Equipo 1: Cisneros Rodríguez Manuel Pablo, Pérez Olvera Santiago, Mendez Flores Alan Jair

¿Se puede separar una mezcla de aminoácidos por cromatografía?

Conceptos:
Aminoácidos: Son compuestos orgánicos formados por Carbono, Nitrógeno, Oxígeno e Conclusión:
Hidrógeno, algunos poseen Azufre. La cromatografía en papel nos permite identificar aminoácidos, sabemos que se genera una
Los aminoácidos reciben este nombre porque presentan los grupos funcionales: Amino (NH3+) y reacción como consecuencia de la interacción entre la ninhidrina y los distintos aminoácidos por la
carboxilo (COO-); definidos como derivados aminados de ácidos carboxílicos por algunos autores. presencia del grupo amino, por lo tanto presenta un color característico como es el morado,
Objetivo: Llevar a cabo la separación de mezclas de magenta y amarillo.
aminoácidos mediante cromatografía en papel. Revelación de La ninhidrina, es el reactivo adecuado y necesario para aplicar en cromatografía de aminoácidos,
los mismos en papel cromatográfico mediante reacción con ya que reacciona con los aminoàcidos, permitiendo el reconocimiento de los mismos por la
Funciones de los aminoácidos: coloración denominada Azul o Violeta de Ruhemann.
Ninhidrina.
● Aminoácidos para síntesis de Entre los aminoácidos, la prolina es la excepción en cuanto a la coloración morado o magenta, más
proteínas. bien, este aminoácido presenta un tono amarillo, debido que al reaccionar con la ninhidrina, la
● Precursores de otras moléculas no Material/Reactivos prolina no produce amonio en el momento de la reacción.
proteicas de importancia biológica. ▪ Cámara cromatográfica
● Donadores de nitrógeno para otras
moléculas no proteicas.
▪ Papel para cromatografía Discusión:
● Fuente de energía cuando los ▪ Estufa 90°C Es una cromatografía en papel por lo tanto tomaremos al agua como la fase estacionaria que se
utiliza para hacer puentes de hidrogeno con la celulosa del papel y la fase móvil la vamos a tomar
combustibles usuales (carbohidratos y ▪ Capilares de los solventes de tipo orgánico, dependiendo de su proporción en este caso el solvente con
lípidos) no están disponibles.
▪ Lápiz mayor concentración es el n-butanol, por lo tanto, nuestra mezcla va a ser apolar; es por eso que
▪ Regla los aminoácidos que van a subir primero son los apolares, tomando en cuenta que lo semejante
Clasificación de aminoácidos: disuelve a lo semejante.
Al tener dos aminoácidos apolares como lo es la leucina y la prolina, tomamos en cuenta que el
▪ Aminoácidos en solución 0.05M que subirá primero es el que tenga más carbonos en su radical, es por eso por lo que la leucina
▪ Solvente: n-Butanol, ácido acético glacial sube primero debido a que su peso es mayor y es más apolar, después la prolina y finalmente la
lisina al ser un aminoácido polar sin carga.
▪ Revelador: Solución de Ninhidrina. Lo mismo ocurrió en la mezcla, quedando el orden exactamente igual y aproximadamente a la
▪ Hidróxido de amonio concentrado. misma distancia del aminoácido correspondiente.
Fichas de Seguridad: Resultados:
N-Butanol Referencia Mezcla
Fórmula molecular: C(4)H(10)O 0.6 0.6
Rf Lisina= = 0.09 Rf Lisina= = 0.08
Peso molecolar: 74.12 g/mol 74.12 g/mol 6.5 7.1
Familia química: alcoholes, alifático
PELIGRO: LÍQUIDO INFLAMABLE. PUEDE CAUSAR IRRITACIÓN OCULAR, EN LA PIEL Y EN EL TRACTO Rf Lisina=
3.6
= 0.65 Rf Lisina=
0.2
= 0.027
5.5 7.3
RESPIRATORIO Utilización con ventilación de salida local. Lleve gafas para productos químicos
Tipos de Cromatografía: certificadas por el NIOSH (Instituto Nacional de Salud y Seguridad Ocupacional). Usar
indumentaria de protección. Los lavaojos y regaderas de seguridad deben ser fáciles de accesar Rf Lisina=
1
= 0.18 Rf Lisina=
2.2
= 0.33
Cromatografía de reparto: Es la separación de mezclas en contracorriente, esencialmente Si existe peligro de salpicadura, utilice protección que cubra toda la cara. Lleve respirador de 5.5 6.5
mediante el principio de distribución antes descrito. vapor certificado por el NIOSH (Instituto Nacional de Salud y Seguridad Ocupacional).
Cromatografía de papel: Está implicado el mismo principio antes mencionado. La celulosa de las En caso de contacto con la piel: Lavar a fondo con agua y jabón la zona afectada de la piel.
fibras de papel está hidratada. A medida que un disolvente que contiene mezcla de aminoácidos Buscar ayuda médica.
Procedimiento:
asciende por capilaridad por el papel, manteniendo en posición vertical, se producen multitud de
distribuciones microscópicas de los aminoácidos entre la fase que fluye y la fase estacionaria Ácido acético glacial
acuosa, ligada a las fibras de papel. Al final del proceso los diferentes aminoácidos han recorrido Fórmula molecular: CH₃COOH
distancias diferentes desde su origen. Líquido inflamable (Categoría 3)
Toxicidad aguda, inhalación (Categoría 4)
Corrosión cutánea (Categoría 1B) – Lesiones oculares graves (Categoría 1)
CONTACTO CON LA PIEL: Lávese inmediatamente después del contacto con abundante agua,
Fundamento durante al menos 20 minutos. No neutralizar ni agregar sustancias distintas del agua. Quítese la
Coeficiente de reparto: ropa contaminada y lávela antes de reusar.
Cuando se distribuye un soluto entre volúmenes
iguales de dos líquidos inmiscibles la relación de 𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜 Ninhidrina
Rf= 𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒
concentraciones del soluto entre dos fases en Fórmula molecular C₉H₆O₄ Masa molar 178,2 g /mol
equilibrio a una temperatura determinada recibe el Nocivo en caso de ingestión
Provoca irritación cutánea
nombre de coeficiente de reparto.
Provoca irritación ocular grave Cuestionario:
Puede irritar las vías respiratorias
Prever una ventilación suficiente.
1° ¿En qué orden migran los aminoácidos de los diferentes grupos?
La utilización de equipos de protección adecuados (incluido el equipo de protección personal En una cromatografía, migran primeramente aquellos aminoácidos apolares, ya que los solventes
mencionado en la sección 8 de la ficha de datos de seguridad) con el fin de evitar toda posible comúnmente usados son menos polares que el agua. Lo que hace que los aminoácidos polares
contaminación de la piel, los ojos y la ropa. No respirar el polvo. Evitar el contacto con la piel, los (con o sin carga) sean retenidos en la fase estacionaria.
ojos y la ropa.
Reacción Ninhidrina: Aclararse la piel con agua/ducharse. En caso de irritaciones cutáneas, consultar a un
dermatólogo.
2° ¿Es la ninhidrina un revelador selectivo?
Si, la ninhidrina es un poderoso agente reactivo común para visualizar las bandas de separación de
Hidróxido de amonio aminoácidos por cromatografía o electroforesis, es utilizada con fines cuantitativos para la
Fórmula química: NH4OH
Familia química: aminas determinación de aminoácidos; reacciona con todos los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra
Masa molar: 35,05 g/mol − Sinónimos: Amoniaco, Amonio, Nitruro de Hidrogeno. entre 4 y 8, dando una coloración que varía de azul a violeta intenso.
Contacto dérmico: Retirar la ropa y calzado contaminados. Lavar la zona afectada con
abundante agua y jabón, mínimo durante 15 minutos. Si la irritación persiste repetir el lavado.
Sustancia corrosiva, Causa irritación a la piel, ojos y vías respiratorias.
3° ¿Cómo se calcula el Rf?
Rf = Distancia recorrida por el soluto / Distancia recorrida por el solvente