TEMA XIV: GLUCOLISIS
Vamos a considerar los mecanismos por los que las moléculas combustibles se degradan y
su energía se conserva en forma de energía de enlace fosfato ATP. Se estudiarán los procesos
conocidos como fermentación, mediante el cual muchos organismos extraen energía química
de la glucosa y otros combustibles en ausencia de oxígeno molecular.
Nos referimos primeramente el proceso de fermentación para luego poder hablar de
respiración.
FERMENTACION Y RESPIRACION
Los organismos inferiores que viven en condiciones anaerobias (ciertas bacterias,
invertebrados inferiores) obtienen su energía de la fermentación de la glucosa. Los organismos
que viven en condiciones aerobias (hongos, bacterias, mayoría de los animales y plantas
superiores) degradan sus combustibles por la ruta anaerobia pero después oxidan los productos
de la fermentación utilizando el oxígeno molecular. En esta fermentación el oxidante final o
aceptor final es una molécula orgánica producida en el proceso fermentativo.
En los organismos superiores la ruta anaerobia es una primera etapa de la fase aerobia de
la respiración.
Utilización de la glucosa por los organismos inferiores superiores:
La ruta de la fermentación es común tanto en la utilización anaerobia de la glucosa como
en la aerobia.
Entre las clases de fermentación nombraremos la fermentación homoláctica y la alcohólica.
La fermentación homoláctica: La molécula de glucosa de 6 átomos de carbono se degrada
a dos moléculas de ácido láctico de tres átomos de carbono. Este proceso se denomina glucólisis
que significa lisis de la glucosa.
La fermentación alcohólica: La molécula de glucosa de 6 átomos de carbono se degrada
a dos moléculas de etanol de 2 átomos de carbono y 2 de CO2.
En estas reacciones tenemos que hablar de las reacciones de óxido reducción que se
producen en todo organismo donde el agente oxidante recibe los electrones y el agente reductor
entrega electrones.
En este caso de la fermentación alcohólica el etanol es una molécula relativamente
reducida rica en H2, pobre en O2. La molécula de CO2 es relativamente oxidada, pobre en H2.
En el caso de la fermentación homoláctica el grupo metilo se halla más reducido que el
grupo carbonilo. Veamos la reacción completa:
ANALIZAREMOS LA REACCION ENERGETICA DE LA GLUCOLISIS
1) La conversión de glucosa en lactato es exergónica y 2) la formación de ATP a partir de
ADP y de Pi es endergónica.
Se deduce de estos datos que la transformación de glucosa en lactato proporciona energía
para producir la fosforilación de 2 moléculas de ADP a ATP. Esta reacción es irreversible. Lo
demuestra el ΔG0 negativo.
ETAPA DE LA GLUCOLISIS:
La glucólisis es catalizada por la acción de un grupo de 11 enzimas. Se cree que están
localizadas en la porción soluble del citoplasma. Se pueden considerar dos etapas o fases. En la
primera fase la glucosa se fosforila y se escinde pare formar gliceraldehído 3 P; y en la segunda
fase éste se convierte en ácido láctico.
LA FASE I: Constituye un proceso preparativo o de congregación en el que cierto número
de hexosas penetran en el esquema, después de fosforilarse a expensas del ATP, y dan un
producto común, el gliceraldehído 3 P.
LA FASE II: Es la ruta común para todos los azúcares, se produce la fosforilación del ADP
y se llevan a cabo las reacciones de óxido reducción, obteniéndose el lactato.
En este proceso hay tres tipos de transformaciones interconectadas.
1º.- La ruta de los átomos de carbono: o sea degradación de la glucosa para formar ácido
láctico.
2º.- La ruta del fosfato: o sea que el Pi (fósforo inorgánico) se transforma en P del ATP.
3º.- La ruta de los electrones: o sea las reacciones del óxido-reducción
1. Fosforilación de glucosa por el ATP: catalizada por dos enzimas: la hexoquinasa y
glucoquinasa.
Es una reacción irreversible.
La hexoquinasa es de mayor afinidad que la glucoquinasa por la glucosa. La glucoquinasa
solo actúa cuando hay alta concentración de glucosa en sangre; las dos enzimas necesitan del
catión Mg++ ó Mn++ para formar el verdadero sustrato que es Mg-Mn-ATP . La hexoquinasa
actúa también fosforilando otras hexosas. La reacción es irreversible.
2. Conversión de glucosa-6-P a fructosa-6-P: Catalizada por la fosfoglucoisomerasa.
3. Fosforilación de la fructosa-6-fosfato a fructosa 1-6 difosfato. Interviene una segunda
molécula de ATP. Esta reacción es catalizada por la fosfofructoquinasa.
4. Escisión de la fructosa 1 - 6 difosfato por una aldosa (la fructosa-1-6-difosfato
gliceraldehído 3-liasa) dando fosfato de dihidroxiacetona + gliceraldehído-3- fosfato.
INTERCONVERSION DE LOS FOSFATOS DE TRIOSA
Solamente uno de los dos fosfatos de triosa, el gliceraldehído 3-fosfato, puede ser
directamente degradado en las reacciones posteriores de la glucólisis. El otro, el fosfato de
dihidroxiacetona, se convierte reversiblemente en gliceraldehído-3-fosfato por acción de la
enzima triosa fosfato isomerasa.
Así en la primera fase una molécula de glucosa da dos moléculas de gliceraldehído 3 P.
SEGUNDA FASE
1. Oxidación del gliceraldehído 3 P a 1-3 difosfoglicerato.
La enzima que actúa es G_3_fosfato deshidrogenasa, o gliceraldehído 3 fosfato
deshidrogenasa.
El NAD+ y el NADH transportan los electrones.
2. Transferencia de fosfato desde el 1-3 difosfoglicerato al ADP.
El 1-3 difosfoglicerato + ADP da 3-fosfoglicerato + 2 ATP; es catalizada la reacción por la
enzima fosfogliceratoquinasa.
3. Conversión del 3-fosfoglicerato dando 2-fosfoglicerato.
Actúa la fosfogliceratomutasa.
4. El 2-fosfoglicerato da fosfoenolpiruvato + H20 por medio de una enzima, la enolasa, en
un proceso de deshidratación.
5. Transferencia de fosfato desde el fosfoenolpiruvato al ADP.
El fosfoenolpiruvato da piruvato por una enzima piruvato quinasa en presencia de ADP y
Mg++.
6. Reducción de piruvato a lactato. Piruvato da lactato por medio de lactato
deshidrogenasa.
En condiciones anaerobias el lactato es producto final de la glucólisis el cual difunde a través
de la membrana plasmática de la célula hacia el entorno como producto de desecho. Cuando las
células musculares de los animales superiores actúan de manera anaerobia durante cortos
esfuerzos de actividad vigorosa (excepcionalmente) el lactato escapa desde las células
musculares a la sangre y es transformado nuevamente en glucosa en el hígado.
BALANCE GLOBAL
ENTRADA DE LOS OTROS HIDRATOS DE CARBONO
Los polisacáridos de reserva el glucógeno, almidón, azúcares sencillos distintos de la glucosa
penetran en la primera fase de la glucólisis.
El glucógeno y el almidón penetran por la acción de dos enzimas que actúan sobre los
extremos terminales no reductores de la molécula, escindiendo los enlaces alfa (1-4). Otra
enzima actúa sobre las ramificaciones alfa (1-6) dando glucosa-1-fosfato para luego dar glucosa-
6-fosfato. Los azúcares sencillos una vez fosforilados, por ej. : manosa-6-P, fructosa-6-P recién
penetran al ciclo.
TEMA XV: CICLO DE LOS ACIDOS TRICARBOXILICOS Y VIA DEL FOSFOGLUCONATO
Energética de la fermentación y respiración. Plan de organización de la respiración.
Oxidación del piruvato a acetil CoA. Ciclo de Krebs. Vías del fosfogluconato.
Las células aerobias obtienen la mayor parte de su energía de la respiración, esto es, gracias
a una transferencia de electrones desde les moléculas orgánicas combustibles hasta el oxigeno
molecular. La respiración es mucho más compleja que la glicólisis.
En este tema se esboza el plan general de le respiración y después se considera con
detenimiento el ciclo del ácido tricarboxílico de Krebs, que es la ruta catabólica común por la
que finalmente se degradan todas las moléculas combustibles de la célula (carbohidratos, ácidos
grasos y aminoácidos). También se describe la ruta del fosfogluconato de oxidación de la
glucosa, mecanismo que genera potencial de reducción para las reacciones biosintéticas.
ENERGETICA DE LA FERMENTACION Y LA RESPIRACION
En la glicólisis se libera solamente una fracción muy pequeña de la energía química
potencialmente asequible en la estructura de la molécula de glucosa. Se libera más energía
cuando ésta se oxida completamente a CO2 y H2O como se pone de manifiesto al comparar las
variaciones de energía libre estándar de la conversión anaerobia de la glucosa en lactato y de su
oxidación a CO2 y H2O .
Cuando las células fermentan a la glucosa anaerobiamente, los productos que ya no son
susceptibles de ulterior empleo, y por ello abandonan la célula, todavía contienen la mayor parte
de la energía de la molécula de glucosa original. Por esta razón, las células que viven
anaerobiamente, para obtener una misma cantidad de energía utilizable tienen que consumir
mucho más glucosa que cuando viven en condiciones aerobias.
¿Por qué rinde la respiración mucho más energía que la glicólisis?
En primer lugar, el producto de la glicólisis, el ácido láctico, es una molécula casi tan
compleja como la de glucosa y sus átomos de carbono todavía se hallan en un mismo estado de
oxidación. El CO2 , producto de la respiración, es una molécula mucho más sencilla y pequeña
que la glucosa, y su átomo de carbono está completamente oxidado. En segundo lugar, la
cantidad de energía que se libera en la transferencia de un par de electrones desde una molécula
combustible determinada a un aceptor electrónico, varía con la naturaleza del aceptor. Puede
liberarse mucha más energía cuando el aceptor electrónico el oxígeno molecular, como ocurre
en la respiración, que cuando es el piruvato el que actúa como aceptor, que es el caso de la
glicólisis.
ORGANIGRAMA RESPIRATORIO
En la figura se muestra un diagrama de la respiración. lkk Los grupos acetilo procedentes
de los carbohidratos, de los lípidos y de los aminoácidos en la fase II del catabolismo, en la
siguiente fase III se incorporan al ciclo de Krebs, que en las aerobias constituye la ruta común
final del catabolismo oxidativo de todas las moléculas combustibles. En este ciclo los grupos
acetilo se desintegran para formar CO2 y átomos de hidrógeno. Estos últimos (o sus electrones
equivalentes) posteriormente se incorporan a la cadena respiratoria constituída por una serie
de transportadores electrónicos.
El proceso subsiguiente de transporte de electrones hasta el oxígeno molecular se realiza
con un descenso muy grande de energía libre, gran parte de la cual se conserve en forma de
ATP, gracias a la fosforilación oxidativa acoplada del ATP. La reacción global catalizada por el
ciclo de Krebs es la siguiente:
Como puede verse en la ecuación, no participan en el ciclo ni el oxígeno molecular, ni el
fosfato inorgánico, ni el ATP.
Su función primaria consiste en la deshidrogenación del ácido acético para formar, en
último término, dos moléculas de CO2 y cuatro pares de átomos de hidrógeno. Este proceso es
catalizado en una serie cíclica de reacciones consecutivas, en contraste con la secuencia
glicolítica, que es lineal.
En cada vuelta del ciclo de Krebs se incorpora una molécula de ácido acético (dos átomos
de carbono) por condensación con una molécula del compuesto de cuatro carbonos, el ácido
oxal acético, para formar el ácido cítrico de seis átomos de carbono.
Posteriormente, el ácido cítrico se degrada con producción de dos moléculas de CO2 y ácido
succínico, compuesto de cuatro átomos de carbono. Finalmente, este último se oxida a ácido
oxalacético, con lo que puede iniciarse de nuevo una vuelta del ciclo. En cada una de las vueltas
se incorpora una molécula de ácido acético y se eliminan dos moléculas de CO2 , en cada giro
completo se emplea también una molécula de oxal acetato para formar citrato, pero aquel se
regenera al final del ciclo.
Por tanto, cuando el ciclo funciona no hay pérdida neta de oxalacetato, basta con una
molécula para llevar a cabo la oxidación de un número infinito de moléculas de acetato.
Las reacciones enzimáticas del ciclo de Krebs tienen lugar en el compartimiento interno de
la mitocondria (a diferencia de la glucolisis que tiene lugar en el citoplasma celular).
Oxidación del Piruvato a acetil CoA
La ecuación global es:
La oxidación de piruvato a acetil-SCoA, catalizada por el sistema piruvatodeshidrogenasa,
en realidad constituye un proceso muy complejo.
A causa del gran descenso de energía libre estándar, la reacción es esencialmente
irreversible. Aunque en si misma no forma parte del ciclo del ácido tricarboxílico, constituye una
etapa obligatoria, mediante le cual los hidratos de carbono se incorporan al ciclo.
En este proceso participan dos coenzimas importantes: CoA y ácido lipoico.
CoA: Actúa como transportador de grupos acilo, efectuando una función análoga a la
que desempeña el ATP como transportador de grupos fosfato. La forma acetilada de la coenzima
A (acetil CoA) es un tioéster del ácido acético. El tioéster es un enlace de elevado contenido
energético, es decir, posee un G0 fuertemente negativo.
Ácido lipoico: es un factor de crecimiento para algunos microorganismos, un ácido graso
saturado de 8 átomos de carbono, en el que los carbonos 6 y 8 están unidos por un grupo
disulfuro formando un anillo de cinco términos.
La decarboxilación oxidante del piruvato a acetil CoA CO2 necesita tres enzimas diferentes
y 5 coenzimas que constituyen el:
REACCIONES INDIVIDUALES DEL CICLO DEL ACIDO TRICARBOXILICO
La acetil-CoA formada como producto final de la piruvato-deshidrogenasa se encuentra
ahora dispuesta para incorporarse al ciclo de Krebs.
1. Se produce la condensación de la acetil-CoA con el oxalacetato, para formar citrato. La
reacción es catalizada por la citrato-sintetasa.
En esta reacción el grupo metilo (CH3-) de la acetil CoA se condensa con el átomo de
carbono carbonílico del oxalacetato con la hidrólisis del enlace tioéster y formación de la CoA
SH libre.
2. Actúa una enzima, la aconitasa que cataliza la formación de isocitrato con formación de
un compuesto intermedio el cis-aconitato. En esta reacción se produce pérdida, y posterior
adición de agua.
3. Se produce una oxidación del isocitrato y pérdida de CO2 . La reacción es catalizada por
la isocitrato-deshidrogenasa ligada al NAD+ , que requiere Mg+ ó Mn++ para su actividad.
La reacción transcurre con gran descenso de Gº es una reacción altamente exergónica.
4. La oxidación de alfa-cetoglutarato a succinato se produce en dos etapas.
a. En la primera el alfa-cetoglutarato experimenta una decarboxilacíón oxidativa para
formar succinil-S-CoA y CO2 .
Esta reacción es comparable a la de la oxidación del piruvato a CoA y se produce por el
mismo mecanismo con intervención de:
Que participan como cofactores necesarios ligados a la enzima succinil-CoAsintetasa.
b. El producto final de la reacción la succinil-CoA que es un tioéster de elevado contenido
energético, experimenta pérdida de su grupo CoA, pero no por una simple reacción de hidrólisis
sino por una reacción con el GDP y fosfato en el que se conserva la energía.
A continuación el GTP formado en esta reacción cede terminal al ADP para formar ATP.
La reacción es catalizada por la nucleósido-difosfoquinasa. Este tipo de fosforilación se
designa como fosforilación a nivel de sustrato, para distinguirla de las fosforilaciones ligadas a
la cadena respiratoria.
5. El succinato es oxidado a fumarato en una reacción catalizada por la
succinatodeshidrogenasa que contiene FAD como coenzima que actúa como aceptor de
hidrógeno.
6. Se produce una hidratación del fumarato dando malato, actuando coma catalizador la
fumarasa.
7. En la última reacción del ciclo la malato-deshidrogenasa dependiente del NAD cataliza
la oxidación del malato a oxalaceta
Podemos ahora resumir los productos producidos en una vuelta del ciclo del ácido
tricarboxílico.
Dos átomos de carbono aparecen en forma de CO2 equivalentes, aunque no idénticos,
a los dos átomos de carbono del grupo acetilo que ingresa en el ciclo. Por
deshidrogenación enzimática se producen cuatro pares de átomos de hidrógeno, tres
pares se utilizan para reducir el NAD y uno para reducir el FAD.
En último término, estos cuatro pares de átomos de hidrógeno y electrones se combinan
con el oxígeno, una vez realizado su transporte a lo largo de la cadena respiratoria.
RUTA DEL FOSFOGLUCONATO O VIA DE LAS PENTOSAS
Muchas células disponen, además del ciclo del ácido tricarboxílico, de otra ruta de
degradación de la glucosa cuya primera reacción es la oxidación de la glucosa-6-fosfato
a 6-fosfato gluconato.
La ruta del fosfogluconato, conocida como ruta de los fosfatos de pentosa o desviación
del monofosfato de hexosa, no es una ruta principal de oxidación de la glucosa.
Su objetivo primordial, en la mayor parte de las células, es obtener NADP reducido en
el citoplasma extramitocondrial.
Una segunda función es la producción de pentosas en especial D-ribosa, que se emplea
en la síntesis de ácidos nucleicos.
Otra función importante consiste en participar en la formación de glucosa, a partir del
CO2 , en las reacciones de fotosíntesis.
Las diversas etapas de la ruta del fosfogluconato tienen lugar en la porción soluble del
citoplasma extramitocondrial de la célula.
1. La primera reacción de la ruta del fosfogluconato es la deshidrogenación enzimática
de la glucosa-6-fosfato por la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa para formar 6-
fosfogluconato.
La enzima es específica para el NADP como aceptor electrónico.
Realiza la deshidrogenación del átomo de carbono 1 de la forma piranosa de la glucosa-
6-fosfato y rinde la 6-fosfogluconato lactona. Esta última es inestable y experimenta
hidrólisis espontánea a ácido libre en presencia de una lactonasa.
2. En la etapa siguiente el 6-fosfogluconato experimenta una decarboxilación oxidativa
por acción de la 6-fosfogluconato-deshidrogenasa y se forma una pentosa la D-ribulosa-
5-fosfato, reacción que produce una segunda molécula de NDAHP2 .
3. Por acción de la fosfo-pentosaepimerasa la ribulosa-5-fosfato se transforma
reversiblemente en xilulosa-5-fosfato, su epímero en el átomo de carbono 3.
Por acción de la fosfo-pentosa-isomerasa, la ribulosa-5-fosfato, puede convertirse,
también reversiblemente, en su isómero aldo, la ribosa-5-fosfato que puede emplearse
en la síntesis de los nucleótidos que contienen pentosa y el ARN.
En ciertas circunstancias, la ruta del fosfogluconato finaliza en este punto, y entonces su
ecuación global se escribe así:
El resultado neto es la producción del NADPH necesario para las reacciones biosintéticas
de reducción en el citoplasma extramitocondrial, y la formación de ribosa como
precursor para la síntesis de nucleótidos.
En otras circunstancias, sin embargo, la ruta del fosfogluconato continúa más allá, ya
que las pentosas-5-fosfato pueden experimentar otras transformaciones que son
posibles gracias a dos enzimas adicionales: la transcetolasa y la transaldolasa.
*La transcetolasa que contiene pirofosfato de tiamina íntimamente unido como
coenzima y Mg++, realiza la transferencia de un grupo glicoaldehído desde la xilulosa-5-
fosfato a la ribosa 5 fosfato. En este proceso el grupo glicolaldehído ( CH2OH CO ) se
transfiere en primer lugar al pirofosfato de tiamina unido a la enzima, que actúa como
transportador intermediario del grupo glicolaldehído, que a continuación es transferido
a la molécula del aceptor, la ribosa-5-fosfato. El resultado neto consiste en la formación
de un ceto-azúcar de 7 átomos de carbono, la sedo heptulosa-7-fosfato, y un azúcar de
3 átomos de carbono, el glicer aldehído-3- fosfato.
Debe observarse que uno de los productos de la acción de la transcetolasa es el
gliceraldehído-3-P que es un intermediario de la secuencia glicolítica. Su formación
constituye un lazo de conexión entre la vía glicolítica y la del fosfogluconato.
*La segunda enzima que participa en transformaciones ulteriores de la vía del
fosfogluconato es la transaldolasa, que actúa sobre los productos de la reacción
catalizada por la transcetolasa Cataliza la transferencia del grupo dihidroxiacetona
correspondiente a los átomos de carbono 1-2-3 de la sedoheptulosa para formar un
azúcar de 6 átomos de carbono, la fructosa-6-fosfato, y otro azúcar de 4 átomos de
carbono, la eritrosa-4-fosfato.
La fructosa-6-fosfato, es también un intermediario de la glicólisis y por lo tanto, el
segundo punto de conexión entra las dos rutas: glicolítica y fosfogluconato.
Otra reacción destacada que cataliza la transcetolasa es:
En la que dos intermediarios de la vía del fosfogluconato pueden convertirse en
intermediarios de la vía glicolítica.
Una consecuencia importante de la acción de las dos enzimas, consiste en que hacen
posible, junto con las enzimas de la secuencia glicolítica la interconversión de los
azúcares.
La última parte de la vía del fosfogluconato no es bien definida, no conduce a un único
producto final, sino a una ruta ramificada, capaz de gran flexibilidad metabólica.
Es probable que la ruta del fosfogluconato normalmente se reúna con el ciclo glicolítico
por interconversión en intermediarios de la glicólisis.
