Curso Preparatorio

INMUNOLOGÍA

PAOLO WONG

Laboratorio de Epidemiología Molecular y Genética,

Instituto de Medicina Tropical UNMSM
Inmunología
 LA RESPUESTA DEL SISTEMA INMUNE

 INMUNOGLOBULINAS

 ANTÍGENOS

 EL COMPLEJO PRINCIPAL DE
HISTOCOMPATIBILIDAD
 Respuesta frente a agentes infecciosos

Producto de aproximadamente 400 millones de años

de evolución, nuestro complejo y adaptable sistema
inmune tiene como función principal protegernos de
sustancias foráneas y potencialmente peligrosas como
microorganismos, toxinas y/o células malignas.

INMUNIDAD INMUNIDAD
INNATA AGENTES ADAPTATIVA

FAGOCITOS INFECCIOSOS

Generación de
CÉLULAS NK receptores específicos

COMPONENTES
EN SANGRE

Horas Días, semanas

Origen de las células del sistema inmune
 Inmunidad innata

• El sistema inmune innato (SII) es la primera respuesta

contra las infecciones.
• El SII regula la inmunidad adaptativa.
• El SII reconoce patrones específicos, limitados, en los
microorganismos denominados patrones moleculares
asociados a patógenos (PMAP) y los receptores que se
unen a ellas se llaman receptores para el reconocimiento
de patrones (RPMAP).
 Características
Inmunidad innata
• No hay autoinmunidad del SII, condición superior al
Sistema inmunitario Adaptativo (SIA).
• Los RPMAP del SII están codificados por el ADN en línea
germinal. Característica que lo diferencia del SIA ya que
este último mantiene un reordenamiento genético.
• Se ha calculado que los RPMAP puede reconocer 1000
patrones distintos en cambio el SIA puede reconocer un
mínimo de 10,000,000 de Ag distintos.
 Características
Inmunidad innata
• El SSI reconoce los productos microbianos que suelen
ser fundamentales para la supervivencia de los
microbios. Esto implica que al microorganismo le sea
difícil mutar ya que comprometería su supervivencia.
• Las principales células que participan en el SSI son los
neutrófilos, macrófagos, cels. dendríticas, cels.
endoteliales, linfocitos y otras.
 Inmunidad innata
¿Qué la constituye?
• Barreras físicas: la piel y mucosas gástrica y respiratorias
• Barreras químicas: pH de los fluidos, lípidos, poliaminas
• Bioquímicas: enzimas, proteínas de fase aguda,
interferones
• Microambientes: flora saprofítica intestinal, vaginal, etc.
• Células: fagocitos: polimorfonucleares, macrófagos
 Barrera física
Piel

• Barrera física y mecánica que impide la penetración de

gérmenes.
• Estrato córneo grueso en las zonas de mayor riesgo
traumático.
• Su acción de barrera física se ve acompañada del efecto
bactericida del pH ácido del sudor, la secreción sebácea,
y ácidos grasos.
 Barrera química

• Moco gástrico y pH ácido del estómago.

• Acción bactericida de las sales biliares sobre
determinados patógenos.
 Bioquímica

• Lisozima
• Proteínas de fase aguda
• Complemento
a. Opsonización de microorganismos (C3b)
b. Quimiotaxia (C3a, C5a)
c. Incremento de permeabilidad vascular (C3a, C5a)
d. Lisis de membrana celular (complejo C5b-9 activado)
Diferenciación celular según el sistema
inmunitario
 Atracción de los leucocitos hacia el
foco infeccioso
1.- Rodamiento de los leucocitos sobre el endotelio debido
a las selectinas.- Las citosinas TNF y IL-1 activan las
células endoteliles y leucocitarias para la expresión de
estas selectinas que no tienen mucha afinidad con sus
ligandos procurando su rodamiento debido a la fuerza de
cizallamiento del flujo sanguíneo.
2.-Aumento de la afinidad de las integrinas debido a las
quimiocinas.- Estimulan la quimiotaxis y la expresión de
integrinas.
3.-Adhesión de los leucocitos al endotelio debido a la
integrina estable.-
4.-Transmigración de los leucocitos a través del endotelio.-
Atracción de los leucocitos hacia el
foco infeccioso
RPMAP y PMAP
 Receptores tipo Toll
(RTT)
• Glicoproteínas integrales de membrana que
contienen repeticiones cargadas de leucina.
• El hombre tiene 11 RTT diferentes.
• Principalmente en macrófagos, células dendríticas,
neutrófilos, células epiteliales de la mucosa y células
endoteliales.
• La estimulación de los RTT estimula la transcripción de
diferentes citocinas (interleuquinas, interferones)
mediada por NF-kB, PA-1, IRF-3 y el IRF-7.
Tipos de RTT
 RTT en TB

Macrófago

ADN Mtb 5’-CG-3’ (CpG) TLR-9

Glicolípidos de pared Mtb TLR-2
Lipoproteína 19-KDa
Manosa bacteriana Lectina C
Otros compuestos RIF-I
NOD-r
Inmunidad adaptativa
 Inmunidad adaptativa

• Receptores de antígenos en los linfocitos

– LT: TCR
– LB: Ig
• Selección clonal
• Las respuestas posteriores a la inmunidad innata
suponen a la inmunidad adaptativa.
• En el plazo de una semana un único Linf B puede dar
lugar a aproximadamente 4000 células secretoras de Ac,
que producen mas de 1012 moléculas de Ac al día.
Selección clonal linfocitos B
 Etapas del SIA

• Etapa inicial de reconocimiento.- de la estructura

antigénica del agresor.
• Etapa de diferenciación.- de los linfocitos específicos.
• Etapa efectora.- en la cual se pone en acción una serie
de mecanismos de destrucción del agresor según las
características del antígeno (Células dendríticas,
macrófagos, Linfocitos B)
 Características
Inmunidad adaptativa
Características definitorias:

[Link] especificidad frente a diversas moléculas

[Link] de “recordar” exposiciones repetidas
al mismo antígeno
[Link] de reconocer GRAN cantidad de
sustancias microbianas y no microbianas
 Los anticuerpos específicos producidos por los linfocitos
B son capaces de reconocer como antígenos casi todo
tipo de moléculas: azúcares, lípidos, hormonas,
macromoléculas, ácidos nucleicos y proteínas.

 En cambio los antígenos de la superficie de los linfocitos

T son más selectivos y sólo son capaces de reconocer
moléculas de naturaleza peptídica cuando éstas están
unidas a ciertas moléculas conocidas como CMH que
están presentes en casi todas las células del organismo.

 Todas las células tendrían la posibilidad de presentar el

antígeno a los linfocitos T pero existen células
especializadas para esta función:
- Células dendríticas - Linfocitos B
- Macrófagos - Espermatozoides
- Plaquetas - Fibroblastos
 Respuesta inmune adaptativa
Linfocito T
NK Macrófago citotóxico
(alveolares, parenquimales) CD8
CPA
MHC-I
Migración

MHC-II
Linfocito Ags IF-Ɣ
B
CD4
Antígenos
Plasmocito Linfocitos
T Ɣ/δ
Anticuerpos Linfocito
Th2 Th2/Th1 Linfocito T
TNF-α - IL-4
IL-10
IL-12
helper IL-17A

Enzimas proteolíticas
Radicales libres
Óxido nítrico
-
Hidrolasas lisosomales Activación IL-2
Aglutinación
Linfocito
IF-Ɣ memoria
Macrófago
Mediadores Linfocito
activado
Th1
 Respuesta inmune en tuberculosis
MΦ
Lisis
CD8
CTL IFNγ
Lisis
Protección Granuloma
IFNγ sólido

CD8 CD8
CD8 TM TM
TM
M. tuberculosis Infección
latente
Presentación CD8
cruzada Agotamiento
PRR
PNG
MΦ MΦ

MHC I Protección

MHC II
IL 17 IFNγ
IL2 IFNγ TNF
Th17
CD4
Th1
M. tuberculosis Th1 TM
MHC II Granuloma
PRR caseoso
CD4 CD4
TEff

Th2
MHC I
Treg
Th3 Supresión
Presentación directa CD8 IL4
IL10
TGFβ
B Enfermedad
activa
Presentación CPA – Linf Th
Presentación CPA – Linf Th y activación
Presentación Ag – Linf Th y activación
Presentación
CPA – Linf Th
y activación
Presentación CPA – Linf Th y activación
 Linfocitos T

Selección tímica positiva (restricción al

CMH)

Selección negativa (Reconocimiento de

autoantígenos)
 Citotoxicidad es apoptosis

Vía Extrínseca Estímulos apoptóticos

Membrana
Estrés
Receptor de Lisosomal
muerte/Ligando Vía Intrínseca
Catepsina

Señales
Estrés RE
Ca+2
intracelulares
Mitocondria

Vía Caspasa Vía Caspasa

Dependiente Independiente
Estrés
genotóxico

Núcleo

APOPTOSIS
 Ligando
Vía Extrínseca
Receptor
de muerte

FADD Complejo de
Activación de
señalización
inductor de muerte la CASPASA 8
(DISC)

PROCASPASA 8
CASPASA 6

bid tbid
CASPASA 7
Apoptosis
CASPASA 3

Liberación de
CITOCROMO C Disminución del
Potencial
CASPASA 9 Activación Transmembrana

Apaf1 Vía Intrínseca

 ó FASL ó Apo1L
Familia
Receptores de Muerte ó FAS ó Apo1 TNF

Complejo de señalización
inductor de muerte
 Citotoxicidad es apoptosis
Complejo Receptor de Muerte

Receptor / Ligando

Fas (CD95/Apo1) / Fas ligand

TNF receptor 1 (p55) / TNF y linfotoxina
TRAMP (WSL1/Apo3/DR3/LARD) / TWEAK (Apo 3 ligand)
TRAIL-R1 (DR4) / TRAIL (Apo2 ligand)
TRAIL-R2 (DR5/Apo2/Killer) / TRAIL
Linfocitos
B
 Inmunofenotipos

Linfocitos T Linfocitos B NK Macrófago

Activación de Linfocitos B
Activación de Linfocitos B
Activación de Linfocitos B
Respuesta humoral
Inmunoglobulinas
 Inmunoglobulinas
• Son moléculas complejas en estructura y función

• Son receptores diversos de las células B con un rango

amplio de sitios de unión

• Proporcionan al sistema inmune un grupo conservado de

moléculas efectoras

• Las funciones receptoras y efectoras se localizan en

diversos dominios de la molécula
 Estructura
• Las inmunoglobulinas (Ig) son glicoproteínas
heterodiméricas

• Contienen dos cadenas pesadas (H, 50 – 70 KDa) y

dos cadenas ligeras (L, 25KDa)

• Presentan dos tipos de cadenas ligeras kappa (κ) y

lambda (λ)

• Cadenas pesadas: gamma (γ), mu (μ), épsilon (ε), alfa

(α) y delta (δ).

• Los residuos de cisteína forman puentes S-S entre las

cadenas individuales de una molécula de Ig.
 Estructura de la inmunoglobulina

Variable Constante Dominio

Sitio de unión
Cadena ligera

Cadena pesada

Sólo en
IgE e IgM

Unión de
Unión de antígeno Función efectora Antígeno
CDR = Región Determinante Complementaria VH = Dominio variable de las cadenas pesadas
Fab = Fragmento de unión al antígeno VL = Dominio variable de las cadenas ligeras
Fc = Fragmento cristalizable CH/L = Dominio constante de cadenas
pesadas/ligeras
 Características de la estructura
• La papaína separa los dos fragmentos de ligación del antígeno
(Fab) de los fragmentos que no se ligan al antígeno (Fc).
PAPAÍNA = 2(ab) + Fc
PEPSINA = (ab´)2 + Fc

• Los fragmentos Fc tienen sitios de unión para la proteína del

complemento C1q

• Las cadenas ligeras consisten de dos cadenas grandes de

aproximadamente igual medida

• Los diferentes dominios de una Ig dada tienen similar

estructura globular caracterizada por la presencia de múltiples
hojas β-plegadas y de uniones disulfuro.
 Características de la estructura

• La región constante (CL) varía un poco de una Ig a otra

• La secuencia de aminoácidos de la región variable (VL) exhibe

alto grado de variabilidad

• Los dominios constantes y variables consisten de

aproximadamente 110 aminoácidos (AA)

• Las cadenas pesadas consisten de un dominio variable (VH) de

aproximadamente 110 AA y tres dominios constantes (CH) con
excepción de IgE e IgM que tienen cuatro dominios
constantes.
Superfamilia de las inmunoglobulinas

Familia grande de proteínas caracterizadas caracterizada por la presencia de dominios tipo Ig de

aproximadamente 110 AA dobladas en dos hojas β-plegadas
 Dominio V
• Los dominios V de las cadenas ligeras y pesadas
contienen regiones con secuencias extremadamente
variables de AA, estas son llamadas regiones
hipervariables
• Las regiones variables consisten de 6 – 8 AA ubicados en
las posiciones 30, 50 y 93 (L) y 98 (H)
• Estas determinan la especificidad de la unión del Ag y
son referidas como regiones determinantes
complementarias (CDR)
• La sustitución de un AA es crucial para la unión de un Ag
particular
 Dominio V y distribución de los CDR

N-Terminal
CDR3

CDR1 C-Terminal

CDR2

Dominio Variable Dominio Constante

Negro: unión disulfuro intracadena
Azul: una superficie del dominio
Celeste: la otra superficie del dominio
 Las regiones hipervariables determinan la
especificidad del antígeno

N-terminal

Dominio variable de la cadena ligera con

los tres determinantes complementarios
hipervariables
 Dominio C

• Este dominio determina la función efectora de una Ig

• Es decir, determina el grado de unión complementaria, la

interacción con receptores específicos (Fc) de varias
células y la transferencia transplacentaria

• Mediador de las funciones biológicas secundarias

 Clases y sub-clases

• Cada una de las clases y sub-clases de IG juegan un rol

importante en la defensa del individuo

• La división en clases está basada en la estructura de la

región constante de la cadena pesada

• Las clases pueden a su vez ser sub-divididas en sub-

clases

• En el humano se tienen 5 clases: IgM, IgG, IgA, IgD e

IgE
 Clases de Ig

• No sólo se diferencian por sus secuencias sino también

por las estructuras antigénicas que producen

• Por ejemplo si inyectáramos proteínas IgG de mieloma a

un conejo, éste produciría un antisuero que al ser
adsorbido con mezclas de otros mielomas (para evitar
reacciones cruzadas) y que luego reaccionarán sólo con
la IgG que la produjo.
 Isotipos, alotipos e idiotipos

• Isotipos: son Ig variantes con base en las estructuras

constantes de sus cadenas pesadas, todas estas están
presentes en cada individuo. (Ej. IgG, IgA, IgM, IgD, IgE)

• Alotipos: son variantes de cadenas pesadas codificadas por

genes alélicos (alternativos) en un locus simple y están por lo
tanto genéticamente distribuidas. (Ej. Grupos Gm)

• Idiotipos: es la colección de determinantes antigénicos de un

anticuerpo, usualmente asociado con regiones hipervariables,
reconocidas por receptores antígeno-específicos, ya sea
anticuerpos (anti-idiotipo) o TCR’s.
Esquematización de isotipos, alotipos e
idiotipos

VH/VL Fc

Idiotipo Isotipo Isotipo

Hipervariable
Alotipo
(sitio de combinación
del Ag)
Variación Distribución Variantes Localización Ejemplos

Isotípica Todas las variantes Clases, CH IgM, IgE

presentes en subclases, CH IgA1, IgA2
suero de tipos, CH Κ, λ
individuos subgrupos,
CH λOz+, λOz-
normales familias
VH/VL VκI, VκII, VκIII
VHI, VHII, VHIII
Alotipica Formas Alotipos Principalmente Grupos Gm (humanos)
alternativas, CH/CL B4, b5, b6, b9 (cadenas
genéticamente Algunas veces ligeras de conejos)
determinadas, no
VH/VL Igh-1ª, Igh-1b (cadenas
presentes en
todos los pesadas γ2a de ratón
individuos
Idiotípica Individualmente Idiotipos Regiones Una o mas regiones
específica a cada variables variables formando el sitio
molécula de de combinación del
inmunoglobulina
antígeno
 Anticuerpos

• Son inmunoglobulinas producidas en respuesta a un

estimulo antigénico

• Los anticuerpos se unen correspondientemente al Ag que

causó su producción

• La interacción entre el anticuerpo y el antígeno se da

entre el paratope y el epítope. Recordar que los
anticuerpos no reconocen antígenos, reconocen epítopes.

• Los Ab son la forma secretoria de los receptores de Cél. B

 Características de los anticuerpos

• Las moléculas de
anticuerpos tienen la
forma de Y

• Tres regiones globulares

forman la Y

• La zona de unión del

antígeno se une al tronco
a través de una región
bisagra
 Anticuerpo tratado con enzimas

Reducción y acidez Papaína Pepsina

Cadenas aisladas Fragmentos por papaína Fragmentos por pepsina

Proteinograma electroforético
Tipos de inmunoglobulinas
 IgM IgG
secretada secretada

IgM de IgG de
membrana membrana

3aa
21aa

3aa
30aa
Igα Igβ
IgA
IgG
Conmutación isotípica
Conmutación isotípica
 Conmutación isotípica

Linfocitos B Isotipo de la Ig secertado (%)

cultivados con

Activador Citocina IgM IgG1 IgG2a IgE IgA

policlonal

LPS Ninguna 85 2 <1 <1 <1

LPS IL-4 70 20 <1 5 <1

LPS IFN-γ 80 2 10 <1 <1

LPS TGF-β + 75 2 <1 <1 15

IL-5
Funciones efectoras Ig
Funciones efectoras Ig
 Funciones efectoras Ig
Linfocito T
helper

CD40 / Ligando-CD40
Citocinas

Linfocito B Linfocito B activado

IgM+
Conmutación Isotípica

IgM IgG (IgG1,IgG3) IgE IgA

Activación del Respuestas de fagocitos Inmunidad frente a Inmunidad en las

complemento dependientes del FcR helmintos mucosas (transporte
Activación del Desgranulación de los de IgA a través de los
complemento mastocitos epitelios)
Inmunidad neonatal (hipersensibilidad
inmediata)
 Funciones efectoras Ig
IgM IgG (IgG1,IgG3) IgE IgA IgD

Activación de Opsonización de Desgranulación Inmunidad en las Receptor

la vía clásica antígenos para su de los mastocitos mucosas (secreción antigénico de
del fagocitosis por (reacción de de IgA a la luz de los linfocitos B
complemento macrófagos y neutrófilos hipersensibilidad los aparatos igestivo vírgenes
Receptor Activación de la vía inmediata o tipo I) y respiratorio) (membrana)
antigénicos de clásica del complemento Activación del
los linfocitos B Citotoxicidad celular complemento por la
vírgenes dependiente de vía de la lecitina o
(membrana) anticuerpos mediada por por la vía alternativa
células NK y macrófagos
Inmunidad neonatal:
paso de los anticuerpos
de la madre a través de
la placenta y el intestino
Inhibición por
retroalimentación de la
activación de los
linfocitos B
 Receptores Fc

La región Fc de Ig determina la forma en que los

patógenos serán eliminados.

• En leucocitos
• En neutrófilos y macrófagos
• En células NK
• En linfocitos B
• En células epiteliales (median transporte
transepitelial de anticuerpos)
 Receptores Fc

Patógenos Transporte (Reclutamiento)

Co-regulación Activación/Inhibición (FcγR/FcγRIIB)
 Receptores Fc
FcR Afinidad por Distribución celular Función
inmunoglobulinas
FcγRI Alta (Kd ˜ 10-9 M); se une a Macrófagos, neutrófilos Fagocitosis; activación
(CD64) IgG1 e IgG3, puede unirse y también eosinófilos de fagocitos
a IgG monomérica
FcγRIIA Baja (Kd > 10-7 M) Macrófagos, neutrófilos, Fagocitosis; activación
(CD32) eosinófilos, plaquetas celular (ineficaz)
FcγRIIB Baja (Kd > 10-6 M) Linfocitos B Inhibición de linfocitos B
(CD32) por retroalimentación
FcγRIIIA Baja (Kd > 10-6 M) Linfocitos NK Citotoxicidad celular
(CD16) dependiente de
anticuerpos
FcγRIIIB Baja (Kd > 10-6 M) Neutrófilos y otras Fagocitosis (ineficiente)
(CD16) células
FcεRI Alta (Kd > 10-10 M) Mastocitos, basófilos, Activación celular
eosinófilos (desgranulación)
FcεRII Baja (Kd > 10-7 M) Linfocitos B, eosinófilos, Desconocida
(CD23) células de Langerhans
FcαR Baja (Kd > 10-6 M) Neutrófilos, eosinófilos, ¿Activación celular?
(CD89) monocitos
Receptores Fcγ
Co-regulación Activación/Inhibición (FcγR/FcγRIIB)
Regulación de la respuesta de las células B por el FCγRIIB
FcεRI
SISTEMA DEL COMPLEMENTO
 Anticuerpos policlonales

• Son anticuerpos derivados de diferentes células B

• Es decir, son un grupo o mezcla de inmunoglobulinas

dirigidos contra un antígeno específico

• Cada inmunoglobulina de la mezcla reconoce un epítope

diferente

• Habitualmente los anticuerpos policlonales se obtienen a

partir de antisueros, los cuales se generan a partir de
animales inmunizados con un antígeno
Producción de anticuerpos policlonales

poliespecífico

Rápido
Recolección de Barato
suero Suero policlonal tiene Ig contra otros Ag
Variación entre lotes
Provisión limitada

monoespecífico
 Anticuerpos monoclonales

• Anticuerpos producidos por una sola clona de células B

• In Vitro son producidos por hibridomas formados entre

células productoras de Ab normales y células B tumorales
inmortales

• Se inició la producción de Ab monoclonales en ratón

• Comparten la misma clase de Ig y alotipo, la misma

región variable, estructura, idiotipo, afinidad y
especificidad por un determinado epítope
 Suero anti a
y anti b
Inmunización

Células esplénicas

Tumor Cél. B

Fusión PEG

Producción de
Hibridomas anticuerpos
monoclonales
inmortales

Dilución límite
1 cél/pozo
Clonación
Microplaca

Expansión
clonal

Monoclonales

Ab monoclonales Anti a y Anti b

Antígeno-Anticuerpo
 Antígeno

• Sustancias que estimulan la generación de anticuerpos

• Cualquier sustancia que puede ser reconocida por el

sistema inmune adaptativo

• Recordar que NO TODAS las respuestas inmunes

adaptativas involucran la producción de anticuerpos

• Algunos antígenos son inmunógenos

 Epítope

• La estructura reconocida por un anticuerpo (paratope)

se conoce como determinante antigénico o epítope

• La mayoría de patógenos tienen cubiertas polisacáridas y

los anticuerpos reconocen subunidades de azucares de
estas moléculas

• En muchos casos, los antígenos que causan la respuesta

inmune son proteínas
 Hapteno

• Grupos químicos
pequeños, bien
definidos, no
inmunogénicos por sí
mismos, pero qué
unidos a un
transportador pueden
generar una respuesta
inmune

Figura: Un hapteno por sí mismo no es capaz de

producir una respuesta humoral
 Adyuvantes
• Sustancia incorporada o inyectada conjuntamente con
un antígeno purificado o un microorganismo atenuado
para potenciar su efecto inmunogénico:
– Fosfatos e hidróxidos de aluminio
– Adyuvante incompleto de Freund (fase acuosa en parafina)
– Adyuvante completo de Freund (MDP, muramil dipeptido)
– Adyuvante de Ribi (MPA,Monofosforil lípido A, derivado de
LPS)
– Liposomas
– Iscom, complejo inmunoestimulante (saponina, colesterol,
fosfatidilcolina)
 Determinantes antigénicos

• Conjunto de epítopes dominantes

• Cada antígeno contiene diversos determinantes en su

superficie, a veces distintos unos de otros

• Un anticuerpo monoclonal que reacciona con un

determinante puede no reaccionar con otros
determinantes en el mismo antígeno
 Los determinantes son grupos dominantes
de epítopes

• Algunos epítopes son más

frecuentes

• Los anticuerpos
monoclonales pueden
reaccionar de manera
sobrepuesta entre
algunos epítopes

Figura: Representación idealizada de un

determinante antigénico, epítopes y paratopes.
 Tipos de epítopes

• Epítopes conformacionales (o discontinuos)

• Epítopes lineares (o continuos)

Epítopes conformacionales (o discontinuos)

• Son estructuras reconocidas por el anticuerpo y que

están localizadas en la superficie de las proteínas

• Estos sitios (estructuras) están compuestos de

aminoácidos de diferentes partes de la cadena
polipeptídica que son unidos por el plegamiento
proteico

• Ej. Las proteínas de la envoltura de algunos virus es

reconocida por anticuerpos
 56
102
VL CDR2
VH CDR3
50
24

VL CDR1 95

34 Epítope 35
antigénic VH CDR1
87
o
31

65
VL CDR3

97
50
VH CDR2

Figura: Representación bidimensional de la región de unión del antígeno formada por la aposición
de asas polipeptídicas que contienen las regiones hipervariables de las cadenas ligeras y pesadas
 Epítopes lineares (o continuos)

• Están compuestos de un segmento simple de

cadena polipeptídica

• Aunque la mayoría de anticuerpos se dirigen contra

proteínas intactas, grandes, plegadas, algunas se
unen a fragmentos peptídicos de las proteínas
 Péptido de
secuencia inflexible

Proteína

Figura: Representación de un péptido de secuencia inflexible (epítope linear). Esta es sólo una de
las múltiples conformaciones espaciales que podría adoptar si fuera un péptido libre. Si se
utilizara para una vacuna, esta sería una muy pobre que incluso generaría una respuesta mínima.
Naturaleza química de los antígenos

• Polisacárida

• Peptídica

• Glicoproteica
 Naturaleza polisacárida
• Existen 84 tipos
diferentes de S.
pneumoniae

• Cada tipo difiere uno del

otro en la estructura
polisacárida de su cápsula

• Para el sistema inmune

cada cápsula representa Figura: Variación antigénica polisacárida en
un organismo distinto Streptococcus pneumoniae
 Naturaleza polipeptídica
• Los virus de la influenza
tienen antígenos
polipeptídicos

• La hemaglutinina es una
proteína de superficie
responsable del ingreso a
la célula

• Por su naturaleza sufre

cambios y alteraciones

Figura: Representación de la expresión de hemaglutinina en el virus de la influenza

Naturaleza glicoproteica
• La superficie del Tripanosoma está
cubierta con una glicoproteína variante
específica (VSG)

• La conversión de genes hace que uno

de los más de 1000 genes se expresen
cada vez

• La variación está en la forma en que la

proteína se glicosila y finalmente se
expresa

Figura: Variación antigénica del Tripanosoma

 Requerimientos de inmunogenicidad

• La inmunogenicidad es la capacidad de la molécula

para provocar una respuesta inmunitaria

• La antigenicidad es la capacidad para reaccionar

específicamente con los productos de la respuesta
inmune (humoral y celular)

• Los haptenos tienen antigenicidad pero no tienen

inmunogenicidad
 Clasificación de los antígenos
1. Por su origen
– Exógenos
– Endógenos

2. Por sus propiedades antigénicas

– Antígenos completos o inmunógenos
– Haptenos o antígenos incompletos

3. Por su estructura físico-química

– Proteínas
– Polisacáridos
– Lipopolisacáridos
– Glicoproteínas
– Ácidos nucleicos
4. Por el tipo de respuesta que producen
– Linfocitos T dependientes
– Linfocitos T independientes

5. Por su forma de obtención

– Naturales
– Artificiales
– Sintéticos

6. Por su conformación estérica

– Conformacionales
– Lineares
7. Por su distribución
– Heterófilos
– Órgano-específicos
 Superantigenicidad

• Los superantígenos son un tipo distinto de antígenos

• Estimulan una respuesta primaria de Células T, similar

en magnitud la respuesta alogénica de tipo MHC

• Esta reacción de observó inicialmente en las reacciones

mixtas de linfocitos a partir de ratones con MHC idéntico
pero genéticamente distintos

• Estos antígenos fueron llamados antígenos estimulantes

de linfocitos menores (MIs)
 Características de los superantígenos

• Estimulan gran cantidad de células T

CPA
• Son producidos por una gran
cantidad de patógenos

• Son proteínas reconocidas por

células T sin ser convertidas en
péptidos que son capturados por
moléculas MHC
Célula T
• Estas moléculas actúan sin tener en
cuenta la especificidad del antígeno
Figura: Estimulación por al receptor
superantígenos
 Toxinas bacterianas como
superantígenos
• Estimulan entre el 5 al 20% de la población de células T
que expresan la misma estructura de la familia de TCR2
Vβ

• La lista incluye: enterotoxinas de S. aureus (SEA, SEB,

otras), toxina 1 del síndrome de choque tóxico de
estafilococo (TSST-1), superantígeno estreptococócico
(SSA), exotoxinas piogénicas de estreptococo (SPE),
toxinas exfoliativas de estafilococo (ETs), entre otras

• También: mitógenos de Mycoplasma arthritidis (MAM) y

Yersinia pseudotuberculosis
Proteínas virales como superantígenos

• Los Virus Tumoral Mamario de Ratones (MMTV) son

transmitidos en la leche y específicos para células B

• Están asociados con moléculas MHC clase II en la

membrana de las células B

• Actúan como superantígenos debido a su afinidad por

ciertas familias de TCR Vβ. Se unen más al asa HV4.

• Otros: nucleocapside del virus de la rabia, antígenos de

CMV y EBV.
Complejo Mayor de
Histocompatibilidad
(CMH I y CMH II)
 Características CMH

• Presentación de los péptidos a los Linf T.

• Son los genes más polimórficos del genoma.
• CMH I Linf T CD 8+
• CMH II Linf T CD4+
• Los genes del CPH controlan la respuesta inmunitaria a
los antígenos proteínicos.
• Para que una proteína sea inmunogénica en un sujeto,
debe contener péptidos que se puedan unir a las
moléculas de su CPH
 Características CMH

• Las moléculas del CPH muestran una especificidad

amplia en su unión a los péptidos y la especificidad
fina del reconocimiento del Ag reside en gran medida
en los receptores del Ag de los Linf T.
• Las moléculas del CPH de un individuo no discriminan
entre los péptidos extraños (es decir, los derivados de
Ag microbianos) y los derivados de Ag del propio
sujeto (Ag propios).
Estructura
Estructura CMH I

CD8 (citotóxicos)
como moléculas
“helper”
 Genética CMH

- Numerosas proteínas que intervienen en el

procesamiento y presentación de antígenos están
codificadas por genes en el interior del CPH

- Las proteínas producto de los genes de CPH de clase I

y clase II son altamente polimórficas

- El polimorfismo del MHC determina qué péptidos

pueden unirse y ser procesados por las células T

- El polimorfismo del MHC amplía el espectro de

antígenos contra los que puede responder el sistema
inmunitario
 Genética CMH

Los genes del CMH se expresan de forma codominante

en cada individuo, cada persona expresa todos los alelos
del CPH heredados de ambos padres. Esto eleva al
máximo el número de moléculas del CMH disponibles para
unirse a péptidos y presentarlos a los Linf T.

Genes del CMH I Genes del CMH II

HLA-A, HLA-B, HLA-C HLA-DR, HLA-DP, HLA-DQ

Genética CMH: Codominancia
Genética
 GENES Y
GENOMA
 Genoma Humano

• El genoma humano es el término utilizado para

describir el conjunto total de moléculas de DNA
que se encuentran en cada célula del cuerpo.
• Consta de 3.000 millones de pares de bases de DNA
(3,2 x 109 pb; 3.200 Mb ó 3,2 Gb).
• Este DNA contiene toda la información necesaria para
que el cigoto se convierta en un ser humano adulto.
Genoma Humano

• La información se encuentra en forma de

genes.
• Cada gen consiste en un fragmento de
DNA que tiene alguna función,
generalmente especificar la secuencia
de una proteína.
• En el genoma humano las secuencias
codificantes representan solamente el
1,5% del total.
• Parte del resto del DNA no es codificante,
pero puede tener funciones diversas en
la regulación de la expresión génica o en
la estructura de los cromosomas y su
segregación en la división nuclear.
 Genoma Humano

• Una parte importante del genoma

parece no tener ninguna función.
• El “DNA basura” consiste en una
colección de elementos repetitivos y
móviles.
• Los genes mismos no son tiras
continuas de DNA: las secuencias
codificantes (exones) se
interrumpen por otras secuencias no
codificantes (intrones).
• En algunos casos, solo el 1%, o menos,
del total de la secuencia de un gen
contiene información codificante.
 Organización estructural del genoma
humano
• DNA de secuencia única, o con pocas copias de
DNA (aproximadamente el 45% del total). Esta clase
contiene las secuencias que forman los genes. Las
regiones codificantes corresponden a un 1,5 % del
total del [Link] DNA restante es el que forma
parte de los intrones o las regiones espaciadoras
(secuencias sin aparente función que separan los
genes).
• DNA moderadamente repetitivo, constituido por
secuencias repetidas entre 102 y 105 copias por
genoma (aproximadamente un 45 % del total).
• DNA altamente repetitivo, formado por secuencias
repetidas hasta 106 copias por genoma (casi un 10%
del total).
 Genes

• Definición funcional.- Es aquella secuencia de DNA que

contribuye al fenotipo de un organismo de manera que
depende de su secuencia.
• Un cambio en la secuencia del gen puede afectar a su
función y puede tener consecuencias fenotípicas.
• Muchos genes codifican proteínas.
• Las secuencias que codifican para moléculas funcionales
de RNA se consideran genes también, ya que su función
depende de su secuencia.
 Estructura de los genes PREG. 121

• Un gen es un fragmento específico de secuencia de

nucleótidos en el DNA que contiene la información para
la síntesis de un polipéptido o una molécula de RNA.
• En los cromosomas se encuentran muchos genes
diferentes.
• La secuencia de nucleótidos que codifican para una
proteína puede estar en cualquiera de las dos cadenas
del DNA.
• Genes distintos tienen diferentes orientaciones en la
doble hélice del DNA.
• La secuencia de aminoácidos de una proteína
usualmente es colinear con la estructura de su gen
Estructura de los genes eucariotas

PREG. 135

PREG. 124
¿Que hay en un genoma?
• Genes: exones e intrones
• Secuencias reguladoras que controlan los genes
• DNA intergénico
• Secuencias Repetitivas
• Genes repetidos, ej. rRNA
• Familias de genes
• Elementos transportables
• Secuencias repetidas cortas
• Microsatélites: 1-3 bp
• Minisatélites: 10 – 100 bp
• Satélites: 5-500 bp, centromérico
¿Que hay en un genoma?
Mecanismos mutacionales
Mutación
 Causas de las alteraciones en el ADN

• Errores durante la replicación

• Modificaciones espontaneas
• Agentes físicos y químicos

* Las mutaciones espontaneas o por agentes

físicos y químicos se dan a nivel de la bases
nitrogenadas.
Errores durante la replicación
 Causas de mutaciones en bases
nitrogenadas
• Desaminación
• Tautomerización
• Análogos de bases
• Radiación
• Alquilación
• Carcinógenos
Desaminación de bases nitrogenadas
 Tautomería

Interconversión entre dos isómeros de la base

nitrogenada que se diferencian sólo en la posición
de un grupo funcional o un protón (la mayoría con
dobles enlaces).

Existe un cambio en la posición de un enlace π y un

hidrógeno.
Tautomería de bases nitrogenadas

TAUTOMERÍA IMINA-AMINA
G–A–C

TAUTOMERÍA LACTAMA-LACTIMA (CETO-ENÓLICA)

G–C–T–U

Las formas tautoméricas (enol e imina, respectivamente) son

unas 10 000 más inestables. La A sólo presenta un tipo de
tautomería, y la G y C dos. La T presenta dos formas
tautoméricas, pero ambas cetoenólicas
 Tautomería Imina-Amina

NH
NH2
H N
N

Imina Amina primaria

Mutaciones por tautomería
Tautomería Imina - Amina

H
N H
H
N
N
N
N H
N
N
O
N
Citosina
Adenina
(tautómero imino raro)
Mutaciones por tautomería
Tautomería Imina - Amina

El tautómero imino de adenina puede

parearse con citosina, eventualmente
dando lugar a la transición de AT a
CG.
A T

G C
 Tautomería Lactama-Lactima
(Ceto-enólica)

O OH

H N
N

Lactama Lactima
 Tautomería Lactama-Lactima
(Ceto-enólica)

Tautomería cetoenólica catalizada por ácido

O O O O
H H +
H
+
+ H+ + H+

Forma enólica Grupo carbonilo Forma ceto

protonado
 Tautomería Lactama-Lactima
(Ceto-enólica)

Tautomería cetoenólica catalizada por base

-
O O O O
H
- - -
+B +BH +B

Forma enólica Ion enolato Forma ceto

Tautomería Lactama-Lactima
(Ceto-enólica)

H 3C
O
H
N N O
H
N
O N
H
Forma enólica N N N
de la Timina
(T*) H
Guanina
 H3
C
Mutación por tautomería
O
H
N N
H
O Consecuencias
N
O N
ACGTC
H
Normal
N N N TGCAC
H
Forma enólica de
ACGTC
Guanina (G*)
TGTAC
ACATC
Mutante
TGTAC
ACGTC AC
Replicación
TGCAC TG
ACGTC
DNA parental Normal
TGCAC
ACGTC
TGCAC
Replicación

Primera ACGTC
TGCAC Normal
generación

Segunda
generación
 Análogo de bases

• Son mutágenos químicos que pueden sustituir a las

purinas o a las pirimidinas durante la síntesis de los
ácidos nucleicos. Ejemplo: 5 Bromouracilo.
Efecto del 5 - Bromouracilo
 Daños por radiación

Dímero pirimidina ciclobutano Dímero 6-4

TT> TC > CT > CC TC > CC > TT > CT
 Daños por alquilación
Agentes alquilantes

• Clorambucil
• Melfalán
• Mostaza nitrogenada
Alquilación de timina y guanina
conversión en O6-mG y O4-mT
 Reacción de las bases con
carcinógenos

BENZOPIRENO
Herencia Genética
 Conceptos básicos
• Gen: Segmento de ADN que contiene la información necesaria para
la síntesis de una proteína.
• El conjunto de genes constituye el genotipo.
• La manifestación externa del genotipo se denomina fenotipo.
• Locus: el lugar que ocupa cada gen a lo largo de un cromosoma (el
plural es loci)
• Cromosomas homólogos: Aquellos que tienen información para los
mismos caracteres
• Alelo: Cada una de las formas alternativas que puede tener un gen
y se diferencian en su secuencia de nucleótidos.
• Homocigótico o raza pura: Se forman cuando los alelos son
iguales(AA o aa).
• Hetrocigótico o híbrido: Cuando poseen dos alelos distintos para
un determinado carácter (Aa)
• Herencia dominante: Se produce cuando en el híbrido (Aa) sólo se
expresa el alelo dominante A, mientras que el alelo recesivo (a) debe
encontrarse en homocigosis para poder expresarse (A  a).

• Herencia intermedia o codominancia: Se produce cuando en el

híbrido (Aa) los dos alelos tienen la misma “fuerza” para expresarse,
por lo que aparece un fenotipo intermedio. Ambos alelos se dice que
son equipotentes, aunque se puede seguir utilizando las letras
mayúsculas y minúsculas, en este caso no indican ninguna relación de
dominancia (se pueden elegir dos letras mayúsculas)
Cromosomas humanos
Ejemplo 1
Ejemplo 2
Gen Dominante
Ejemplo 3
Gen recesivo
 Herencia influida por el sexo
• Algunos genes situados en los autosomas, o en las zonas
homólogas de los cromosomas sexuales, se expresan de manera
distinta según se presenten en los machos o en las hembras .
Generalmente este distinto comportamiento se debe a la acción
de las hormonas sexuales masculinas.

• Como ejemplo de estos caracteres, podemos citar en los hombres

la calvicie, un mechón de pelo blanco , y la longitud del dedo
índice.

• En el caso de la calvicie en hombres C2 > C1 y en el caso de las

mujeres C1 > C2
 Herencia ligada al sexo

• Los genes responsables de algunos caracteres se localizan en los

cromosomas sexuales X e Y, por los que su manifestación se
encuentra ligada a qu una persona sea de uno de otro sexo.

• Entre las enfermedades más comunes asociadas al segmento

diferencial del cromosoma X están hemofilia y el daltonismo
Herencia del daltonismo
• Consiste en la incapacidad de
distinguir colores, especialmente el
rojo y el verde.

• Se trata de un carácter recesivo

localizado en el cromosoma X

• Hombre normal (XY), hombre

daltónico (XdY), mujer normal (XX),
mujer normal portadora (XdX) y
mujer daltónica (XdXd)
 Herencia de la hemofilia
• Se caracteriza por la incapacidad de coagular la sangre.

• Se trata de un carácter recesivo localizado en el cromosoma X

• Hombre normal (XY), hombre hemofílico (XhY), mujer normal

(XX), mujer normal portadora (XhX) y mujer hemofílica (XhXh)
(pero en la realidad no llegan a nacer porque esta combinación
homocigótica recesiva es letal en el estado embrionario, es decir
provoca la muerte del feto)
Traslocación robertsoniana