CREATINE KINASE-MB

COD 11792 1 x 50 mL
(CK-MB)
CONSERVAR A 2-8ºC
Reactivos para medir la concentración de CK-MB
CREATINA QUINASA-MB (CK-MB)
Sólo para uso in vitro en el laboratorio clínico Inmunoinhibición

FUNDAMENTO DEL MÉTODO El índice de CK-MB se calcula utilizando la siguiente fórmula:

Un anticuerpo específico inhibe las dos subunidades M de la CK-MM (CK-3) y la única CKMB concentración
x 100 = %
subunidad M de la CK-MB (CK-2), lo que permite la medición de la subunidad B de la de la CKtotal concentración
CK-MB (asumiendo la ausencia de CK-BB o CK-1)1,2. La concentración catalítica de CK-B, que
corresponde a la mitad de la actividad CK-MB, se determina empleando las reacciones VALORES DE REFERENCIA
acopladas de la hexoquinasa (HK) y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6P-DH), a partir de la Se han descrito valores discriminantes de alrededor de 25 U/L = 0,42 µkat/L para el infarto
velocidad de formación del NADPH, medido a 340 nm3. agudo de miocardio. No obstante, es preferible emplear el límite del índice de CK-MB del 6% de
la concentración de CK total4 como valor discriminante.
CK-B
Fosfato de creatina + ADP Creatina + ATP CONTROL DE CALIDAD
HK Se recomienda el uso del Suero Control de CK-MB (cod. 18024) para verificar la funcionalidad
ATP + Glucosa ADP + Glucosa - 6 - fosfato
del procedimiento de medida. Las concentraciones de CK y CK-MB vienen indicadas en la
G6P-DH
etiqueta del vial. El valor de CK es trazable al sistema de referencia descrito por el Comité de
Glucosa - 6 - fosfato + NADP+ Gluconato - 6 - fosfato + NADPH + H+
Sistemas de Referencia para Enzimas de IFCC y el de CK-MB al material de referencia ERM-
COMPOSICIÓN AD455/IFCC (IRMM). La trazabilidad solo se asegura empleando los reactivos y procedimientos
de medida recomendados por BioSystems.
A. Reactivo. 1 x 40 mL: Anti-humano-CK-M capaz de inhibir 2000 U/L de CK-M, Imidazol 125
Todos los componentes de origen humano han resultado ser negativos para el antígeno HBs y
mmol/L, EDTA 2 mmol/L, acetato de magnesio 12,5 mmol/L, D-glucosa 25 mmol/L,
para los anticuerpos anti-HCV y anti-HIV. Sin embargo, deben tratarse con precaución como
N-acetilcisteína 25 mmol/L, hexoquinasa 6800 U/L, NADP 2,4 mmol/L, pH 6,1.
potencialmente infecciosos.
B. Reactivo. 1 x 10 mL: Fosfato de creatina 250 mmol/L, ADP 15,2 mmol/L, AMP 25 mmol/L, Reconstituir con el volumen de agua destilada indicado en la etiqueta. Estable 7 días a 2-8ºC.
P1, P5-di(adenosina-5'-)pentafosfato 103 µmol/L, glucosa-6-fosfato deshidrogenasa 8800 Utilizar el Control en el procedimiento analítico de forma idéntica a las muestras de los
U/L. pacientes.
CONSERVACIÓN Los intervalos de valores aceptables que se sugieren han sido elaborados en base a la
experiencia previa en variabilidad interlaboratorio y se indican únicamente a título orientativo, ya
Conservar a 2-8ºC. que cada laboratorio debe establecer sus propios parámetros de precisión.
Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se
conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso. CARACTERÍSTICAS METROLÓGICAS
− Límite de detección: 3 U/L = 0,05 µkat/L.
Indicaciones de deterioro:
− Límite de linealidad: 1000 U/L = 16,7 µkat/L. Cuando se obtengan valores superiores, diluir la
− Reactivos: Presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco superior a 0,400 a 340 muestra 1/2 con agua destilada y repetir la medición.
nm (cubeta de 1 cm). − Repetibilidad (intraserie):
REACTIVOS AUXILIARES Concentración media CV n

S. Patrón de Creatina Quinasa-MB (CK-MB) (BioSystems cod. 11824). CK-MB humana. La 45 U/L = 0,75 µkat/L 2,8 % 20
concentración de CK-MB viene indicada en la etiqueta del vial. El valor de concentración es 129 U/L = 2,15 µkat/L 2,3 % 20
trazable al material de referencia ERM-AD455/IFCC (IRMM).
− Reproducibilidad (interserie):
Todos los componentes de origen humano han resultado ser negativos para el antígeno HBs y
para los anticuerpos anti-HCV y anti-HIV. Sin embargo, deben tratarse con precaución como Concentración media CV n
potencialmente infecciosos. 45 U/L = 0,75 µkat/L 3,5 % 25
Reconstituir el liofilizado con 1 mL de agua destilada. Estable 7 días a 2-8ºC. 129 U/L = 2,15 µkat/L 3,2 % 25

PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS − Veracidad: Los resultados obtenidos con estos reactivos no muestran diferencias
Reactivo de Trabajo: Añadir el contenido de un frasco del Reactivo B a un frasco del Reactivo sistemáticas significativas al ser comparados con reactivos de referencia. Los detalles del
A. Mezclar suavemente. Si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL estudio comparativo están disponibles bajo solicitud.
de Reactivo A + 1 mL de Reactivo B. − Interferencias: La hemólisis (hemoglobina > 2,5 g/L) y la lipemia (triglicéridos >1,25 g/L)
Estable 15 días a 2-8ºC. El reactivo de trabajo debe estar protegido de la luz. interfieren. La presencia en la muestra de concentraciones por encima de lo normal de
CK-BB o de adenilato quinasa, y de macro-CK o CK mitocondrial interfieren5. La bilirrubina
EQUIPO ADICIONAL (< 20 mg/dL) no interfiere. Otros medicamentos y sustancias pueden interferir6.
− Analizador, espectrofotómetro o fotómetro con cubeta termostatizable a 37ºC para lecturas a Estos datos han sido obtenidos utilizando un analizador. Los resultados pueden variar al
340 nm. cambiar de instrumento o realizar el procedimiento manualmente.
− Cubetas de 1 cm de paso de luz. CARACTERISTICAS DIAGNÓSTICAS
MUESTRAS La creatina kinasa esta compuesta de 2 cadenas polipeptídicas, denominadas B (de cerebro) y
M (de músculo), que dan origen a los tres isoenzimas diméricos: MM (CK-1), MB (CK-2) y BB
Suero o plasma con heparina recogidos mediante procedimientos estándar. (CK-3).
La concentración de CK total en la muestra debe ser inferior o igual a 1000 U/L. Si es superior, Los porcentajes de la actividad de CK-MB sérica respecto a la actividad CK total suele ser
diluir el suero 1/2 con NaCl 150 mmol/L.
inferior al 6%. Sin embargo, estos valores aumentan al 10 a 30% después de un infarto de
La CK-MB es estable al menos 7 días a 2-8ºC. miocardio dependiendo de la extensión de tejido miocárdico afectado y de la localización del
PROCEDIMIENTO infarto. No obstante, pueden encontrarse índices bajos de CK-MB sérica tras un infarto de un
miocardio previamente sano. Por consiguiente, el diagnóstico de infarto de miocardio debe
1. Precalentar el Reactivo de Trabajo y el instrumento a 37ºC. basarse en la historia clínica y otros datos, junto con la magnitud de la elevación de CK-MB y su
2. Pipetear en un tubo de ensayo: (Nota 1) perfil en el tiempo4,7.
Muestra 40 µL El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo,
Reactivo de Trabajo 1,0 mL sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio.
3. Mezclar bien e incubar inmediatamente a 37ºC. Poner en marcha el cronómetro. NOTA
4. Leer la absorbancia (A) a 340 nm exactamente a los 5 minutos (A5) y a los 10 minutos (A10) 1. Estos reactivos pueden utilizarse en algúnos analizadores automáticos. Solicite información
de incubación. a su distribuidor.
CÁLCULOS BIBLIOGRAFÍA
La concentración de CK-MB en la muestra se calcula a partir de la siguiente fórmula: 1. Würzburg U, Hennrich N, Lang H, Prellwitz W, Neumeier D and Knedel M. Bestimmung der
Vt x 106 aktivität von creatinkinase MB im serum unter verwendurng inhibierender antikörper.
(A10 – A5) x x 2 = U/L Klinische Wochenschrift 1976; 54: 357-360.
ε x I x Vs x 5 min
2. Gerhardt W and Waldenstrom G. Creatine kinase B-subunit activity in serum after
El coeficiente de absorción molar (ε) del NADPH a 340 nm es 6.300, el paso de luz (l) es 1 cm, immunoinhibition of M-subunit activity. Clin Chem 1979; 25: 1274-1279.
el volumen total de reacción (Vt) es 1,04, el volumen de muestra (Vs) es 0,04, y 1 U/L equivale 3. IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 7: IFCC
a 0,0167 µkat/L. Se deducen los siguientes factores para calcular la concentración catalítica: method for creatine kinase. JIFCC 1989; 1: 130-139.
4. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th ed. Burtis CA, Ashwood
x 1651 = U/L
A10 – A5 ER, Bruns DE. WB Saunders Co, 2005.
x 27,5 = µkat/L
5. Urdal P and Landaas S. Macro creatine kinase BB in serum, and some data on its
Si se utiliza para calibrar el Patrón de Creatina Quinasa-MB (CK-MB): prevalence. Clin Chem 1979; 25: 461-465.
6. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed. AACC Press, 2000.
(A10 – A5) Muestra
x C Patrón = C Muestra 7. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press,
(A10 – A5) Patrón 2001.

M11792c-05 BioSystems S.A. Costa Brava, 30. 08030 Barcelona (Spain) 02/2014
Quality System certified according to
EN ISO 13485 and EN ISO 9001 standards