Laboratorio de Macroalgas Antárticas y Subantárticas

Universidad de Magallanes

Cul9vo de Algas Marinas

Dpto. de Ciencias y Recursos Naturales

Universidad de Magallanes
 ¿QUE ES UNA MICROALGAS?
Los ficológos han determinado que una microalga es todo organismo que
posee clorofila a y no 9ene un talo diferenciado, es decir, no 9ene, frondas ni
estructuras de figación. Las cianobacterias se incluyen dentro de esta
definición a pesar de ser procariontes.

n: No se incluyen actualmente
ónimos para esta especie.

arreogénicas (AO, DTX1 y/o DTX2) y/u otras

inas lipofílicas como las pectenotoxinas
TX2, PTX11, PTX12 y/o PTX13) dependiendo
su procedencia geográfica. De gran tamaño,
ede medir entre 55-95 µm. Cosmopolita, se
Agua dulce y marina
cuentra presente a lo largo de las costas
Chile, con mayor incidencia de canales y
Sobre el suelo
rdos. En Aysén ha sido asociada a AO y DTX1.
desconoce si produce PTXs en nuestro país.
Fotosintesis: Las microalgas y cianobacterias son microorganismos
fotoautotrofos oxigenados.

CO2+H2O+ ENERGÍA LUMINOSA CH2O (CARBOHIDRATO) + O2
 LOCALIZAÇÃO DA FOTOSSÍNTESE
Ø Cloroplastos organismos eucariontes
í Membrana dupla í Estroma í Membrana tilacóide / Grana
í Lúmen do tilacóide
REAÇÕES LUMINOSAS
Ø Fotossistemas í Unidades funcionais da fotossíntese
REAÇÕES LUMINOSAS
Ø Pigmentos fotossintetizantes
¿Porque un alga verde es verde?
Las divisiones de macroalgas se diferencian por su composición especifica de pigmentos.

-Carotenoides su peak de absorción es 400-500nm.
-La absorción de la clorofila “a” entre 650-700.
- Ficobilisomas absorben fuertemente entre 600-650.
La posibilidad de cul9var microalgas con fines económicos se
inves9ga desde hace varias décadas. En los años 40 del pasado
siglo se iniciaron los estudios para la producción industrial de
lípidos y desde los 50 con toda una serie de finalidades, que van
desde la producción de proteínas hasta el tratamiento de aguas
residuales.
 Cianobacterias (algas verde-azul)

Diatomeas (Bacillariophyta)

Microalgas

Dinoflagelados (Pyrrhophyta)

Clorophyta (Algas verdes)

 Algas verde azul o cianobacterias
•  También denominadas algas verde-
azuladas, son organismos unicelulares
procariotas más relacionados con las
bacterias que con las algas eucariotas.
Poseen clorofila y biliproteínas y fueron las
primeras células con fotosíntesis oxigénica

PIGMENTOS ACCESORIOS FICOBILISOMAS.

LA ABSORCIÓN ES 600-650 nm
 Algas verde azul o cianobacterias
Las cianobacterias algunas pueden ser dañinas a la salud humana. Pero muchas de ellas
pueden ser cul9vadas de diferentes maneras, esto en sistemas cerrados mediante la
incorporación de nutrientes y Luz.

•  Fototróficas oxigénicas.
•  Procariotas.
•  Poseen clorofila a.
•  Movilidad por contacto, fototaxia, quimiotaxia.
•  Esporas con paredes gruesas.
•  Reproducción asexual.
 SPIRULINA

•  Tiene filamento en espiral.

•  Sus células son muy vibrá9les.
•  Se les encuentra en aguas dulces y salobres.
 SPIRULINA
•  Puede hacer fotosíntesis y puede fijar
nitrógeno del medio.
•  Tiene contenido proteico del 50% - 63%.
•  Sus usos van desde suplemento proteínico,
acuacultura, tratamiento de aguas negras y
también se puede usar como fuente de
energía.
 Producción comercial.
Sosa Texcoco,
1970 producción
semi-natural.
Lago Texcoco,
México.

Dainippon Ink &

Chemicals (DIC), 1978
producción ar9ficial
en estanques,
Bangkok, Tailandia.
Presentaciones de Bogado Spirulina.

Spirulina seca en polvo y

comprimidos de 500 mg.
DIVISIÓN BACILLARIOPHYTA
(Diatomeas)

 Anton van Leeuwenhoek

Tabellaria flocculosa

En 1703 se hace la primera referencia de las

diatomeas por un ingles, en 1753 se hace otra
referencia por baker pensando que eran huevos de
insectos.
Origen: El sílice es el elemento más abundante en la corteza del planeta
después del oxigeno. Esta en insoluble en rocas y bajo el agua, la forma
química es acido orthosilicato Si(OH)4. Las diatomeas han creado
estrategias para construir su pared celular en base a sílice, incluso organelos
como las mitocondrias presentan formación de silicato.

¿Por qué hay sílice en el mar?


Caracterís9cas generales
unicelulares, o pueden formarse agregados coloniales o cadenas unidas por
mucílago,
distribución, planctónicas (flotando libremente) o bentónicas (sujetas al
sustrato)
frecuentemente forman el perifiton: conjunto de organismos microscópicos
adheridos sobre un sustrato sólido sumergido.

Habitan en el agua marina y dulce, y su distribución puede ser bentónica o
planctónica.


Didymo, Didymosphenia
germinata
 Epivalva

Bandas

Epiteca
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un Fig. 2. Sección transversal del frústulo de una diatomea. Figura redibujada de Hasle & Syvertsen (1997)
500 y tomada y adaptada de apuntes de la UNESCO, Comisión Oceanográfica Intergubernamental (IOC).
ctual
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 ECOLOGIA
Son parte fundamental de la productividad global, las diatomeas son el grupo
fotsintetizador más importante en la vida acuatíca, dominando el fitoplancton en
aguas frías ricas en nutrientes,especial mente en zonas de surgencias en los
oceános.
Donde es una zona de
surgencias en Chile?
Las diatomeas bentónicas se consideran un grupo poco estudiado y muy rico en
diversas formas, géneros y especies, con un alto potencial para ser usado como
fuente de alimento vivo para los organismos que se cul9van con interés
comercial y que presenten hábitos bentónicos, al menos, en alguna fase de su
ciclo de vida. Las especies más estudiadas están representadas por los géneros
Navicula y Nitzschia, seguidas de Amphora

Amphora
Navicula
Las primeras inves9gaciones sobre alimentación con diatomeas bentónicas refieren
su empleo en abalones en cul9vo.

Donde encontraron que las etapas tempranas de desarrollo del abulón Halio9s sp.
dependen, imprescindiblemente, de diatomeas bentónicas. Estas microalgas están
consideradas un elemento crí9co para la primera alimentación de las postlarvas de
los abulones y su ausencia puede causar hasta un 90% de mortalidad en las mismas.
También se ha iden9ficado que inducen el asentamiento larval de los abalones.
División Pyrrhophyta = Dinophyta
(Dinoflagelados)
PYRRHÓS (griego) : Color de fuego
PHYTA (griego) : Planta
I. CARACTERÍSTICAS BASICAS
EUCARIÓTICA
Clorofila a y c2
Xantofilas (peridinina, neoperidinina, dinoxan9na, etc.) y
carotenos (principalmente beta- carotenos).
Reserva: almidón y aceite.
Pared celular: cuando esta presente, esta compuesta de celulosa.
Presencia de dos flagelos.
Atecados

Carecen de una pared celulosica mul9disco visible. Los tecados si 9enen esta pared
Dinoflagelado sin teca.
 Complejo del Poro
Apical (del ingles APC)
Preapicales

Apicales

Precingulares
{
Intercalares Epiteca

Cingulum Cintura
ones
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ono
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Sulcales
Poro Flagelo

Postcingulares
{ Hipoteca
cual
Antapicales
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que
teca

ores Fig.1. Esquema del patrón de distribución de las placas para un dinoflagelado tecado tipo,indicando la
los terminología utilizada para describir sus principales características morfológicas. Cuando examinamos
ión, un dinoflagelado tecado, es muy importante señalar la orientación de la célula; se denomina vista
nas ventral (esquema de la izquierda) al lado donde se encuentran el cingulum y el sulcus y vista
ivas dorsal al opuesto. Figura tomada y adaptada de apuntes de la UNESCO, Comisión Oceanográfica
reas Intergubernamental (IOC).
000
mez
 V. ASPECTOS ECOLÓGICOS
•  Los dinoflagelados son importantes productores primarios, integrando el
fitoplancton de aguas saladas, salobres o dulces. Son conocidos como
causantes de floraciones o mareas rojas y en este caso el mar puede
realmente teñirse de rojo, pero según la especie puede teñirse de café, esto
ocurre por un aumento explosivo (bloom) del numero de individuos de una
especie, formando manchas visibles en el agua, debido a la alta densidad.
•  Las floraciones ocurren como consecuencia del aparecimiento de condiciones
ambientales ideales para el crecimiento de las poblaciones, y están
invariablemente ligados a un aumento de los nutrientes (eutroficación) que
puede ocurrir por causas naturales o por acción antrópica.
•  Entre los principales géneros causantes de floraciones nocivas se destacan:
Prorocentrum, [Link], Cochlodinium, Gymnodinium y Alexandrium.
•  Pueden causar la muerte de peces, por el consumo exagerado de oxigeno y
producción de toxinas poderosas, que pueden incluso causar la muerte e seres
vivos.
•  Una de esas sustancias es la saxitoxina, proteina que actúa en el sistema
nervioso central y que es letal en concentraciones muy bajas.
•  Los moluscos generalmente no son sensibles a estas toxinas por lo que son
bioacumuladores de toxinas, que pueden afectar al hombre
•  Reserva: los principales productos de reserva son el
almidón y aceite.

•  Núcleo: el de 9po mesocario9co, caracterizado por la
presencia de cromosomas permanentemente condensado,
aun en la interfase. Este 9po de núcleo también esta
presente en Euglenophyta.

•  IV. REPRODUCCIÓN Y CICLO DE VIDA
Se reproducen vegeta9vamente a través de simple división
celular. También presenta reproducción sexual a través de
formación de gametos (isogamia o anisogamia). Son
organismos haplobiontes haplontes.

•  VI. BIOLUMISCENCIA
Algunos géneros presentan bioluminiscencia (Ej. Noc0luca). a
través de la oxigenación de la luciferina por la lucífera,
ocurre la formación de un producto excitado que libera
fotones de luz.
Bioluminescencia
Eventos de marea roja
Método de muestreo de fitoplancton y
fitobentos
•  Métodos de muestreo de microalgas
Red de fitoplancton
Manguera de muestreo
Botella 9po niskin
ROSETA DE BOTELLAS NISKIN
Muestreo de dinoflagelados desde el
sedimento
Oferta de
microalgas
FIJACIÓN DE LAS MUESTRAS
La fijación más común se realiza con lugol, de preferencia ácido (Throndsen, 1978). La
can9dad de fijador a agregar a la muestra lo indica el color que toma la muestra, el que es
descrito como café pálido (Throndsen, 1978), o color brandy o coñac (Andersen &
Throndsen, 2004); generalmente este color se alcanza al agregar entre 8 a 12 gotas por
125 ml de muestra.

¿Cómo cul9var en laboratorio dinoflagelados para el
estudio de toxinas en Magallanes?
Piezas de culRvo

Es necesario tener una cámara de cul9vo, para esto es conveniente mantener la
temperatura op9ma entre 10 a 15 °C. En el caso de Magallanes esta temperatura
puede oscilar entre 8 a 11 °C.
 ¿Cómo cul9var en laboratorio dinoflagelados
para el estudio de toxinas en Magallanes?
Estantes

Deben ser en lo posible metálicos con bandejas perforadas para permi9r la circulación
del aire, o de vidrio, suscep9bles de ser limpiadas.
Iluminación

Cada bandeja donde van los cul9vos , debe estar iluminada por tubos fluorescentes. Los
tubos que generalmente se usan para el cul9vo de microalgas son de luz fría o luz día, ya
que estos simulan mejor el rango de longitudes de onda (300-700nm), necesario para la
fotosintesis.

Cámaras de transferencia

El principal propósito de estas cámaras o áreas de transferencia es crear un espacio con
el mínimo de polvo y probabilidades de contaminación.
Recipientes de culRvo

Los u9lizados son de vidrio y dentro de éstos, los de borosilicato son los preferidos. Se
recomienda recubrir el recipiente por ejemplo con parafina, o usar recipientes de plás9co
desechable. Son ocupados tubos de ensayo, placas petri, matraces cápsulas magenta,
son u9lizados para cul9vos en pequeños volúmenes.
Elementos de inoculación

Elementos de inoculación pueden u9lizarse implementos metálicos como pinzas de
punta fina, es9letes, asa de siembra, bisturí, y de vidrio como espátula de Drigalsky,
pipetas pasteur y varillas.
Agua

El agua empleada para medios de cul9vo puede ser agua des9lada, agua bides9lada,
agua filtrada o agua desionizada.
Lavado de material.

Cuando el material esta extremadamente sucio es recomendable lavar con una solución
de acido crómico o sulfocrómico y luego enjuagar con abundante agua.

Desinfección y esterilización


Medio de culRvo.
 Trabajo de laboratorio
Método de conteo

-  3 estudiantes por grupo.
-  Iden9ficar las diatomeas diatomeas pennadas
-  Cuan9ficar su abundancia de tres métodos diferentes.
-  Cada persona va anotar su abundancia en la pizarra.
-  Cuan9ficar su abundancia en el volumen conocido.


Métodos
-  Contar la totalidad de las células pennadas en una mitad de la placa.

-  Contar las células pennadas en tres transectos dentro del porta

objeto.

-  Contar en 5 cuadriculas de la cámara de conteo.

-  Contar en 5 puntos de referencia dentro del porta objeto.