LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
INFORME DE LABORATORIO:
ANTIBIOGRAMA.
Aura Anaya Sánchez
Melisa Vergara
Oscar David Moreno
Docente: Leidy Mendoza Nova
Universidad de Córdoba
Departamento de ingeniería ambiental
Montería
2017
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ANALISIS Y DISCUSION
Una cepa de la bacteria escherichea coli, fue repicada en el medio de cultivo
Müller hintony sometida a una prueba de antibiograma frente a seis antibióticos;
para determinar su sensibilidad o resistencia de la bacteria a dicho grupo de
antibióticos.
Las técnicas de antibiograma son las utilizadas en el laboratorio de microbiología
para estudiar la actividad de los antimicrobianos frente a los microorganismos
responsables de las infecciones.
El orden de los antibióticos utilizados fue:
1. Ampicilina; 2 Cefradina; 3 Cefalexina; 4 Polimina B; 5 Dicloxacilina;
6 Amoxicilina.
En la caja de Petri se
observó el crecimiento
bacteriano entorno a los
discos de antibiograma; En
tres (2, 4 y 5) de los puntos
hay presencia de halos de
inhibición.
En el 1, 3 y 6 hay crecimiento
bacteriano. En el 1 se
observa un círculo negro,
mientras que en el 3 y 6 se
observa un viraje amarillo.
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E. coli - ampicilina
La ampicilina es un beta-lactámico, cuyo mecanismo de acción se da al interferir
en las últimas fases de la síntesis del peptidoglicano, componente necesario en la
formación de la pared bacteriana. Uno de los principales mecanismos de
resistencia hacia beta-lactámicos presentados por la bacteria E. coli y otros
microorganismos es la hidrólisis enzimática, que es debida a la presencia de
enzimas llamadas “beta-lactamasas” que se caracterizan por hidrolizar el enlace
amida del núcleo beta-lactámico, inactivando de esta manera el antibiótico antes
de que genere cualquier efecto. En conjunto con los componentes del medio de
cultivo el antibiótico hidrolizado da como resultado un viraje amarillo en las partes
de la colonia cerca al disco.
E. coli – cefradina
Es un antibiótico beta-lactámico, del grupo de las cefalosporinas de primera
generación, con acción bactericida. Inhibe la síntesis y reparación de la pared
bacteriana. Presenta un espectro antibacteriano de amplitud media. Actua
preferentemente sobre bacterias Gram-positivas aeróbicas, especialmente cocos.
También son sensibles las especies de Neisseria (incluyendo algunas cepas
productoras de penicilinasas) y Haemophillus.
Los enterococos son resistentes. Tiene actividad limitada frente a
enterobacteriáceas (E. coli, K. pneumoniae, P. mirabilis). Carece de actividad
frente a Pseudomonas sp. y Acetinobacter sp.
Actualmente esta cefalosporina, en algunas indicaciones, ha sido sustituida por
otras cefalosporinas más potentes.
E. coli - cefalexina
Es un antibiótico del grupo de las cefalosporinas de los conocidos como de
primera generación. Es utilizado para tratar infecciones bacterianas en el tracto
respiratorio (neumonía, faringitis), la piel, los huesos, el oído (otitis media). Puede
ser útil en casos de pacientes con hipersensibilidad a la penicilina.
Los antibióticos β-lactámicos son bactericidas y actúan inhibiendo la síntesis de la
capa de peptidoglucano de la pared celular bacteriana. La capa de peptidoglucano
es importante para la integridad estructural de la pared celular, especialmente en
los organismos Gram-positivos.
E. coli - polimixina B
La polimixina B es un antibiótico polipeptídico producido por una cepa de Bacillus
polymyxa. Su espectro de actividad se limita a las bacterias Gram-negativas
(como la E. coli). La polimixina B se fija a los fosfolípidos de las membranas de las
células bacterianas Gram-negativas. Esta unión destruye las membranas
bacterianas, aumentando la permeabilidad de la membrana lo que se traduce en la
muerte celular. La polimixina B es bactericida frente a la mayor parte de los
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gérmenes Gram-negativos aunque algunos Proteus y Serratia pueden ser
resistentes.
E. coli - dicloxacilina
La dicloxacilina es una penicilina semisintética, resistentes a enzimas beta
lactamasas, por lo cual se puede establecer el poco crecimiento bacteriano,
algunas de las bacterias pudieron haber adquirido nuevos genes, pudiendo
generar nuevas defensas contra el antibiótico lo que explica que el aro de
inhibición no esté totalmente transparente.
E. coli - amoxicilina
La amoxicilina al igual que la ampicilina es la respuesta a la necesidad de
encontrar derivados de la penicilina de mayor espectro, dada la aparición de cepas
resistentes. Al igual que la ampicilina es un beta-lactámico, y la E. coli presenta el
mismo sistema de defensa que contra la ampicilina, la hidrólisis enzimática al
anillo beta-lactámico. El viraje amarillo se da por las mismas causas.
PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS.
1. ¿Que otros métodos son para determinar la sensibilidad de un
microorganismo a un determinado antibiótico?
R/. Existen diferentes técnicas de laboratorio que permiten medir o calcular de
forma rutinaria, y de manera semicuantitativa, las CIM (métodos manuales y
métodos automatizados o semiautomatizados). Se puede realizar mediante:
1.- Difusión en agar: Disco placa y E test
2.- Dilución: Medio sólido y Medio líquido (micro/macrodilución)
3.- Mecanizados y Automatizados
Dilución en caldo
Se colocan concentraciones decrecientes del agente antimicrobiano,
generalmente diluciones 1:2, en tubos con un caldo de cultivo que mantiene el
desarrollo del microorganismo. Los antibióticos se preparan en "soluciones madre"
concentradas y luego se diluyen en caldo hasta obtener las concentraciones
apropiadas.
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Un tubo de caldo se mantiene sin inocular como control negativo de crecimiento.
Después de un periodo de incubación adecuada se observa la turbidez de los
tubos que indica el desarrollo bacteriano. El microorganismo crecerá en el tubo
control y en todos los que no contengan suficiente antibiótico que sea capaz de
inhibir su desarrollo. La concentración de antibiótico que presente ausencia de
crecimiento es la Concentración Mínima Inhibitoria.
Difusión en agar
Este método incorpora el antimicrobiano a discos de papel de filtro. Su
introducción permitió agilizar la determinación de la sensibilidad de las cepas
bacterianas frente a un número importante de antimicrobianos de forma
simultánea. El empleo de los discos de papel de filtro para las pruebas de
sensibilidad está estandarizado y se correlaciona con las CMIs. Durante muchos
años, y a pesar de ser una técnica puramente cualitativa, el método de difusión
por disco (o método Kirby-Bauer), en función sobre todo de su comodidad,
economía y fiabilidad, ha sido uno de los más utilizados en los laboratorios.
Método de E-test
Es un método más reciente, es una combinación de características de los métodos
anteriores. Se trata de una técnica cuantitativa en placa que permite obtener una
lectura directa de CMI en µg/ml, ya que se emplean tiras plásticas impregnadas en
concentraciones crecientes de antibiótico.
El microorganismo se inocula en una placa y sobre ella se deposita la tira del
antibiótico (o antibióticos) a ensayar. Se incuba durante 16-24 horas a 35ºC y se
valora la zona de inhibición alrededor de cada tira. La CMI se lee directamente
observando el punto más bajo de la elipse que presente el crecimiento.
Métodos automatizados
La mayoría de estos métodos utilizan sistemas de microdilución en medio líquido
sobre microplacas con pocillos en "U" e interpretan el crecimiento bacteriano en
los diferentes pocillos por medio de un autoanalizador (mediciones por turbidez o
fluorescencia). Anteriormente se hacía por lectura óptica del técnico a través de un
espejo invertido.
Son sistemas fáciles y rápidos, generalmente automatizada o semiautomatizada.
Son métodos ideales para grandes volúmenes de trabajo. Una de sus grandes
limitaciones es que sólo ofrecen garantía para investigar microorganismos de
crecimiento rápido y que no tengan requerimientos especiales.
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BIBLIOGRAFIA.
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generales/cefalexina-mk
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