INFORME PRACTICA 2

Antioxidantes como parte fundamental de productos funcionales.

VITAMINA C EN UNA MUESTRA DE GUAYABA

Angela Zarama; Meliza Lopez

LABORATORIO DE BIOQUIMICA; FACULTAD DE INGENIERÍA; UNIVERSIDAD DE LA SABANA; AGOSTO 2019

INTRODUCCIÓN: de los antioxidantes naturales más comunes

es el ácido ascórbico o vitamina C, el cual
La utilización de oxígeno por parte de los
también abunda en muchas frutas. Por otro
seres humanos, resulta ser muy útil y
lado, la vitamina C (acido L-ascorbico) es una
positivo para el organismo cuando se habla
vitamina soluble en agua y se encuentra
de la regulación de proteínas, grasas,
tanto en forma reducida (ácido ascórbico),
carbohidratos entre otras cosas, pero de
como en forma oxidada (ácido
igual manera resulta ser muy nocivo en
deshidroascorbico). Es muy usado en la
cuanto al formar radicales libres que atacan
industria como: aditivo alimentario nutritivo,
a células del organismo lo cual trae algunos
antioxidante, agente reductor, estabilizador,
efectos negativos en el organismo, Los
modificador, estabilizador de color
radicales libres también llamados “especies
(Eitenmiller et al, 2008). En algunos estudios
reactivas de oxígeno” (ROS), son átomos o
se reporta que el efecto antioxidante en
moléculas que tienen uno o más electrones
algunos alimentos se debe a las altas
desapareados en su orbital más externo por
concentraciones de ácido ascórbico.
llo cual tienen una alta reactividad química,
se generan durante el metabolismo normal Durante la práctica de laboratorio se
en el ser humano (Miriam Palomino Pacheco realizaron estudios con una muestra de
, Emilio Guija Poma , Nancy Lozano Reyes, guayaba, es importante resaltar que es una
2009). No obstante, el ser humano tiene un fruta que posee una elevada concentración
sistema antioxidante constituido por de vitaminas A y C , polifenoles y otros
enzimas, es ahí donde encontramos la componentes que podrían ejercer un
función de los antioxidantes en el cuerpo, eficiente efecto antioxidante (Miriam
estos estabilizan y actúan impidiendo el Palomino Pacheco , Emilio Guija Poma ,
ataque de los radicales libres a las células. Nancy Lozano Reyes, 2009).

Las capacidades antioxidantes de las frutas El principal objetivo del presente informe es
varían según su contenido en vitamina C, determinar la capacidad antioxidante y el
vitamina E, carotenoides, flavonoides y otros contenido total de ácido ascórbico en una
polifenoles (Saura-Calixto y Goñi, 2006). Uno muestra de guayaba, así hallar la cantidad de
vitamina C en las muestras realizadas Tabla 1: Volúmenes de reactivos (2-
haciendo uso de espectrofotometría, a partir nitroanilina y nitrito de sodio) para
de esto determinar si puede ser explotada preparar curva de calibración (tubos 1-6)
como fuente de antioxidantes naturales. Así y muestras problema (P) (tubos 7-12)
mismo realizar la curva de calibración de
ácido ascórbico.

MATERIALES Y METODOLOGÍA

preparación de las soluciones problema:

1. muestra problema (P1) sin diluir

se pesaron 1.0473 g de materia vegetal

(guayaba), el cual fue macerado en 10 ml de estos tubos fueron mezclados y se
ácido oxálico (0.15%) y luego filtrado con verificó que el medio fuera ácido
gasa sobre un matraz totalmente cubierto de (pH<4,0). Para así dejarlos en reposo 10
aluminio. con lo cual se obtuvo una solución min y añadir los siguientes reactivos
al 10.473 % p/v,con una densidad de 1.0176 siguiendo la Tabla 2:
g/ml (dato obtenido al pesar un gramo de
solución). Tabla 2: Volúmenes de reactivos (etanol
absoluto, patrón ácido ascórbico y ácido
2. muestra problema (P2)diluida
oxálico) para preparar curva de
para esta muestra se tomó 1 ml de muestra calibración (tubos 1-6) y muestras
(P1) y 9 ml de ácido oxálico (0.15%). problema (P) (tubos 7-12)
Concentración de 1.0473 % p/v.

se realizaron dichas soluciones con el fin de

obtener las concentraciones de ácido
ascórbico presente en las soluciones
espectrofotométricamente. Para las
muestras problema (P) se añadió 1 ml del
filtrado (diluido y sin diluir en caso de
material sólido o diluciones en caso de
material líquido; tubos 7-12) en lugar de
la solución patrón (tubos 1-6), se
determinó la absorbancia y concentración Era necesario tener un pH básico para
con base en la curva de calibración. observar color. asi pues,se mezclaron bien
y se esperó 20 minutos para agregar los
preparación de la curva de calibración: siguientes reactivos según la Tabla 3:
se cubrieron 13 tubos con papel aluminio
Tabla 3: Volúmenes de reactivos (NaOH
y se empezó adicionando reactivos de
y Agua destilada) para preparar curva de
acuerdo a la Tabla 1, teniendo en cuenta
calibración (tubos 1-6) y muestras
que el tubo B es el blanco:
problema (P) (tubos 7-12)
se observó que el pH fuera básico y se
midió absorbancia en espectrofotómetro a Concentración preparada Absorbancia
540 nm.

5x10-3 mg/ml 0,268

1x10-2 mg/ml 0,425

2x10-2 mg/ml 0,712

3x10-2 mg/ml 1,012

4x10-2 mg/ml 1,142

RESULTADOS :

El peso de la muestra tomada para 5x10-2 mg/ml 1,39

realizar la primera mezcla con ácido
oxálico: 1,0473g se graficaron los siguientes datos en una
curva de calibración donde como
A partir de lo anterior y siguiendo con la resultado obtuvimos un R de 0,9872 con
metodología se determinó la densidad, la cual se confirma la correlación con la
así: ley de Lambert-Beer
Se peso en un vaso de precipitados un
litro del filtrado, lo cual en la balanza
marcó 1,0176 g. Haciendo los respectivos
cálculos obtuvimos una densidad de
1017,6 kg/m3, valor expresado en
unidades el sistema internacional.

también se obtuvieron las absorbancias de

las muestras problema mediante
espectrofotometría a 540 nm:
 Y= 2.4671X + 0.1875
MUESTRAS ABSORBANCIA
540nm Y Absorbancia

P1.1 0,691 X concentración

P1.2 0,678 XP1:

P1.3 0,701
XP2:

P2.1 0,154 resultado con el que se encontró la

relación de vitamina c en la guayaba de
forma experimental:
P2.2 0,137

P2.3 0,143

muestras P1: concentradas Se utilizó la concentración de la muestra

sin diluir (ecuación XP1), porque en la
muestras P2: diluidas diluida al hacer los respectivos cálculos
obtuvimos un valor negativo, como se
Para obtener las concentraciones se puede evidenciar en la anterior ecuación
realizó primero una media entre los (XP2).
resultados de concentración diluida(P2) y
concentrada (P1) de los que no se DISCUSIÓN DE RESULTADOS
descarto ninguno por su corta diferencia,
con lo que se obtuvo: A Partir de los datos obtenidos
experimentalmente, así como también la
P1 ecuación al graficar dichos datos en una
curva de calibración, se calcularon las
concentraciones de ácido ascórbico en la
muestra tomada, tomamos el valor
obtenido con los datos de las muestras P
concentradas, es decir las muestras P1
P2:
que corresponden a las no diluidas, puesto
con que el valor fue positivo en comparación
estos datos se calculo la concentración con el obtenido con las muestras P
experimental con la ecuacion de la recta diluidas (P2), lo que se puede interpretar
obtenida en la curva de calibración:
debido a que el blanco absorbe más luz Notamos que hay una diferencia de 6,66
comparado con la muestra problema. UI de vitamina C, variación que puede ser
resultado de errores experimentales.

CONCLUSIONES

1 Se determinó una concentración

experimental de vitamina c de 195 mg
ácido ascórbico/ 100 g guayaba que
difiere del valor real (228.3mg/100
g)14,6%. con lo cual se evidencia un gran
aporte antioxidante de esta fruta.
tabla (Bienestar familiar,2015)tabla 2 se encontró que la curva de calibracion
nutricional guayaba cumplia con la le de Lambert_ Beer con
un coeficiente de correlación lineal de
como se pudo notar el valor obtenido
experimental difiere de 14,6% diferencia 3 En unidades internacionales UI la
que se puede atribuir a una mala dilución vitamina C en la guayaba tiene un valor
de la muestra o una falta de maceración experimental de 39 UI de vitamina C y un
en donde se perdió materia vegetal al valor real de 45,6 UI de vitamina C, a
realizar el filtrado. pesar de que el valor obtenido
experimentalmente no es exactamente el
Finalmente expresamos los datos mismo al encontrado en la tabla
obtenidos experimentalmente acerca de la nutricional, si se asemeja mucho.
cuantificación de vitamina C en la
muestra de guayaba analizada en
unidades internacionales de vitamina C.

Sabiendo que 1 UI de vitamina C: 50

μg de vitamina C , tenemos:

REFERENCIAS
De igual forma expresando los datos
encontrados acerca de el contenido de
vitamina C en la tabla nutricional ( tabla
(Bienestar familiar,2015)tabla nutricional AVelasco, C., & López Rico , E. (2005).
guayaba) en unidades internacionales de Guía de laboratorio de bioquímica. Bogotá,
vitamina C: Colombia: Universidad Nacional de
Colombia, Unilibros.

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N.(2009) PROPIEDADES
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( L.)Recuperado el 13 de septiempre de
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