UNIVERSIDAD NACIONAL

MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, Decana de América)

FACULTAD DE QUÍMICA E ING. QUÍMICA

EAP. INGENIERÍA QUÍMICA

LABORATORIO DE ANALISIS INSTRUMENTAL

ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA
- VISIBLE
PROFESORA : QUIM. ALVAREZ BAUTISTA JENNY

FECHA DE LA PRÁCTICA : 13/ 09 / 14

FECHA DE ENTREGA : 27/ 09 / 14

TURNO : SABADO 13 – 17 HORAS

INTEGRANTES:

ABAD CASTILLO WILLIS 11070194

CURI AGUADO NILTON 12070144
MINAYA CCAIHUARE PAOLO 12070152
NÚÑEZ AGUILAR GIUSEPPE 12070154
RAMIREZ ARCE MARY 12070198
SALAS PASTOR MARIO 12070047
VALVERDE ARMAS ANDRES 12070170
 ESPECTROSCOPÍA MOLECULAR UV-VIS (ULTRAVIOLETA-VISIBLE)

Es una técnica analítica que mide la absorción de la luz, dependiente de las longitudes de
onda, en la región visible o ultravioleta.

Una muestra en solución es irradiada en el rango del UV-Visible. Ciertas longitudes de

onda son selectivamente absorbidas por la muestra produciendo un patrón espectral
característico, el cual puede ayudar a identificar el material.

Para la determinación en la región ultravioleta es necesario emplear porta muestras de

cuarzo que no absorba en esta zona del espectro.

Los componentes básicos de los espectrofotómetros son similares a los de un colorímetro

pero con mejoras y ampliaciones que les permitan una mayor precisión en las medidas.
Se distinguen dos tipos fundamentales: los de chorro simple y los de chorro doble. Estos
últimos son más prácticos ya que permiten obtener directamente la absorción relativa de
la muestra respecto a la referencia en todo el intervalo de longitudes.

 Fundamento de la técnica:

 Cuando un haz de luz atraviesa una disolución con un soluto absorbente, la intensidad
de este haz se disminuye debido a la absorción de una parte de la energía radiante de
una frecuencia característica por parte de moléculas o de iones del soluto cuando se
excitan a niveles energéticos superiores. En general podemos decir que:

Yo=Ya+It+ir

Donde Y o es la intensidad de luz incidente, Y a es la intensidad de luz absorbida, Y t es la

intensidad de la luz transmitida y I r puede ser eliminada.

 Nuestros ojos detectan longitudes de onda de la luz visible no absorbida, es decir, la

luz que transmitida. Las medidas de la cantidad de luz transmitida se pueden hacer
con un instrumento llamado espectrofotómetro, un esquema del que se muestra en la
figura y que consta fundamentalmente de una fuente de luz, un selector de longitud
de onda, una cubeta de material transparente a la radiación y un detector.
 Espectrofotómetro

 La absorbancia (A) de la sustancia se relaciona con la intensidad de la luz incidente y

de la luz transmitida según la ecuación conocida como ley de BOUGIES-Lambert-Beer:

A = -log T = -log Y t / I o = ·l·c

Dónde:
A = absorbancia
T = transmitancia
= absortividad molar; es una constante de proporcionalidad que depende de la sustancia
y de la longitud de onda. (Unidades: mol -1)
Y t = intensidad de la luz transmitida
I o = intensidad de luz incidente
l = camino óptico recorrido por la luz dentro de la disolución (unidades: cm)
c = concentración de la sustancia que absorbe (unidades: mol -1)

 Descripción de la técnica:

En este experimento usted determinará la concentración de manganeso en acero por

espectrofotometría.

El método más usado en la determinación espectrofotométrica de manganeso se basa en

la oxidación del ión de manganeso, Mn2+ al permanganato, MnO4-. El ión de
permanganato absorbe luz visible en la región de los 525 nm lo que le imparte un color
violeta a la solución acuosa de este ión.

El experimento consiste principalmente en preparar soluciones estándar permanganato

de potasio (KMnO4) con su respectivo blanco para ajustar la absorbancia a 0, luego
preparar soluciones del desconocido y su blanco.
Finalmente, determinará la absorbancia de todas las soluciones preparadas. Con estos
datos preparará una curva de calibración de absorbancia como función de concentración
conocida de manganeso y con la absorbancia de las soluciones desconocidas podrá
determinar la concentración del ión de MnO4-. Las medidas espectrofotométricas las
llevará a cabo en un espectrofotómetro visible GENESYS.
 REACCIONES IMPORTANTES
Tratamiento de la muestra de Acero para determinación de Mn:

Dilución de la muestra con los ácidos H3PO4 + HNO3 + Agua:

Fe 2  HNO3  Fe 3  NO2  NO
MnO  HNO3  Mn  2  NO2  NO

Al realizar la disolución de la muestra, la mezcla de ácidos H3PO4 + HNO3: actúa sobre los
componentes dejándolos en estados iónicos, donde el ácido nítrico actúa tanto en la muestra
de acero como en el de manganeso y el ácido fosfórico va a acomplejar al ión férrico dando un
complejo incoloro, cuya reacción es la siguiente:

2PO 43  Fe 3  Fe(PO 4 )2 

3

Complejo incoloro

Agregación de Sal de Mohr: ( NH4 )2 Fe(SO4 )2  6H 2O

La adición de sal de Mohr es para dar las mismas condiciones a la muestra patrón con el fin de
igualar el contenido de hierro de los patrones con el hierro contenido en la muestra de acero
a determinar.
Oxidación del Mn con la adición de peryodato de potasio.

2Mn 2  5IO4  3H2O  2MnO 4  5IO 3  6H

Reacciones en el equipo de espectrofotometría:

En el proceso de absorción de radiación electromagnética una especie, en un medio

transparente, capta selectivamente ciertas frecuencias de la radiación electromagnética. El
fotón absorbido hace pasar la especie M a un estado excitado M*:
M + h  M*
Tras un corto periodo, se pierde la energía de excitación, generalmente en forma de calor, y la
especie vuelve a su estado fundamental:

M*  M + Calor
 CÁLCULOS DETALLADOS
Calibración del espectrofotómetro “ SPECTRONIC C-20 GENESIS”

Se calibra a partir de la solución de CoCl2 en HCl a 1% midiendo los valores de absorbancia en el

rango de 450 a 700 nm cada 10 nm se mide la absorbancia. Se obtuvieron los datos presentes en la
tabla Nº1. En el cual la máxima absorbancia se da en un  max de 510 nm (según lo teórico debe ser
max de 510nm). Este resultado se encuentra en la gráfica Nº1.

Determinación máxima del  máximo del permanganato

Se utiliza el blanco y el patrón 2 (anteriormente descritos). Con ello se determinó el  máximo para
el permanganato mediante la gráfica Nº2. Se determinó que el  máximo es 525 nm, el cual se
encuentra en la tabla Nº2.

Determinación cuantitativa del manganeso en el acero

Se calcula la concentración del Mn en cada uno de los patrones

-PATRÓN 1:
0.1547 𝑔 𝑀𝑛𝑆𝑂4.𝐻2𝑂 𝑃𝐴 𝑀𝑛 0.1547𝑔 54.94𝑔/𝑚𝑜𝑙
W(g)Mn/250mL = 250𝑚𝐿
𝑥 𝑃𝐹 𝑀𝑛𝑆𝑂4𝐻2𝑂 = x
250𝑚𝐿 168.94𝑔/𝑚𝑜𝑙
= 2.0124x10-4 g/mL=

1000𝑚𝐿
W(g)Mn=0.20124mg/mLx 1𝐿
=201.24 mg/L

W(g) Mn = 201.24ppm

Ahora se calcula la concentración para 2mL del patrón diluidos en 100mL

1𝐿 2 𝑚𝐿
P1 =201.24mg/L x1000𝑚𝐿 𝑥 100 𝑚𝐿
P1= 4.0247 mg/L

Se repiten los cálculos para los patrones P2 y P3

P2= 10.0618 mg/L

P3=20.1236 mg/L

MUESTRAS (MI)

Se calcula la concentración total de la muestra en base al peso de dicha muestra diluido en 100mL.

M1 total = 0.1142g/100mL = 1.1420 x 10 3 mg/L

M2total = 0.1177g/100mL =1.1770 x 103 mg/L
M3 total = 0.1202g/100mL = 1.2020x 103 mg/L
Del gráfico Nº 3 se obtienen las concentraciones de manganeso (Mn) en las muestras.

M1 =11.2686 mg/L
M2 =12.1642 mg/L
M3= 7.2388 mg/L

Determinación del % de Mn en cada muestra de acero

Se utiliza la siguiente fórmula:

𝑀1
% Mn = 𝑥100
𝑀1 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙

Para muestra 1 (M1)

11.2686
% Mn = 1.1420 x 103 x100 = 0.986% ≈ 0.99%

M2:
% Mn = 1.03 %

M3:
% Mn = 0.60 %
 TABLA DE DATOS
1.- Concentración de Mn en Patrones

Concentración de
Mn en cada patrón (mg/L)
Patrón 1 4.0247
Patrón 2 10.0618
Patrón 3 20.1236

2.- Verificación de la calibración del espectrofotómetro con Cocl2 en Hcl al 1%.

λ (nm) Absorb.
450 0.198
460 0.262
470 0.311
480 0.347
490 0.379
500 0.418
510 0.444
520 0.430
530 0.380
540 0.298
550 0.213
560 0.145
570 0.091
580 0.063
590 0.052
600 0.044
610 0.039
620 0.037
630 0.036
640 0.034
650 0.032
660 0.031
670 0.029
680 0.026
690 0.022
700 0.019
3.-Determinación de la longitud de onda máxima ( λmáx) del mn usando patrón 2.

λ (nm) A
480 0.009
490 0.025
500 0.035
510 0.050
520 0.058
525 0.064
530 0.061
540 0.056
550 0.055

4.- Absorbancia de las soluciones patrones y muestras. ( lamba = 525 nm)

Solución A
P1 0.018
P2 0.064
P3 0.126
M1 0.069
M2 0.075
M3 0.042
 TABLA DE RESULTADOS
1.-Pocentaje de Mn en muestra de acero.

Concentración total Concentración de % de Mn en

de la muestra Mn en las muestras Muestra
(mg/L) (mg/L)
Muestra 1 1.1420 x 10 3 11.2686 0.99%
Muestra 2 1.1770 x 103 12.1642 1.03 %
Muestra 3 1.2020x 103 7.2388 0.60 %

GRÁFICAS EXPERIMENTALES
A) VERIFICACIÓN DE LA CALIBRACIÓN DEL ESPECTROFOTÓMETRO CON CoCl 2 en HCl al 1%.

λ (nm) A
450 0.198
460 0.262
470 0.311
480 0.347
490 0.379
500 0.418
510 0.444
520 0.430
530 0.380
540 0.298
550 0.213
560 0.145
570 0.091
580 0.063
590 0.052
600 0.044
610 0.039
620 0.037
630 0.036
640 0.034
650 0.032
660 0.031
670 0.029
680 0.026
690 0.022
700 0.019
 Gráfica 1 Calibración del espectrofotómetro
0.5
A vs λ
0.45

0.4

0.35

0.3
Absorbancia

0.25
A
0.2

0.15

0.1

0.05

0
400 450 500 550 600 650 700 750
Longitud de onda (nm)

B) DETERMINACIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA MÁXIMA ( λmáx) DEL Mn USANDO PATRÓN 2.

λ (nm) A
480 0.009
490 0.025
500 0.035
510 0.050
520 0.058
525 0.064
530 0.061
540 0.056
550 0.055
 Gráfica 2 Determinación λmáx del Mn
A vs λ A

0.07

0.06

0.05
Absorbancia

0.04

0.03

0.02

0.01

0
470 480 490 500 510 520 530 540 550 560
Longitud de onda (nm)

C) CURVA DE CALIBRACIÓN CON LOS DATOS DE ABSORBANCIA vs CONCENTRACIÓN (mg Mn/L)

Solución C (mg/L) A
P1 4.0247 0.018
P2 10.0618 0.064
P3 20.1236 0.126
M1 11.2686 0.069
M2 12.1642 0.075
M3 7.2388 0.042
 Gráfica 3 Curva de calibración
A vs c
0.14

0.12 y = 0.0067x - 0.0065

R² = 0.9966
0.1
Absorbancia

0.08

0.06

0.04

0.02

0
0 5 10 15 20 25
Concentración ( mg/L)
 DISCUSION DE RESULTADOS

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
 Conclusiones:
 La sal de Mohr (Fe(NH4)2)(SO4)2.7H2O que contiene al Fe3+ (amarillo) y el
H3PO4 forman un complejo fosfórico incoloro, mediante el enmascaramiento
al Fe3+ , evitando así una interferencia de coloración.
 El Blanco debe contener todos los reactivos utilizados en la preparación de
la disolución coloreada, pero nada de la sustancia que se está analizando, en
este caso el Manganeso (morado).
 Cuando se grafica la Absorbancia(A) vs la Concentración (C) de los patrones
y las muestras, las absorbancia de las muestras deben estar situadas entre el
rango de los patrones para la luego localizar las concentración de cada una
de ellas (muestra 1 y muestra 2). Si esto ocurre el análisis realizado es
óptimo.

 Recomendaciones:
 Se debe tener bien en cuenta el rango en el que se va a trabajar; en este caso
el rango visible. Por lo tanto, se emplea las celdas de material de vidrio para
el análisis por espectrofotometría visible.
 Para la preparación de la mezcla de ácidos se emplea agua, para que de esta
manera la solución esté diluida y el HNO3 no esté tan concentrado, así se
evita que se forme un óxido con el Fe lo cual podría dificultar la identificación
del Manganeso en la muestra.
 Limpiar cuidadosamente y correctamente con papel tisú las celdas de vidrio,
ya ciertas interferencias podrían afectar en el análisis espectrofotométrico.
 BIBLIOGRAFIA

 Hewlett Packard. 1988. The Diode-Array Advantage in UV-VIS Spectroscopy.

Publication No12 - 5594–8912.
 Inge, J.A. Jr. and Crouch, S.R. 1988. Spectrochemical Analysis. Prentice Hall
International, Inc.
 Skoog, D.A. y West, D.M. 1984. Análisis Instrumental. 2a edición. Ed.
Interamericana.
 Rubinson, K. A., Rubinson, J. F. “Análisis Instrumental”. Pearson Educación, S.A.
Madrid, España, 2001.
Willard, H. H., Merrit, L. Jr., Dean, J. A. y Settle, F. A. "Métodos Instrumentales De
Análisis".
 Grupo Editorial Iberoamérica. México, D.F. 1991.koog.-Holler Nieman, Análisis
Instrumental, quinta edición, Mc Graw Hill, 2001
ANEXO