Biología celular
Proyecto de laboratorio
Primer acercamiento al reconocimiento de Microhongos
Juan Sebastian Diagama Rosas
Lizeth Andrea Quiroga Zamora
Temática.
Los hongos, de forma masiva son considerados un reino natural en sí, poseen relación con
las plantas y un comportamiento de tipo parasitario en algunos casos y en otros son
descomponedores. No poseen clorofila pero en algunas especies tallo, se reproducen
principalmente de manera asexual por esporas y poseen tamaños en extremo diversos.
Desde este apartado se realizará un primer acercamiento al estudio y reconocimiento de los
“hongos” en sentido de especímenes microscópicos, enfocándose principalmente en sus
estructuras morfológicas.
Resumen.
En el presente documento, se presenta la información pertinente para el acercamiento a los
microhongos, como los resultados obtenidos en la práctica de laboratorio realizada en
conjunto este trabajo escrito. Se pudieron observar aproximadamente 5 microhongos
diferentes hallados en cultivos agar sabouraud casero, con su estructura morfológica bien
definida. Además, se intentó realizar la categorización de dichos hongos con el uso de claves
de reconocimiento.
Palabras clave: fungi, microhongos, parasitario, cultivo, esporas.
Introducción.
En el presente documento se abordarán los aspectos generales para el estudio de los hongos,
desde aspectos históricos y teóricos, hasta lineamientos para comenzar el reconocimiento de
los mismos en el apartado de los microhongos.
El tema de reconocimiento de hongos fue elegido, con el fin de realizar un primer
acercamiento al estudio de los mismos, necesario para poder abordar el área de la botánica
en su primera instancia, sin dejar de lado el interés propio sobre el tema.
Primeramente se abordarán todos los aspectos teóricos pertinentes, entendiendo el poco
estudio que ha sido realizado sobre dicho reino natural, seguido del trabajo de laboratorio que
se realizó para este proyecto, exponiendo los resultados encontrados.
Finalmente dichos resultados de laboratorio serán tomados de la práctica de cultivo y
reconocimiento de microhongos, comparando asimismo, la efectividad de dichos cultivos.
● Cultivo y reconocimiento de microhongos en dos medios de agar Sabouraud casero.
Con ello se planea comprender manera general la composición, comportamiento y estructura
morfológica del reino fungi.
Objetivo general.
-Identificar los diferentes tipos de hongos y su morfología en los diferentes medios de
cultivos expuestos a distintos entornos.
Objetivos específicos.
-Identificar las diferentes estructuras de los hongos mediante el uso y montaje con
azul de metileno
-Comprender y aprender en primera instancia los diferentes medios de crecimiento
de los microhongos.
Marco teórico.
1.1 Generalidades
los hongos constituyen el segundo grupo de organismos con mayor número de especies,
después de los insectos,y el menos conocido de los organismos eucarióticos, con menos del
5% (69.000) de especies descritas en total de 1.5 millones hipotetizadas ( hawksworth,1991)
son un grupo diverso de organismos unicelulares y pluricelulares (eucariotas) que se
alimentan de la absorción directa de nutrientes (heterótrofos),los alimentos se disuelven
mediante enzimas que secretan los hongos,después son absorbidos a través de la fina pared
de la célula y se distribuyen por difusión simple por el citoplasma, al igual que las bacterias,los
hongos son los causantes de la descomposición de toda la materia orgánica. (Bartha R,
2002).
se dividen en macroscopicos y microscopicos, en el caso de los hongos los microhongos en
su mayoría pertenecen a la familia de los ascomicetes, en general son tan pequeños que solo
se pueden ver con lupa o microscopio.
Estructura
los fungi carecen de tejidos epiteliales, conjuntivos,nerviosos,parénquimas,reserva, etc, ni
poseen ninguno de los tejidos especializados en una determinada función que forman las
plantas y los animales.En realidad los hongos están formados por un conjunto de células más
o menos alargadas y dispuestas unas tras de otra formando como hilos aglomerados
conocidos como “hifas”(Courtecuisse, Duhem. 2000)
a nivel celular,los hongos carecen de plastidios, por lo que no realizan fotosíntesis,su pared
contiene quitina (polisacárido nitrogenado) y almacenan glucógeno en sus células como
compuesto de reserva,en el citoplasma se distinguen microfibrillas formadas por polisacáridos
formando una especie de retículos, la membrana celular tiene ergosteroles, algunos
medicamentos antifúngicos actúan frente a este. por otro lado, los microcuerpos son
estructuras que contienen diferentes enzimas,los cuerpo woronin regulan el paso de material
citoplasmático. Los quitosomas son estructuras esféricas que transportan enzimas que
sintetizan quintina. los lomasomas están relacionados con la síntesis de pared celular y
excreción. (biologia celula 2009. sexto semestres,componente propedéutico)
El tamaño de los hongos varía considerable, algunos son unicelulares como las levaduras
(Alexopoulos, 1996) y los quitridios,pero la mayoría presenta un cuerpo vegetativos
compuesto por filamentos microscópicos ramificados llamados hifas,son tubos largos y
finos,el conjunto de hifas se denomina micelio. Las hifas pueden, o no, presentar septos, los
cuales están perforados de distinta forma según el grupo de hongos. En la producción de un
plecténquima es un conjunto de hifas entrelazadas que se asemeja a un tejido. Se dice
prosénquima si las hifas pueden ser reconocidas y pseudoparénquima cuando han perdido
su individualidad.Por otro lado, es necesario mencionar que la parte que vemos de los hongos
en los jardines o en el bosque, llamadas setas, orejas de mono o palo, corales, estrellas de
tierra, etc., son sólo una pequeña porción de un enorme hongo
(micelio) que va creciendo desapercibidamente debajo de la tierra.
Morfología de los hongos
Los hongos están formados por dos estructuras principales: el micelio y las esporas.
El Micelio,consta de una masa de filamentos llamadas hifas que se entrecruzan las cuales le
dan un aspecto algodonoso, lanoso o aterciopelado del moho. Las hifas según la función que
realizan, pueden ser: vegetativas cuando son las encargadas de suministrar el alimento del
medio) y fértiles (cuando tienen fines reproductivos o sea, producen conidios o esporas). Las
hifas pueden presentar tabiques transversales llamados septos. Existen especies de mohos
que no son tabicados.
Las Esporas, son los órganos que proporcionan color a la colonia y pueden ser: negros,
verdes, azules, marrón, etc. Además son los órganos encargados de la reproducción ya sea
sexual (en los cuales intervienen órganos masculinos y órganos femeninos) o asexual (se
producen a partir de una parte del hongo, el tallo, o de sus esporas). Las esporas presentan
diferentes formas: de huso, ovalada, granada y otras.(Susan 2000).
Los hongos presentan básicamente dos tipos de morfologías: una multicelular denominada
filamentosa y otra unicelular denominada levaduriforme (Figura 1). Los hongos filamentosos
(miceliares o mohos), representan el crecimiento más típico de los hongos microscópicos. En
medios de cultivo sólidos y también sobre cualquier superficie en la que se desarrollen, por
ejemplo frutas u otros alimentos (Figura 2), producen colonias algodonosas o pulverulentas
que son muy características. Al microscopio óptico, los hongos filamentosos presentan unas
estructuras tubulares, formadas por múltiples células, que se denominan hifas.
Figura 2. Crecimiento fúngico sobre una naranja. Figura 2. Aspecto colonial de hongos que presentan
. crecimiento filamentoso (F) y levaduriforme (L).
Formas de vida
los hongos contribuyen en gran parte al equilibrio ecológico del planeta.Estos órganos
desprovistos de clorofila e incapaces de sintetizar los glúcidos que necesitan para vivir,han
desarrollado tres sistemas de vida.
Los hongos saprobios o saprofitos, descomponen y absorben los nutrientes de la materia
orgánica no viviente, como: troncos caídos, cadáveres de animales, palitos, hojarasca, entre
otros restos de organismos vivos. Para este grupo se mencionan los siguientes géneros:
Auricularia (orejas de mono), crecen sobre troncos descompuestos, muchos son comestibles
y utilizados por sus propiedades medicinales en la China.
Cyathus, cuyas formas son semejantes a pequeños nidos de pájaro y crecen sobre palitos o
pequeños troncos descompuestos.
Los hongos parásitos absorben los nutrientes de las células de sus huéspedes, ya sean
plantas, animales o al mismo hombre. Algunos de estos hongos, son patógenos ya que
son los responsables de cerca del 80% de las enfermedades en las plantas.
Entre algunas especies parásitas están :
El género Cordiceps, (Ascomycetes) se caracteriza por infectar el interior de los insectos,
desarrollando un micelio dentro del organismo de estos y consumiendo a su vez todos los
nutrientes hasta dejarlo sin vida, posteriormente se forma un cuerpo fructífero que traspasa
el cuerpo del insecto. Cordiceps sinensis, es la especie más conocida y consumida en países
asiáticos por sus excelentes propiedades medicinales (anticancerígeno, antitumoral y mejora
el rendimiento físico).
Laboulbeniales, un grupo diminuto de hongos ectoparásitos, altamente especializados con
algunas familias de insectos. Por ejemplo, Stigmatomyces betellae ha sido encontrada
parasitando las alas de una especie de mosca de la familia Ephydridae.
por último están los simbióticos o micorrízicos, viven en asociación con alguna especie
vegetal (normalmente árboles), obteniendo ambos beneficios mutuo.estos hongos sirven
rodeando las parte más fina de las raíces de los árboles, envolviendolas y alimentándose de
exudados radiculares. estos exudados radiculares aportan al hongo los glúcidos que necesita
para vivir (Saenz, 2004)
Entre estos se encuentran los Líquenes,conocidos también como hongos liquenizados, son
resultantes de la unión (simbiosis) de organismos fotosintéticos (algas verdes o
cianobacterias) con las hifas de un hongo (Ascomycete generalmente), en el cual, el hongo
protege al alga y ésta le proporciona nutrientes, a través de la fotosíntesis.
Las Micorrizas es otro tipo de simbiosis, es muy importante en los sistemas naturales y para
la agricultura, ya que la mayoría de las plantas vasculares tienen micorrizas y dependen de
la asociación con un hongo, para captar minerales y otros nutrientes del
suelo. Las micorrizas se forman a través de la unión de las hifas de los hongos con las raíces
o rizomas de plantas.(Baseia, I.G. 2005)
clasificación
el reino de los hongos se encuentra dividido en los phylum Chydiomycota, Zygomycota,
Ascomycota, Basidiomycota y hongos microscópicos (Muelles, 2004, Carlile 2006)
Los Phylum Chytridiomycota poseen células flageladas en su ciclo de vida (zoosporas) y se
clasifican según estas, poseen micelio cenocítico, talo holo o eucárpico. reproducción sexual
o asexual gracias al esporangio. sus paredes celulares se componen principalmente de
quitina y glucano.
Esporas de Synchytrium endobioticum, un hongo parásito, en tubérculos de papa.
tomado de : Simmons 2005
Los Phylum Zygomycota, su micelio es cenocítico,producen esporas sexuales denominada
zigosporas que se desarrollan en el zigosporangio. Algunos como Rhizopus tienen órganos
de fijación denominadas rizoides. Su pared celular compuesta de quitina, quitosano y acido
poligalacturónico
mucor. perteneciente a la familia zygomycota
fuente: universidad de Adelaide 2006
.
Phylum Ascomycota, sus hifas son septadas con un poro, a ambos lados de la cual puede
observarse sendos “cuerpos de woronin” poseen ascosporas dentro de ascas, estas ascas
provienen de un ascogonio y en general están dispuestas en una capa de células similares y
en estructuras características denominadas cleistotecio, peritecio o apotecio. sus paredes
están compuestas de quitina principalmente.
chaetomium perteneciente a la familia ascomycota
fuente:Sutton 2000
Basidiomycota, este grupo se caracteriza por presentar basidiosporas que se producen en
basidios, la forma del basidio juega un papel fundamental en la clasificación, aquellos que
tienen septos se clasifican en phragmobasidiomycetes y aquellos sin septos en
homobasidiomycetes. el cuerpo fructífero sexual se denomina basidiocarpo, sus hifas son
septadas y los septos son simples o con doliporos.
Hifas con fíbulas del Craterellus tubaeformis
.
los hongos mitospóricos, se conocen como hongos imperfectos y después como
Deuteromycetes. se denominaron imperfectos por su ausencia de una fase sexual de su ciclo
de vida y se conocen como hongos microscópicos por que sus esporas se reproducen por
división nuclear mitótica. las hifas son septada, la mayoría son anamorfos y sus
conidiosporas se conocen como conidios, los cuales pueden ser de dos tipo; tallicos si
proviene de la segmentación de segmentos preexistentes de las hifas y blástico cuando hay
alargamiento del conidio inicial de septarse.
otros organismos parecidos a los hongos pertenecen al phylum oomycota. reino Straminipila,
estos son patógenos para las plantas, poseen hifas y mecanismos de infección similares a
los hongos. sus paredes celulares se componen principalmente de glucano, su núcleo es
diploide( Deacon,J. 2006) .
de igual forma ocurre con los hongos mucilaginosos conformado por los Myxomycetes,
Plasmodiophoromycota, Dictyosteliomycota y Acrasiomycota, estos organismos se
caracterizan por no tener pared celular, presentan más de dos núcleos, y algunos, se mueven
mediante flagelos.
orden de caracteres para identificación en hongos
-aspecto macroscópico de la colonia
-tipo de hifa
-presencia de esterigmas o conidióforos, el orden que presentan
-forma y distribución de las esporas
-presencia o no de rizoides. solo se presentan en hongos de hifa no septadas
-presentar pruebas de comparación con claves.
Materiales y metodología.
● Microscopio
● Laminas y laminillas
● Asa bacteriológica
● Azul de metileno
● Mechero bunsen
● Guantes
● Tapabocas
● Cuchillas
● Claves de identificación de microhongos.
● Cultivos de agar Sabouraud casero
>Microhongos
● Una semana antes de realizar la práctica se debe iniciar el cultivo de hongos en un
medio de agar Sabouraud casero o químico.
>(https://doityourselfscience.wordpress.com/2011/04/11/como-preparar-un-medio-
de-cultivo-casero/)
● Encienda el mechero bunsen, procurando dejar las cajas de petri al lado para quemar
las esporas por seguridad.
● Describa el aspecto externo de cada colonia observada.
● Con sumo cuidado y apoyándose de una asa bacteriológica, extraer diversas
muestras del cultivo, procurando que sean de diversas colonias fúngicas.
● Depositar la muestra tomada en una lámina (portaobjetos) y adicionar 1 gota de azul
de metileno, procurando cubrir muy bien la muestra, ponga una laminilla
(cubreobjetos). Luego de 1 minuto con el azul de metileno, lavar muy bien el
excedente de tinte.
● Ponga la muestra en el microscopio y observe de 4x-40x
● Con ayuda de claves, trate de identificar los hongos observados.
Resultados y discusión.
Figura 1. Primer cultivo de agar sabouraud con un hongo
masivo que cubre la mayor parte de la caja de petri.
Figura 2. Segundo cultivo de agar sabouraud, posee 3
hongos visiblemente diferentes y dos hongos unidos en la
zona superior derecha.
Figura 3. Primer hongo 4x: apariencia blanca verdosa, de
textura rugosa y blando. Se observa en la imagen una gran
masa. En el extremo inferior, ya se notan filamentos del
extremo del hongo, asimismo durante toda la muestra se ven
espacios más claros, donde la masa del hongo es menos
abundante.
Figura 4. Primer hongo 10x: se enfocó la zona inferior de la
muestra, se logra observar de manera sencilla, aunque no
detallada, la estructura de hifas, que componen al hongo.
Aún no se puede identificar.
Figura 5. Primer hongo 40x: se logra apreciar
completamente la estructura de las hifas, las cuales son
cenocíticas, hay muy pocos esporangios y presencia de
esporas. El hongo se identifica como: Rhizopus sp. Moho
de pan.
Figura 6. Segundo hongo 4x: de apariencia negra café,
muy liso y semi rigido. Se observa una masa muy densa
en la zona superior y estructura más abierta en la zona
inferior, ya se ve filamentada completamente. Posee un
gran tamaño, pues se aprecian las hifas de forma sencilla
aunque, no se puede apreciar su estructura.
Figura 7. Segundo hongo 10x: se considera que en la
muestra hay dos hongos, pues como se aprecia en la
figura 2, hay como mínimo dos hongos combinados en
uno de los fragmentos. El hongo que se trató de identificar
fue el más pequeño y de hifas delgadas, de este mismo
se aprecian las esporas, esporangios y esporangióforos
de manera directa.
Figura 8. Segundo hongo 40x: hifas perfectamente
visibles, muy delgadas y poco abundantes, de tipo
cenocíticas se encuentra encapsuladas en una
membrana estructural junto a las esporas de tamaño
pequeño, además de esporangios y esporangióforos. Por
su estructura semejante y su color, el hongo se identifica
como:
Wallemia sp. Hongo común en medios muy dulces o
salados como el cultivo de agar.
Figura 9. Tercer hongo 4x: apariencia verdosa y rugosa,
muy blando. Se aprecia con suma facilidad las colonias
de hifas dando estructura al micelio del hongo.
Figura 10. Tercer hongo en 10x: se observa un cúmulo
de hifas muy escasas de estructura cenocítica, hay
grandes esporas por toda la muestra, se especula que es
un hongo diferente.
Figura 11. Tercer hongo 40x: como ya se ha señalado
antes, sus hifas son poco abundantes, aunque de gran
longitud, son cenocíticas y están rodeadas de una
cantidad muy abundante de esporas. Por sus pocas y
alargadas hifas, sumado a su cantidad enorme de
esporas, el hongo se identifica como:
Scopulariopsis sp. Hongo común de las plantas.
Figura 12. Hongo no identificado a primera vista, se
encontraba junto al tercer hongo. Sus hifas son septadas,
alargadas y muy abundantes, no se aprecian esporas,
pues estas son del hongo anterior, no hay esporangios ni
esporangióforos. Por la estructura de sus hifas y la
ausencia de aparato reproductor de esporas, la especie
se identifica como:
Aureobasidium sp. Hongo común de las plantas y
cercano a las levaduras en composición y
comportamiento, no es dañino para su huésped.
Figura 13. Cuarto hongo 4x: de apariencia rojiza fuerte,
textura lisa y semi rigido. Se ven masas de hifas muy
abundantes encapsuladas en diversos grupos, hay
algunas esporas apreciables.
Figura 14. Cuarto hongo 10x: nuevamente se presenta el
problema de tener dos posibles hongos en la misma
muestra, uno de hifas posiblemente septadas y el otro de
hifas cenocíticas más abundantes que el de septadas,
asimismo se aprecian esporas.
Figura 15. Cuarto hongo 40x: por la longitud de sus hifas
de tipo cenocíticas, la ausencia de esporangios y
esporangióforos, y que las esporas presentes son muy
grandes a comparación de las hifas, ya que las esporas
de dicha especie son más pequeñas y en media luna, el
hongo se identifica como:
Fusarium sp. Hongo común de la microbiota del suelo.
Figura 16. Hongo secundario de la cuarta muestra,
claramente se trata de Wallemia sp. se aprecia
fácilmente en su estructura y se sabe, ya que el hongo
rojo y el hongo negro se encontraban juntos en la caja de
petri.
Figura 17. Quinto hongo 4x: el hongo se observa de tono
gris blanquecino, liso y semi rigido. parece haber dos
colonias diferentes en la misma muestra, además de
filamentos sueltos por toda el campo óptico.
Figura 18. Quinto hongo 10x: por la densidad de
filamentos formados por las hifas, no se logra apreciar ni
la composición de las hifas ni su forma estructural.
Figura 19. Quinto hongo 40x: el hongo presente vuelve a
ser Aureobasidium sp. Hongo común de las plantas y
cercano a las levaduras en composición y
comportamiento, no es dañino para su huésped.
Se debe tener en cuenta que se encuentra un hongo
secundario más grande junto al Aureobasidium, dicho
hongo no se puede identificar por el pequeño fragmento
que se ve del mismo.
Primeramente se debe entender que: el cultivo inicial
(papa + azúcar) resultó ser más efectivo para el
crecimiento del único microhongo presente, pues éste
creció de forma masiva por toda la caja; mientras que, el segundo cultivo (azúcar + caldo
instantáneo), resultó ser más efectivo en la proliferación de diversos hongos, (4
aproximadamente) y menos efectivo en su crecimiento, pues estos se aislaron en pequeñas
colonias que no se expandieron. Todos los hongos hallados resultaron ser hongos comunes,
pero asimismo, por su bajo estudio y por la ausencia de claves de identificación, no se
identificaron con certeza dichos hongos.
Conclusiones.
Se logró de forma exitosa el objetivo de este proyecto de laboratorio: tener un primer
acercamiento exitoso al reino fungi partiendo de uno de sus grupos principales: los
microhongos.
Asimismo, se pudo observar y comprender en primera instancia de manera muy exitosa la
morfología y funcionamiento de los microhongos en las diversas especies obtenidas en los
cultivos caseros del agar sabouraud, comparando qué tipo de cultivo resulta ser más efectivo
para el crecimiento y proliferación de dichos hongos.
Bibliografía.
➢ https://www.researchgate.net/publication/324015186_Los_Hongos
➢ https://www.uaeh.edu.mx/nuestro_alumnado/icap/licenciatura/documentos/Seleccion
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➢ https://doityourselfscience.wordpress.com/2011/04/11/como-preparar-un-medio-de-
cultivo-casero/
➢ https://www.semicrobiologia.org/storage/secciones/publicaciones/semaforo/57/articul
os/30_Clave.pdf
➢ https://www.lifeder.com/hifas/#Tipos