ULADECH CATÓLICA GUÍA DE QUÍMICA ORGÁNICA II
PRÁCTICA 13
IDENTIFICACIÓN Y REACCIONES DE CARBOHIDRATOS
OBJETIVOS:
1. Aprender a identificar mediante reacciones características a
monosacáridos, disacáridos (reductores o no reductores)
FUNDAMENTO TEÓRICO
Debido a su naturaleza polihidroxilada, los azúcares son bastante
difíciles de aislar y purificar. Son muy solubles en agua y tienden a
formar jarabes viscosos que cristalizan mal. En el siglo diecinueve, estas
propiedades causaban serios problemas cuando se trabajaba con
azúcares, antes de la aparición de los poderosos métodos
espectroscópicos de análisis actuales. Por entonces, el único método de
averiguar la identidad de los compuestos era comparando sus puntos de
fusión.
I. FENILOSAZONAS DE LA D-(+) GLUCOSA Y DE LA D-(–)
FRUCTOSA
En el año 1884, Fischer (Emil Fischer, 1852-1919, Universidad de Berlín,
Premio Nobel, 1902) introdujo el uso de la fenilhidrazina como reactivo
en la química de azúcares. Fischer descubrió que un monosacárido,
como la glucosa reacciona con la fenilhidrazina en ácido acético, para
dar una fenilhidrazona normal. Sin embargo, esta fenilhidrazona
reacciona posteriormente con dos equivalentes más de fenilhidrazina,
para dar un derivado llamado osazona.
Las osazonas producidas son sólidos cristalinos de color amarillo
brillante, con puntos de fusión característicos. Sin embargo, las
osazonas resultaron ser más valiosas de lo que se pensó en un principio,
por sus implicaciones en la determinación de la configuración de los
estereocentros C3, C4 y C5 de los monosacáridos.
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Los monosacáridos de cadena abierta, presentan las reacciones típicas
de los compuestos polifuncionales. Por ejemplo las aldosas contienen un
grupo aldehído que es oxidable y, por tanto, responde a las pruebas de
oxidación clásicas como el tratamiento con los reactivos de Fehling o
Tollens. Los sustituyentes hidroxilo en α de cetonas (presente en las
cetosas) se oxidan de forma parecida.
La capacidad reductora de los disacáridos, así como otras pruebas
químicas sencillas, permiten la determinación estructural de los mismos.
Así, se sabe que la sacarosa es un disacárido formado por dos unidades:
glucosa y fructosa. Sus reacciones confirman este hecho: por hidrólisis
ácida se forma una mezcla 1:1 de glucosa y fructosa; es un azúcar no
reductor; no forma una osazona y, finalmente, no experimenta
mutarrotación.
Estas pruebas sugieren que los monosacáridos, glucosa y fructosa,
componentes están unidos por un puente de acetal, que conecta los dos
carbonos anoméricos. De esta forma, los hemiacetales cíclicos se
protegen mutuamente. El análisis de su estructura de rayos-X confirma
esta hipótesis y se muestra a continuación:
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La maltosa o azucar de malta es un dímero de la glucosa en la que el
oxígeno hemiacetálico de una molécula de glucosa (en su forma
anomérica α) está unido al carbono 4 de la segunda. En esta disposición,
una unidad de glucosa mantiene su grupo hemiacetal libre y presenta su
química característica. Así, la maltosa es un azucar reductor, forma
osazona y muestra mutarrotación.
El disacárido natural más abundante después de la sacarosa es la
lactosa, que se encuentra en la leche humana y en la de la mayoría de los
animales. Su estructura se obtiene por la unión de galactosa y glucosa en
la forma indicada. Cuando se cristaliza en agua se forma únicamente el
anómero α (todos los monosacáridos y disacáridos se encuentran, en
disolución, como una mezcla de anómeros α y β, a su vez en equilibrio
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con la forma abierta. Sin embargo, en forma cristalina suelen
presentarse en una de las formas).
MATERIALES Y EQUIPOS
Vaso de precipitación 1 L Matraz Erlenmeyer 250 ml
Tubos de ensayo grandes Cocina eléctrica
Vasos de precipitación de 150 Baño maría
mL
Pipeta de 5 y 10 mL
Embudos vástago corto
Varilla de vidrio
Fiola de 100 mL
Propipetas
REACTIVOS
Glucosa Reactivo de Fehling
Fructosa Reactivo de Tollens
Sacarosa Permanganato de Potasio
Maltosa Hidróxido de sodio
Lactosa Ácido clorhídrico
Fenilhidrazina Levadura de pan
Acetato de sodio Papel filtro
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MÉTODO
a) Preparación de fenilosazonas: En dos tubos de ensayos grandes
se agregan 20 mL de solución de glucosa al 5% de glucosa y en el otro
tubo 20 mL de fructosa al 5%; a cada tubo se le agrega 2 mL de
fenilhidrazina, 3 g de acetato sódico y 3 mL de ácido acético glacial. Las
disoluciones se agitan y se colocan en un vaso de agua hirviendo que
previamente se había preparado habiéndose cortado la calefacción de
este sistema, dejándolos dentro del vaso por 30 – 40 minutos.
Los sólidos formados en cada tubo se filtran y una pequeña parte de
cada sólido se recristaliza en etanol al 50 %. Tratar de obtener la
máxima pureza del producto para que al determinar el punto de fusión la
medida sea la más exacta. Debido a que las fenilosazonas funden con
descomposición y el intervalo varía apreciablemente con la velocidad de
calentamiento del baño, este se debe de calentar a una temperatura
constante de 20ºC por minuto. Luego se mezclan cantidades iguales de
las dos muestras y se determina el punto de descomposición de la
mezcla, anotando las conclusiones.
b) Oxidación de la Glucosa:
- Degradación por permanganato de potasio: En un tubo de ensayo
se agregan 5 mL de una disolución de glucosa al 10% y se añaden
unas gotas de permanganato de potasio al 0.3%. El ensayo se
repite con una disolución de glucosa al 10% a la que se ha añadido
una gota de disolución de hidróxido de sodio al 10%. Se puede
adicionar temperatura y se observa las variaciones.
- Oxidación con reactivo de Tollens:
Preparación del reactivo de Tollens:
Solución A: Disolver 9 g de Nitrato de plata en 90 mL de agua y
aforar a 100 mL
Solución B: Disolver 10 g de Hidróxido de sodio en agua y aforar a
100 mL
Solución de amoniaco al 10%: Medir 35.7 mL de amoniaco
concentrado (28%) y aforar a 100 mL
- Oxidación con reactivo de Fehling: unas gotas de disolución de
glucosa al 10% se añaden a 6 mL de reactivo Fehling (3 mL de cada
una de las disoluciones A y B) y la mezcla se calienta en baño de
agua. Anotar sus observaciones.
c) Acción reductora de los disacáridos: En tres tubos de ensayo
con 5 mL de disolución de Fehling se añaden unas gotas de disoluciones
diluidas de sacarosa al primero, de maltosa al segundo, y de lactosa al
tercero. Se introducen los tubos en agua a ebullición y se observan los
resultados.
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RESULTADOS:
a) Preparación de Fenilosazonas
MUESTRA PESO (mg) PUNTO DE FUSIÓN OBSERVACIONES
Glucosa al 5%
Fructosa al 5%
b) Oxidación de monosacáridos, disacáridos y polisacáridos:
MUESTRA FEHLING TOLLENS KMnO 4 OBSERVACIONES
Glucosa 10%
Fructosa 10%
Galactosa
10%
Sacarosa 10%
Lactosa 10%
Maltosa
Almidón
DISCUSIÓN:
a) Escribir el mecanismo de formación de las hidrazonas que se forman
inicialmente en la reacción de formación de las osazonas.
b) Escribir con detalle el mecanismo de la formación de la osazona para
el caso de la fructosa.
c) ¿Cuál es la composición del reactivo de Tollens y del reactivo
Fehling?
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d) Explicar el carácter reductor de los disacáridos sacarosa, lactosa y
maltosa. Formular los productos de oxidación en cada caso con el
reactivo de Tollens.
RESUMEN:
CONCLUSIONES:
1.
2.
3.
BIBLIOGRAFÍA:
1. DORIA SERRANO, María del Carmén: “Experimentos de Química en
Microescala para Nivel Medio Superior”. Editorial Universidad
Iberoamericana. Primera Edición. Mexico. 2009.
2. FIESER, Louis: “Organic Experiments” Septum Edición. Editorial D.C.
Heath and company. Toronto, Canada. 1992.
3. DOMINGUEZ, X. A. y X. A. Dominguez S. 1982. Química Orgánica
Experimental. México, Limusa
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