PRACTICA N°2

GRUPO SANGUINEO, FACTOR RH Y RECONOCIMIENTO DE CELULAS DE LA

SANGRE

I. INTRODUCCIÓN.-
El conocimiento de los grupos sanguíneos ha con tribuido al entendimiento de
algunos de los mecanismos básicos de la herencia, y a un siglo de que Landsteiner
los descubriera siguen siendo de gran interés práctico y conceptual.
Un grupo sanguíneo es la clasificación de la sangre de acuerdo a las características
presentes en la superficie de los glóbulos rojos y en el suero de la sangre

Se conocen dos antígenos (A y B) que aparecen en la superficie de las hematíes

estos antígenos son llamados también aglutinógenos porque provocan la
aglutinación de las células sanguíneas

Se pudo clasificar en el sistema ABO, como:

Las personas que tienen el antígeno A en sus glóbulos rojos y que presentan
anticuerpos anti B en su suero pertenecen al grupo A

Las personas que tienen el antígeno B en sus glóbulos rojos y la aglutinina anti A en
su suero pertenecen al grupo B

Las personas que presentan ambos antígenos A y B por lo tanto no tienen

aglutininas en su suero pertenecen al grupo AB

Las personas que no tienen ningún antígeno en sus glóbulos y poseen ambas
aglutininas en su suero pertenecen al grupo O, tienen también un anticuerpo anti AB
que tiene reacción cruzada con un antígeno presente tanto en los glóbulos A como
en los B.

Como también con el sistema Rh, siendo los dos tipo Rh (+) y Rh (-)

La principal diferencia entre el sistema ABO y el sistema Rh es que en el sistema

ABO las aglutininas plasmáticas responsables de las reacciones transfusionales
aparecen de forma espontánea mientras que en el sistema Rh las aglutininas casi
nunca surgen de modo espontaneo. Los antígenos Rh son compuestos o sustancias
moleculares presentes en muchos sitios de la membrana del eritrocito.

Se utilizara un método para la determinación del grupo sanguíneo y la observación

posterior de un frontis para clasificar las células y ver la frecuencia según el tipo de
células sanguíneas

II. OBJETIVOS.-
GENERAL:

 Conocer la técnica de la determinación de grupo sanguíneo

 ESPECIFICO:

 Reconocer el tipo de sangre de los integrantes del grupo

 Observar y analizar la presencia de células sanguíneas en una muestra X

III. MARCO TEÓRICO

GRUPO SANGUINEO

El conocimiento de los grupos sanguíneos ha con tribuido al entendimiento de

algunos de los mecanismos básicos de la herencia.
Se descubrió que la sangre de personas diferentes suele tener propiedades
antigénicas e inmunitarias distintas, de forma que los anticuerpos del plasma de una
sangre reaccionan con los antígenos de la superficie de los hematíes de otra sangre.
Existen dos grupos particulares de antígenos que ocasionan reacciones
transfusionales con más frecuencia que los demás se trata de sistema de antígenos
ABO y del sistema Rh.

Muchas de ellas se han podido identificar serológicamente mediante anticuerpos

específicos. El primer grupo de estas sustancias fue identificado por Landsteiner en
1901; a este grupo se le llamó sistema ABO, en el cual un individuo puede expresar
en la membrana de sus glóbulos rojos uno, dos, o ninguno de los antígenos A y B,
las clasificaciones más importantes para describir el grupo sanguíneo en humanos
son los antígenos (sistema ABO).

SISTEMA ABO

Nuestra sangre está compuesta por una porción liquida llamada plasma y una parte
sólida que contiene células sanguíneas, nombradas hematíes. Leucocitos y
plaquetas

En promedio, el 55% de la sangre es líquida y el 45% está formado por células

Los glóbulos rojos contienen proteínas en su superficie que se llamados antígenos o

aglutinógenos, los antígenos que reciben los nombres A, B, AB y O

La incompatibilidad del grupo sanguíneo se presenta cuando existe diferencia entre

las proteínas presentes en la superficie de los glóbulos rojos del donante y del
receptor.

Los eritrocitos poseen en su membrana diversas estructuras con carácter antigénico

que son determinadas genéticamente.

Existen cuatro tipos de grupos sanguíneos:

GRUPO A: es aquel tipo de sangre cuyos glóbulos rojos tienen aglutinógenos A y en

el plasma encontramos aglutininas anti-B.

GRUPO B: sus glóbulos rojos tienen aglutinógenos B y su plasma aglutininas anti-A.

GRUPO AB: los glóbulos rojos tienen los dos tipos de aglutinógenos: A y B; pero el
plasma no tiene aglutininas.

GRUPO 0: en este grupo sanguíneo los glóbulos no tienen aglutinógenos, de ahí su

nombre, pero el plasma tiene aglutininas anti-A y anti-B.

Para el caso de las transfusiones se debe tomar en cuenta el tipo de aglutininas de

la persona que recibirá sangre (receptor) y el tipo de aglutinógeno de la persona que
donó la sangre (donante o dador) (fig. 1).

Por ejemplo, una persona receptora del grupo A no puede recibir sangre que
contenga el aglutinógeno B, ya que a medida que la sangre del grupo B ingresa al
torrente sanguíneo del receptor A, las aglutininas anti-B de éste comienzan a
aglutinar (pegar) los glóbulos rojos de tipo B, originando obstrucción de la circulación
en el receptor y la muerte. Hoy en día esto no ocurre, porque todas las sangres
donadas son revisadas y clasificadas.

FACTOR Rh

En 1939, Levine y Stetson, reportaron el caso de una mujer con una intensa re-
acción hemolítica después de haberle practicado una transfusión con sangre donada
por el esposo. El antígeno responsable fue diferente a los antígenos conocidos en
aquella época. En 1940, Landsteiner y Wiener inmunizaron conejos y cobayos con
eritrocitos obtenidos de Macacus rhesus, partiendo del planteamiento de que en los
eritrocitos de estos monos podrían existir antígenos similares a los humanos.

EL ANTIGENO Rh: PERSONAS” RH POSITIVAS” Y “Rh NEGATIVAS”

Existen seis tipos de antígeno Rh llamados factor Rh (C, D ,E, c, d, e),pero el

antígeno de tipo D tienen una prevalencia alta en la población y posee mucho más
poder antigénico que los otros grupos Rh. Por lo tanto todo aquel que posea este
tipo de antígeno se dice que es Rh positivo, mientras que toda persona que no tenga
el antígeno de tipo D es Rh negativo.

El suero obtenido (anticuerpos) aglutinaba los glóbulos rojos de estos monos y a los
eritrocitos de 85% de la población blanca.

Posteriormente, las investigaciones demostraron que el antígeno involucrado en el

caso de Levine y Stetson y en el antígeno hallado por Landsteiner y Wiener, los
cuales inicialmente se pensaban eran el mismo antígeno, resultaron ser distintos. Se
estableció que el antígeno del mono rhesus lo poseen la mayoría de los humanos y,
además, otro diferente, pero relacionado.

A sugerencia de Levine, se conservó la denominación de factor Rh para el antígeno

humano y LW para el antígeno común al hombre y al mono.

A mediados de los años 40 se habían identificado cinco antígenos pertenecientes al

sistema Rh (C,c,D,E,e). El D tiene dominancia antigénica, de tal manera que si un
individuo expresa D en sus eritrocitos, será Rh positivo. Es hasta fecha muy reciente
que se pudo caracterizar la estructura de estos antígenos, la cual resultó ser muy
compleja.

COMPATIBILIDAD DEL GRUPO SANGUINEO Y TRANSFUSIONES

El Rh es en sí es otra proteína que puede estar presente en la superficie de la

membrana plasmática de los glóbulos rojos. Las personas que presentan el factor
Rh (aglutinógeno) pertenecen al grupo Rh positivo; las que no lo presentan
pertenecen al grupo Rh negativo. Ninguno de los dos grupos presenta aglutininas en
el plasma al momento de nacer. Sólo se pueden producir en caso de una transfusión
incompatible o durante el embarazo. Para que esto pudiera ocurrir, el receptor debe
ser Rh negativo y el donante Rh positivo, la sangre del receptor desconoce las
proteínas Rh positivo y comienza a producir aglutininas anti Rh. En el caso contrario
no se da esta situación ya que el factor Rh negativo no presenta la proteína para
factor Rh, por eso se denomina Rh negativo. Este grupo es escaso en la población
mundial.

La situación antes descrita no se da en las transfusiones, por razones explicadas

anteriormente, pero sí es factible durante el embarazo. Si la madre es Rh negativo y
el feto Rh positivo, durante la gestación y especialmente durante el parto, la sangre
del recién nacido con hematíes Rh positivo puede pasar a la circulación sanguínea
de la madre, los cuales serán reconocidos como extraños estimulándose la
producción de aglutininas para destruir los hematíes extraños. Como el hijo ha
nacido, no hay ningún problema.

Si hay un segundo embarazo en las mismas condiciones, la sangre materna ya tiene

las aglutininas anti Rh formadas en el primer embarazo. En caso de que algún
glóbulo rojo Rh positivo del feto traspase la placenta (no debiera ocurrir), las
aglutininas anti Rh de la sangre materna pasan hacia el feto y causan la enfermedad
hemolítica del recién nacido (EHRN) o eritroblastosis fetal.
LA SANGRE

La sangre transporta oxígeno y nutrientes a todas las células del cuerpo y es

también el transporte de desechos al exterior. Las células sanguíneas también
combaten infecciones y controlan las hemorragias.

Las células sanguíneas se producen y reemplazan constantemente, en función de

su tiempo de vida. La mayoría de las células sanguíneas se producen en la médula
ósea.

La sangre está compuesta por 3 tipos de células sanguíneas (glóbulos rojos,

glóbulos blancos y plaquetas) y plasma.

Componentes de la sangre

Glóbulos rojos (eritrocitos) Los glóbulos rojos transportan oxígeno de los pulmones a
los tejidos y llevan el dióxido de carbono nuevamente a los pulmones. Constituyen
aproximadamente el 44 % de la sangre. El tiempo de vida de un glóbulo rojo es de
aproximadamente de 120 días.

Glóbulos blancos (leucocitos) Los glóbulos blancos combaten infecciones y ayudan

a desarrollar inmunidad. Constituyen menos del 1 % de la sangre. Hay 3 tipos de
glóbulos blancos: granulocitos, monocitos y linfocitos. Cada tipo tiene funciones
específicas.

Hay 3 subtipos de granulocitos:

o Los neutrófilos, que ayudan a combatir infecciones causadas por bacterias u

hongos.
o Los basófilos, que se relacionan con las respuestas inmunitarias, aunque no
se conoce bien su función exacta;
o Los eosinófilos, que ayudan a combatir infecciones parasitarias.

En cuanto a las agranulocitos, no presentan gránulos evidentemente

o Los monocitos destruyen y eliminan organismos extraños y células que

mueren.
o Los linfocitos conforman el sistema inmunitario.

El intervalo de vida de los glóbulos blancos es amplio, va de horas a años.

Plaquetas (trombocitos) Las plaquetas son células incoloras cuya función principal
es controlar las hemorragias. Constituyen menos del 1 % de la sangre. Las
plaquetas viven aproximadamente entre 9 y 12 días.

Plasma

El plasma es la parte líquida de color amarillo pálido de la sangre que contiene todas
las células sanguíneas. Constituye aproximadamente el 55 % del volumen total de
sangre. El plasma transporta agua, nutrientes, minerales y hormonas y lleva
productos de desecho a los riñones para eliminarlos del cuerpo. Se compone de
agua, proteínas y hormonas.

Frotis sanguíneo

Es la extensión de sangre realizada sobre un portaobjeto y a partir de la cual se

observarán, al microscopio, las características de las células sanguíneas.

Es un análisis rutinario que acompaña a todo hemograma (o hematología completa),

ya sea en forma manual o automatizada. En este último caso, cuando hay
normalidad en todos los elementos sanguíneos, se obtienen los datos gráficamente
y es opcional verificarlo, esto dependerá de cada laboratorio. Este preparado brinda
valiosa información en casos como las leucemias, deficiencias de hierro, trastornos
genéticos de la forma de los eritrocitos, posibles deficiencias de vitamina B12 entre
otras.

Es de gran importancia en hematología ya que el diagnóstico de muchas

enfermedades hematológicas puede realizarse con sólo observar las características
morfológicas de las células sanguíneas

Para un estudio panorámico, los frotes deben ser delgados, bien extendidos y bien
coloreados no deben ser excesivamente gruesos ni excesivamente finos.
Habitualmente éste se realiza al momento de tomar el hemograma al paciente.

Método de los dos portaobjetos para frote periférico

Todas las láminas por usar, sobre todo nuevas, deben ser limpiadas con algodón y
alcohol al 70% para eliminar la grasa que viene adherida.

El fundamento de este método consiste en la extensión de una gota de sangre

sobre un portaobjeto de aproximadamente 76 por 26 mm, espesor alrededor de 1,0
mm, empleando el canto biselado de otro portaobjeto de igual dimensión (Rodak,
2009).

2. Técnica para la realización de un frote

Con la lanceta estéril realizar una punción en el dedo anular o utilizar una gota de
sangre del tubo de hemograma (lo ideal es una gota sin mezcla de anticoagulante)

Una vez extraída la sangre con cualquiera de las metodologías, se coloca una
pequeña gota de sangre, cerca de 50 µL, sobre un portaobjeto (limpio, libre de
pelusas y grasa), a 2 cm aproximadamente de uno de los extremos. Colocar el canto
de otro portaobjeto esmerilado (tomarlo lateralmente entre las yemas de los dedos),
sobre la superficie del primer portaobjeto (en la que se encuentra la gota de sangre),
formando un ángulo de 45º. Deslizar suavemente y a velocidad moderada el
portaobjeto sobre el otro en sentido longitudinal, hasta que la gota de sangre quede
bien extendida sobre la superficie del primer portaobjeto. El inicio del frote se
denomina cabeza y la parte final del frote se denomina cola.

El grosor del frote sanguíneo puede variar según sea el ángulo que formen entre sí
ambos portaobjetos. Así, si es superior a 45º, la extensión obtenida será gruesa y
corta, si es inferior a 45º será larga y fina.

El secado del frote es a temperatura ambiente y en posición horizontal o dejándolo

sobre una rejilla o toalla de papel, con la zona donde está la muestra mirando hacia
arriba

a. Zona excesivamente gruesa: Se halla en la región inmediata al punto de partida

de la extensión (cabeza). En ella se aprecia siempre un aumento de linfocitos.

b. Zona excesivamente fina: Corresponde al final de la extensión y termina en un

área donde las células adoptan una posición acartonada (barbas). En esta región
existe un exceso de granulocitos y monocitos.

c. Zona ideal: Corresponde a la región intermedia de la zona excesivamente fina del

frote y en ella existe un reparto equilibrado de células (Anexo B) (Rodak, 2009).

Para poder diferenciar los componentes de un extendido de sangre es necesario

teñirlos. Una vez seco el frote, se procede a la tinción hematológica.

Tinciones Hematológicas

Las tinciones hematológicas son un conjunto de procesos que conducen a la

coloración de las estructuras que componen las células sanguíneas. Esto tiene por
objeto aumentar el contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea, y
permite por tanto que las células sean visualizadas microscópicamente con mayor
facilidad.

Los colorantes más comúnmente usados para las tinciones hematológicas son los
derivados de la anilina: los colorantes de Romanowsky.

La tinción de tipo Romanowsky es muy importante en el laboratorio de hematología

porque con ella puede obtenerse una cantidad significativa de información a partir de
un frote sanguíneo bien teñido.

La coloración consiste en azul de metileno y sus productos de oxidación (azul B), y

eosina

La tinción de la muestra permite distinguir la forma, tamaño y contorno de los

eritrocitos, leucocitos y plaquetas y el núcleo, citoplasma y granulaciones de las
distintas células ya que adquieren diferentes colores: azul, púrpura, rosa o salmón.

Para el estudio de las células sanguíneas se recomienda utilizar el colorante de

Wright, mientras que para la tinción de parásitos sanguíneos se usa el colorante de
Giemsa (Perea, 2003).
 1. Tinción de Wright

La tinción de Wright permite suministrar un medio para estudiar la sangre y

determinar las variaciones y anormalidades de estructura, forma y tamaño de los
eritrocitos, su contenido de hemoglobina y sus propiedades de coloración. La
información obtenida de un frote de sangre periférica depende en gran parte de la
calidad del frote y la coloración (Rodak, 2009 y Morales, 1982).

El colorante de Wright se coloca durante un minuto sobre el frote sanguíneo,

evitando el secado del mismo para evitar precipitación. El tiempo de la tinción puede
prolongarse dependiendo de la maduración del colorante que se utilice en cada
laboratorio. Posteriormente, se coloca una solución amortiguadora, agua destilada o
agua del chorro; durante 10 minutos.

El color (tonos de azul o rojo), puede variar, aumentando o disminuyendo el tiempo

en la solución amortiguadora. La médula ósea debe teñirse durante al menos 3
minutos y tamponarse entre 3 a 10 minutos (Anexo C-1) (Rodak, 2009).

El frote sanguíneo coloreado se coloca en el microscopio y con pequeño aumento,

se revisa la calidad de la coloración, la cantidad aproximada de glóbulos blancos y
se escoge la zona ideal para iniciar el recuento. Se coloca una gota de aceite de
inmersión y se enfoca a un aumento de 100x.

Para la interpretación, se observa el color de los glóbulos rojos (cantidad de

hemoglobina) y se examina detenidamente su forma y tamaño. También debe
observarse la presencia de plaquetas, su agrupación y distribución (Perea, 2003).

Posteriormente, se hace el recuento diferencial de glóbulos blancos en 100 células,

para lo cual se deberá conocer las diferencias entre neutrófilos, eosinófilos,
linfocitos, monocitos y formas inmaduras (p. ej.: cayados).

Una extensión de sangre bien teñida debe caracterizarse por una buena
diferenciación de las estructuras subcelulares en los leucocitos, una coloración
rosada de los eritrocitos y la ausencia de precipitados

2. Tinción de Giemsa

Romanowsky (Wright, y Giemsa), son mezclas de 2 colorantes primarios, el Azul de

metileno y la eosina. El azul de metileno (color azul), es un colorante básico, en las
células se une a sustancias ácidas que se tiñen de color azul. La eosina es un
colorante ácido, en las células se unen a las proteínas básicas que se observan de
color naranja, Durante el proceso de maduración de los colorantes de Romanowsky,
el azul de metileno se oxida dando lugar a colorantes secundarios. Los más
importantes son los Azures de metileno, de color azul brillante, que son también
colorantes metacromáticos (Anexo C-2) (Rodak, 2009).

La tinción de Giemsa emplea como colorante fundamental, una mezcla de tiacínicos

catódicos, como el azur A,B y azul de metileno, que colorean el núcleo, mientras que
la eosina se usa para coloración citoplasmática, estas sustancias están disueltas en
alcohol metílico.

Su fundamento está en la disociación controlada de las sales de eosinato, que

ocurre por la mezcla de Giemsa con agua destilada. La cromatina nuclear adopta la
tinción azul violácea algo distinta a la habitual para los colorantes tiacínicos y que
recibe la denominación de efecto Giemsa (Rodak, 2009).

Para la interpretación se observa: eritrocitos color rosado, gránulos neutrófilos de

rosa a lila, gránulos eosinófilos de rojo a anaranjado, gránulos basófilos azul
violáceo oscuro, citoplasma de neutrófilos color rosa claro, citoplasma de linfocitos
azul celeste claro, citoplasma de monocitos azul grisáceo, núcleo de neutrófilos y
linfocitos violeta oscuro, núcleo de monocitos púrpura azulado algo más claro que
los anteriores, eritrocitos policromatófilos azul violeta, punteado basófilo azul oscuro,
cuerpos de Howell-Jolly rojo púrpura, plaquetas púrpura oscuro o violeta con un halo
azul claro a su alrededor.

La coloración celular es muy variable en cuanto a tonalidades, dependiendo del

tiempo de tinción y de los lotes de colorantes.

Las posibles causas de error en el momento de la observación del frote pueden ser
(Rodak, 2009):

a. Tinción demasiado azulada:

1) Extensión demasiado gruesa.

2) Excesivo tiempo de tinción.
3) Lavado con poca cantidad de agua.
4) Alcalinidad del colorante, del agua o tampón.

b. Tinción demasiado rosada:

1) Tinción insuficiente.
2) Excesivo tiempo de lavado.
3) Acidez del colorante o tampón.

c. Otras causas de error:

1) Utilización de porta objetos sucios.

2) Secado del colorante durante el periodo de tinción.
3) Lavado inadecuado durante la tinción.
4) Presencia de polvo en el portaobjeto.
5) Mala filtración del colorante antes de su uso.
6) pH inadecuado del colorante o los diluyentes.
7) Agua destilada a pH inadecuado.
8) Precipitación del colorante sobre el portaobjeto debido a inadecuado lavado o uso
del colorante que no ha sido filtrado adecuadamente.

En una tinción ácida, los eritrocitos se tiñen bien pero los leucocitos se tiñen muy
pálidos o no se tiñen. Al contrario, en una tinción básica o alcalina los eritrocitos se
tiñen pálidos y el núcleo de los leucocitos excesivamente azules (Rodak, 2009).

IV. MATERIALES
Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Lancetas
Cuenta gotas
Colorante wright o leishman
Reactivos de determinación de grupo sanguíneo (sueros: Anti-A, Anti-B y
Anti-D)
Etanol
Agua destilada
V. MÉTODOS
 EXTRACCIÓN DE SANGRE(PUNCIÓN CAPILAR)
o Identificar al paciente
o Realice lavado de manos
o Alistar el material
o Explicar al paciente el procedimiento que se le va a realizar
o Buscar la zona adecuada para la punción en este caso seria las yemas
de los dedos de las manos de preferencia el índice y el medial ya que
estos tienen mayor irrigación, otra zona adecuada puede ser el lóbulo
de las orejas y en niños el talón y el dedo pulgar del pie.
o Masajear ligeramente la zona de punción esto para facilitar el sangrado
y dilatar más los capilares, para una mejor obtención de la muestra.
o Desinfectar el sitio de punción con el antiséptico(alcohol al 70%),
esperar a que seque y puncione la piel con una lanceta estéril que
debe penetrar 2mm (el pinchazo debe ser rápido y preciso)
o Deseche la primera gota de sangre para estar seguros que la muestra
no esté contaminada y tomar las gotas subsecuentes en los porta
objetos, solo una gota por portaobjeto
 o Desechar la lanceta en el recipiente de corta punzantes.
o Se presiona débilmente el lugar de punción con un algodón seco para
parar el sangrado y explicar al paciente que el procedimiento ha
terminado.

 IDENTIFICACIÓN DEL GRUPO SANGUÍNEO

o Extraer sangre como se indica en el procedimiento anterior.
o En los portaobjetos con marcador de vidrio hacer un círculo para
delimitar y también nombrar según el reactivo, que se pondrá después
(anti-A, anti-B y anti-D, respectivamente)
o Poner 3 gotas en tres portaobjetos, una en cada uno de ellos,
respectivamente.
o Verter una de los reactivos sobre cada gota de sangre(anti-A, anti-B y
anti-D, respectivamente en cada muestra).
o Mezclar con un mondadientes (para mejores resultados con un varilla
de vidrio) bien la sangre con el reactivo respectivo formando un circulo
menor a lo establecido por el circulo anterior.
o Mover el portaobjetos lentamente, de un lado al otro, con movimientos
leves y lentos durante 3 minutos, de forma que se expanda la muestra
para un mejor resultado.
o Observar la aparición o no de aglutinación en las muestras después
unos segundos o unos pocos minutos.
La reaccion es positiva si se produce una aglutinación, suele tardar
unos pocos segundos.
La reaccion es negativa, si no se produce una aglutinación al cabo de
2 minutos de reposo

 OBSEVACIÓN DE CELULAS SANGUÍNEAS

o Realizar el frontis con la sangre extraída de la siguiente manera:
o Depositar una gota de sangre en la parte media extrema del
portaobjetos.
o Y con otro portaobjetos extender lo frotis.
o Tomar el portaobjetos lateralmente entre las yemas de los dedos a 45°
y deslizarlo sobre toda la superficie del porta de manera que se pueda
obtener un fina película de sangre que contenga las parte de cabeza,
cuerpo y cola.
o Dejar secar al aire
o Teñir la preparación con la tinción panóptica de la siguiente manera
(este proceso no fue llevado a cabo por falta de tiempo, disposición de
los colorantes y comodidad de los estudiantes del aula).
o Disponer los colorantes, Nº 1, Nº 2, y Nº 3, en cubetas Wertheim o
similares.
 o Sumergir en la cubeta con el portaobjetos durante 5 segundos (5
inmersiones de 1 segundos) en la disolución colorante Nº
1(triamerilmetano), escurrir.
o Sumergir, a continuación, otros 5 segundos (5 inmersiones de 1
segundo) en la disolución colorante Nº 2(eosina), escurrir de nuevo.
o Sumergir, finalmente, otros 5 segundos (5 inmersiones de 1 segundo)
en la disolución colorante Nº 3(tiazina).
o Lavar con agua destilada vertiéndola gota agota durante medio minutos
o Dejar secar al aire.
o Poner una gota de aceite de inmersión y observar en el microscopio en
el objetivo 100 x.
o Ordene el sitio de trabajo lávese las manos.

VI. RESULTADOS
INFORMAR:

 CARACTERISTICAS DE LAS CELULAS SANGUINEAS

En las muestras dadas por lo doctora se puede informar lo siguiente:
Son tres los principales componentes celulares, también llamados
componentes formes, de la sangre: leucocitos (glóbulos blancos), eritrocitos
(glóbulos rojos o hematíes) y plaquetas (trombocitos). Aunque de todos ellos,
sólo los primeros califican formalmente como células, ya que son los únicos
que poseen núcleo celular.
ESTAS SON:
Leucocitos
● Características: También llamados glóbulos blancos, son las células
encargadas de activar el sistema inmunitario del cuerpo.
Son de diferentes tipos, donde se pueden distinguir por orden de abundancia:
neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos. La médula ósea es la
encargada de producirlos.
● Funciones: Como agentes del sistema inmune, tienen la función de
combatir las enfermedades producidas por agentes extraños y segregar
sustancias que protegen al organismo frente a infecciones.
 Los neutrófilos se encargan de la fagocitosis, que es el proceso de devorar y
destruir células ajenas al cuerpo y sustancias extrañas, que suele ser la
función más conocida de los glóbulos blancos.
 Los linfocitos son células que llevan la programación de la inmunidad del
organismo frente a agentes virales ya padecidos. Reconocen y destruyen a
las células infectadas por virus.
 Los monocitos también ayudan a combatir los virus, aunque no son agentes
de inmunidad. Actúan también en contra de parásitos.
 Los eosinófilos combaten los parásitos, pero también tienen papel activo en
las alergias.
 Los basófilos son células que segregan sustancias anticoagulantes y
antiinflamatorias.

Eritrocitos
● Características: Se les conoce también como glóbulos rojos o hematíes.
Son los elementos más abundantes en la sangre, conformando más del 95%
de los componentes formes. Su forma típica semeja pequeños discos más
aplanados hacia el centro. En algunos grupos étnicos, la forma de los
eritrocitos semeja una media luna, que son los llamados eritrocitos
falciformes.
Los eritrocitos no se consideran células en el sentido formal, aunque poseen
un citoplasma. Compuesto por una proteína a base de hierro, y que es capaz
de transportar oxígeno. La hemoglobina presente en los eritrocitos es la que
le da a la sangre el distintivo color rojo.
● Funciones: Cumple funciones de transporte de oxígeno (O2) y también de
dióxido de carbono (CO2). La sangre bombeada a los pulmones recoge el
oxígeno de los mismos, que se combina con la hemoglobina de los eritrocitos.
Esta sangre oxigenada viaja a los órganos del cuerpo, donde el oxígeno es
llevado para que actúe como combustible en los procesos energéticos del
organismo. Allí la hemoglobina se combina con dióxido de carbono, producto
de desecho de dichos procesos, y la sangre regresará a los pulmones, desde
donde saldrá el CO2 por espiración, volviendo a capturar oxígeno para repetir
el proceso.
 En la cual en las dos observaciones o perspectivas mostradas en el microscopio
se pudo observar lo siguiente:

1ra muestra 2da muestra

Se puede observar: Se puede observar:

- 2 neutrófilos - 1 eosinófilos
- 2 linfocitos pequeños - 3 linfocitos pequeños
- Plaquetas - Plaquetas
-Glóbulos rojos -Glóbulos rojos

Observación de un basófilo Adicional

Se puede observar: Se puede observar:

- Basófilo - 1 Eosinófilo
- Glóbulos rojos - 2 Neutrófilos
- plaquetas - Glóbulos rojos
- plaquetas
CARACTERISTICAS Y COMPOSICION DE LOS REACTIVOS DE GRUPO
SANGUINEO (SUEROS ANTI-A ANTI-B Y ANTI-D)

COMPOSICION DE LOS REACTIVOS

Anticuerpos monoclonales murinos IgM
ANTI A Línea celular 9113D10. Tampón fosfatos. Acida
Sódica <0,1%. Color azul. Colorante: Patent Blue.
Anti B Línea celular 9621A8. Tampón fosfatos. Acida
Sódica <0,1%. Color amarillo. Colorante:
Tartrazine.
Anti D Línea celular 152D12+9113D10. Tampón
fosfatos. Acida sódica 0,1% g/L. Incoloro.
CARACTERISTICAS:
➢ Sí la sangre se aglutina con el suero anti –A, es del grupo A.

➢ Sí la sangre aglutina con el suero anti – B, es del grupo B.

➢ Sí la sangre aglutina con ambos sueros anti – A y anti – B, entonces

pertenece al grupo AB

➢ Sí la sangre no aglutina con el suero anti – A, ni con el anti – B, es del

grupo O.
 ESQUEMA DE TRANSFUCIONES POSIBLES

 DEDUCIR EL GRUPO SANGUINEO DE LOS HIJOS CONOCIENDO EL DE

LOS PADRES
Las personas que tienen un AB tiene que tener necesariamente en sus dos alelos
uno correspondiente a A (llamado IA) y uno del B (IB). No transmitirá herencia del
grupo O. Una persona con tipo O no tiene ni el alelo A ni el alelo B. Tiene dos alelos
ii (los que se corresponden al grupo O).
Pero no es tan sencillo, pues los alelos son dominantes (A y B) o recesivos (O),
por lo que se puede presentar un grupo A o B en una persona portadora del alelo O
en combinación de A y B.

Existen en realidad, por tanto, genotipos correspondientes a AO (IAi) y BO (IBi), que

se manifiestan en el grupo sanguíneo del alelo dominante (A o B), pero que pueden
traspasar al hijo el alelo recesivo. Al producirse la división celular, puede suceder
que se herede un tipo O y, en combinación con otro híbrido, existe la posibilidad de
que el hijo sea O a pesar de que el grupo de los padres sea A y B.

Lo que no podría suceder es que un individuo AB tenga un hijo con el grupo O, ya

que no posee el alelo recesivo correspondiente al grupo O que transmitir y el alelo i
es recesivo en combinación con IA o IB.

 ERITOBLASTOSIS FETAL
En el pasado, la incompatibilidad Rh era un problema muy serio.
Afortunadamente, se han logrado avances médicos significativos para prevenir
las complicaciones asociadas con la incompatibilidad Rh y tratar al recién nacido
afectado por este problema. Casi todas las mujeres con sangre Rh negativa se
identifican en los primeros meses de su primer embarazo detectado, mediante un
simple análisis de sangre. Si una mujer es Rh negativa y no está sensibilizada los
médicos le administran dos inyecciones de globulina hiperinmune Rh (RhIg),
también conocida como Rh o GAM, durante el primer embarazo. La primera
inyección se da alrededor de las 28 semanas de embarazo y la segunda, dentro
de las 72 horas después del parto.5 La globulina hiperinmune Rh provoca la
destrucción rápida de los glóbulos rojos del feto que han entrado en la circulación
maternal, impidiendo que el cuerpo de la madre genere anticuerpos peligrosos
Rh que pueden causar complicaciones serias en el recién nacido o complicar
futuros embarazos.

También se puede inyectar esta dosis de inmunoglobulina Rh en una mujer que

acaba de tener un aborto espontáneo, una amniocentesis o algún tipo de
hemorragia durante el embarazo. Si el médico determina que la mujer ya ha
desarrollado los anticuerpos Rh, entonces, el embarazo será controlado muy de
cerca para asegurarse de que los niveles de Rh no sean muy elevados.

 GRUPO SANGUINEO O BOMBAY

Las personas con tipo de sangre O no producen antígenos A ni B. Por lo
tanto, los antígenos H presentes en la superficie de los glóbulos rojos
permanecen inalterados. Así sucede con la mayoría de personas del tipo O.

Las pruebas habituales para el sistema ABO los hace parecer miembros de
ese grupo, pero las incompatibilidades relacionadas a los cruzamientos
pueden mostrar falsos "O". Por ejemplo, un padre y una madre, ambos con
sangre supuestamente de tipo "O", tienen un niño con sangre tipo "A", lo que
 muestra que uno de los padres o ambos tienen al menos el antígeno "A".
Otros exámenes de laboratorio más específicos pueden confirmar el
fenómeno.

A este extraño fenotipo sanguíneo se le conoce como "fenotipo Bombay" por

haber sido el fenómeno descubierto en esa ciudad en 1952 por Y.M. Bhende,
y también debido a la alta incidencia en la región. Otro nombre para
describirlo es "falso O", ya que los alelos responsables de la producción de
antígenos "A" o "B" no tienen relación con los responsables de la producción
de enzima H. El mayor y único problema de las personas con dicho grupo
sanguíneo reside en las transfusiones de sangre. Como es fácil de imaginar,
las personas con fenotipo Bombay son el donante ideal pero únicamente
pueden recibir transfusiones de personas del mismo grupo sanguíneo debido
a que en su sangre estarán presen tas inmunoglobulinas contra los antígenos
A, B y H (perteneciente al grupo 0). Este hecho dificulta enormemente las
cosas, ya que la cantidad de personas donantes que posean dicho grupo
sanguíneo es ínfima. Además, en muchos casos la persona afectada por la
mutación tampoco es consciente de su peculiaridad, puesto que como hemos
explicado antes las personas del fenotipo Bombay darán un falso 0 en las
pruebas de los grupos sanguíneos y no levantara sospechas a menos que
sea un caso extremadamente extraño como el mencionado más arriba. Desde
un punto de vista personal, está enfermedad, si es que se la puede llamar así,
debería ser divulgada en una mayor medida, ya que a pesar de ser muy
infrecuente sería conveniente saber que no por ser del grupo sanguíneo 0
significa que podamos recibir donaciones sanguíneas de dicho grupo, algo
que sin duda habría de tenerse más en cuenta.

 RESULTADOS DE LA PRACTICA

En la práctica tuvimos resultados de diferentes tipos de sangre A, B, O:+

Decimos que el tipo de sangre es A, cuando aglutina con el suero anti-A.
Decimos que el tipo de sangre es B, cuando aglutina con el suero anti-B.
Decimos que el tipo de sangre es O, cuando aglutina con el suero anti-D.

VII. CUESTONARIO

1. Hacer un esquema del protocolo seguido para la determinación del grupo

sanguíneo.
- Tener listo el material, 3 porta objetos limpios y rotulados además de la lanceta y el
algodón húmedo y seco.
- Buscar la zona adecuada para la punción en este caso seria las yemas de los
dedos de las manos de preferencia el índice y el medial ya que estos tienen
mayor irrigación, otra zona adecuada puede ser el lóbulo de las orejas y en
niños el talón y el dedo pulgar del pie.
 - Masajear ligeramente la zona de punción esto para facilitar el sangrado y
dilatar más los capilares, para una mejor obtención de la muestra.
- Realice la punción utilizando una lanceta hematológica estéril.
- Coloque una gota de sangre a cada lámina portaobjeto.
- Agregar a cada gota de sangre una gota de suero Anti-A, Anti-B y Anti-D por
separado.
- Observar la reacción e identificar a que grupo pertenece y que factor Rh si es
positivo o negativo.

3. Desinfectar la zona de punción 2. Punción capilar con la lanceta 1. Retirar la primera gota

A B RH
ARh+

ORh+
AB
B
O

AB
O
 2. Anotar los reactivos e indicar los grupos sanguíneos de sus compañeros.

NOMBRES Y APELLIDOS: GRUPO: 202 FECHA: 08/08/2018 (FECHA DEL

SILENCIO ARIAS CLAUDIA CAMILA SUBGRUPO: B ESTUDIO REALIZADO)

ANTI-A ANTI-B _______ ANTI-D

+ +
GRUPO SANGUINEO A Rh (+)

NOMBRES Y APELLIDOS: GRUPO: 202 FECHA: 08/08/2018 (FECHA DEL

WENDY BEATRIZ NCOLAS MAGNE SUBGRUPO: B ESTUDIO REALIZADO)

ANTI-A _______ ANTI-B _______ ANTI-D

+
GRUPO SANGUINEO O Rh (+)

NOMBRES Y APELLIDOS: GRUPO: 202 FECHA: 08/08/2018 (FECHA DEL

CAROL A. VAZQUEZ RAMOS SUBGRUPO: B ESTUDIO REALIZADO)

ANTI-A _______ ANTI-B _______ ANTI-D

+
GRUPO SANGUINEO O Rh (+)

NOMBRES Y APELLIDOS: GRUPO: 202 FECHA: 08/08/2018 (FECHA DEL

VALERIA VARGAS VACA SUBGRUPO: B ESTUDIO REALIZADO)

ANTI-A _______ ANTI-B _______ ANTI-D

+
GRUPO SANGUINEO O Rh (+)
NOMBRES Y APELLIDOS: GRUPO: 202 FECHA: 08/08/2018 (FECHA DEL
FLOR DE LIZ QUIÑONES LLANOS SUBGRUPO: B ESTUDIO REALIZADO)

ANTI-A _______ ANTI-B _______ ANTI-D

+
GRUPO SANGUINEO O Rh (+)

NOMBRES Y APELLIDOS: GRUPO: 202 FECHA: 08/08/2018 (FECHA DEL

ROCKER SIERRA GONZALES SUBGRUPO: B ESTUDIO REALIZADO)

ANTI-A _______ ANTI-B _______ ANTI-D

+
GRUPO SANGUINEO O Rh (+)

3. Hacer un esquema de los pasos seguidos para la observación de células sanguíneas.

Dependiendo de la tinción y el proceso llevado a cabo. Según bibliografía se lleva el

siguiente proceso.
1. Con débil aumento explorar la preparación para localizar la zona en la que el frotis es
más perfecto. los lugares más aptos son aquellos en los que la extensión de los
glóbulos se ha conseguido en una sola capa (cuerpo del frotis), cuando se observe
una zona apta, pasar a aumentos más fuertes.

2. Una vez explorado la preparación puede aumentar el objetivo a 100X, y añadir una
gota de aceite de inmersión al frotis y tener una mejor observación de las células
sanguíneas.

Los pasos seguidos en nuestra práctica fueron:

1. Poner una gota de inmersión en el frontis en la parte del cuerpo para la mejor
observación de células sanguíneas.
2. Poner el frontis en la platina del microscopio asegurarse de que este bien colocada
(en el momento de poner la muestra tiene que estar en objetivo 4 x con la platina
abajo)
3. Poner en el objetivo 100 x y con mucha precaución subir la platina con el tornillo
macrometrico hasta que se forme la imagen clara, después afinar la imagen con el
tornillo micrométrico.
4. Se observara los distintos tipos de células. Se podrán identificar según las
siguientes características.
En el campo del microscopio, se verán con un dominio predominante los glóbulos rojos,
hematíes o eritrocitos, teñidos en color rojo. No tienen núcleo y son más delgados por el
centro que por los bordes. Los glóbulos blancos o leucocitos de identifican fácilmente por la
presencia de núcleo.

Hay varias clases de glóbulos blancos:

Los linfocitos, algo mayores que los glóbulos rojos, con un núcleo muy voluminoso que
ocupa casi todo el glóbulo, aparecen fuertemente teñido en color azul celeste.

Los monocitos, son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, hay que
desplazarse por la preparación para encontrar alguno.

Los Neutrófilos, con granulaciones abundantes y el núcleo teñido de color violeta.

Los Eosinófilos, con granulaciones abundantes de color rojizo y el núcleo teñido de color
violeta.

Los basófilos, presentan un núcleo teñido de violeta y las granulaciones del citoplasma de
color muy oscuro.

Las plaquetas, aparecen como pequeños fragmentos teñidas de color violeta. Estas células
intervienen en el proceso de coagulación sanguínea.

OBJETIVO 100 X

Observamos un panorama de las células

sanguíneas fáciles de distinguir según sus
características especiales y el tipo de tinción
observado.

En las diferentes muestras de pudo observar, dos muestras ya teñidas para directamente observar en
el microscopio
 PREPARACIÓN DE LA SANGRE TIPOS CELULARES

GLOBULOS ROJOS
1. Limpiar con un algodón humedecido el

ERITROCITOS
alcohol la yema del dedo anular.
2. Con una lanceta realizar el pinchazo, debe
ser certero y rápido, de manera sorpresiva
para el paciente.
3. No olvidar desechar la primera gota pues Aumento 100 x(células e forma
puede contener algún residuo infeccioso, bicóncava de coloración clara)
es recomendable comenzar a trabajar a

NEUTROFILO
partir de la segunda gota.
4. Depositar la gota de sangre, en un lado y
en el centro de un portaobjeto bien limpio.
5. Seguidamente, con el empleo de otro

GRANULOCITOS
portaobjeto se hace un frotis o extensión

GLOBULOS BLANCOS
de sangre.
6. El porta con el que se hace la extensión Aumento 100 x
debe deslizarse bien colocado y lo más
perfectamente aplicado en su borde EOSINOFILO
contra el otro porta sobre el que se hace
la extensión. Sólo debe pasarse una vez,
de forma continua e ininterrumpida.

Tecnica de tincion panóptica:

 Preparar las extensiones del modo Aumento 100 x

habitual. Dejar secar al aire.
 Disponer los colorantes, Nº 1, Nº 2, y Nº
BASOFILO

3, en cubetas Wertheim o similares,

 Sumergir el cestillo con los portas
durante 5 segundos (5 inmersiones de
1 segundos) en la disolución
colorante Nº 1, escurrir.
Aumento 100 x
 Sumergir, a continuación, otros 5
MONOCITO

segundos (5 inmersiones de 1
No fue posible ver un monocito,
segundos) en la disolución colorante por su probabilidad menor al
Nº 2, escurrir de nuevo. 1% de observarse en un frotis
AGRANULOCITOS

 Sumergir, finalmente, otros 5

segundos (5 inmersiones de 1
segundos) en la disolución colorante
Nº 3.
LINFOCITOS

 Lavar con agua del grifo y dejar secar

 Poner el aceite de inmersión
 Observar con el objetivo 100 x
Aumento 100 x (se observó
linfocitos pequeños)
 TROMBOCITOS
Aumento 100 x (son la acumulaciones
de formas largadas vistas en toda la
superficie )

¿QUÉ CARACTERÍSTICAS DISTINGUEN A LOS Su forma pequeña y bicóncava y de color rojo,

ERITROCITOS DE LAS OTRAS CÉLULAS SANGUÍNEAS? no se pueden reproducir y su función principal
es transportar oxígeno a las diferentes partes
del cuerpo.

¿POR QUÉ TIENE ESTAS CARACTERÍSTICAS? Ausencia de núcleo, presencia de hemoglobina

que le da el color característico.

¿QUÉ TIPO DE LEUCOCITOS HAS OBSERVADO? Neutrófilos, eosinófilos, linfocitos pequeños y un

basófilo.

¿CUÁLES SON MÁS ABUNDANTES? Los eritrocitos abundan más, si de leucocitos de

trata existen más los neutrófilos y plaquetas.

VIII. CONCLUSIONES
 Los estudiantes que conformaron el grupo fueron aptos de realizar la
técnica de determinación sanguínea de manera exitosa teniendo
buenos resultados la practica en si se logró conocer que de los seis
alumnos que conforman el grupo cinco tienen el grupo sanguíneo O-
Rh+ y una con el tipo de sangre A-Rh+.
 Al observar las células sanguíneas, se tuvo ya muestras preparadas
con la tinción panóptica para el microscopio, se contó con dos
muestras la primera muestra contaba con 2 neutrófilos ,2 leucocitos
pequeños, plaquetas y glóbulos rojos. En la segunda muestra se
observó un eosinófilos, leucocitos pequeños, glóbulos rojos y un
basófilo (el cual fue complicado encontrar).
IX. RECOMENDACIONES
 Para pruebas de paternidad se recomienda realizar pruebas más
específicas como PCR o HLA ya que estas son más exactas en un
99% y 80%.
 Concientizar a las madres primerizas a hacerse un control natal ya que
gracias a estos podemos salvar vidas y prevenir enfermedades como la
eritoblastosis fetal y síndrome de Bombay etc.
  Tener cuidado en no cambiar la lanceta y ocupar una ya utilizada ya
que existen enfermedades que son muy contagiosas a través de la
sangre.
 Realizar rápidamente la practica ya que esta al estar expuesta largo
tiempo puede que la sangre se coagule.
 Hacer el círculo en el portaobjetos considerable ya que si es muy chico
la sangre puede llegar a sobresalir y derramarse.
 Llevar el equipo adecuado para la extracción capilar ya que puede
existir contagio de alguna enfermedad sino se toma las previsiones
correspondientes.

X. BIBLIOGRAFÍA:
INTRODUCCION A LA FISIOLOGIA: FISIOLOGIA GENERAL Y CELULAR
Rodak, C.J. (2009). Atlas de Hematología Clínica (3ra ed.). (E.M.
Panamericana, Trad.) España: Elsevier.
Perea, J. (2003). Reseña de "Cien Años del Colorante de Giemsa".
Biomédica, 23 (001), 5-18.
Morales, V. (1982). Extendidos de sangre periférica. Revista Médica de Costa
Rica.
https://es.wikipedia.org/wiki/Sangre
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1503&sectionid
=99838856
http://www.vivo.colostate.edu/hatosano/topics/bloodsmear.html
https://es.slideshare.net/FreddyUzeda/tincion-de-extendidos-de-sangre-
prctico-6
http://www.bvs.hn/RMH/pdf/1983/pdf/Vol51-3-1983-6.pdf
http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-2009/myl097-8c.pdf
http://www.kardiagnostx.com/documentos/Hemato_35.pdf
http://ww2.educarchile.cl/UserFiles/P0001/File/grupos_sanguineos.pdf
http://www.binasss.sa.cr/revistas/rmcc/rmedica/472/art2.pdf
http://saludpublica.mx/index.php/spm/article/viewFile/6410/7775
http://www.cienciorama.unam.mx/a/pdf/170_cienciorama.pdf
http://www.wiener-
lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%2520espanol/anti_a_anti
_b_anti_ab_monoclonal_sp.pdf
https://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/download/1006/
1121%253A%253Apdf
http://www.facmed.unam.mx/fm/pa/2010/practicas/practicas_inmuno.pdf
http://bioted.es/protocolos/DETERMINACION-SISTEMA-AB0-Rh.pdf
http://www.scielo.org.bo/scielo.php%3Fscript%3Dsci_arttext%26pid%3DS181
7-74332013000100007
https://www.lls.org/sites/default/files/file_assets/sp_bloodcellschart.pdf
http://www.scielo.org.ve/pdf/zt/v27n4/art05.pdf
https://microinmuno.files.wordpress.com/2011/07/3-cc3a9lulas-
sanguc3adneas.pdf
http://medicina.udea.edu.co/emd/hematologia/clases/Hematopoyesis-2010-
2.pdf
http://hematologiaparaelresidente.blogspot.com/2013/07/tinciones-en-
hematologia.html
http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/06/06_3490.pdf
http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-2009/myl097-8c.pdf