por ejemplo, un billete recubierto con tinta ferromagnética y 7.12 Técnicas de Mejoramiento de
en poliestireno expandido) (Suzuki et al., 2002, pág. 573-
578). El uso de la técnica también ha comenzado a incre- la Sangre
mentar en América del Norte y se han obtenido resultados
exitosos a partir de bolsas de plástico, en algunos casos con 7.12.1 Historia
varios años de antigüedad y expuestas a la humedad (Batey La sangre es uno de los contaminantes conocidos más
et al., 1998, pág. 165-175). comunes de huellas dactilares encontradas en los lugares

7–40
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

de los hechos. El uso de evidencia de sangre en la his­ El uso del tinte de proteína, amido negro (negro ácido
toria de la investigación data de más de 150 años. Las 1), rápidamente se hizo popular entre los investigadores
primeras pruebas fueron de dos tipos, ambas apoyándose forenses. Su uso por parte el Laboratorio de la Policía Met­
en la presencia del grupo hemo: aquellas que produjeron ropolitana, en una base de disolvente de metanol y ácido
cristales y aquellas que se apoyaron en su naturaleza acético, se debatió en un simposio de la ciencia forense
catalítica. en 1961 por Godsell (1963, pág. 79). Esta formulación, con
un cambio en el método para la fijación de sangre—desde
Las pruebas de cristal o confirmatorias se formularon por el uso de calor para la inmersión en metanol (Faragher y
Teichmann en 1850 (Thorwald, 1966, pág. 23) y Takayama Summerscales, 1981), junto con una formulación a base
en 1912 (Gerber y Saferstein, 1997, pág. 19-19). Sin em­ de agua del mismo colorante (Hussain y Pounds, 1989a)
bargo, estas pruebas requieren que la sangre se raspe de —continuó siendo recomendada para la mejora de las
la superficie y, por consiguiente, no le da importancia a las huellas dactilares en la sangre por parte del Ministerio del
formas de evidencia física tales como las huellas dactilares, Interior del Reino Unido hasta 2004 (Kent, 2004), cuando
impresiones de calzado o patrones de salpicadura. se aprobó una nueva formulación por parte de Sears y
Prizeman (2000, pág. 470).
Los ensayos catalíticos o presuntos que intentaron
mantener gran parte de la evidencia física intacta fueron También se han propuesto muchas otras manchas de
producidos por Van Deen y Day en 1862 y se basaron proteínas para la mejora tanto de las huellas dactilares y las
en guayacol (Gerber y Saferstein, 1997, pág. 18-19); por impresiones de calzado en la sangre: azul de Coomassie
Schönbein en 1863, utilizando peróxido de hidrógeno; y (azul ácido 83) y la doble tinción de Crowle (azul ácido 83
por Adler y Adler en torno a 1900, utilizando bencidina y rojo ácido 71) por Norkus y Noppinger en 1986 (Norkus
(Thorwald, 1966, pág. 23). Adler y Adler fueron pioneros y Noppinger , 1986, pág. 5); ácido fucsina (violeta ácido
en el uso de leucomalaquita verde en 1904 (Eckert y 19, rojo húngaro), azul patente V (azul ácido 1) y tartrazina
James, 1989, pág. 2); Medinger modificó su método en (amarillo ácido 23) por Barnett y sus colegas en 1988 (Bar-
1931 para que fuera más sensible (Söderman y O’Connell, nett et al., 1988); benzoxanteno amarillo y violeta ácido 17
1935, pág. 226). por Sears y sus colaboradores en 2001 (Sears et al, 2001,
pág. 28); y amarillo ácido 7 por Sears y sus colaboradores
Otras pruebas presuntas de sangre fueron reveladas por
en 2005 (Sears et al., 2005, pág. 741).
Kastle y Sheed en 1901 y Kastle y Meyer en 1903, utilizan­
do fenolftaleína; por Ruttan y Hardisty en 1912, utilizando Aunque el uso de colorantes de proteína se convirtió en
o-toluidina; por Specht en 1937, utilizando luminol (3-ami­ el más popular para la mejora de las huellas dactilares en
noftalhidrazida); y por Gershenfeld en 1939, utilizando la sangre, la investigación sobre métodos presuntos de
o-toluidina (Eckert y James, 1989, pág. 2). mejora continuó y, en 1976, Garner et al. (1976, pág. 816)
propusieron el uso de tetrametilbenzideno (TMB) como el
En 1911, Abderhalden y Schmidt (1911, pág. 37) repor­
más seguro y tan fiable como la bencidina. Sugerencias
taron el revelado de huellas dactilares en la etiqueta de
para otras pruebas presuntivas siguen: tetraamino-bifenilo
la botella de hidrato de tricetohidrindeno (ninhidrina).
(TAB) y diaminobenzidina (DAB) en 1989 por Hussain y
Este descubrimiento no fue explotado para la detección
Pounds (1989b); fluoresceína en 1995 por Cheeseman y
de huellas dactilares o sangre hasta 1954, cuando Odén
DiMeo (1995, pág. 631); y violeta leucocrystal (LCV) en
(Odén y von Hofsten, 1954, pág. 449) produjo su formu­
1996 por Bodziak (1996, pág. 45).
lación de ninhidrina sobre la base de acetona. El uso de
este método para la mejora de las huellas dactilares en Además, se han realizado muchas modificaciones a las
la sangre revolucionó el pensamiento en esta área de formulaciones de ninhidrina para aumentar su eficacia y
investigación forense. El énfasis se desplazó de las prue­ seguridad: por Crown en 1969 (Crown, 1969, pág. 258) y
bas presuntivas de hemo, que generalmente requieren la Morris y Goode en 1974 (Morris y Goode, 1974, pág. 45).
opinión de expertos para interpretar los resultados de la Otros cambios se vieron obligados a la comunidad de huel­
prueba correctamente, y en reactivos más fáciles de usar las dactilares debido a “El Protocolo de Montreal relativo
que producen productos intensamente coloreados con a las sustancias que agotan la capa de ozono” (Programa
otros componentes de la sangre, por lo general proteínas Environ de las Naciones Unidas, 1999) y las nuevas formu­
o sus productos de degradación. laciones fueron propuestos por Watling y Smith en 1993

7–41
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

(Watling y Smith, 1993, pág. 131) y Hewlett y sus colegas 7.12.2 Teoría
en 1997 (Hewlett et al., 1997, pág. 300). El uso de tintas de
La sangre se compone de glóbulos rojos (eritrocitos),
transición de metal para cambiar el color o hacer que se
glóbulos blancos (leucocitos) y plaquetas (trombocitos)
vuelva fluorescente el producto de reacción entre aminas
en un fluido proteico llamado plasma, que constituye
y ninhidrina también fue propuesto por Morris en 1978
aproximadamente el 55% del volumen de sangre entera.
(Morris, 1978), Everse y Menzel en 1986 (Everse y Menzel,
Los glóbulos rojos contienen principalmente la proteína
1986, pág. 446) y Stoilovic y sus colegas en 1986 (Stoilovic
hemoglobina, pero también tienen proteínas de superfi-
et al., 1986, pág. 432).
cie específicas (aglutinógenos) que determinan el grupo
También se sugirió que el uso de uno de los diversos análo- sanguíneo. Los glóbulos blancos, que forman parte del
gos de ninhidrina mejoraría la sensibilidad y muchos se han sistema inmune, tienen un núcleo que contiene ADN.
propuesto: benzo (f) ninhidrina en 1982 por Almog et al.
La hemoglobina constituye aproximadamente el 95%
(1982, pág. 912), 5-metoxininhidrina en 1988 por Almog y
del contenido de proteínas de los glóbulos rojos y está
Hirshfeld (1988, pág. 1027), el DFO en 1990 por Grigg et al.
formado por cuatro subunidades de proteínas, cada una
(1990, pág. 7215) e indanodiona en 1997 por Ramotowski
contiene un grupo hemo. El grupo hemo está hecho de un
et al. (1997, pág. 131).
anillo de porfirina plano y un ion ferroso conjugado.
A finales de la década de 1970 y principios de la de 1980,
Los métodos químicos de mejora de sangre caen amplia-
los que revelaron fuentes de luz de alta intensidad obser-
mente en dos tipos: los que utilizan la agrupación del hemo
varon que las longitudes de onda más cortas de la luz en
para probar o inferir la presencia de sangre y los que reac-
las regiones UV y violeta del espectro hacen superficies
cionan con las proteínas o sus productos de degradación.
sean fluorescentes fuertemente. Esto puede proporcionar
Estos últimos no son en absoluto específicos de la sangre;
un detalle extra si una huella dactilar está en un mate-
sin embargo, debido al alto contenido en sangre de pro-
rial fuertemente absorbente de la luz, tal como la sangre
teína y productos de degradación de las proteínas, estas
(Hardwick et al., 1990). Este es un método especialmente
técnicas son las más sensibles a disposición del investiga-
valioso para la mejora de las huellas dactilares en la sangre,
dor forense (Sears et al., 2005, pág. 741).
ya que el grupo hemo absorbe la luz a través de mucha de
la parte visible del espectro (Kotowski y Grieve, 1986, pág.
1079). 7.12.3 Pruebas para Hemo
Hay dos tipos de pruebas que utilizan el grupo hemo de la
Todos estos acontecimientos hicieron que a finales de la
hemoglobina: pruebas de cristal y pruebas catalíticas.
década de 1990, existieran tantos reactivos y formulacio-
nes para la mejora de las huellas dactilares contaminadas Las pruebas de cristal son específicas o de confirmación
con sangre e impresiones del calzado, con poco o nada de de la presencia de hemo, pero no si la sangre es humana
datos comparativos, que estaba causando una inmensa o no. Las dos pruebas de cristal más conocidas son las
confusión entre los profesionales. Además, la aparición formuladas por Teichmann y Takayama. Los resultados
de los análisis de ADN colmó aún más la incertidumbre de las pruebas Teichmann en la formación de cristales
sobre qué técnicas podrían o deberían ser utilizadas para romboédricos marrones de hematina y los resultados de
la mejora de la sangre, de manera que una prueba tan vital las pruebas a Takayama en cristales rojo-rosa de piridina
era probable que se pierda por las decisiones equivocadas. hemocromógeno (Palenik, 2000, pág. 1115; Ballantyne,
Por lo tanto, el Ministerio del Interior del Reino Unido se 2000, pág. 1,324). Ambas pruebas tienen que llevarse a
dispuso a aclarar la situación y comenzó un programa de cabo ex situ también, por lo que no son de utilidad para la
trabajo para revisar y comparar la más utilizada de estas mejora de la huella dactilar.
técnicas (Sears y Prizeman, 2000, pág. 470; Sears et al,
2001, pág. 28; 2005, pág. 741). Resultante de esta tarea Los ensayos catalíticos son sólo presuntos o infieren la
colosal resultaron una serie de hallazgos clave que se presencia de hemo porque están sujetos a reacciones falsas
incorporaron en una actualización integral para El Manual positivas y falsas negativas causados por una variedad de
de Técnicas de Desarrollo de Huellas Dactilares en el año sustancias no sanguíneas. En consecuencia, los resultados
2004 (Kent, 2004). individuales requieren de una cuidadosa interpretación de
los expertos. Todas estas pruebas se basan en la actividad

7–42
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

de la peroxidasa del grupo hemo (es decir, la capacidad de aminas. La sangre contiene más proteínas que cualquier
reducir el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno). Esta otro material, por lo que estas técnicas son inherentemente
reacción se puede acoplar a la oxidación de tintes incoloros más sensibles que las de hemo, aunque no son en absoluto
reducidos (por ejemplo, fenolftaleína, leucocristal violeta, específicas para la sangre.
tetrametilbenzidina y fluoresceína) que al oxidarse, forman
Los tintes más eficaces de proteínas para la mejora de las
sus homólogos de colores (Ballantyne, 2000, pág. 1324).
huellas dactilares en la sangre son un grupo conocido como
H2O2 +tinte reducido → H2O + tinte oxidado colorantes ácidos. A menudo se caracterizan por la pres­
sin color coloreado encia de uno o más grupos de sulfonato (-SO3­ ), general­
mente la sal de sodio (Na+). Estos grupos funcionan de dos
(Lee y Pagliaro, 2000, pág. 1333). maneras: en primer lugar, proveen solubilidad en agua o
alcohol, los principales disolventes favorecidos para estos
La prueba de luminol también se basa en la actividad de la colorantes; y, en segundo lugar, ayudan a la reacción en
peroxidasa del grupo hemo, pero utiliza perborato de sodio virtud de su carga negativa (aniónico). Si las condiciones áci­
en lugar de peróxido de hidrógeno. Esto produce enton­ das se utilizan (el ácido acético siendo la opción preferida),
ces un producto que tiene luminiscencia en presencia de las moléculas de proteína en la sangre adquieren una carga
sangre. La quimioluminiscencia blanco azulada es débil y positiva (cationes) y esto atrae a los aniones de colorantes
debe ser vista en la oscuridad por un operador que está ácidos. Además, el enlace de hidrógeno y otras fuerzas
totalmente adaptado a la oscuridad para obtener lo mejor físicas, tales como van der Waals, pueden desempeñar un
de esta prueba. Incluso con una aplicación cuidadosa de papel en la afinidad de los colorantes ácidos con moléculas
luminol, es muy fácil dañar el detalle fino de las huellas de proteína (Christie et al., 2000, pág. 19-20). La presencia
dactilares contaminadas con sangre. Esta técnica sólo de un alcohol de cadena corta en la solución de teñido
debe utilizarse cuando no se requiere el detalle fino y cu­ ayuda a evitar que la sangre se difunda durante la etapa
ando otras técnicas pudieran verse comprometidas por tipo de teñido (Sears y Prizeman, 2000, pág. 470). El etanol se
o inviabilidad de superficie, tales como alfombras oscuras o prefiere ya que ofrece menor toxicidad e inflamabilidad que
estampados (Sears et al., 2005, pág. 741). el metanol. El uso de agua como disolvente principal da a la
solución un punto de inflamación alrededor de 30°C, lo que
La mayor preocupación con las pruebas catalíticas para la
permite que esta formulación (que contiene agua, etanol
sangre es que pueden producir resultados falsos positivos
y ácido acético) sea utilizada en el lugar de los hechos con
en la presencia de oxidantes químicos y catalizadores;
algunas precauciones simples (Kent, 2004).
sales de metales pesados como el cobre, níquel y hierro;
y peroxidasas vegetales tales como las que se encuentran Si las formulaciones del colorante ácido se aplican directa­
en el rábano picante, cítricos y numerosos tubérculos (Lee mente a las huellas dactilares en la sangre sin una etapa de
y Pagliaro, 2000, pág. 1334). Una prueba de dos etapas fijación, la sangre se solubilizará y las crestas se difundirán
puede obviar esto. El colorante incoloro reducido se aplica o serán completamente enjuagadas. Se han utilizado un
inicialmente y si no se observa cambio de color, a con­ número de diferentes agentes de fijación, pero los más
tinuación, se añade el peróxido de hidrógeno. Un cambio eficaces son el ácido 5-sulfosalicílico y metanol. Cuál se
de color en este punto es más probable que indique la utilice depende del disolvente principal empleado en el
presencia de sangre. proceso de teñido: si el agua es el disolvente principal,
entonces una solución de ácido 5-sulfosalicílico será más
En general se acepta que un resultado negativo con una
eficaz, mientras que si el principal disolvente de teñido
prueba catalítica demuestra la ausencia de sangre; sin em­
es metanol, entonces el metanol es el mejor agente de
bargo, los agentes reductores fuertes, tales como el ácido
fijación (Sears y Prizeman, 2000, pág. 470). Estos agentes
ascórbico, pueden inhibir tales pruebas (Eckert y James,
de fijación actúan de diferentes maneras; el ácido 5-sulfo­
1989, pág. 121).
salicílico precipita proteínas básicas y el metanol deshidrata
la sangre.
7.12.4 Pruebas para Proteínas y sus
Productos de Degradación El uso de soluciones basadas en metanol ha disminuido
por un número de razones, incluyendo su toxicidad, in­
Hay dos tipos de técnicas para las proteínas—aquellos que
flamabilidad y la tendencia a causar daños a las superficies
se tiñen de material proteico y aquellos que reaccionan con

7–43
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

(por ejemplo, pinturas, barnices y algunos plásticos) y tiene dos maneras en que esto puede lograrse: (1) por fluores-
un efecto negativo en el desarrollo de huellas dactilares. cencia excitante en la superficie de fondo sobre el que se
Esta etapa de fijación da a los tintes proteicos otra ventaja deposita la sangre o (2) por tratamiento con un producto
sobre las pruebas presuntivas de sangre: además de ser químico que, o bien rompe el grupo hemo o convierte la
una prueba más sensible, a menudo produce crestas de sangre en una especie fluorescente, o hace ambas cosas.
huellas dactilares más claramente definidas y el detalle es
más claro. Muchos materiales tienen fluorescencia cuando son
excitados por luz de alta intensidad en las regiones UV y
Una etapa de lavado se requiere posterior al teñido. En violeta del espectro. Esto es coincidentemente donde el
superficies no porosas, esto sólo elimina el exceso de grupo hemo es más absorbente, con un pico alrededor
tinte; sin embargo, en superficies porosas, esto también de 421 nm (conocido como Banda de Soret) (Kotowski y
actúa como un blanqueador, eliminando el tinte que ha sido Grieve, 1986, pág. 1079). Esta absorción es el por qué van
absorbido por la superficie del fondo. La solución de lavado a aparecer obscuras las huellas dactilares contaminadas
tiene que ser construida con cuidado para que solubilice con sangre contra un fondo claro. El examen de fluores-
el tinte, que no difundir o lavar la huella dactilar teñida y cencia se puede utilizar antes de cualquier otra técnica de
retener la intensidad de color del colorante en la misma. mejora de la huella dactilar, ya que no es destructiva y si se
Por esta razón, la misma mezcla disolvente que es utilizada utiliza luz UV de onda larga o ultravioleta (de 350-450 nm)
para el proceso de teñido, o alguna pequeña variación de (Hardwick et al., 1990) entonces, la tipificación del ADN
la misma, es generalmente más eficaz (Sears y Prizeman, también es afectada (Kent, 2004). El uso de ninhidrina,
2000, pág. 470). ácido negro 1 ó violeta ácido 17 pueden intensificar aún
más el contraste entre la huella dactilar y el fondo medi-
La ninhidrina y el DFO reaccionan con aminas y son las dos
ante al aumentar las propiedades de absorción de luz de la
técnicas más utilizadas para el revelado de huellas dactil-
sangre.
ares latentes en superficies porosas (Figura 7-22). También
son muy eficaces para la mejora de la sangre (Sears et al., El uso de un ácido orgánico fuerte en combinación con
2005, pág. 741). Ambos reaccionan con los aminoácidos de peróxido de hidrógeno rompe el grupo hemo de modo que
manera similar para formar productos que contienen dos ya no es tan eficaz en la absorción de luz. Entonces, cu-
moléculas de desoxigenación del producto de partida, puen- ando es excitado por luz verde (500-550 nm) será fluores-
teados por un átomo de nitrógeno que se donó a partir de la cente en color naranja. Este efecto también se ha señalado
amina (McCaldin, 1960, pág. 39; Wilkinson, 2000a, pág. 87). como edades de sangre.

Aunque los mecanismos de reacción y los productos tienen El DFO y amarillo ácido 7 producen especies fluorescentes
similitudes, el método de su visualización es comple- con sangre que pueden ser excitadas por luz verde (510-
tamente diferente. La ninhidrina, bajo las condiciones 570 nm) y azul (420-485 nm), respectivamente. Ambos
adecuadas, produce un producto de color intenso (púrpura pueden ser menos eficaces en los depósitos pesados de la
de Ruhemann) y el DFO genera un producto de color sangre debido a que el grupo hemo conserva su capacidad
rosa pálido extremadamente fluorescente. El púrpura de de absorber tanto la luz de excitación y la emitida como
Ruhemann se pueden hacer para generar fluorescencia al fluorescencia.
complementarlo con sales de metales, pero este proceso
adicional todavía no es tan sensible como el DFO (Stoilovic, 7.12.5.1 Aplicación. Actualmente se considera que el
1993, pág. 141). El DFO requiere calor para que la reacción examen de fluorescencia, dos reactivos de aminoácido y
proceda (Hardwick et al., 1993, pág. 65), mientras que la tres colorantes ácidos son los medios más eficaces para la
ninhidrina reacciona a temperatura ambiente, siempre que mejora de las huellas dactilares en la sangre (Sears et al.,
la humedad esté disponible, aunque el proceso avanza 2005, pág. 741). Las técnicas más apropiadas a utilizar para
mucho más rápido a temperaturas y humedades elevadas. eficacia máxima, ya sea individualmente o en orden se-
cuencial, dependen de la porosidad de la superficie a tratar.
Esto se aplica tanto para el revelado de huellas dactilares
7.12.5 Fluorescencia
latentes y la mejora de las huellas dactilares contaminadas
El uso de la fluorescencia para mejorar las huellas dactil- con sangre.
ares en la sangre puede ser extremadamente eficaz. Hay

7–44
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

O O N N
FIGURA 7–22
-
N
-
--- --
--
Los productos de reacción
N para la reacción de ninhidrina
+
H
(izquierda) y DFO (derecha)
O O - NH4 + N N con aminas.

Probar la superficie para la fluorescencia siempre debe Los tres colorantes ácidos recomendados, ácido negro 1
llevarse a cabo antes de cualquier otra técnica. Las fuentes (CI 20470), violeta ácido 17 (CI 42650) y amarillo ácido 7 (CI
de luz de alta intensidad con salidas de entre 350 y 450 56205) deben ser aplicados todos a la sangre fija durante
nm son las más efectivas. Cuando las huellas dactilares al menos 5 minutos con una solución de ácido 5-sulfo­
contaminadas con sangre o latentes están sobre superfi­ salicílico. El teñido de sangre fija es más eficaz si el área
cies porosas, la secuencia más eficaz de las técnicas es de interés se sumerge en la solución de teñido durante al
con DFO, ninhidrina, ya sea ácido negro 1 ó ácido violeta menos 3 minutos para el ácido negro 1 y violeta ácido 17 y
17 (después de llevar a cabo una prueba de la mancha para durante al menos 5 minutos en el caso del amarillo ácido 7.
ver cuál es la más adecuada) y finalmente revelador físico Las zonas fuertemente contaminadas con sangre requieren
(Sears et al., 2005, pág. 741). tiempos más largos de teñido. Si no es posible sumergir
las huellas dactilares ensangrentadas, entonces la solu­
Cuando las huellas dactilares contaminadas con sangre ción de teñido debe ser aplicada por encima de la zona de
o latentes están en superficies no porosas, la secuencia interés y dejarse fluir hacia abajo sobre ésta, manteniendo
más eficaz de las técnicas es por medio de VMD, polvos, el área húmeda durante el tiempo especificado. Un pozo
amarillo ácido 7, ácido violeta 17 y finalmente, ya sea física puede construirse alrededor de la zona de interés en su­
revelador físico o solvente negro 3 (negro Sudán). El super- perficies horizontales, el cual puede inundarse y drenarse
pegamento puede utilizarse en lugar del VMD o los polvos, según corresponda.
pero esto va a inhibir el proceso de teñido de sangre me­
diante la prevención de que el colorante llegue a la sangre Las áreas de interés entonces necesitarán ser lavadas o
(Sears et al., 2005, pág. 741). desmanchadas para eliminar el exceso de tinte. La solución
más eficaz para hacer esto es la misma composición disol­
La solución activa de DFO y ninhidrina debe aplicarse por vente que la solución de tinte, lavándola según sea necesa­
inmersión o por cepillado con un cepillo suave sobre los rio para eliminar el exceso de tinte o desmanchar el fondo.
artículos más grandes o superficies. Se recomienda que el
DFO se caliente a 100°C durante 20 minutos; sin embargo, Las fuentes de luz de alta intensidad capaces de emitir
cuando esto no es posible, pueden ser utilizadas temper- longitudes de onda entre 420 y 485 nm deben ser uti­
aturas tan bajas como 50°C, pero la velocidad de reacción lizadas para excitar la fluorescencia de la sangre teñida
es mucho más lenta (Hardwick et al., 1993, pág. 65). Se con amarillo ácido 7. La fluorescencia emitida es de entre
recomienda que los artículos o superficies tratados con 480 y 550 nm. El uso de longitudes de onda más cortas
ninhidrina se calienten a 80°C y humidificados a 65% de entre 350 y 450 nm, para excitar la fluorescencia de fondo
humedad relativa. Sin embargo, la reacción procederá a después del tratamiento con negro ácido 1 ó violeta ácido
temperatura y humedad ambiente, pero más lentamente. 17, puede ser benéfico.

Las fuentes de luz de alta intensidad capaces de emitir El trabajo llevado a cabo por el Ministerio del Interior del
longitudes de onda entre 510 y 570 nm deben ser utiliza­ Reino Unido ha demostrado que la identificación de ADN
das para excitar la fluorescencia de la sangre que ha hecho positivo se puede hacer después del examen de fluores­
reacción con DFO. La fluorescencia emitida es de entre cencia y de cualquier tratamiento químico, siempre que se
550 y 650 nm. Los beneficios también pueden obtenerse sigan las pautas simples. Si la técnica de revelado de más
mediante el uso de longitudes de onda más cortas, entre de una huella dactilar se utiliza en secuencia, entonces las
350 y 450 nm, para excitar la fluorescencia de fondo posibilidades de llevar a cabo con éxito la identificación del
después del tratamiento con ninhidrina. ADN serán mucho más reducidas (Kent, 2004).

7–45
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

El trabajo del Reino Unido ha demostrado que la formu- Ag+ + Cl– AgCl → Kformación = 1/Kdisociación = 1/Ksp = 5.6 x 107
lación más eficaz para los colorantes ácidos es la siguiente
(Sears et al, 2005, pág. 741): Hay al menos dos razones por las que el tratamiento de ni-
trato de plata funciona bien en superficies porosas. Una es
Solución de fijación-46 g de deshidrato de ácido 5-sulfo- que el proceso de precipitación es mucho más rápido que
salicílico disuelto en 1 L de agua. el proceso de disolución; es decir, la reacción para formar
el AgCl insoluble es más rápida que la capacidad del vehí-
Solución de tinción-1 g de tinte ácido disuelto en 700
culo acuoso para disolver la sal NaCl soluble. La segunda
ml de agua destilada, 250 ml de etanol y 50 ml de ácido
razón es que el AgCl insoluble queda atrapado dentro de
acético.
la estructura o de la “micro-rugosidad” de la superficie
Solución de lavado-700 ml de agua, 250 ml de etanol y porosa (Kerr et al, 1981, pág. 209-214); es decir, el residuo
50 ml de ácido acético. de la impresión latente fresca está en una forma acuosa o
semiacuosa que penetra en la superficie porosa, llevando
Las soluciones de tinción y lavado son inflamables. Se sus constituyentes con él.
deben tomar precauciones de seguridad si se utilizan estas
soluciones fuera de una campana de extracción con una Un reactivo de nitrato de plata basado en etanol al 3% (w/v)
temperatura ambiente superior a 28°C (Kent, 2004). (90% de etanol y 10% de agua) revela impresiones en
superficies repelentes al agua tales como papel encerado,
cartón con un acabado de cera y la espuma de poliestireno
7.13 Técnicas Acuosas (Trozzi et al., 2000). Aquí, el etanol se utiliza para reducir la
disolución del NaCl en el residuo de las huellas dactilares,
Esta sección abarca cuatro métodos de deposición acuosa para humedecer mejor la superficie (debido a que estas
de metal comúnmente utilizados: los que implican reactivos superficies son generalmente repelentes al agua) y para dar
de nitrato de plata, reveladores físicos de plata, procesos de una evaporación más rápida. Como era de esperarse, debido
deposición multimetálicos y reactivos de pavonado. Cada a la baja porosidad de tales superficies, las impresiones
uno de estos métodos implica reactivos con sales de me- reveladas sobre estas superficies son más frágiles que las
tales disueltos en un vehículo acuoso (o un alcohol, como de superficies porosas como papel y madera.
en el caso de algunos reactivos de nitrato de plata). Estos
reactivos revelan huellas latentes y resistentes al agua, Bajo luz de una sala común, el cloruro de plata se convierte
tales como las impresiones sebáceas (a excepción de los poco a poco por medio de foto-reducción en plata elemen-
reactivos de nitrato de plata utilizados en superficies porosas tal; sin embargo, esto se acelera con la radiación UV. El
que se dirigen a la sal). Aquí, los iones metálicos se reducen revelado más eficiente se produce con la radiación UV de
a partículas de metal en el residuo de la impresión latente onda corta (254 nm); sin embargo, la radiación UV de onda
(excepto para el caso de las huellas latentes sobre el metal, larga más segura (366 nm) también revela impresiones,
donde el residuo de impresión resiste a la deposición). pero menos eficientemente (Goode y Morris, 1983).

AgCl + hν Ag + ½Cl2
7.13.1 Reactivos de nitrato de plata
La plata elemental formada es de color marrón oscuro a
7.13.1.1 Historia y antecedentes. Uno de los primeros reac-
negro (no es de color plateado). La razón de esto es que
tivos utilizados para el revelado de las impresiones latentes
los depósitos de plata son como un agregado de diminutas
sobre superficies porosas fue una solución acuosa al 1-3%
partículas de plata (de tamaño coloidal), lo que hace que
de nitrato de plata, AgNO3. Fue utilizada en 1891 para este
una superficie muy porosa atrape la mayor parte de la luz
fin (Forgeot, 1891; Rhodes, 1940, pág. 10). La mayoría de las
que incide sobre ella. La formación de la plata oscura que
fórmulas ahora incluyen un alcohol para acelerar el secado
atrapa la luz sucede porque los iones de plata se reducen
y para aumentar la humedad (reducir la tensión superficial)
muy rápidamente.
(Lee y Gaensslen, 2001, pág. 105-175). Los iones de plata
en el nitrato de plata reaccionan con los iones de cloruro en 7.13.1.2 Aplicación (superficies porosas y repelentes
la sal (cloruro de sodio, NaCl) contenidos en el residuo de la al agua). El reactivo del nitrato de plata se aplica general-
impresión latente para formar cloruro de plata (AgCl), una mente a los especímenes por inmersión en la solución o
sal altamente insoluble (Kps = 1.8x10-10) (Dean, 1985). pulverizando la solución sobre las muestras. El FBI (Trozzi

7–46
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

et al., 2000, pág. 38-39) recomienda la formulación al 3% β). Si el tratamiento original de nitrato de plata no mancha
de AgNO con base de agua para superficies porosas y la significativamente el fondo con plata, entonces este mé­
formulación del AgNO3 al 3% con base de etanol para todo dejará ver sólo las impresiones reveladas con poca
superficies repelentes al agua. o ninguna interferencia de fondo. El proceso, descrito por
Goode y Morris (1983) y revisado por Cantu (2001, pág. 29­
Champod et al. (2004, pág. 153-154) recomiendan el reac­
64), implica la conversión de la plata en la imagen de plata
tivo a base de metanol con AgNO3 al 2% para superficies
al bromuro de plata (AgBr), usando métodos de bromación
porosas. Después del secado, las muestras se exponen a
(blanqueo) y luego el tratamiento de ésta, ya sea con el
una fuente de luz de alta intensidad, luz UV o luz solar para
sulfuro de sodio o tiourea (donde el azufre es radioactivo
revelar las impresiones. Tan pronto como se revelan las 35
S) para convertir el AgBr a Ag2 35S. El proceso se llama
impresiones, son fotografiadas y las muestras se alma­ tonificación radiactiva. Si el procedimiento MSN se utiliza,
cenan en la oscuridad. Con el tiempo, el fondo se oscurece el cual arroja una impresión de sulfuro de plata, entonces
debido a la reducción gradual de cualquier nitrato de plata se utilizará radioactivo tiourea para formar Ag2 35S.
residual en las muestras (esta reducción se acelera si se
expone a la luz). Enjuagar las muestras después del reve­ 7.13.1.4 Limitación. El principal inconveniente del método
lado y secándolas después en la oscuridad hace poco para de nitrato de plata es que los iones de cloruro en el residuo
frenar el revelado del fondo. de la impresión latente se difunden a través del tiempo y la
humedad acelera esta difusión. Esto afectará a la resolu­
Goode y Morris (1983) reportaron en 1983 que sumergir ción (detalles de la cresta) de la impresión revelada. Nor-
las muestras en ácido etilendiaminotetraacético disódico malmente, las impresiones no mayores de 1 semana se
(Na2EDTA) complementa los iones de plata en exceso, revelarán bien; sin embargo, uno debe tratar de examinar
que luego se pueden enjuagar fácilmente con agua. Su la evidencia tan pronto como sea posible para evitar esta
procedimiento de nitrato de plata modificado (MSN) utiliza difusión. Según Goode y Morris (1983), en un ambiente
una solución acuosa de nitrato de plata al 1% que contiene interior en el Reino Unido, las impresiones en superficies
también 5% de Na2EDTA y 3% de K2CO3. El procedimiento porosas duran más tiempo (meses) en el invierno que en
del MSN implica (1) el tratamiento de las muestras con el verano (días o semanas). Sin embargo, indican que estos
este reactivo modificado con el tiempo suficiente para efectos dependen de factores tales como el tipo de super-
mojar la superficie; (2) transferir a un 1% (w/v) de solución ficie (las impresiones duran más tiempo en el papel que en
de Na2EDTA y dejándolos durante 1 minuto; (3) la elimi­ la madera en bruto) y, por supuesto, la humedad relativa.
nación y lavado a fondo con agua destilada y; finalmente, Por esta razón, el reactivo de nitrato de plata se utiliza
(4) colocándolos en una solución de tiourea al 5% que ahora en casos especiales. El revelador físico de plata y los
contenga 1% de KOH durante unos 30 segundos a 2 minu­ métodos de deposición multimetálicos son más común­
tos. El primer paso crea el cloruro de plata de los iones de mente utilizados para los componentes insolubles en agua,
cloruro en la impresión latente y el último paso lo convierte pero no se dirigen a los iones de cloro.
a sulfuro de plata negra. Más tarde, en 1998, Price y Stow
(1998, pág. 107-110) recomiendan sumergir las muestras 7.13.1.5 El uso de nitrato de plata sobre metales. La
en una “solución de parada” que consiste en una solución discusión hasta ahora ha sido sobre el uso de nitrato de
acuosa de metanol al 40%, ácido acético al 20% y 2% de plata en ciertas superficies brillantes (repelente al agua) y
glicerol para suprimir el revelado ulterior del fondo. porosas para revelar impresiones que soporten cloruro. El
nitrato de plata se ha utilizado también en algunas super-
7.13.1.3 Mejora. Según Lennard y Margot (1988, pág. 197­ ficies metálicas, tales como los casquillos de bala, para
210), las impresiones débilmente reveladas se podrían revelar grabados mediante el depósito de plata en todas
mejorar mediante el tratamiento de las muestras con una partes (dando una apariencia metálica gris a negra) excepto
solución de revelado físico de plata diluida. El factor de di­ donde la huella latente se asienta (Olsen, 1978; Cantú et
lución es 1:10. Goode y Morris (1983) discuten un método al, 1998,. pág. 294-298). Es decir, el nitrato de plata resalta
potenciador radiactivo que convierte una impresión de “impresiones que soportan lípidos”, porque tales impresio­
plata impresa en una radioactiva, la impresión de sulfuro de nes protegen la superficie del metal en la que se encuentra
plata con emisores β, que luego es convertida en imagen que reaccionan con el nitrato de plata. (Si los iones de
usando película radiográfica (este proceso de registro de cloruro están presentes en el residuo de la impresión lat­
imagen se denomina a veces autorradiografía o radiografía ente, se forma cloruro de plata; sin embargo, el contraste

7–47
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

de la impresión contra el fondo permanece y puede incluso

ser mejorado a través de la reducción de cloruro de plata Tabla 7–4
a plata oscura.) La reacción habitual de los iones de plata
(Ag+) con la superficie metálica es: Potenciales de reducción estándar de muchas especies
iónicas y moleculares.
nAg+ + M nAg + Mn+
o Potencial estándar de
(E ) en mV
Aquí, M representa el metal y Mn+ es un ion correspondi­ reacción media
ente. Se dice que la plata desplaza al metal M. Al observar H2O2 + 2H++ 2e­ 2H2O + 1776
el emplazamiento de la plata en las series electromotrices
Au3+ + 3e– Au + 1498
(ver la Tabla 7-4), observamos que la plata puede desplazar
al cobre, hierro, níquel, zinc, plomo y aluminio. 2Cl2 + 2e –
2Cl –
+ 1358
OCl– + H2O + 2e– Cl– +
2Ag+ + Cu 2Ag + Cu2+ Eoredox = 458 mV + 810
2OH–
3Ag+ + Al 3Ag + Al3+ Eoredox = 2461.6 mV Ag+ + e– Ag + 799.6
Fe + e
3+ –
Fe 2+
+ 771
Aquí, por ejemplo, Eoredox (Ag+/Ag; Cu/Cu2+) = Eored (Ag+
+ e– Ag) + Eoox (Cu Cu2+ + 2e–) se calcula de los H2SeO3 + 4H+ + 4e–
+ 740
potenciales de reducción estándar (Tabla 7-4) (Dean, Se + 3H2O
1985; Weast, 1986). Un valor positivo de E0redox indica Ag(NH3)2++ e–
+ 373
que la reacción de redox es termodinámicamente favor- Ag + 2NH3
able, pero no dice nada acerca de la tasa o velocidad de Cu2+ + 2e– Cu + 341.9
la reacción. Otra consideración es que estos metales se
Ag2O + H2O + 2e–
oxidan, algunos más fácilmente que otros, y esto crea + 342
2Ag + 2OH–
una película de óxido sobre la superficie metálica. Si una
2H+ + 2e– H2 0.0
impresión se colocó ante el metal oxidado, la impresión
puede mostrarse naturalmente, dado el tiempo suficiente Fe3+ + 3e– Fe – 37
(algunos se refieren a esto como que la impresión ha sido Pb + 2e
2+ –
Pb – 126.2
“grabada” en el metal). Sin embargo, si se coloca después
Ni2+ + 2e– Ni – 257
de la película de óxido formada, a menudo será difícil para
el reactivo de nitrato de plata oxidar adicionalmente el Fe + 2e
2+ –
Fe – 447
metal en esta película de óxido; por lo tanto, la deposición Zn2+ + 2e– Zn – 761.8
de la plata y el posterior revelado de la impresión puede
Al + 3e
3+ –
Al – 1662
ocurrir pero no tan fácilmente. La formación de una capa
de óxido protector, impermeable se denomina pasivación
bromuro de plata expuesta a plata. El baño fijador, en el
(Atkins, 1990, pág. 927).
primer caso, elimina los cristales de bromuro de plata no
7.13.2 Reveladores Físicos de Plata expuestos y también los cristales de bromuro de plata ex­
puestos (dejando detrás la plata depositada en ellos), mien­
7.13.2.1 Historia y antecedentes. El revelador físico de
tras que en este último caso, sólo se elimina el bromuro de
plata se originó en la química fotográfica como un método
plata no expuesto porque el bromuro de plata expuesto ha
alternativo para el revelador químico para el revelado de
sido convertido a plata.
la película (Cantu, 2001, pág. 29-64; Bunting, 1987, pág.
85; Cantu y Johnson, 2001, pág. 242-247). La exposición Debido a este proceso, el revelador físico de plata pronto
de bromuro de plata o cristales de yoduro de plata a la luz se hizo conocido como uno de los reactivos más sensibles
hace motas de plata se formen en la superficie de cristal para la detección de rastros de plata (Feigl y Anger, 1972,
(Walls y Attridge, 1977, pág. 104-108). Estos se convierten pág. 423-424). Los examinadores de huellas latentes
en “centros de revelado” (o “sitios de activación”), ya sea (Collins y Thomas) en el Reino Unido reconocieron éste
para el revelado químico o físico. Un revelador físico de durante la década de 1970 (Goode y Morris, 1983) y lo apli­
plata deposita la plata sobre cristales de bromuro de plata caron en primer lugar a las impresiones presentadas para
expuestos, mientras que un revelador químico reduce el el depósito de metal al vacío. Luego ampliaron su uso a

7–48
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

otras sustancias como telas y papel. Se encontró desde el el equilibrio de Ag+ + Fe2+ Ag + Fe3+ a la derecha (for-
principio que el revelador físico de plata funciona mejor en mando plata elemental).
superficies porosas que no porosas. Además, nadie sabía
realmente qué sustancias en los residuos de huellas lat­ Fe3+ + H3Cit FeCit + 3H+ → → Kformation = 0.398 at 25 °C
entes eran responsables de causar que el revelador físico
Sin embargo, por cada molécula de citrato férrico formada,
de plata trabajara. Es decir, nadie sabía lo que había en los
tres protones se liberan y estos orientan el equilibrio a la
residuos de huellas dactilares que actuara como un centro
izquierda (supresión de la formación de plata elemental). La
de revelado o un sitio de activación (tal como las motas
reacción general es:
de plata). No fue sino hasta recientemente que surgieron
o
algunas explicaciones plausibles o razonables. Ag+ + Fe2+ + H3Cit Ag + FeCit + 3H+ E redox
= 5.0 mV
o
Un revelador físico de plata es una solución acuosa que Por lo tanto, la adición de ácido cítrico reduce el E redox de
contiene iones de plata y un agente reductor que reduce 28.6 mV a 5 mV. Esta reducción facilita el ajuste de las
los iones de plata a plata, pero también contiene otros dos concentraciones de los componentes (ácido cítrico y las
conjuntos de productos químicos: un conjunto mantiene sales férrica, ferrosa y de plata), de modo que la reduc­
el agente reductor de la reducción de los iones de plata a ción de iones de plata a nanopartículas de plata elemen­
plata elemental a menos que una “sustancia desencade­ tales se produce sólo en los sitios de activación y no en
nadora” esté presente (por ejemplo, los cristales expues­ solución. Sin embargo, incluso con esta supresión de su
tos de bromuro de plata en película fotográfica), y el otro tasa de formación, los que sí se forman se convierten en
conjunto mantiene la solución estable. El primer conjunto sitios de nucleación (de activación) sitios para su posterior
suprime la capacidad reductora del agente reductor hasta deposición de plata (el proceso es autocatalítico) y, en
el punto de que la reducción se produce sólo cuando los consecuencia, crecen hasta precipitarse. Esto eventual­
sitios de activación están presentes. Esto, por lo tanto, mente agotará la mayor parte de la solución de iones de
suprime la formación de plata elemental en la solución. plata (dependiendo de la concentración de iones ferrosos
Sin embargo, debido a este delicado equilibrio, se produce inicialmente presentes).
cierta reducción espontánea mediante la cual las partículas
de plata de tamaño coloidal (nanopartículas) se forman en Para dar estabilidad a la solución, las partículas de plata
la solución y, debido a que estos son sitios de activación formadas de alguna manera deben haber bloqueado su
(es decir, son motas de plata) que crecen. Crecen de forma capacidad de activación. Aquí es donde los tensoactivos se
autocatalítica; es decir, la plata que se forma activa la re­ vuelven importantes.
ducción de más plata. Así, el segundo conjunto de produc­
Cuando las nanopartículas de plata se forman espontánea­
tos químicos suprime este crecimiento.
mente, se rodean por iones de citrato (cada uno de los
El revelador físico plata utilizado actualmente para el reve­ cuales lleva tres cargas negativas) en solución y por lo
lado de huellas latentes en superficies porosas contiene tanto adquieren una carga negativa. El tensoactivo principal
iones de plata (nitrato de plata) e iones ferrosos (sulfato usado para suprimir el crecimiento de las nanopartículas de
ferroso amónico) como los principales componentes; ácido plata formadas espontáneamente es un tensoactivo cat­
cítrico y iones férricos (nitrato férrico) como el conjunto de iónico cargado positivamente, acetato de n-dodecilamina.
los productos químicos que inhiben la formación de partícu­ La razón de la elección de un tensoactivo catiónico es que
las de plata coloidal formadas espontáneamente; y tenso­ ayuda a suprimir la carga negativa de las nanopartículas de
activo catiónico y no iónico como el conjunto de productos plata formadas. Esto entonces reduce la atracción de los
químicos que inhiben el crecimiento de tales partículas. iones de plata positivos hacia las partículas y por lo tanto
reduce la posibilidad de su crecimiento (por la reducción
La ecuación neta para la reacción de plata-deposición es: de plata en su superficie). El tensoactivo catiónico rodea
o
la partícula de plata cargada negativamente de manera
Ag+ + Fe2+ Ag + Fe3+ → → E = 28.6 mV
redox escalonada, con muchos extremos positivos que apuntan
E
o
is computed from Table 7–4. hacia la partícula como en dirección opuesta a la misma
redox
(Cantu, 2001, pág. 29-64; Cantu y Johnson, 2001, pág. 242­
Agregar ácido cítrico reduce la concentración de los iones 247; Jonker et al., 1969, pág. 38-44). Esta partícula encap­
ferrosos a través de la formación de citrato férreo y cambia sulada de tensoactivo se dice que está encerrada en una

7–49
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

micela. Un agente tensioactivo no iónico, Synperonic-N, se que inicialmente se dispersaron en residuo de la impresión
utiliza en conjunción con el acetato de n-dodecilamina para latente, pero, después del secado, se convirtieron en no
ayudar a la disolución de este último. dispersables. También se sabe que los alquenos (olefinas)
pueden adquirir una carga positiva en un ambiente ácido
En la película o papel fotográfico expuesto, el revelador (se forma, ya sea un ion carbonio o un alcohol protonado).
físico de plata actúa reduciendo sus iones de plata en las Por lo tanto, otra posibilidad es que el residuo de la impre-
motas de plata (sitios de nucleación) que se encuentran sión latente contenga olefinas.
en la superficie de los cristales de bromuro de plata ex-
puestos y en ningún otro lugar. Siendo un proceso auto- El área de superficie de las proteínas en las superficies poro-
catalítico, la deposición de plata en los sitios de nucleación sas y su unión a la celulosa. Se reconoció desde el principio
continúa hasta que se detenga, por ejemplo, mediante la que el revelador físico de plata funciona mejor en superficies
eliminación de la muestra de la solución y el enjuague con porosas, superficies particularmente basadas en celulosa,
agua. El revelador físico de plata tensoactivo estabilizado como el papel y el cartón. Cuando el residuo de impresión
permanece estable y activo durante varias semanas. Si latente se coloca sobre tales superficies, las porosidad de
los iones de plata entran en contacto con iones hidroxilo, las superficies causa que el residuo penetre y por lo tanto
(AgOH) se forma hidróxido de plata insoluble, que se cubra una gran área de la superficie; esto entonces expone
convierte en óxido de plata marrón-negro de (Ag2O). más sitios de nucleación (de activación) para el revelado
Hoy en día, la mayoría del papel es alcalino (básico), ya físico de plata que si no se extendiera (como en una super-
que contiene carbonato de calcio (CaCO3) como relleno. ficie no porosa). Además, si están presentes aminas (como
Cuando está mojado, es básico y se vuelve negro cuando en las proteínas), pueden formar enlaces de hidrógeno con
se sumerge en una solución de nitrato de plata y se seca a los grupos de hidroxilo en la celulosa.
un color marrón-negro. En consecuencia, el papel alcalino
El depósito de partículas de plata en el residuo de impresio-
debe ser neutralizado antes de someterlo al revelado físico
nes latentes. En el revelador físico de plata, una nanopartícu-
de plata. Cualquier ácido que no suministre cloruros (que
la de plata recién formada está cargada negativamente
reaccionan con la plata para formar AgCl insoluble) neu-
(debido a los iones de ácido cítrico adheridos) y atrae la “ca-
tralizará el CaCO3. La reacción de neutralización implica la
beza” de la amina positiva (RNH3+) de varias moléculas de
liberación de burbujas de dióxido de carbono:
surfactante, que finalmente envuelven toda la partícula (en la
CaCO3 + 2H+ → Ca2+ + H2O + CO2 (gas) configuración escalonada, mencionada anteriormente). Sin
embargo, la nanopartícula también se siente atraída por el
Los siguientes son los rudimentos de algunos conceptos residuo de impresión latente con carga positiva. Una vez que
que ayudan a explicar cómo el revelador físico de plata una de estas nanopartículas alcanza el residuo, se neutraliza.
visualiza huellas latentes en superficies porosas.
La avalancha de deposición de partículas de plata se pro-
duce en esta partícula inicial (porque cada partícula de plata
La carga de residuos de impresiones latentes (a pH bajo).
es ahora un sitio de la nucleación - efecto autocatalítico) y
Es fortuito que el revelador físico de plata es ácido, con un
crece. El resultado final es una aglomeración de numerosas
pH de aproximadamente 1.38 ya que esto ayuda a explicar
partículas “crecidas” (alrededor de 10 a 40 μ de diámetro) a
por qué funciona en el revelado de las huellas latentes
lo largo del resto de la impresión latente.
sobre superficies porosas. Se sabe (Saunders, 1989) que
cuando el residuo de impresión latente (sobre un sustrato Formulación. La formulación del reactivo revelador físico de
poroso o no poroso) se sumerge en una solución de oro plata dispuesto en la Sección 7.14 es la formulación original
coloidal con pH <3, las nanopartículas de oro coloidal se británica (Kent, 1998), que es muy similar a la formulación
depositan selectivamente sobre el residuo. Esto sugiere holandesa (Jonker et al., 1969, pág. 38-44) utilizada en la
que a un pH <3, el residuo de impresión latente adquiere foto fabricación de tableros de circuito. El procedimiento
una carga positiva. También se sabe que el oro coloidal a para la visualización de las impresiones en superficies
pH bajo se utiliza para “manchar” proteínas y esto ocurre porosas; sin embargo, implica tres etapas: una etapa de
porque, a un pH bajo, los grupos amina en las proteínas tratamiento previo, el paso del revelado físico de plata y
(por ejemplo, R-NH2) adquieren una carga positiva sobre una etapa de tratamiento posterior.
la protonación (R-NH3+). Por lo tanto, una posibilidad es
que el residuo de la impresión latente contenga proteínas

7–50
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

Existen otras formulaciones para los reveladores físicos Water Pretreatment—This is designed to remove dirt and
de plata (Cantu, 2001, pág. 29-64), pero uno que se utiliza soil, if present.
actualmente por muchos se basa en el uso de agua de alta
pureza, como la de las unidades de purificación de agua Pretratamiento ácido—Éste reacciona con el carbonato de
que utilizan tecnologías de ósmosis inversa y desionización calcio en papel alcalino, causando la liberación de dióxido
(el agua se conoce como agua RO/DI). Mediante el uso de carbono en forma de burbujas y neutraliza el papel.
de tal agua, se necesita menos detergente (2.8 g de cada
Tratamiento de revelador físico de plata—Éste se realiza
uno, en lugar de 4.0 g) (Kent, 1998), aunque el rendimiento
bajo la luz tenue para evitar la foto-reducción de iones de
se ve afectado adversamente. Sin embargo, Burow et al.
plata a plata elemental (que se traduce en el revelado de
(2003, pág. 1094-1100) demostró que también se puede
fondo y debilitamiento del reactivo). La bandeja se balan­
reducir la cantidad de otros componentes y terminar con
cea hacia atrás y hacia adelante; dentro de 10 minutos, las
un reactivo que funcione tan bien o mejor que el reactivo
impresiones comienzan a revelarse y continúan con el au­
tradicional (lo hace; sin embargo, implica la adición de ácido
mento de contraste. Un buen revelado se produce dentro
málico al reactivo); la reducción de costos es de aproxi­
de 10-30 minutos.
madamente el 16%. Seifert, Burow, y Ramotowski (desde
el laboratorio forense del Servicio Secreto) mostraron Post-tratamiento de agua—Éste se realiza con agua
(resultados no publicados) que Tween 20 se puede utilizar potable del grifo durante unos 5 minutos para eliminar el
en lugar de Synperonic-N. exceso de revelador físico de plata (y cualquier cloruro de
plata que se pueda formar).
El paso de hipoclorito es un paso de mejora. Hace dos
cosas: ilumina (blanquea) el papel y oscurece la impresión Post-tratamiento de hipoclorito—El tiempo de tratamiento
de plata. La impresión se hace más oscura a través de la es de aproximadamente 2-3 minutos. Esto aligera el fondo
formación de óxido de plata (OCl- + 2Ag Ag2O + Cl- Eoredox y oscurece la impresión de plata.
= 550 mV; véase la Tabla 7-4). Otros métodos de mejora
Lavado y secado—Las muestras se lavan con agua del grifo
son tratados por Cantu (2001, pág. 29-64), así como méto­
y se secan (por ejemplo, mediante el uso de una secadora
dos de blanqueamiento. Un método de blanqueamiento,
de fotografías o por secado al aire sobre papel secante).
utilizado con éxito al mostrar una impresión revelada
encontrada en una impresión altamente marcada, convierte
la impresión de plata en una impresión de yoduro de plata 7.13.3 Métodos de Depósito Multimetálico
blanquecino y se oscurece el fondo a través de la reacción 7.13.3.1 Historia y antecedentes. A finales de la década
de almidón-yodo (Cantu et al., 2003, pág. 164-168). de 1980, el Dr. George Saunders, ya luego con el Labo­
ratorio Nacional de Los Alamos en Los Álamos, Nuevo
7.13.2.2 Aplicación. El procedimiento para utilizar el revela­
México, visitó el laboratorio forense del Servicio Secreto
dor físico de plata involucra tres tratamientos en secuencia
para compartir ideas acerca de las técnicas para el revelado
y en la misma bandeja de vidrio. El último punto es impor­
de huellas dactilares latentes. Presentó una idea novedosa
tante, ya que simplifica el proceso y ahorra tiempo. Se basa
que inicialmente llamó Proceso Universal para la Detección
en el hecho de que el reactivo residual de un tratamiento
de Huellas Dactilares y, más tarde, puesto que se trataba
no afecta el rendimiento del siguiente tratamiento. Los tres
del depósito de dos metales, el Método de Depósito Mul­
tratamientos son el pretratamiento con ácido, el tratamiento
timetálico (MMD). Él basó su idea en un método existente
de revelador físico de plata y el post-tratamiento con hipoclo­
utilizado para la tinción de proteínas, anticuerpos y otras
rito. De vez en cuando, un pretratamiento de agua destilada
macromoléculas (por ejemplo, proteínas separadas en las
precede a estos para eliminar cualquier suciedad o tierra
membranas o geles). Este método de tinción involucró la
de los especímenes. Éste, así como los otros tratamientos,
tinción con oro coloidal (por lo que el oro coloidal se une a
elimina cualquier impresión revelada con ninhidrina y la escri­
la macromolécula) y la mejora (o amplificación) esta “se­
tura o la impresión con tintas solubles en agua (por ejemplo,
ñal” de oro o mancha con un revelador físico de plata.
algunas tintas de pluma con bola de rodillo y tintas de impre­
sión de inyección de tinta). También, un post-tratamiento de La unión de oro coloidal a las proteínas se observó por prim-
agua del grifo se realiza entre el revelado físico de plata y el era vez en 1939 por Kausche y Ruska (1939, pág. 21-24).
post-tratamiento de hipoclorito. Una vez más, todo esto se En 1971, Faulk y Taylor (1971, pág. 1081-1083) utilizaron esta
hace en una bandeja de vidrio.

7–51
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

propiedad para unir el antisuero de la anti Salmonella y lu- de plata. La otra es que el tratamiento con sal de zinc, a
ego el coloide recubierto resultante se utilizó para etiquetar veces hecho después del proceso de ninhidrina, debe ser
la superficie de la bacteria Salmonella. El mecanismo de et- evitado. Los Iones divalentes tales como Zn2+ tienen una
iquetado era detectable a través de la imagen microscópica tendencia a unirse al oro coloidal y, por lo tanto, los iones
de electrones del oro. En 1983, DeMey (1983, pág. 82-112) divalentes atrapados en los poros de la superficie atraen
utilizó el oro sin recubrimiento para teñir directamente las partículas de oro coloidal y toda la superficie está sujeta
proteínas en la superficie de la membrana. También en al revelado físico de plata.
1983, Holgate et al. (1983, pág. 938-944) mostró que una
7.13.3.2 Formulación (MMD). El proceso MMD implica
mancha de oro se puede intensificar con tinción de plata.
dos reactivos utilizados en secuencia: la solución de oro
Básicamente, reconocieron que los coloides de oro son
coloidal y el revelador físico de plata modificado.
(1) partículas negativas altamente cargadas que se unen
a muchas macromoléculas y (2) sitios de activación para Hay dos puntos a considerar con respecto a revelador físico
el revelado físico de plata. Las partículas de oro coloidal de plata modificado: una es que Tween 20, un tensoactivo
adquieren su carga negativa a través de la adsorción de no iónico, se utiliza en lugar de un tensoactivo catiónico
iones de citrato (cada uno lleva tres cargas negativas) en más estabilizador. Cantu y Johnson (2001, pág. 242-247)
su superficie (los iones de citrato provienen del citrato de especulan que esto puede ser debido a que un agente ten-
sodio utilizado en la formulación). soactivo catiónico rodearía partículas de unión de oro (que
todavía llevan algo de carga negativa) y por lo tanto impiden
Saunders sabía que los residuos de la huella dactilar con-
el proceso de revelado físico en ellos. El segundo punto es
tienen macromoléculas como las proteínas y lipoproteínas
que la concentración de iones de plata de la solución activa
y, por lo tanto, deberían poder ser visualizados a través de
es sólo el 0.2% y esta es suficientemente baja e aparien-
la tinción y la mejora de la capacidad del oro coloidal y la
cia para que no ocurra el “ennegrecimiento” (formación de
técnica del revelador físico. Formuló su propia solución de
óxido de plata) en la superficie de papel alcalino (básico). Por
oro coloidal utilizando el método de Frens (Frens, 1973,
lo tanto, no se necesita ningún tratamiento previo con ácido
pág. 20-22) y revelador físico de plata. Llamó a este último
para neutralizar dicho papel (que normalmente contiene
revelador físico modificado para distinguirlo del revelador
carbonato de calcio). La solución de oro coloidal tiene un pH
físico de plata tradicional utilizado para visualizar las impre-
de aproximadamente 2.8 y, por lo tanto, causa una cierta
siones latentes sobre superficies porosas. Al formular sus
neutralización en este tipo de papel, pero los iones de calcio
propios reactivos, fue capaz de optimizarlos. Se encontró
divalente que se generan aparentemente no desestabilizan
que el proceso visualizaba impresiones latentes en superfi-
significativamente la solución de oro (pueden hacerlo en
cies porosas y no porosas; incluyendo superficies como
la superficie donde se forman). Ejemplos de impresiones
vidrio, metal, cerámica y plástico, ya sean oscuros o claros.
latentes reveladas (en una variedad de superficies) mediante
Por lo tanto, el proceso de MMD es básicamente un pro- el proceso de MMD se encuentran en la Figura 7-23.
ceso de revelado físico de plata que está precedido por un
7.13.3.3 Formulación (MMD II). En 1993, el Dr. Bernard
tratamiento con oro coloidal; el tratamiento de oro ofrece al
Schnetz presentó su trabajo, llevado a cabo en el Instituto
residuo de la impresión latente los sitios de nucleación (co-
de Policía Científica y Criminología de la Universidad de
loides de oro) para el revelado físico de plata. Al igual que
Lausana, sobre técnicas bioquímicas para amplificar las
el revelador físico de plata, el proceso de MMD revela los
impresiones latentes tratadas con oro coloidal. Él trató
componentes insolubles en agua del residuo de la impre-
impresiones latentes con oro coloidal, adjuntó una proteína
sión latente (por ejemplo, la porción sebácea del residuo).
a las partículas de oro coloidal (ya unidos a residuos de
Para visualizar las impresiones latentes en superficies po- impresión latente) y los amplificó con enzimas o manchas
rosas con el proceso de MMD, Saunders proporcionó dos que formaran productos coloreados o fluorescentes
observaciones importantes para los usuarios. Una es que, (Schnetz, 1993). En 1997, se informó acerca de una
en superficies porosas, debe hacerse un enjuague extenso actualización de este trabajo y también en su variante del
después del tratamiento con oro coloidal para reducir el proceso de depósito multimetálico (MMD II) (Schnetz,
posible revelado de fondo. Este se debe a que partículas 1997) y en 2001, él y Margot publicaron su trabajo en su
de oro coloidal se quedan atrapadas en los poros y se optimización (Schnetz y Margot, 2001, pág. 21-28). Como
convierten en lugares de activación para el revelado físico en el proceso MMD, éste es un proceso de dos pasos,

7–52
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

FIGURA 7–23
Impresiones latentes visualizadas por el pro­
ceso de MMD en una variedad de superficies.
Superior izquierda: vaina del cartucho de un
revólver. Superior media: lado adhesivo de la
cinta de Mylar negra. Superior derecha: lado
adhesivo de la cinta de flejado de alta resisten­
cia. Media: superficies metálicas de un disco
de computadora de plástico.Inferior izquierda:
etiqueta de papel de un disco de computadora.
Inferior derecha: tarjeta de crédito de plástico.
Observe que las impresiones reveladas apare­
cen oscuras en las superficies de color claro y
tenues en las superficies de color oscuro.

pero utiliza material de vidrio siliconizado, oro coloidal con Como se discutió previamente para el nitrato de plata, la
un tamaño de partícula de 14 nm de diámetro (en compara­ impresión sebácea se resiste a la deposición, y los depósi­
ción con los 30 nm para el oro coloidal de Saunders) y un tos de plata (como un metal de gris a negro) en todas
revelador físico de plata muy diferente del revelador físico partes, excepto cuando existe la huella dactilar. Para ser
de plata modificado de Saunders. más precisos acerca de lo que está ocurriendo, debemos
señalar que el proceso de depósito siempre se acompaña
El Dr. John Brennan, recientemente retirado del Servicio de
de un proceso de grabado. Para la plata en cobre, se
Ciencias Forenses (Londres, Reino Unido), ha utilizado con
depositan iones de plata (proceso de deposición o reduc­
éxito los procesos de MMD y MMD II sobre varios tipos de
ción) mientras se remueven los iones cúpricos proceso de
pruebas y tiende a favorecer el MMD II (J. Brennan,
grabado u oxidación). Hay, sin embargo, procesos de graba­
comunicación privada). La Dra. Naomi Jones presentó en
do que no implican la deposición de metales (por ejemplo,
su tesis doctoral varios métodos de depósito de metales;
el grabado con peróxido de hidrógeno acidificado) (Cantu et
también encontró que el proceso MMD II superó al
al., 1998, pág. 294-298) y estos procesos también se ven
proceso MMD en el rendimiento (Jones, 2002).
obstaculizadas por el material sebáceo.

7.13.4 Reactivos de pavonado Otros métodos de depósito de un metal para revelar huel­
las latentes en los casquillos del cartucho incluyen el uso
7.13.4.1 Historia y antecedentes. El pavonado se utiliza
de paladio (Migron y Mandler, 1997, pág. 986-992) y selenio
para repintar los cañones de una pistola con un brillo
(Bentsen et al., 1996, pág. 3-8). Además de mostrar que el
azulado. Se advierte no dejar huellas dactilares en el
paladio puede revelar impresiones sebáceas sobre metal,
cañón debido a que la solución de pavonado no funcio­
Migron y Mandler hicieron un estudio analítico amplio de
nará allí (Angier, 1936, pág. 6). Bundeskriminalamt (BKA)
cómo funciona el proceso de deposición en las superficies
en Alemania descubrió que esto también es cierto en los
de bronce que contienen grabados sebáceos. El trabajo
cartuchos de bala (Cantú et al., 1998, pág. 294-298). Así fue
de Bentsen y sus colegas en la deposición de selenio es
el nacimiento de soluciones de pavonado para visualizar
similar a lo que hace el pavonado y, por lo tanto, se discute
huellas latentes en superficies metálicas, en particular los
a continuación, junto con el pavonado.
de los cartuchos de bala.
7.13.4.3 Composición general. Hay varios fabricantes
7.13.4.2 Depósito de metal y grabado. El pavonado de
de soluciones de pavonado y no hay dos soluciones que
metales implica la deposición simultánea de dos metales,
tengan exactamente la misma formulación, pero todos
selenio y cobre, en una superficie de metal. El bimetal
contienen los tres ingredientes activos necesarios: ácido
depositado es de color azul-negro.
selenioso, una sal de cobre y un ácido. Una solución

7–53
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

acidificada de ácido selenioso es un reactivo de grabado especímenes metálicos primero (por ejemplo, los casquil-
relativamente fuerte (oxidante), como lo señaló el potencial los) con extracción de CA. La Tabla 7-6 es un resumen de
de oxidación (Tabla 7-4): sus recomendaciones.
o
H2SeO3 + 4H+ + 4e– Se + 3H2O E = +740 mV 7.13.4.5 Aplicación. Desde su introducción por la BKA,
el pavonado se utiliza actualmente en varios laboratorios
Cabe destacar que se necesita ácido (H+) y esta es la debido a su facilidad. Como se mencionó anteriormente,
razón por la que la solución de pavonado también contiene un tratamiento éster de CA antes del pavonado mejora
un ácido. La Tabla 7-4 muestra que una solución ácida de la detección de huellas latentes sobre metal. Después
ácido selenioso puede oxidar y grabar cobre, plomo, níquel, del tratamiento, hay una tendencia a que la solución de
zinc y aluminio. Una solución de iones cúpricos es también pavonado continúe su deposición y se han propuesto
un fuerte reactivo químico de grabado (oxidante) capaz de varios métodos de detención (Cantu et al., 1998, pág.
oxidar plomo, níquel, zinc y aluminio. 294-298). Estos incluyen la inmersión en una solución de
bicarbonato de sodio, la inmersión en barniz transparente
A medida que cada uno de estos reactivos graba, los
(Bentsen et al., 1996, pág. 3-8), la aplicación de un spray de
iones de metal se depositan en lo que está grabado. Por
laca (comunicación privada por parte de Anton Theeuwen y
ejemplo, en aluminio, la reacción de oxidación y reducción
Josita Limborgh, Ministerio de Justicia de los Países Bajos,
(grabado y depósito) es:
Laboratorio de Ciencias Forenses) y el uso de esmalte
3H2SeO3 + 12H+ + 4Al 3Se + 9H2O + 4Al3+ de uñas (comunicación privada por parte de Vici Inlow, del
laboratorio forense del Servicio Secreto).
Eoredox = 2402 mV
Si se produce un revelado excesivo, se recomienda el
o
3Cu2+ + 2Al 3Cu + 2Al3+ E redox
= 2003.9 mV peróxido de hidrógeno acidificado para eliminar el exceso
de depósito pavonado (Cantu et al., 1998, pág. 294-298). Si
Si ambos reactivos están presentes juntos, como en la asumimos que la aleación de cobre de selenio es un aducto
solución de pavonado, entonces la relación del Cu al Se que 1:1, entonces la reacción neta para su eliminación es.
deposita depende de la velocidad (cinética) de cada uno
de los dos reactivos en competencia; es posible que una 3H2O2 + 2H+ + Cu–Se H2SeO3 + Cu2+ + 3H2O
aleación 1:1 de Cu-Se se forme, pero no es seguro. El resul-
Una composición sugerida para la solución de peróxido de
tado final es una capa metálica azul-negra (en todo el lugar
hidrógeno acidificada es 5 volúmenes de vinagre de uso
excepto donde exista una impresión latente sebácea).
doméstico (5% de ácido acético) y 7 volúmenes de peróxi-
La composición de algunas soluciones de pavonado se da do de hidrógeno doméstico (peróxido de hidrógeno al 3%).
en la Tabla 7-5. Cabe destacar que todas involucran ácido Esto se basa en la estequiometría de la ecuación anterior.
selenioso (uno involucra dióxido de selenio, el cual es la Sin embargo, una mezcla 1:1 también funciona bien.
forma anhidra del ácido selenioso), una sal cúprica y un áci-
7.13.4.6 Comentarios sobre el grabado. El grabado sin
do. Curiosamente, Bentsen et al. (1996, pág. 3-8) utilizaron
deposición de metal también puede revelar huellas en su-
una solución de ácido selenioso al 0.4% (sin iones cúpricos
perficies de metal por el contraste entre el fondo grabado
o ácido) para revelar impresiones en superficies metálicas
formado y la impresión latente sin grabar. De la Tabla 7-4 se
tales como cartuchos de bala usados. Esto deposita metal
puede ver que el ácido puede desplazar al hierro, plomo,
de selenio en el metal que está siendo tratado y en esta
níquel, zinc y aluminio. El peróxido de hidrógeno acidi-
solución, junto con el tratamiento éster de cianoacrilato
ficado, sin embargo, también desplazará al cobre. Cantu
al vacío, fue categorizado altamente entre otros métodos
et al. (1998, pág. 294-298) señalaron que el peróxido de hi-
utilizados.
drógeno acidificado visualiza impresiones bastante buenas
7.13.4.4 Formulaciones. Cantu et al. (1998, pág. 294- en muchas superficies metálicas. Proporcionan una larga
298) recomiendan una dilución a 1:80 de una solución de discusión y la explicación de por qué el proceso de grabado
pavonado comercial. Leben y Ramotowski (1996, pág. 8, debe ser vigilado cuidadosamente: los metales que han
10) recomiendan una solución más fuerte (una dilución a quedado grabados en forma de iones pueden volver a
1:40) e indican que una mejora respecto a simplemente depositarse a medida que el proceso continúa.
utilizar el reactivo de pavonado diluido es tratar a los

7–54
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

Tabla 7–5
Composición de algunas soluciones de pavonado*

Fabricante Birchwood-Casey Brownells Outers E. Kettner

Nombre comercial Perma Blue Perma Blue Perma Blue Super Brass Black Aluminum Formula Gunslick Waffen-
Liquid Gun Immersion Paste Gun Blue Metal Black PAB 44/40 Gun Blue Brünierung
Blue PB22 Blue PBIM Blue SBP 2 Extra Touch Up 17 Instant Gun
Strength BB2 Blue
Latón,
Utilizado para Acero Acero Acero Acero Bronce, Aluminio Acero Acero Acero
Cobre
Ácido Selenioso 3 4 2 5 3 4 6
Compuestos
de Selenio Dióxido de Selenio 3

Cloruro cúprico 3
Sal cúprica Nitrato cúprico 4
Sulfato cúprico 3 4 4 8 8 2
Sal de zinc Sulfato de zinc 5
Sal de
Sulfato de níquel 1 2
níquel
Hidroclórico
Nítrico 3 2 4
Ácido Fosfórico 4 4 4 8 3
Fluobórico 2
Amido sulfónico 12
Solución pH (factor de disolución) 2.3 (1/40) N/A(1/40) 1.5 2.3 (1/80) 2.3 (1/40) 2.3 (1/80) 1.8 (1/80) 3.3 (1/40) 2.3 (1/80)

Polietileno estearil éter 15

Octilfenoxi polietoxietanol 1
Other
Moldibdato de amonio 4

Bifluoruro de amonio 1

*Todas las concentraciones están en su máximo porcentaje. Excepto para el pH, toda la información se obtuvo de las hojas de información del Material de Seguridad.

Tabla 7–6
Resumen de los protocolos recomendados para tratar casquillos de cartuchos.

Suggested Treatment
Cartridge Type Gun Blue (GB) Dilution Comments
After Superglue
Otras soluciones también funcionaron bien
Latón niquelado Negro latón 1 ml GB en 40 ml de agua destilada
en estos casquillos.
Formula 44/40 Instant Otras soluciones también funcionaron bien
Brass 0.5 mL GB in 40 mL distilled water
Gun Blue en estos casquillos.
Ninguna de las soluciones de pavonado
Acero lacado Súper pegamento únicamente
produjeron detalles identificables.
This is the only solution that worked on this
Aluminum Aluminum Black 0.5 mL GB in 40 mL distilled water
metal.

7–55
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

Schütz et al. (2000, pág. 65-68) compararon el método de detalle de las crestas de fricción y el fondo del producto.
grabado y el de pavonado con el método de deposición Debido al color azul-negro de la mancha de tinte, habrá una
multimetálico en su capacidad para revelar las huellas falta de contraste entre el detalle de las crestas de fricción
latentes sobre cartuchos. Ellos encontraron que (1) el y los productos de colores oscuros. Se recomienda que
pavonado sobresalió en la visualización de las impresiones otras técnicas de procesamiento se utilicen en estos pro-
sebáceas en los casquillos de latón, (2) para los casquillos ductos (Stone y Metzger, 1981, pág. 13-14).
de aluminio, el MMD funcionó mejor (el paso del revelador
físico modificado realizado después de la etapa de oro co- Las impresiones procesadas con negro Sudán seco se
loidal, reveló el contraste de la impresión) y (3) no funcionó han levantado utilizando cinta de levantamiento conven-
bien para los casquillos de acero lacado. Para este último, cional (tal como se utiliza con la técnica de procesamiento
recomiendan extracción de CA. de polvo). Se ha tenido éxito en recubiertos de cera, brillo-
sos y sustratos lisos. Sin embargo, ha tenido menos éxito
en sustratos fuertemente contaminados, desiguales, y
7.13.5 Negro Sudán B
semiporosos.
7.13.5.1 Historia y antecedentes. El negro Sudán B (aquí
referido como negro Sudán) fue utilizado inicialmente en 7.13.5.2 Validación del reactivo y técnica de aplicación.
los laboratorios para pruebas biológicas o cribado químico Como en la aplicación de todos los reactivos y procesos,
para los componentes grasos (Figura 7-24). La reacción se sugiere que la solución de negro Sudán sea validada
produce un producto o imagen azul-negra. El negro Sudán antes de su uso. Para validar la solución, se debe contami-
se reportó inicialmente para su uso como una técnica de nar un sustrato no poroso con la matriz específica (por
revelado de crestas de fricción en 1980 por Mitsui, Katho, ejemplo, sebácea-grasa-, fructosa-, sacarosa- o detalles
Shimada, y Wakasugi del Laboratorio de Ciencia Criminal o materiales de las crestas de fricción contaminados con
en Nagoya-shi, Japón (Mitsui et al, 1980, pág. 9-10;. 1981, alimentos), a continuación, aplicar la solución de negro
pág. 84-85). Sudán al sustrato en el manera se señala más adelante. Si
no se observa reacción, la solución o la matriz de validación
El negro Sudán es una mancha de colorante utilizada para requieren una evaluación adicional. Es una buena práctica
la detección de componentes sebáceos en residuos de para familiarizarse con la técnica de aplicación y la reacción
la piel sobre las crestas de fricción en algunos sustratos o reacciones con el sustrato y la matriz antes de aplicarlos
no porosos y semiporosos (por ejemplo, guantes de látex a las pruebas.
y algunas cerámicas) (Figura 7-25). Esta mancha de tinte
también detecta el detalle de la cresta de fricción en la Revisar las fichas de seguridad referentes a la seguridad,
piel donde ésta o el sustrato que hayan sido contaminados manipulación y almacenamiento de información.
con grasa, residuos de alimentos o depósitos secos de re-
7.13.5.3 Solución de reactivo. La solución del reactivo
frescos o bebidas endulzadas (por ejemplo, por fructosa o
consta de 15 g de negro Sudán disueltos en 1 L de etanol
sacarosa). También se ha usado para incrementar el detalle
o metanol, creando una solución de color azul-negro, la
de la cresta de fricción tratada previamente por la técnica
cual se añade a continuación a 500 ml de agua destilada y
de extracción de CA.
se agita hasta que esté completamente mezclada. La vida
Tendrán que ser considerados el color y la porosidad del útil de la solución es indefinida.
sustrato. Los sustratos porosos tienden a absorber el
7.13.5.4 Metodología secuencial y técnica de procesa-
colorante, lo que resulta en una falta de contraste entre el
miento. Antes de procesamiento con negro Sudán, se

FIGURA 7–24 N N N N NH CH3

Estructura química
del negro Sudán. NH CH3

7–56
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

FIGURA 7–25
Detalle de la cresta de fricción sebácea
en un sustrato de plástico procesado con
negro Sudán.

debe ver el producto con una fuente de luz forense para

7.14 Formulaciones para Soluciones
detectar cualquier fluorescencia inherente del residuo de
las crestas de fricción o del sustrato. Se debe fotografiar Químicas
cualquier detalle visible.

• Colocar la solución de negro Sudán en un vaso limpio 7.14.1 Ninhidrina (Kent, 1998; Champod et al,
o un plato de metal, verter una cantidad suficiente 2004, pág. 239)
para sumergir el producto que se está procesando. La
Solución base: 25 g de ninhidrina disuelta en 225 ml de
solución también se puede aplicar por aspersión. Se
etanol absoluto, 10 ml de acetato de etilo, 25 ml de ácido
recomienda que la técnica de inmersión se utilice para
acético glacial.
evitar la inhalación de partículas en el aire del aspersor.
Solución activa: 52 ml de solución base diluidos a 1000 ml
• Dejar que el producto se sumerja en la solución
con HFE 7100.
durante aproximadamente 2 minutos. Si el producto
ha sido previamente procesado utilizando la técnica de
extracción de CA, el producto puede requerir mayor 7.14.2 Solución de Cloruro de Zinc (Champod
tiempo de inmersión en la solución. et al., 2004, pág. 240)
• Enjuagar el producto bajo agua potable fresca o fría del Solución base: 8 g de cloruro de zinc disuelto en 180 ml de
grifo de forma lenta, o colocar el producto en un plato etanol, 20 ml de ácido acético glacial.
limpio que contiene agua fresca o fría hasta que se
Solución activa: 6 ml de solución base diluida en 100 ml
retire el exceso de tinte del fondo.
con disolvente portador (por ejemplo, HFE 7100).
• Dejar que se seque producto a temperatura ambiente.
7.14.3 1,8-Diazafluoreno-9-uno (DFO) (Kent,
• Ver la imagen azul-negro revelada; las imágenes débiles 1998; Champod et al, 2004, pág. 230)
han sido mejoradas por un segundo tratamiento con la
solución de negro Sudán (seguir los pasos anteriores 0.25 g de DFO disuelto en 30 ml de metanol y 20 ml de
de la aplicación). Se sugiere que el producto se observe ácido acético glacial. Agregar esto a 725 ml de HFE 7100 y
con una fuente de luz forense después del procesa­ 275 ml de HFE 71DE.
miento con negro Sudán debido a que el fondo puede
emitir fluorescencia, creando un contraste mejorado. 7.14.4 Ninhidrina no Polar (Stimac, 2003a,
pág. 185-197)
• Cualquiera de las imágenes reveladas necesitarán ser
fotografiadas para propósitos de comparación, docu­ Solución base: 1.5 g de ninhidrina disueltos en 100 ml de
mentación y archivo. HFE 71IPA (puede requerir reflujo a baja temperatura).

Solución activa: 15 ml de solución base diluida con 100 ml

de HFE 7100.

7–57
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

7.14.5 1,2-Indanodiona Solución activa: 900 ml de solución base # 1. Añadir 40 ml

de solución base # 2 y agitar durante 5 minutos. Añadir 50
0.25 g de 1,2-indanodiona disueltos en 90 ml de acetato de ml de solución base # 3 y agitar durante 5 minutos. La vida
etilo y 10 ml de ácido acético glacial. Añadir esto a 1 L de en almacenamiento es de 1-2 semanas.
HFE 7100 (Merrick et al., 2002, pág. 595-605).
Solución de post-tratamiento de hipoclorito: 100 ml de
ó cloro de uso doméstico (~6% de NaOCl) se mezcla con
100 ml de agua.
2 g de 1,2-indanodiona disueltos en 70 ml de acetato de
etilo. Añadir esto a 1 L HFE 7100
7.14.10 Depósito Muiltimetálico (Saunders,
(Almog et al., 1999, pág. 114-118). 1989, 1996, 1997)
Solución de oro coloidal
7.14.6 5-Metiltioninhidrina (5-MTN)
(Wallace-Kunkel et al., 2006, pág. 4-13) Solución base # 1: 10% (p/v) de ácido tetracloroaurico
(HAuCl4.3H2O) en agua de alta pureza (RO/DI).
1.7 g de 5-MTN disueltos en 52.5 ml de acetato de etilo, 50
ml de metil tert-butil éter, 12.5 ml de etanol absoluto y 5 ml Solución base # 2: 1% (p/v) de citrato trisódico
de ácido acético glacial. Agregar esto a 360 ml de HFE 7100. (Na3Cit.2H2O) en agua de alta pureza.

7.14.7 2-Isononilninhidrina (INON, Therma- Solución base # 3: 0.5 M (10.5% p/v) de ácido cítrico
(H3Cit.H2O) en agua de alta pureza.
nin) (Al Mandhri y Khanmy-Vital, 2005)
4-5 g de INON disueltos en 15 ml de acetato de etilo, 5 ml Solución base # 4: 1% de glicol de polietileno.
de isopropanol y 980 ml de HFE 7100.
Solución activa: Añadir 1 ml de solución base # 1 a 1 L de
agua de alta pureza y someter a ebullición. Añadir rápida-
7.14.8 Nitrato de Plata (Trozzi et al., 2000, mente 10 ml de solución base # 2 y hervir ligeramente
pág. 38-39) durante 10 minutos. Añadir 5 ml de Tween 20 (o Tween 80)
Disolver 30 g de nitrato de plata en 1 L de agua destilada. y mezclar bien. Añadir 10 ml de solución base # 4 a la solu-
ción enfriada y ajustar el pH a 27 usando solución base # 3.
ó Restaurar un volumen total de 1 L de agua de alta pureza.
La vida en almacenamiento es de 3 meses.
Disolver 30 g de nitrato de plata en 100 ml de agua desti-
lada y añadir a 1 L de etanol. Solución modificada del revelador físico de plata

Solución base # 1: Disolver 33 g de nitrato férrico nonahi-

7.14.9 Revelador Físico (Kent, 1998)
drato en 1 L de agua de alta pureza. Añadir 89 g de sulfato
Pretratamiento ácido: se disuelven 30 g de ácido maléico en de amonio ferroso hexahidratado a la solución. Añadir 22 g
1 L de agua destilada. Vida en almacenamiento indefinida. de ácido cítrico a la solución. Añadir 1 ml de Tween 20 a la
solución.
Solución base # 1: 30 g de nitrato férrico nonahidrato
disueltos en 900 ml de agua destilada. 80 g de sulfato de Solución base # 2: 20% (p/v) de nitrato de plata en agua de
amonio ferroso hexahidratado disuelto en esta solución. 20 alta pureza.
g de ácido cítrico anhidro disuelto en esta solución. La en
almacenamiento puede ser de varios meses. Solución activa: Añadir 1 parte de la solución base # 2 a
99 partes de la solución # 1. Sólo es estable durante 15
Solución base # 2: 4 g de acetato de n-dodecilamina disueltos minutos.
en 1 L de agua destilada. 4 g (4 ml) de Synperonic N fueron
añadidos a esta solución. Vida en almacenamiento indefinida. Aplicación

Solución base #3: 20 g de nitrato de plata disueltos en 100 Prelavado: Los productos porosos se deben lavar varias
ml de agua destilada. Vida en almacenamiento indefinida. veces en agua de alta pureza.

7–58
 Desarrollo de la Impresión Latente CAPÍTULO 7

Oro coloidal: Remojar los productos en la solución de oro 4°C. Antes de usar, llevarla a temperatura ambiente, añadir
coloidal durante 30-120 minutos, pero evitar el revelado 0.5 ml de Tween 20 (o Tween 80) y ajustar el pH a 2.7 con
excesivo. solución base # 3.

Entre el enjuague: Enjuagar los productos en agua de alta Solución del revelador físico de plata
pureza. Para productos porosos, utilizar varios cambios de
Solución base # 1: 24 partes al 25.5% (p / v) de solución
agua durante 15 minutos o más.
de ácido cítrico, 22 partes de solución de citrato de sodio al
Reveladores físicos de plata: Colocar los productos en la 23.5% y 50 partes de agua de alta pureza. Ajustar el pH a
solución recién hecha. La amplificación de plata se produce 3.8 con ácido cítrico adicional o con solución de citrato de
dentro de 10 a 15 minutos. sodio.

Post-lavado: Enjuagar con agua del grifo. Deje secar al aire. Solución base # 2: 0.2% (p / v) de solución de acetato de
plata.
7.14.11 MMD II (Schnetz y Margot, 2001, pág.
Solución base # 3: 0.5% (p / v) hidroquinona en solución
21-28) base # 1.
Silanización de cristalería
Solución de enjuague: 0.25% (p / v) hidroquinona (1 parte
Sumergir la cristalería durante 8 horas en 10% de Extran solución base # 3 y 1 parte de agua de alta pureza).
MA 01 líquido alcalino (Merck). Enjuagar con agua caliente
Solución activa: Una parte de solución base # 2 y una parte
de alta pureza y luego con agua fría de alta pureza. Secar
de solución base # 3. Es inestable, por lo que se debe
en un horno a 100 ° C. Remojar durante 5 segundos en 2%
preparar justo antes de su uso.
(v/v) de 3-aminopropiltrietoxisilano en acetona. Enjuagar
dos veces con acetona, después con agua. Secar en un Aplicación
horno a 42°C durante 8 horas.
Prelavado: Los productos porosos se deben lavar con agua
Solución de oro coloidal de alta pureza durante 2 minutos. Los productos no porosos
necesitan sólo un breve lavado en agua de alta pureza.
Solución base # 1: 10% (p/v) de ácido tetracloroaurico en
agua de alta pureza. Oro coloidal: Remojar los productos en solución de oro coloi­
dal durante 5-15 minutos con agitación suave.
Solución base # 2: 1% (w/v) citrato de sodio en agua de alta
pureza. Entre el enjuague: Enjuagar brevemente en agua de alta
pureza.
Solución base # 3: 0.5 M de ácido cítrico en agua de alta
pureza. Entre el enjuague de hidroquinona: Enjuagar durante 2-5
minutos en solución de enjuague de hidroquinona.
Solución Base # 4: 1% (p/v) de ácido tánico en agua de alta
pureza. Revelador físico de plata: Colocar los artículos en revelador
físico de plata por unos 18 minutos.
Solución activa # 1: Añadir 0.5 ml de solución base # 1 a 400
ml de agua de alta pureza. Calentar a 60°C. Post-lavado: Enjuagar con agua de alta pureza.

Solución activa # 2: Añadir 20 ml de solución base # 2 y 0.1 Fijación: Fijar con dilución al 1:9 de fijador fotográfico du­
ml de solución base # 4 a 75 ml de agua de alta pureza. rante 2-5 minutos, enjuagar con agua del grifo, secar al aire.
Calentar a 60°C.

Una vez que ambas soluciones alcanzan los 60°C, añadir

rápidamente solución activa # 2 para trabajar la solución # 1
7.15 Revisores
y mezclar enérgicamente. Calentar la mezcla hasta la ebul­ Los revisores que participaron en este capítulo fueron
lición, enfriar y ajustar a 500 ml con agua de alta pureza. La Christophe Champod, Sue Manci Coppejans, Christine L.
solución puede ser almacenada en una botella de plástico a

7–59
CAPÍTULO 7 Desarrollo de la Impresión Latente

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