EL MICROSCOPIO
DEFINICIÓN DEL MICROSCOPIO
Instrumento óptico para ampliar la imagen de objetos o seres, o de detalles de estos,
tan pequeños que no se pueden ver a simple vista; consta de un sistema de lentes
de gran aumento.
Este instrumento se caracteriza por aumentar la imagen hasta el nivel de la retina
para así poder captar mucho mejor la información. La ciencia que se encarga de la
investigación de esta serie de objetos pequeños, empleando este instrumento tiene
por nombre microscopía. Etimológicamente hablando la palabra microscopio
proviene del griego, que quiere decir «dispositivo o aparato para observa pequeñas
cosas, que no son visibles a simple vista», vocablo formado por «micro» que
significa «pequeño» y «scopio» alude a «aparato para ver u observar».
¿Qué es un microscopio y cuándo se inventó?
El microscopio es un instrumento que ayuda al biólogo en su tarea de un modo
fundamental, y ha posibilitado el desarrollo científico, especialmente en el campo de
la Microbiología, pues permite hacer visibles materias tan pequeñas que no podrían
distinguirse con nuestra vista, pues sus medidas no superan el milímetro, como son
las bacterias y los virus. Su invención se debe presumiblemente a un holandés,
Zacharias Jansen, de dudosa reputación, moral y científica, siendo la época de su
creación, los albores del siglo XVII. En 1674, Antón Van Leewenhoeck, se preocupó
de perfeccionar el invento.
CLASES DE MICROSCOPIOS
El microscopio electrónico es mucho más preciso que el óptico, que fue el primero
en inventarse, pues permite diferenciar detalladamente la estructura de bacterias y
virus, que son invisibles al microscopio óptico, por su ínfimo tamaño. Opera a través
de la reflexión de electrones, que al rebotar forman una imagen de mayor tamaño,
llegando a aumentarla hasta diez veces con respecto a su dimensión real.
El microscopio óptico funciona por refracción (cambio de velocidad y dirección de
ondas al pasar de un medio a otro) provocado por contar con una lente (microscopio
simple o lupa) o algunas lentes (microscopio compuesto).
Las partes que conforman un microscopio óptico compuesto son: un sistema óptimo,
formado por una lente ocular, que se ubica cerca del ojo de la persona que va a
observar la imagen, y un objetivo, que es una lente ubicada cerca del objeto
observable. El objetivo amplía la visión del objeto, y el lente ocular, amplía la imagen
del objetivo. Los rayos lumínicos son enviados al condensador por el foco, y el
condensador, que es otra lente los concentra sobre el objeto. También posee un
sistema mecánico, para fijar y permitir el funcionamiento del aparato.
El microscopio electrónico, fue creado en 1931, donde los electrones fueron los
encargados de reemplazar la luz, y a los campos magnéticos les correspondió
sustituir a la lente, siendo al principio de transmisión, creándose el microscopio
electrónico de barrido, en 1942. Permite ampliar la imagen hasta 200.000 veces su
tamaño original.
La mecánica cuántica posibilitó en 1981, crear el microscopio con efecto túnel, de
precisión aún mayor.
También existen actualmente microscopios diseñados con un propósito en especial,
algunos de estos son:
Microscopio electrónico de barrido, Microscopio óptico, Microscopio simple,
Microscopio compuesto, Microscopio de luz ultravioleta, Microscopio de
fluorescencia, Microscopio petrográfico, Microscopio en campo oscuro, Microscopio
de contraste de fase, Microscopio de luz polarizada, Microscopio confocal,
Microscopio electrónico, Microscopio electrónico de transmisión, Microscopio de
iones en campo, Microscopio de sonda de barrido, Microscopio de efecto túnel,
Microscopio de fuerza atómica, Microscopio virtual
MICROSCOPIOS SEGÚN EL SISTEMA DE ILUMINACIÓN:
Microscopio óptico, Microscopio electrónico, Microscopio de luz ultravioleta,
Microscopio de luz polarizada, Microscopio de fluorescencia.
Microscopios según el número de lentes
Microscopio simple. Este tipo de microscopio dispone de una única lente y es más
habitualmente conocido como lupa. Aun así, con un microscopio simple pueden
conseguirse grandes aumentos. Hay que destacar que, durante el siglo XVII,
Antonie van Leeuwenhoek utilizó este tipo de microscopios para conseguir el mayor
aumento alcanzado hasta el momento. A día de hoy, uno de los conceptos basados
en la misma idea es el Foldscope.
Microscopio compuesto. - Este tipo de microscopio es aquél que dispone de por
lo menos dos lentes. Este es el caso más habitual en todos los microscopios
modernos. Normalmente los microscopios disponen de distintas lentes tanto en el
objetivo como en el ocular para corregir las aberraciones ópticas y alcanzar una
imagen con buena calidad. La invención del microscopio está asociada con la
invención del microscopio compuesto. Este apareció en los Países Bajos a finales
del siglo XVI.
Microscopios según la transmisión de la luz. - Existen dos tipos básicos de
microscopio óptico según el camino seguido por la luz hasta llegar el objetivo:
microscopios de luz transmitida y los microscopios de luz reflejada.
Microscopio de luz transmitida. - En este tipo de microscopio la luz atraviesa la
muestra. Para esta clase de microscopios es necesario preparar la muestra
cortándola en láminas muy finas. La muestra se ilumina desde debajo la platina. La
preparación de la muestra hace que esta sea semitransparente y parte de la luz
pueda atravesarla y llegar al objetivo para ser observada posteriormente a través
del ocular. En general este es el sistema de iluminación más utilizado entre los
microscopios ópticos.
Microscopio de luz reflejada. - En este caso la luz ilumina la muestra y parte de
esta es reflejada y dirigida al objetivo. De este modo es necesario iluminar la
muestra desde la parte superior de la platina. Este tipo de microscopía es utilizada
para examinar materiales opacos como pueden ser estructuras metálicas,
materiales cerámicos, etc. Existen microscopios ópticos que permiten los dos tipos
de iluminación de modo que es posible observar tanto muestras semitransparentes
como opacas.
Microscopios según el número de oculares
Los microscopios también pueden ser clasificados según el número de oculares.
En base a este criterio puede distinguirse entre microscopios monoculares,
binoculares o trinoculares.
NORMAS PARA EL USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
1.-Quitar la funda protectora del microscopio.
2.-Enchufar/encender el microscopio.
3.-Colocar en primera instancia el objetivo de menor aumento para lograr un
enfoque correcto. Este paso en muy importante y se debe realizar siempre, ya que
permitirá la observación de una panorámica del preparado y la ubicación de áreas
de interés para su análisis posterior.
4.-Subir el condensador utilizando el tornillo correspondiente.
5.-Colocar el preparado sobre la platina, con el cubre-objetos hacia arriba y
sujetándola con las pinzas/guías.
6.-Enfoque el preparado mirando a través del ocular y lentamente mueva el tornillo
macrométrico.
7.-Recorra todo el preparado y haga sus observaciones. Elija el sitio donde debe
seguir observando a mayor aumento.
8.-Cambie al objetivo de mediano aumento (20 X) y para lograr el enfoque siga
moviendo lentamente el tornillo macrométrico. Al cambiar de objetivo, la imagen
debe estar ligeramente enfocada gracias a que la mayoría de microscopios son
parafocales, es decir, una vez logrado el primer enfoque, al pasar al objetivo de
aumento inmediato superior la imagen queda en un foco aproximado y solo se debe
realizar un ajuste.
9.-Realice la observación y haga sus anotaciones. Determine cuál es la estructura
que va a observar a mayor aumento y colóquela en el centro del campo.
10.-Cambie al objetivo de mayor aumento. Si realizó el enfoque de manera correcta
con el objetivo anterior, al colocar el objetivo de mayor aumento la imagen solo se
debe enfocar girando única y lentamente el tornillo MICROMÉTRICO. NUNCA se
debe utilizar el tornillo macrométrico con los objetivos de mayor aumento, pues al
estar éste muy cerca del preparado, se corre el riesgo de partirlo.
11.-Al lograr el enfoque con el objetivo de mayor aumento debe realizar la
observación moviendo constantemente el tornillo micrométrico para variar los
planos de enfoque. De igual manera, abra o cierre el diafragma para regular la
intensidad de la luz y mejorar el contraste. Haga sus observaciones.
12.-Una vez finalizada la observación, aleje la platina y coloque nuevamente el
objetivo de menor aumento.
13.-Retire la muestra.
14.-Limpie la lente objetivo si usó medio de inmersión, apague la/s lámpara/s.
15.-Cubra el microscopio con la funda protectora.
Recomendaciones
- NUNCA dañar, rayar, dejar caer las lentes u otros componentes ópticos.
- NUNCA forzar los controles de foco.
- NUNCA tocar las superficies ópticas. Durante la clase se discutirá cuál es el
procedimiento para limpiar las lentes objetivos correctamente
PARTES DE UN MICROSCOPIO
Las partes de un microscopio se pueden clasificar entre las que pertenecen a su
sistema mecánico y las que pertenecen a su sistema óptico.
Las diferentes partes que componen un microscopio comúnmente, son:
Lente ocular. - Es donde coloca el ojo de la persona observadora. Esta lente puede
aumentar la imagen entre 10 a 15 veces su tamaño.
Cañón. -Se trata básicamente de un tubo alargado de metal cuyo interior es negro,
sirve como sostén al lente ocular y a los lentes de objetivos.
Lentes objetivos. - Es un grupo de 2 o3 lentes ubicados en el revólver.
Revólver. - Es un sistema que en su interior contiene a los lentes objetivos, puede
tener un sistema de giro que permite el intercambio de estos lentes.
El tornillo macrométrico. - Es una perilla que al girarla actúa acercando o alejando
al objeto que se está observando.
El tornillo micrométrico. - Es lo que permite afinar y enfocar correctamente la
imagen. Haciéndola más clara.
La platina. - Se trata de una plataforma de pinzas, es donde se coloca al objeto o
a la preparación que se desea observar.
El diafragma. - Sirve para regular la cantidad de luz que pasa a través del objeto
en observación.
El condensador. - Sirve para concentra el haz luminoso en la preparación u objeto.
Fuente luminosa artificial. - dirige luz hacia la platina.
Ampliar: Partes del microscopio
SISTEMA MECÁNICO
Dentro del sistema mecánico se incluyen todos los elementos estructurales que dan
estabilidad al microscopio y mantienen los elementos ópticos correctamente
alineados.
Base o pie: Es la pieza que se encuentra en la parte inferior del microscopio y sobre
la cual se montan el resto de elementos. Acostumbra a ser la parte más pesante
para proporcionar suficiente equilibrio y estabilidad al microscopio. Es habitual que
incluya algunos topes de goma para evitar que el microscopio se deslice sobre la
superficie donde se encuentra.
Brazo: El brazo constituye el esqueleto del microscopio. Es la pieza intermedia del
microscopio que conecta todas sus partes. Principalmente conecta la superficie
donde se coloca la muestra con el ocular por donde ésta se puede observar. Tanto
las lentes del objetivo como del ocular se encuentran también conectadas al brazo
del telescopio.
Platina: Esta es la superficie donde se coloca la muestra que se quiere observar.
Su posición vertical con respecto a las lentes del objetivo se puede regular mediante
dos tornillos para generar una imagen enfocada. La platina tiene un agujero en el
centro a través del cual se ilumina la muestra. Generalmente hay dos pinzas unidas
a la platina que permiten mantener la muestra en posición fija.
Pinzas: Las pinzas tienen la función de mantener fija la preparación una vez esta
se ha colocado sobre la platina.
Tornillo macrométrico: Este tornillo permite ajustar la posición vertical de la
muestra respecto el objetivo de forma rápida. Se utiliza para obtener un primer
enfoque que es ajustado posteriormente mediante el tornillo micrométrico
Tornillo micrométrico: El tornillo micrométrico se utiliza para conseguir un enfoque
más preciso de la muestra. Mediante este tornillo se ajusta de forma lenta y con
gran precisión el desplazamiento vertical de la platina.
Revólver: El revólver es una pieza giratoria donde se montan los objetivos. Cada
objetivo tiene proporciona un aumento distinto, el revólver permite seleccionar el
más adecuado a cada aplicación. Habitualmente el revólver permite escoger entre
tres o cuatro objetivos distintos.
Tubo: El tubo es una pieza estructural unida al brazo del telescopio que conecta el
ocular con los objetivos. Es un elemento esencial para mantener una correcta
alineación entre los elementos ópticos.
MANUAL DEL USUARIO
MICROSCOPIO BIOLOGICO R0502155
MICROSCOPIO BIOLOGICO MODELO N-100B
MANUAL DE INSTRUCCIONES
APLICACIONES
El microscopio está provisto de objetivos acromáticos, oculares de campo amplio,
condensador de Abbe, enfoque coaxial y el ajuste de enfoque fino. Este microscopio
de campo ocular amplio da una imagen buena y nítida, diseñado de una manera
moderna. Está especialmente diseñado para examinaciones clínicas y
demostraciones educacionales en laboratorios, colegios y campos médicos. Es,
además, un instrumento ideal para investigaciones biológicas, bacteriológicas,
patológicas y farmacéuticas.
ESPECIFICACIONES
-OCULAR
Designación Ampliación Campo de vista Longitud focal
Ocular de 10x 18mm 24,46mm
campo
-OBJETIVO
designación Ampliación Apertura Longitud Distancia de
numérica focal trabajo
4x 0.1 31.04 37.5
10x 0.25 17.13 7.316
Acromática 40x 0.65 4.65 0.632
100x 1.25 2.096 0.198
3. Ampliación Total: 40X ---- 1000X
4. Longitud de tubo mecánico: 160mm
5. Con plataforma mecánica acoplable, disposición de movimiento: 60mm X 30mm
6. Condensador de Abbe: NA=1.25 con diafragma de iris y filtro.
7. Sistema de iluminación: Lámpara fluorescente 7W, 220V
8. Embalaje: Cada conjunto en espuma de poliestireno en caja de cartón para su
protección.
USO
1. En orden de obtener una imagen más clara y nítida, usted debe ajustar el sistema
de iluminación. Cuando use objetivos de distintas ampliaciones, por favor ajuste el
diafragma de iris del condensador para poner su apertura numérica y la apertura
numérica de objetivo en coincidencia. Como siempre, la apertura numérica del
condensador debe ser controlada un poco menos que los objetivos para prevenir
que el otro haz de luz ingrese en el campo el campo de visión, el cual influirá en el
contraste de la imagen.
2. Inserte el ocular en el tubo ocular inclinado, y luego rote los objetivos en
secuencia, de acuerdo a su amplificación, en los agujeros roscados del porta-
objetivos. Coloque el espécimen en el centro del campo de visión. Primeramente,
use un objetivo de bajo poder para encontrar la imagen del espécimen y luego
obsérvelo con un objetivo de alto poder, al mismo tiempo, ajuste la perilla de
enfoque fina hasta que la imagen esté clara. Cuando use
el objetivo de inmersión en aceite 100X, el espacio entre la parte frontal del objetivo
y la superficie del espécimen debe estar lleno de aceite de cedro. Las gotas de
aceite de cedro deben estar estrictamente libre de burbujas de aire, y el objetivo
debe ser limpiado inmediatamente después de usarlo, de otra manera se
solidificarán y harán que la limpieza sea más difícil.
MANTENCIÓN
1. Desembale la caja cuidadosamente para evitar que elementos como los lentes
puedan caerse y sufrir algún daño. Antes de utilizar el equipo, por favor remueva las
piezas de goma, las cuales protegen los focos de ajuste fino y grueso de golpes.
2. El microscopio debe ser mantenido en un lugar fresco y seco, y debe estar
cubierto del polvo después de utilizarlo.
3. Nunca desensamble los lentes ya que estos están corregidos rigurosamente. Si
hay manchas en el lente, límpielo con un trapo con alcohol, pero debe prestar
atención a que no se filtre al interior de los objetivos para que no disuelva el
pegamento. Polvo en el lente puede ser limpiado con un pincel limpio.
4. El equipamiento de foco grueso y fino y el porta-objetivos son construidos
precisamente y no deben ser desmantelados sin autorización.
PIEZAS TOTALES DEL MICROSCOPIO
items contenido cantidad
1 El cuerpo principal del microscopio biológico 1 juego
2 Ocular: 10X 2 piezas
3 Objetivo 4X, 10X, 40X y 100X 1 pieza cada uno
4 Filtro: amarillo, azul 1 pieza cada uno
5 Aceite de cedro 1 botella
6 Manual de instrucciones 1 copia
Distancia interpupilar.
La distancia interpupilar es la distancia definida entre el centro de la pupila de un
ojo y el del otro (alrededor de unos 6 cm). Cada persona posee una distancia
interpupilar distinta. Los microscopios binoculares permiten ajustar esta distancia
moviendo uno de los dos tubos o ambos, debiendo realizarse el ajuste para cada
persona que vaya a mirar por el microscopio. Primero miraremos sólo con un ojo
para ver el campo iluminado (no hace falta que haya una muestra puesta), a
continuación, miramos con el otro ojo y vamos moviendo los tubos hasta que la
imagen vista por un ojo se superponga y coincida con la que ve el otro ojo.
Ajuste de dioptrías.
Cuando miramos por el microscopio, los posibles defectos de la visión se acentúan
debido a que miramos muy de cerca y a través de un sistema óptico complejo.
Además, a quienes usamos lentes nos resulta muy incómodo acoplar la lente al
ocular. Para ajustar las dioptrías, primero (cerrando un ojo) miramos por el ocular
que no posee regulación y enfocamos perfectamente la muestra. Abrimos el ojo del
ocular regulable y entonces giramos el anillo de ajuste hacia un lado u otro según
veamos la imagen perfectamente nítida.
LA ILUMINACIÓN.
Iluminación por luz reflejada en espejo.- Los microscopios clásicos y algunos
modernos vienen dotados de un espejo para capturar luz del ambiente y transmitirla
al sistema óptico del microscopio. Normalmente los espejitos tienen dos caras, una
plana y otra cóncava (curvada con el centro más hundido). Para la luz del sol, que
entra por una ventana de la sala, o ilumina la escena si estamos en medio del
campo, se utilizará el espejo cóncavo, de modo que recoje y concentra los rayos
solares hacia la muestra. Para lámparas próximas al microscopio, usaremos el
espejo plano, ya que los rayos de luz llegan de más cerca y es mejor para su
transmisión a la muestra. Algunos autores antiguos afirman que el espejo cóncavo
se utiliza en los momentos en que no usamos el condensador.
Iluminación eléctrica. - Existen varios tipos de iluminación eléctrica. Lo más normal
es que el iluminador incorporado lleve una bombillita, ya sea normal o halógena.
Para que funcione bien, el campo del microscopio debe estar perfectamente
centrado respecto a la bombilla (la máxima intensidad de luz debe corresponder al
centro del campo de visión del microscopio). Al regular la distancia de la bombilla a
la platina (si esto es posible) o regular la posición del condensador, debe ponerse
interés en que el filamento de la bombilla no se vea enfocado por el sistema óptico,
pues nos producirá interferencias en la imagen de la muestra. Otras iluminaciones
interesantes que se usan hoy en día son los sistemas de luz fría y las lámparas de
cuarzo (con una luz más blanca y de frecuencia más constante).
Diafragma. - Entre la iluminación y el condensador suele situarse una pieza móvil
denominada diafragma. Puede tratarse de una lámina metálica con distintos
orificios, de laminillas intercambiables con diferentes agujeritos o bien de un
diafragma auténtico “tipo iris” como los de las cámaras fotográficas. En este último
caso, el diafragma consta de un conjunto de laminillas metálicas engarzadas en un
anillo, de modo que al girar una palanquita movemos el conjunto de laminillas
abriendo o cerrando el hueco central. El diafragma debe estar perfectamente
centrado respecto al sistema óptico del microscopio. Para ello, colocaremos un
objetivo de poco aumento y cerraremos el diafragma para comprobar si el centrado
es perfecto, en caso contrario deberemos repasar el ajuste del diafragma para
obtener el mejor centrado posible. El diafragma debe ir regulándose para cada
muestra y cada sistema objetivo ocular que utilicemos, especialmente si pasamos
a objetivos de gran aumento (40 o 60) o si pasamos a objetivo de inmersión.
Condensador. - El condensador es una pieza fundamental en el microscopio. De
la calidad de la luz que tengamos dependerá en gran medida la calidad de la imagen
obtenida. Existen diversos tipos de condensadores, algunos con lentes supletorias,
habitualmente acompañados de sistemas de filtros. Si la fuente de iluminación es
blanca, podemos usar filtros de tono neutro (blanco), pero si la luz es amarilla (lo
más común) deberemos usar un filtro de color verde o azul para obtener una imagen
con fondo blanco. El condensador debe situarse lo más cerca posible de la platina,
para obtener el máximo de iluminación posible, salvo cuando usemos sistemas
ópticos especiales (inmersión o contraste de fases) y debamos regularlo para
obtener la mejor imagen.
MECÁNICA DEL MICROSCOPIO.
Carro cubreplatina. Tipos y mandos.
Algunos modelos de microscopio vienen provistos de un carro móvil cubreplatina,
de modo que puede ir moviéndose la preparación de una manera
cómoda y exacta. Normalmente llevan uno o dos mandos para mover el carro. Los
que llevan un mando incluyen dos diales giratorios, de modo que cada uno mueve
un eje de la platina; los que llevan dos mandos, cada uno regula el movimiento de
un eje. En el mercado existen carros supletorios que se adaptan a las perforaciones
de la platina. Para colocarlos deben retirarse las pinzas de sujeción y fijar en los
orificios los tornillitos del carro. Normalmente son estándar, pero si esto no ocurre
habría que mecanizar o bien la platina o bien el carro. Los modernos microscopios
invertidos no llevan ya carro cubreplatina, sino que la totalidad de la misma se
desplaza al mover los mandos, pudiendo situarse en la platina una preparación, una
cápsula de Petri, un pocillo, e incluso en algunos un erlenmeyer o un matraz. En el
caso de los microscopios para geología o petrológicos, la platina lleva un accesorio
especial circular. Estas platinas circulares llevan unas graduaciones en el borde
para orientarnos sobre el ángulo de la muestra respecto al sistema polarizador. La
platina circular puede llevar dos tornillitos laterales para el centrado fino de la misma.
Enfoque: tornillos o mandos macrométrico y micrométrico.
Los microscopios de cierta calidad ya llevan todos dos mandos de enfoque. El
mando grande suele ser el llamado macrométrico, que mueve el enfoque
rápidamente. El mando pequeño suele ser el llamado micrométrico, que mueve el
enfoque lentamente. El modo normal de proceder es enfocar primero con el mando
macrométrico o bien mover éste hasta que el objetivo se encuentre cerca de la
preparación, procediendo al ajuste del enfoque fino moviendo posteriormente el
mando micrométrico. Algunos microscopios disponen del llamado “freno” para el
enfoque. Este sistema consiste en una palanquita situada sobre el tambor de los
mandos de enfoque y permite ajustarlos para que nunca acerquemos más de lo
debido el objetivo a la preparación. Se debe usar con precaución para no romperlo
ni afectar al buen funcionamiento del enfoque. No se debe desbloquear de golpe
con el objetivo cerca de la preparación, pues se puede romper la preparación e
incluso dañar el objetivo.
Movimiento del cuerpo del condensador.
Como ya se ha comentado anteriormente, el condensador debe centrarse y
ajustarse a la distancia correcta. Para ello, los microscopios de calidad media
presentan además un mando lateral (o tornillo) que permite subir o bajar el cuerpo
del condensador, ajustando la distancia a la preparación. Lo más normal es acercar
el condensador al máximo a la preparación para las observaciones normales.
Recordar que deberá ajustarse al cambiar a objetivos de mayor aumento, de
inmersión, o sistemas de iluminación especiales.
Los pasos a seguir para trabajar con el microscopio son los siguientes:
1) Llevar las manos limpias y secas antes de tocar un microscopio. Limpiar
adecuadamente el lugar donde se ubicará el aparato.
2) Para coger un microscopio, siempre debemos hacerlo por el brazo o por la base
con ambas manos y mucho cuidado.
3) Comprobar el estado general del microscopio. Objetivo de mínimo aumento
seleccionado, limpieza de los objetivos (especialmente el de inmersión y los de gran
tamaño colindantes –de 40 o 60 aumentos-), limpieza del ocular, limpieza de la
platina, limpieza y ubicación del condensador.
4) Verificar la conexión del cable del microscopio a la toma de corriente.
5) Comprobar que la iluminación funciona correctamente.
6) Dejar el condensador lo más cerca de la platina posible, sin que llegue nunca a
tocar la misma o la base de la preparación.
7) Cerrar el diafragma al máximo, con ello obtenemos una imagen menos luminosa,
pero con mayor profundidad de campo, facilitando el enfoque. Si es necesario lo
abriremos luego.
8) Comprobar que el objetivo que está seleccionado (vertical o perpendicular sobre
la platina) es el de menor aumento del aparato.
9) Comprobar que el ocular u oculares instalados son los deseados en esta
observación.
10) Verificar a través del ocular (u oculares) que todo el campo visual permanece
uniformemente iluminado.
11) Ajustar la distancia interpupilar y las dioptrías si el microscopio es binocular.
12) Colocar en la platina la preparación. Si tenemos pinzas de sujeción, comprobar
que están adecuadamente ajustadas y bien situadas a los lados de la muestra, sin
llegar a tocar la zona del cubreobjetos. Si tenemos carro cubreplatina, asegurarnos
del correcto centrado de la muestra respecto a la iluminación (normalmente se
regula al centro de la muestra).
13) Aproximar, mirando desde el lateral –y no a través del microscopio- al máximo
posible el objetivo. Se puede usar como referencia un papelito doblado varias veces
para comprobar el acercamiento en objetivos de mayor aumento.
14) Mirar a través del ocular (u oculares) e ir separando el objetivo de la preparación,
primero con el mando macrométrico y una vez comience a verse enfocada la
muestra con el mando micrométrico, hasta conseguir un enfoque perfecto.
15) Para pasar a un objetivo de más aumento, que suele ser de mayor tamaño,
separar al máximo el objetivo de la preparación y proceder como en los puntos
anteriores.
16) Para pasar a un objetivo de menos aumento, que suele ser de menor tamaño –
verificar esto último según el modelo de microscopio-, simplemente girar el revólver
porta objetivos y proceder como en los puntos anteriores.
17) Una vez acabada la observación, deben seguirse escrupulosamente los pasos
siguientes:
17.1. Separar al máximo el objetivo de la preparación, retirarla y devolverla a su
caja.
17.2. Apagar la iluminación y desconectar el aparato de la corriente.
17.3. Colocar centrado el carro cubreplatina (si tenemos).
17.4. Colocar el objetivo de mínimo aumento perpendicular a la platina.
17.5. Acercar el objetivo a la platina ya vacía en la posición de guardar el
microscopio.
17.6. Repasar los objetivos para comprobar que están limpios, si es necesario
limpiarlos adecuadamente.
17.7. Repasar los oculares para comprobar que están limpios, si fuera
necesario proceder a limpiarlos.
17.8. Repasar la totalidad del aparato para dejarlo muy limpio y en
disposición de usos posteriores.
17.9. Retirar los oculares si no son los de uso normal o si colocamos
las tapas de los tubos tras el uso.
17.10. Comprobar que el cuerpo del condensador está bien situado y en buenas
condiciones de uso. Limpiarlo si es necesario (o limpiar el filtro si se ha ensuciado).
17.11. Una vez hechas todas las comprobaciones, desconectar el cable de la base
del aparato (si esto es posible).
17.12. Colocar la funda del microscopio. Si no tenemos funda porque se haya roto
o perdido, podemos sustituirla por una bolsa de plástico de tamaño adecuado
previamente limpia. El polvo y la suciedad son los peores enemigos del microscopio.
17.13. Si el microscopio no está en un lugar de trabajo fijo, proceder a colocarlo en
su caja. Tener cuidado de no forzarlo para meterlo en la caja. Colocar todos los
accesorios en la caja, cada uno en su lugar. Guardar finalmente el cable si va suelto
en la caja, procurando también no doblarlo demasiado ni forzar su entrada en la
caja a costa de empujar o forzar el microscopio.
17.14. Siempre debe cerrarse la caja con su llave, para evitar suciedad y que el
aparato pueda caerse al desplazar la caja.
17.15. Llevar la caja con cuidado, siempre de pie, a la estantería o lugar donde
guardemos los aparatos.
Para utilizar el objetivo de inmersión proceder según los siguientes pasos:
1) Separar al máximo el objetivo que estemos usando de la preparación.
2) Asegurarnos de que el condensador se encuentra lo más próximo posible a la
preparación.
3) Cerrar el diafragma al máximo.
4) Centrar la preparación respecto al haz de luz que atraviesa la muestra. Es decir,
el circulo iluminado debe estar en el centro del cubreobjetos de la preparación.
5) Girar el revólver hasta situar perpendicularmente el objetivo de inmersión. Si el
objetivo queda muy cerca de la preparación, ladearlo ligeramente para dejar sitio y
poder poner el aceite de inmersión. (El aceite de inmersión posee un índice de
refracción –I.R.- mayor que el aire, facilitando la observación).
6) Poner una gotita de aceite de inmersión (una gotita de dos milímetros de diámetro
puede ser suficiente) centrada sobre el circulo iluminado de la preparación.
7) Acercar el objetivo de inmersión muy lentamente mirando desde el lateral para
evitar tocar la preparación con el objetivo.
8) Llegará un momento que la gotita de aceite de inmersión parece estirarse y
pegarse al extremo del objetivo. En ese momento ya podemos mirar por el ocular
(u oculares) e ir enfocando con el mando micrométrico, siempre muy despacio y con
mucho cuidado.
9) La observación con aceite de inmersión es la última que debemos realizar, pues
una vez hemos puesto aceite sobre el cubreobjetos, el uso de un objetivo de 40 o
60 se hace imposible porque se pueden ensuciar, y se pierde mucha calidad para
regresar a observaciones con objetivos de 10 o
4 aumentos. Si se trata de una preparación comercial o sellada, procederemos a
limpiarla adecuadamente para posteriores observaciones, bien con un producto
comercial o bien con alguno de los líquidos que indicamos seguidamente para
limpieza de objetivos.
10) Al terminar la observación, separamos el objetivo de la platina al máximo.
11) Girar entonces el revólver hasta dejar seleccionado el objetivo de menor
aumento, con lo cual el objetivo de inmersión (que debe ser el opuesto en el
revólver) quedará hacia fuera del aparato.
12) Proceder a limpiar adecuadamente el objetivo de inmersión con un papelito de
limpieza de lentes (se puede sustituir por papel de filtro o mejor por papel “de
fumar”). Para ello, pasar muy suavemente sin apretar el papelito por la lente del
objetivo, siempre en el mismo sentido y nunca haciendo arrugas en el papel. Se
puede acabar la limpieza con una gamuza especial para lentes (por ejemplo
microfibra que no deja pelusa), asegurándonos primero de que no queda aceite en
el objetivo.
13) Si el aceite de inmersión se ha secado en el objetivo, limpiarlo con un disolvente
adecuado para este tipo de limpiezas. Si no hay un producto específico, se puede
usar xilol o bien una mezcla de alcohol y acetona en proporción 7:3 (siete partes de
alcohol-tres partes de acetona). No se debe abusar de estas limpiezas con
disolventes, pues pueden despegar la lente del objetivo o dañarla
irremediablemente.
14) Tener siempre presente las precauciones e instrucciones de uso. Tratar con
sumo cuidado el aparato y dejarlo convenientemente limpio, ajustado y guardado.
ANEXOS
Microscopio biológico profesional
Microscopio digital
Bibliografía
1.- https://deconceptos.com/ciencias-naturales/microscopio
2.- Conceptodefinicion.de, Redacción. (Última edición:19 de febrero del 2014).
Definición de Microscopio. Recuperado de:
https://conceptodefinicion.de/microscopio/. Consultado el 2 de septiembre del 2019
3.- https://concepto.de/microscopio/#ixzz5yOl3sLsB
4.- https://www.mundomicroscopio.com/tipos-de-microscopios/
5.- https://www.mundomicroscopio.com/partes-del-microscopio/
6.https://www.google.com/search?tbm=isch&sa=1&ei=1nptXce0Ns_85gKI5rewDg
&q=tipos+de+microscopio&oq=+tipmicroscopio&gs_l=img.1.0.0i7i30l10.801874.8
03062..806417...0.0..0.180.672.0j4......0....1..gws-wiz-
img.......0i67.68TknDUazVk#imgrc=oRYJrUNuSWGjtM:
7.https://www.google.com/search?tbm=isch&sa=1&ei=_n1tXenZHaXy5gKstYeoAQ
&q=+microscopio&oq=+microscopio&gs_l=img.3..0i67l10.150674.150674..153546.
..0.0..0.210.210.2-1......0....1..gws-wiz-img.gQxK3R8PsxI&ved=0ahUKEwjp0JG-
_7LkAhUluVkKHazaARUQ4dUDCAY&uact=5#imgrc=VHiz8VN0jF05oM:
8.http://materias.df.uba.ar/f2bygAa2013c1/files/2012/07/gu%C3%ADa7_labo_micr
oscop%C3%ADa_avanzada.pdf
9.https://www.veto.cl/components/com_virtuemart/files/manuales/espanol/R05021
55.pdf
10.- Prof. SIMÓN J. ROVIRA. Pequeño manual básico de microscopía. 2004-2005.
