AMICI CONSIGUIO UNA NOTABLE REDUCCION DE LA ABERRACION CROMATICA MEDIANTE LA CONSTRUCCION DE LENTES OBJETIVOS
LOS MEDIOS DE CULTIVO SON MEZCLAS DE SUSTANCIAS NUTRITIVAS, QUE EN CONCENTRACIONES ADECUADAS Y EN LAS CONDICIONES FISICAS
ACROMATICOS. OPTIMAS PERMITE EL DESARROLLO DE MICROORGANISMOS PROPORCIONANDOLES FUENTE DE CARBONO Y ENERGIA, FUENTE DE NITROGENO, UN
PH ADECUADO Y OSMOLARIDAD. PERMITEN EL AISLAMIENTO DE DISTINTAS ESPECIES MICROBIANAS PRESENTES EN UNA MUESTRA ASÍ COMO SU
KOCH FUE EL PRIMERO QUE PREPARO PELICULAS SECAS DE BACTERIAS TIÑENDOLAS CON AZUL DE METILENO, ADEMAS, FUE PIONERO EN LA CONCERVACIÓN.
INTRODUCCION DE LOS MEDIOS SOLIDOS UTILIZANDO UNA PATATA COCIDA COMO MEDIO, INOCULANDOLA CON LA PUNTA DE UNA AGUJA.
CONSTITUYENTES HABITUALES DE UN MEDIO DE CULTIVO
COHN FORMULÓ UN MEDIO BASE CON SALES Y RESTOS DE LEVADURA A LAS QUE PODIA AGREGAR DIVERSOS AZUCARES. FUENTE DE CARBONO Y SALES: GLUCOSA, LACTOSA, NACL, FOSFATOS, SULFATOS, MAGNESIO, AMONIO.
AGENTE GELIFICANTE: AGAR, GELATINA
MCINTOSH Y FILDES CONSTRUYERON UNA JARRA ANAEROBICA CON EL FIN DE AISLAR CLOSTRIDIUM DE HERIDAS CONTAMINADAS DURANTE LA
FLUIDOS CORPORALES: SANGRE, SUERO, LECHE. (ENRIQUECIMIENTO DEL MEDIO)
GUERRA.
AGENTES REDUCTORES: CISTEINA, TIOGLICOLATO, ETC. (DESARROLLO DE MICROORGANISMOS MICROAEROFILICOS O ANAEROBICOS)
TYNDALL DEMOSTRO QUE LAS BACTERIAS PUEDEN EXISTIR EN DOS FORMAS: LÁBILES AL CALOR Y RESISTENTES AL MISMO. NUTRIENTES (CARBOHIDRATOS, LIPIDOS Y PROTEINAS): SE SUMINISTRAN EN FORMA DE INFUSIONES DE CARNE, EXTRACTOS DE CARNE O
EXTRACTOS DE LEVADURA)
LA ESTERILIZACIÓN SE DEFINE COMO LA ELIMINACIÓN TOTAL DE MICROORGANISMOS PATOGENOS INCLUYENDO VIRUS Y ESPORAS.
EL AGAR ES UN POLIMERO DE SUBUNIDADES DE GALACTOSA PROCEDENTE DE LA MEZCLA HOMOGENEA DE DOS POLISACARIDOS, AGROPECTINA Y
LA SANITIZACION ES EL PROCESO MEDIANTE EL CUAL UN OBJETO SE HACE SEGURO PARA SU USO (SANITARIO), IMPLICA QUE ESTÉ ESTE LIBRE DE AGAROSA. ES EXTRAIDO DE LAS PAREDES DE ALGAS MARINAS.
MATERIAL O MICROORGANISMOS DAÑINOS.
LAS PEPTONAS SON COMPUESTOS ORGANICOS NITROGENADOS Y SALES MINERALES OBTENIDOS POR DIGESTON ENZIMATICA O QUIMICA DE
SE DEFINE DESINFECCION COMO LA ELIMINACION DE TODO MICROORGANISMO PATOGENO, CON EXCEPCION DE ESPORAS BACTERIANAS EN PROTEINAS ANIMALES O VEGETALES.
OBJETOS INANIMADOS.
ALGUNAS PROBABLES CAUSAS DE ERROR EN LA PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO DESHIDRATADOS SON: PROBLEMAS DE PH Y CAMBIO DE
LA ELECCION DE METODOS DE ESTERILIZACION DEPENDE DEL TIPO DE MATERIAL QUE SE PRETENDE ESTERILIZAR ASI COMO DE LA SENSIBILIDAD COLOR (SOBRECALENTAMIENTO, MEZCLADO INADECUADO, CONTAMINACION), FALTA DE CONSISTENCIA EN EL AGAR (MEZCLADO INEFICIENTE) Y
DEL MATERIAL AL AGENTE ESTERILIZANTE. LA PERDIDA DE LAS PROPIEDADES NUTRICIONALES O CAMBIOS EN LAS CARACTERISTICAS DE CRECIMIENTO.
LA ASEPCIA SE DEFINE COMO LA AUSENCIA DE MATERIA SEPTICA (AUSENCIA ABSOLUTA DE GERMENES), LAS TECNICAS ASEPTICAS COMPRENDEN CLASIFICACION DE MEDIOS DE CULTIVO
UN CONJUNTO DE PROCEDIMIENTOS QUE TIENEN POR OBJETO IMPEDIR LA PENETRACION DE GERMENES EN EL SITIO QUE ESTA LIBRE DE ESTOS.
SEGUN SU ESTADO MEDIOS LIQUIDOS CALDO NUTRITIVO BHI
LA DESINFECCION ES UNA TECNICA ASEPTICA.
FISICO
CONTROL QUIMICO DE MICROORGANISMOS MEDIOS SOLIDOS AGAR NUTRITIVO (ACE),
UN ANTICEPTICO ES UNA SUSTANCIA QUIMICA QUE INHIBE MICROORGANISMOS QUE SE ENCUENTREN EN CONTACTO CON TEJIDO VIVO, EVITAN MEDIOS GENERALES AGAR MUELLER HILTON
LA SEPTIS O PUTREFACCION. TIENEN ALTO PODER GERMICIDA Y UN GRAN PODER DE PENETRACION.
SEGUN SUS MEDIOS SELECTIVOS AGAR SALES MANITOL, AGAR EMB
EXISTEN ANTICEPTICOS ORGANICOS (ALCOHOLES, FENOLES, ALDEHIDOS Y AGENTES TENSOACTIVOS) E INORGANICOS (YODUROS-CLORUROS PROPOCITOS DE USO
HIDROGENADOS, OXIDANTES COMO EL AGUA OXIGENADA Y KMNO4) MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO AGAR CHOCOLATE, AGAR SANGRE
TIPOS DE ESTERILIZACION MEDIOS DIFERENCIALES AGAR MC CONKEY, AGAR EMB
METODOS FISICOS
SEGUN LA MEDIOS NATURALES O COMPLEJOS EXTRACTO DE CARNE, EXTRACTO DE LEVADURA
CALOR HUMEDO CON PRESION (AUTOCLAVE) NATURALEZA DE SUS
EL VAPOR QUE SE GENERA EN EL MÉTODO DE CALOR HÚMEDO FLUYE A TRAVÉS DE CUALQUIER ESPACIO QUE PUEDA TENER EL MATERIAL QUE SE CONSTITUYENTES MEDIOS SINTETICOS O QUIMICAMENTE DEFINIDOS
SOMETE A ESTERILIZACIÓN
EL AGAR EMB ES SELECTIVO Y DIFERENCIAL POR QUE CONTIENE COLORANTES DE AZUL DE METILENO Y EOSINA QUE INHIBEN EL CRECIMIENTO DE
LA AUTOCLAVE UTILIZA VAPOR DE AGUA A 15LB/IN² DE PRESION, QUE PRODUCE UNA TEMPERATURA DE 121OC, EL TIEMPO PARA CONSEGUIR LA BACTERIAS GRAM+ EN CIERTO GRADO, LOS COLORANTES TAMBIEN ACTUAN COMO INDICADORES DIFERENCIALES EN RESPUESTA A LA
ESTERILIZACION DE ENDOSPORAS ES GENERALMENTE 15 MIN. FERMENTACION DE LACTOSA O SACAROSA POR PARTE DE LOS MICROORGANISMOS.
CALOR HUMEDO SIN PRESION (EBULLICION, BAÑO MARIA, PASTEURIZACION, TINDALIZACION, VAPOR FLUENTE) CARACTERISTICAS DE LA MORFOLOGIA COLONIAL
EXISTEN TRES TIPOS DE PASTEURIZACION: NORMAL, RAPIDA Y ULTRARAPIDA UHT. TAMAÑO, COLOR, FORMA, ELEVACION Y MARGEN, SUPERFICIE (LISA O RUGOSA), ASPECTO (HUMEDO O SECO), CONSISTENCIA (BUTIROSA, DURA
CALOR SECO (HORNO) O FRIABLE), TRANSMICION Y REFLEXION DE LA LUZ.
LOS HORNOS UTILIZAN CALOR SECO PARA LA ESTERILIZACION DE MATERIALES, EL TIEMPO DE ESTERILIZACION ES DE 30 MINUTOS A 180OC.
RADIACIONES (UV, IONIZANTES, GAMMA)
LA RADIACION IONIZANTE GENERA ELECTRONES, RADICALES HIDROXIDO (OH) Y RADICALES HIDRURO (H)
LA RADIACION ULTRAVIOLETA CON LONGITUDES DE ONDA ENTRE 220 Y 300 NM PROVOCA MODIFICACIONES O ROTURAS EN EL ADN
PROVOCANDO SU ALTERACION Y/O MUERTE DEL MICROORGANISMO EXPUESTO, TIENE BAJO PODER DE PENETRACION Y TIENDE A SER REFLEJADA
POR EL VIDRIO.
FILTRACION (FILTROS BACTERIOLOGICO: MEMBRANA MILIPORO)
BACTERICIDA BACTERIOLÍTICO BACTERIOSTATICO
INHIBICION DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
DESTRUCCION DE BACTERIAS LISIS DE BACTERIAS
SIN SU DESTRUCCION
CULTIVO DE MICROORGANISMOS
CARACTERISTICAS DE LA MORFOLOGIA MICROSCOPICA PRUEBAS BIOQUIMICAS: DETECTAN LA PRESENCIA O AUSENCIA DE UNA DETERMINADA ACTIVIDAD ENZIMATICA, GRUPO DE ENZIMAS O VIA
TAMAÑO, FORMA AGRUPACION, GRAM, PRESENCIA DE ESPORAS, FLEXIBILIDAD O RIGIDEZ), LAS AGRUPACIONES PRINCIPALES SON: METABOLICA. (BBL)
ANTIGENOS MICROBIANOS: SUSTANCIAS QUE DESENCADENAN LA FORMACION DE ANTICUERPOS Y PUEDE CAUSAR REPSUESTA INMUNE. LOS
ANTIGENOS SON USUALMENTE PROTEINAS O POLISACARIDOS, INLCUYENDO PARTES DE BACTERIAS; CAPSULA (ANTIGENO K), PARED CELULAR
(ANTIGENO O), FLAGELOS (ANTIGENO H).
LA TAXONOMIA MOLECULAR ESTA BASADA EN ANÁLISIS MOLECULARES DE BIOMOLECULAS. (ANÁLISIS DE LIPIDOS, CONTENIDO DE GC,
HIBRIDACION DE ADN, RIBOTIPADO).
PRESERVACION DE MICROORGANISMOS
TIENE COMO OBJETIVO CONCERVAR LA PUREZA DEL CULTIVO Y DE CARACTERISTICAS GENETICAS SIN PERDIDA DE SUS PROPIEDADES
BIOQUIMICAS ESTABLES. SU VIABILIDAD PERMITE LA SUPERVIVENCIA DE AL MENOS EL 70-80% DE LAS CELULAS. SE TRABAJA CON CEPAS
ESTABLES, CUYOS MICROORGANISMOS PRESENTAN ALTA VELOCIDAD DE CRECIMIENTO, LIBRES DE CONTAMINANTES Y FAGOS.
TINCONES SE CONOCE COMO CEPARIO AL LUGAR DONDE SE TIENE UNA COLECCION MICROBIANA PARA SU PRESERVACION CON FINES CIENTIFICOS,
PUEDEN SER SIMPLES (AZUL DE METILENO, CRISTAL VIOLETA, SAFRANINA) O COMPUESTAS QUE UTILIZAN DOS O MAS COLORANTES, MORDENTES INDUSTRIALES Y DE DOCENCIA.
Y DECOLORANTES (GIEMSA, WRIGHT), SELECTIVAS (ENDOSPORAS, FLAGELOS) O DIFERENCIALES (GRAM, ZIEHL NEELSEN).
LAS COLECCIONES MICROBIANAS SON ASOCIACIONES U ORGANIZACIONES DEDICADAS A LA COLECCION, PRESERVACION Y DISTRIBUCION DE
AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS CULTIVOS (BACTERIAS, HONGOS, ALGAS, PROTOZOARIOS, VIRUS Y CELULAS).
CULTIVO AXENICO O PURO (QUE CONTIENE SOLO UN TIPO DE MICROORGANISMO). PARA SU OBTENCION, SE UTILIZAN DIFERENTES TECNICAS DE
AISLAMIENTO (DILUCIONES SERIADAS, VACIADO EN CAJA, DISPERSION, ESTRIA CRUZADA, ETC.) METODOS DE CONCERVACION A LARGO PLAZO
EL CRECIMIENTO DE LAS CELULAS MICROBIANAS SE PARALIZA SIN PROVOCAR SU MUERTE.
DILUCION EN SERIE
SE UTILIZA PARA REDUCIR EN NUMERO EL CRECIMIENTO DE COLONIAS EN LA PLACA, HACIENDO POSIBLE SU CUANTIFICACION. (VOLUMEN CONCERVACION POR CONGELACION: EL METABOLISMO CELULAR SE PARALIZA DEBIDO A LA DISMINUCION DEL AGUA DISPONIBLE, PERMITE
TOTAL/VOLUMEN DE MUESTRA)-1. ES UN METODO DE ALTA SENSIBILIDAD PERMITE CONTEOS EN MUESTRAS CON POCOS MICROORGANISMOS, MANTENER EL ESTADO FISIOLOGICO DE LA CELULA, VIABILIDAD PUREZA Y ESTABILIDAD, ADEMÁS DE MINIMIZAR DAÑOS DURANTE LA
SOLO PERMITE CUANTIFICAR CÉLULAS VIVAS. CONGELACION MEDIANTE EL USO DE AGENTES CRIOPROTECTORES (GLICEROL AL 10%, SACAROSA, DIMETILSULFOXIDO, DEXTRANOS, EXTRACTO
DE MALTA, SUERO DE CONEJO O EQUINO, ETC.)
VERTIDO EN PLACA
ES UNA TÉCNICA CUANTITATIVA Y CUALITATIVA, SOLO PERMITE EL CONTEO DE CELULAS VIVAS ADEMAS DE REQUERIR DE MUCHO MATERIAL Y LA EDAD DE LAS CELULAS, LA VELOCIDAD DE CONGELACION Y DESCONGELACION, LA TEMPERATURA DE ALMACENAMIENTO Y EL EMPLEO DE
TIEMPO. AGENTES CRIOPROTECTORES SON ALGUNOS FACTORES QUE INFLUYEN EN EL PROCESO.
LA TECNICA DEL NUMERO MAS PROBABLE (NMP) PROPORCIONA UNA ESTIMACION ESTADISTICA DE LA DENSIDAD MICROBIANA PRESENTE, EN CONCERVACION POR LIOFILIZACION: REDUCCION DE LA AW EN LA CELULA SOMETIÉNDOLA A UNA RÁPIDA CONGELACIÓN Y ELIMINACION DE
BASE A QUE LA PROBABILIDAD DE OBTENER TUBOS CON CRECIMIENTO POSITIVO DISMINUYE CONFORME EL VOLUMEN DE MUESTRA INOCULADO. HIELO A PARTIR DE UN LIGERO CALENTAMIENTO AL VACÍO QUE LO TRANSFORMA EN VAPOR. ESTE ULTIMO PROCESO UTILIZA LA SUBLIMACION
SE APLICA PARA EL CONTEO DE MICROORGANISMOS COLIFORMES EN AGUAS RESIDUALES (PASO DE LA MATERIA EN FASE SOLIDA A GASEOSA SIN PASAR POR LA FASE LIQUIDA).
RECUENTO EN CAMARA PETROFF HAUSSER EL TIPO DE MICROORGANISMO, LA CONCENTRACION CELULAR, LA TEMPERATURA DURANTE LA SUBLIMACION, GRADO DE DESHIDRATACION,
ALGUNAS LIMITACIONES SON QUE NO PERMITE LA DIFERENCIACION ENTRE CELULAS VIVAS Y MUERTAS, POCA PRESICIÓN, NO ES ADECUADO EMPLEO DE CRIOPROTECTORES Y LAS CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO SON ALGUNOS DE LOS FACTORES QUE INFLUYEN EN EL PROCESO.
PARA SUSPENCIONES CON BAJA DENSIDAD CELULAR. PARA SU RECUPERACION, LOS MICROORGANISMOS SE RESUSPENDEN, SE INOCULAN Y SE INCUBAN EN LAS CONDICIONES ADECUADAS PARA EL
MISMO.
TECNICA DE ESTRIA CRUZADA
ES UNA TECNICA CUALITATIVA QUE REQUIERE DE POCO TIEMPO Y MATERIAL. PERMITE EL CONTEO UNICAMENTE DE CELULAS VIVAS. OBTENER UN METODOS ALTERNATIVOS: UTILIZADOS ANTE LA CARENCIA DE EQUIPOS NECESARIOS O ANTE CEPAS MICROBIANAS QUE NO RESISTEN LOS
ALTO GRADO DE PRESICION PUEDE SER DIFICIL CON ESTA TECNICA. METODOS CONVENCIONALES.
RESIEMBRA PERIODICA DEL CULTIVO EN UN MEDIO NUTRITIVO FRESCO. DESVENTAJAS:
LA TAXONOMIA ES LA CIENCIA MEDIANTE LA CUAL SE CLASIFICAN LOS ORGANISMOS, SE CATEGORIZAN EN BASE A SUS SIMILITUDES SUBCULTIVO
CONCERVACION POR RIESGO DE CONTAMINACION, POSIBILIDAD DE MUTACION.
ESTRUCTURALES Y EVOLUTIVAS EN GRUPOS LLAMADOS TAXAS. LA NONMECLATURA ES LA SUBDICIPLINA QUE ESTABLECE LOS NOMBRES PARA
TRANSFERENCIA
LOS MICROORGANISMOS.
PERIODICA EL CULTIVO SE CUBRE COMPLETAMENTE CON UNA CEPA DE ACEITE MINERAL O
CEPA DE ACEITE
TAXONOMIA CLASICA: SE BASA EN ANÁLISIS FENOTIPICOS QUE INCLUYEN EL ASPECTO DE UN ORGANISMO, SU METABOLISMO ENERGETICO, VASELINA ESTERIL. DESVENTAJAS: POSIBILIDAD DE MUTACION.
ENZIMAS, ETC.
CONCERVACION POR AGUA DESTILADA O AGUA VIABLE PARA DIVERSOS TIPOS DE MICROORGANISMOS, TANTO HONGOS
TIPOS NUTRICIONALES PRINCIPALES ENTRE LOS MICROORGANISMOS SUSPENCION DE MAR ESTERIL FILAMENTOSOS COMO LEVADURAS Y ALGUNAS BACTERIAS.
FOTOLITOTROFICAS UTILIZAN LA LUZ COMO FUENTE DE CO2 COMO FUENTE DE CARBONO METODOS RESTRINGIDOS: BASADOS EN LA PARALISIS DEL CRECIMIENTO CELULAR (REDUCCIÓN DEL METABOLISMO) POR ELIMINACION DEL
FOTOTROPICAS AGUA DISPONIBLE. SE UTILIZA LECHE DESCREMADA O GLUTAMATO SODICO AL 10% COMO AGENTE PROTECTOR Y ARENA, AGAR, PAPEL,
ENERGIA PARA EL DESARROLLO
FOTOORGANOTROFICAS COMPUESTOS ORGANICOS GELATINA O GEL DE SILICA COMO SOPORTE PARA LA DESECACION A TEMPERATURA AMBIENTE. ES UN METODO UTIL PARA LA CONCERVACION DE
MICROORGANISMOS ESPORULADOS COMO LOS ACTINOMICETOS, NO TODOS LOS MICROORGANISMOS SOBREVIVEN A ESTOS METODOS.
OXIDACION DE COMPUESTOS
QUIMIOLITOTROFICAS CO2 COMO FUENTE DE CARBONO
INORGANICOS LAS ALGAS Y CIANOBACTERIAS SON ORGANISMOS FOTOSINTETICOS NO TOLERANTES A LA LIOFILIZACION NI DESECACION, SU PRESERVACION
QUIMIOTROPICAS MAS EFICIENTE ES LA CONGELACION CON N2 LIQUIDO.
OXIDACION DE COMPUESTOS
QUIMIOORGANOTROFICAS COMPUESTOS ORGANICOS
ORGANICOS LA LIOFILIZACION ES EL MEJOR METODO PARA LA PRESERVACION DE BACTERIAS DEBIDO A LA FACILIDAD DE TRANSPORTE.
LA MAYORIA DE LOS HONGOS PUEDEN CONCERVARCE A PARTIR DE SU DESECACION EN SUELOS.
