CENTRO DE BACHILLERATO
TECNOLÓGICO INDUTRIAL Y DE
SERVICIOS #76
ANALIZA SANGRE CON BASE EN
TECNICAS DE QUIMICA SANGUINEA
PRÁCTICA 1: DETERMINACIÓN DE UREA
EN SANGRE
EQUIPO:
GUERRERO GARCIA VALERIA AKETZALI
EQUIPO 10
Q.B.P. SANCHEZ GONZALEZ RODOLFO
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INDICE
1.-Introducción…………………………………………………………………………3
2.-Material y Equipos…………………………………………………………………5
3.-Procedimiento………………………………………………………………………6
4.-Resultados…………………………………………………………………………...7
5.-Discusión……………………………………………………………………………8
6.-Conclusión………………………………………………………………………..9
7.-Cuestionario……………………………………………………………………….10
8.-Bibliografias…………………………………………………………………………10
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INTRODUCCIÓN
La urea es el principal desecho del metabolismo de las proteínas, representando
la forma mayoritaria de eliminación de nitrógeno. La urea es un compuesto
relativamente inocuo para el organismo comparado con el amonio y es muy
soluble en agua. Esta gran solubilidad permite que se filtre totalmente a nivel del
glomérulo renal y que se difunda homogéneamente por todo el organismo.
La urea se sintetiza mayoritariamente en el tejido hepático, por un mecanismo
cíclico llamado ciclo de la urea, donde intervienen los aminoácidos ornitina y
arginina. Esta síntesis tiene lugar a partir del amonio generado en el catabolismo
proteico y de la acción de las bacterias intestinales sobre las proteínas de la dieta,
al ser retirado de la circulación portal por el hígado. Esta separación es necesaria
para impedir la acumulación de amoniaco libre en la sangre, el cual es sumamente
toxico, especialmente para el sistema nervioso central.
El contenido de urea se puede expresar bien como concentración de urea o como
concentración de nitrógeno (BUN). Para convertir un valor de BUN a su
equivalente en urea, es necesario multiplicarlo por 2,14, factor resultante de la
relación de los pesos moleculares de la urea y del nitrógeno que contiene.
La urea se elimina por el riñón por un mecanismo pasivo de filtración a nivel
glomerular. Dada la gran solubilidad de la urea esta filtración, es importante,
siendo igual las concentraciones de urea en el filtrado glomerular y en el plasma.
Sin embargo, no toda la urea filtrada a nivel glomerular es eliminada con la orina;
tan solo de un 30/60 por 100 es eliminada, siendo el resto reabsorbida a nivel
tubular. Esta reabsorción tubular no es constante si no que depende del flujo de la
orina. Cuando la diuresis es 2 ml/min o superior solo se reabsorbe de un 30 a 40
por 100 de la urea.
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Los niveles plasmáticos de la urea dependen principalmente de 4 factores; la
dieta, el metabolismo proteico, la función renal y la función hepática, órgano en el
que tiene lugar, fundamentalmente la síntesis de proteína.
Actualmente solo presentan interés los métodos enzimáticos basados en la acción
catalítica de la enzima ureasa. La urea es hidrolizada por la ureasa, liberando
anhídrido carbónico y amoniaco según la reacción:
Urea + H2O
La urea se cuantifica a partir del amonio liberado, que puede ser medido con
reactivos.
La reacción de Berthelot es la más utilizada; en ella el amonio reacciona con el
hipoclorito dando cloramina que en presencia de fenol y catalizado por el
nitroprusiato produce un derivado indofenolico de color azul en medio alcalino,
cuya intensidad es proporcional a la cantidad de urea.
Existe un método enzimático cinético de medición de la urea que utiliza las
enzimas ureasa y glutamato deshidrogenasa. El amonio liberado es convertido en
glutamato por acción del glutamato deshidrogenasa, en presencia de NADH y
alfacetoglutarato, según la reacción:
NH3 + NADH + alfacetoglutarato
La concentración de urea se determina midiendo la velocidad de desaparición del
NADH a 340 0 365 mm. (1)
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MATERIALES Y EQUIPOS
1.- Jeringa de 2 o 5 ml.
2.- Gradilla
3.-Centrifuga
4.-Torundas con alcohol
5.-Ligaduras
7.-Espectofotómetro
8.-Cubetas de 1,0 cm de paso de luz
9.-Pipetas serológica
10.-Tubos de ensayo
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PROCEDIMIENTO
LONGUITUD DE ONDA…………………………………………………………510nm.
CUBETA…………………………………………………………......1cm de paso de luz
1.-Extraer 1-2 ml de sangre y obtener el suero.
2.-Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
3.-Pipetear en una cubeta:
Patrón Muestra
R1(ml) 1.0 1.0
Patrón(ul) 50.0 -
Muestra(ul) - 50.0
4.-se mescla y luego se encuba por 1min
5.- Se agrega el reactivo de trabajo
R2 1.0 1.0
4.- Mezclar y leer la absorbancia a los 1 min (A1) y a los 2 min (A2).
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5.-Calcular como se muestra a continuación:
Muestra
___________________ X 50 (Conc. Patrón)=mg/dL de urea en la muestra.
Patrón
RESULTADOS
Px: Mariana Gutiérrez Tajonar Edad: 18 años Sexo: Femenino
(0.24) x (0.42) x (46)
Resultado= 34 mg/Dl
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DISCUSIÓN
Consideramos que a lo largo de nuestra practica si tuvimos errores significativos
que pudieron haber influido en que los resultados obtenidos no fueran óptimos.
Primero la toma de muestra estuvo muy bien, ósea que por aquí no va el
problema; también cuando las centrifugamos estuvo bien porque no se nos
hemolizo ni nada por el estilo, en donde realmente estuvo nuestro problema fue
cuando pipeteamos porque creemos que tal vez por una muy pequeña cantidad no
le pusimos la cantidad de muestra y reactivo que dice el procedimiento, ya que,
esto depende solo de nuestra vista, y claro, esta puede fallar. También cuando
una de nosotras estábamos esperando que se incubara la muestra puede que
haya habido variaciones en la temperatura y ni siquiera lo hayamos notado;
cuando pasamos la muestra a ponerle el reactivo 2 y después a llevarlo al
espectrofotómetro también pudimos haber cometido errores con respecto al
tiempo y habernos pasado por unos segundos y estos claramente afectan a los
valores de nuestro paciente.
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CONCLUSIÓN
A la paciente Mariana Gutiérrez Tajonar de 18 años de edad se le
realizó el estudio de “Determinación de Urea en Sangre Periférica ” el
cual sus resultados fueron de 34 mg/dl los cuales nos indica que está
en un rango normal en sus resultados, pues como las normas nos
indican que al tener unos resultados bajos clínicamente significaría
que el paciente puede tener problemas a nivel Renal con síntomas
ampliamente cognitivos como son los siguientes:
Pre-renales: Deshidratación, hipovolemia, insuficiencia cardiaca,
Miosotis/ trauma muscular.
Renales: Insuficiencia renal, crónica o aguda, Necrosis tubular,
pielonefritis, glomerulonefritis, hidronefritis
Post-renales: Causas obstructivas de tracto urinario y Rupturas de
Vías urinarias.
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CUESTIONARIO
1.- Explica el fundamento de esta prueba.
La urea es hidrolizada por la ureasa, liberando anhídrido carbónico y amoniaco. La
urea se cuantifica a partir del amonio liberado, que puede ser medido con
reactivos.
La reacción de Berthelot es la más utilizada; en ella el amonio reacciona con el
hipoclorito dando cloramina que en presencia de fenol y catalizado por el
nitroprusiato produce un derivado indofenolico de color azul en medio alcalino,
cuya intensidad es proporcional a la cantidad de urea.
Existe un método enzimático cinético de medición de la urea que utiliza las
enzimas ureasa y glutamato deshidrogenasa. El amonio liberado es convertido en
glutamato por acción del glutamato deshidrogenasa, en presencia de NADH y
alfacetoglutarato.
2.-Ejemplificar con fórmulas la reacción química entre la urea, H2O y ureasa
y sus productos.
Urea + H20
3.-Ejemplificar con fórmulas la reacción química entre NH3, a-Cetoglutarato,
NADH, glutamato deshidrogenasa y sus productos.
NH3 + NADH + alfacetoglutarato
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4.-Explica los métodos los fundamentos de la reacción química de los metos
de chaney marbach y ormsby
Chaney
La ureasa hidroliza a la urea para posteriormente convertirse en amoniaco y
anhídrido carbónico .el amoniaco que se generó reacciona en un medio alcalino
con el hipoclorito y el salicilato sódico en presencia de nitroprusiato, agente
precursor de un cromófero verde cuya intensidad es proporcional a la
concentración de urea en la
Muestra.
5-¿Dos enfermedades que se diagnostiquen con esta prueba?
Glomerulonefritis y fallo cardiaco
6- Esquematizar la formación de urea y los órganos y sustancia que
regulan la concentración en esta prueba
8- Valores normales resultado e interpretación de la prueba y sus
operaciones
Los valores normales son 7 y 20 mg
Px: Mariana Gutiérrez Tajonar Edad: 18 años Sexo: Femenino
(0.24) x (0.42) x (46)
Resultado= 34 mg/Dl
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Los valore de la Px nos muestran que esta en un rango por arriba de lo normal el
cual podría incar que probablemente tenga algún probable ranal pre renal o pos
renal
9- que aprendió de la práctica y que aplicación
Aprendimos a usar una técnica que no era de nuestro conocimiento como el uso
del espectrofotómetro
En la parte teórica que era la urea como se desecha y como se crea desde donde
y la aplicación que va a ter en nuestro campo laboral al identificar un resultado
alterado y cuáles son los parámetros de las diferentes edades .
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BIBLIOGRAFIAS
[Link]
l
[Link]/bioquimica/Tejedor
/bioquimica_quimica/tema20-
[Link]
[Link]/2012/04/[Link]
[Link] › Página Principal › Enciclopedia médica
-[Link]
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