UNIVERSIDAD

SAN PEDRO

FACULTAD : CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA : TEC. MED. LABORATORIO CLÍNICO

JO

CURSO : INMUNOLOGIA
DOCENTE : MINAYA HIGINNIO GIOVANNA

TEMA : INMUNOCROMATOGRAFIA

CICLO : V
ALUMNO(A) : SAMANAMUD OSORIO CHRISTIAN

HUACHO – PERÚ
2019
 INFORMES DE LABORATORIO

AD-BIO HIV 1/2 AB PLUS COMBO RAPID TEST -

CASETE (SUERO / PLASMA / SANGRE TOTAL)

FUNDAMENTO

El virus de la Inmunodeficiencia adquirida tipo I y II (VIH-1 y VIH-2) se compone de una cadena

simple de ARN. La causa de la relación entre el virus VIH-1 y VIH-2 y el síndrome de
inmunodeficiencia adquirida (SIDA) se ha establecido en las últimas décadas. El VIH-1 ha sido
aislado de pacientes con SIDA y el complejo relacionado con el SIDA, y de pacientes sanos con alto
riesgo de desarrollar SIDA1. El VIH-2 se aisló de pacientes con SIDA del oeste africano y de
pacientes asintomáticos seropositivos.
La prueba de casete consiste en:
1) una almohadilla con conjugado de color borgoña que contiene antígeno VIH-1 recombinante
conjugado con coloide de oro (VIH-1 conjugado), antígeno VIH-2 recombinante conjugado con
coloide de oro la muestra Control prueba muestra S muestras congeladas a temperatura ambiente
lentamente y mezcle con suavidad. Las muestras que contengan partículas visibles, deben ser
eliminadas por centrifugación antes de la prueba. Sangre Total La sangre total puede obtenerse
por punción digital o venopunción
2) Cuando se dispensa un adecuado volumen de muestra en el pozo del casete de prueba, la muestra
migra por capilaridad a lo largo del casete. Los anticuerpos VIH-1, si se encuentran en la muestra,
migran a través de la almohadilla donde se unen a los conjugados de VIH-1. El inmunocomplejo
es capturado por la membrana que está recubierta del antígeno VIH-1, formando una línea de
color borgoña en la región 1, indicando así un resultado positivo o reactivo. La ausencia de esta
línea en esa región sugiere un resultado negativo o no reactivo para anticuerpos anti VIH-1. Los
anticuerpos VIH-2, si están presentes en la muestra, migran a través de la membrana hasta unirse
con el conjugado VIH-2. El inmunocomplejo es entonces capturado por la membrana pre-
recubierta de antígeno VIH-2, formando una línea color borgoña en la región 2, indicando un
resultado positivo o reactivo. La ausencia de esta línea en esa región sugiere un resultado
negativo o no reactivo para anticuerpos anti VIH-2. La ausencia de cualquiera de la línea 2
sugiere un resultado negativo.
La prueba contiene un control interno (línea C) que debe exhibir una línea de color borgoña por la
formación del inmunocomplejo de los anticuerpos de control, independientemente de la presencia de
cualquier línea coloreada. De no presentarse, el resultado de la prueba no es válido y la muestra debe
ser analizada de nuevo con otro dispositivo.

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MATERIALES:

 Bolsa de aluminio sellada que contiene: a. Un dispositivo de casete b. Un tubo

capilar c. Un desecante
 Diluyente de muestra (REF SB-R0011, 5 mL/botella)
 Un inserto (instrucciones de uso).
 Reloj o cronómetro 2. Dispositivo de punción para la extracción de sangre total

RECOLECCION DE LA MUESTRA
PLASMA
1. Recolecte la muestra en un tubo tapa lila, azul o verde (que contenga EDTA,
Citrato o Heparina) por venopunción.
2. Separe el plasma por centrifugación.
3. Cuidadosamente transfiera el plasma a un tubo nuevo.
Suero
1. Recolecte por venopunción la muestra en un tubo tapa roja (sin
anticoagulantes)
2. Espere la formación del coagulo
3. Separe el suero por centrifugación
4. Cuidadosamente transfiera el suero a un tubo nuevo

PROCESAMIENTO
Paso 1: Lleve las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es refrigerada
o congelada. Mezcle bien la muestra antes del ensayo una vez descongelado.
Paso 2: Cuando esté preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el dispositivo.
Colóquelo sobre una superficie limpia y plana.
Paso 3: Asegúrese de marcar el dispositivo con la identificación del paciente.

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Paso 4: Llene el tubo capilar con la muestra (20 µL) no exceda la línea de muestra como se
muestra en la imagen. Para mayor precisión, transfiera la muestra con una pipeta que de
exacto el volumen.

Con el tubo capilar en posición vertical, dispense la muestra en el centro del pozo de muestra
asegurándose de que no haya burbujas.

Agregue 2 gotas (aprox. 60-80 µL) de diluyente de muestra inmediatamente dentro del pozo
de muestra con la botella en posición vertical.

Paso 5: Contabilice el tiempo

Paso 6: Los resultados pueden leerse entre 15 minutos. Los resultados positivos pueden ser
visibles a partir de 1 minuto. Los resultados negativos deben ser confirmados al final de los
20 minutos. Cualquier interpretación de resultados hecha fuera de la ventana de 15-20
minutos deben ser considerados inválidos y el ensayo debe ser repetido. Tras interpretar los
resultados deseche los dispositivos usados según las regulaciones locales.

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INTERFERENCIA
Las sustancias comunes (tales como medicamentos para el dolor y la fiebre, componentes
sanguíneos), pueden afectar al rendimiento de ad-bio HIV 1/2 Ab Plus Combo Rapid Test. Esto fue
estudiado mediante el fortalecimiento de estas sustancias en los controles estándar de VIH1 Ab y
VIH-2 Ab. Los resultados se presentan en la siguiente tabla y demuestran que las sustancias o
enfermedades estudiadas no afectan el rendimiento de ad-bio HIV 1/2 Ab Plus Combo Rapid Test.
Lista de químicos de interferencia potencial y concentraciones analizadas:

 Albumina 60 g/L
 . Creatinina 442 µmol/L
 Glucosa 55 mmol/L .
 . Salicylic acid 4.34 mmol/
 Bilirrubina 20 mg/dL
 . Heparin 3,000 U/L

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 BIBLIOGRAFIA

1. Chang, SY, Bowman, BH, Weiss, JB, Garcia, RE and White, TJ. The
origin of HIV-1 isolate HTLV-IIIB. Nature (1993) 3/363:466-9.

2. Arya, SK, Beaver, B, Jagodzinski, L, Ensoli, B, Kanki, PJ, Albert, J,

Fenyo, EM, Biberfeld, G, Zagury, JF and Laure, F. New human and
simian HIV-related retroviruses possess functional transactivator (tat)
gene. Nature (1987) 328:548-550.

3. Caetano JAImmunologic aspects of HIV infection. Acta Med Port

(1991) 4 Suppl 1:52S-58S.

4. Janssen, RS, Satten, GA, Stramer, SL, Rawal, BD, O'Brien, TR,
Weiblen, BJ, Hecht, FM, Jack,N, Cleghorn, FR, Kahn, JO, Chesney,
MA and Busch MP. New testing strategy to detect earlyHIV-1 infection
for use in incidence estimates and for clinical and prevention purposes.
JAMA (1998) 280(1): 42-4.
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PRUEBA RÁPIDA EN CASETE ONSITE HCV AB

PLUS (SUERO / PLASMA)
PRUEBA CUALITATIVA

FUNDAMENTO
El virus de la Hepatitis C (VHC), ha sido descrita como una forma transmitida parenteralmente
de hepatitis no-A, no-B (NANBH), la cual se convierte en una enfermedad crónica en el 50% de
los casos.

La prueba rápida HCV Ab Plus es desarrollada para la detección de anticuerpos incluyendo IgG,
IgM e IgA contra el virus de la Hepatitis C en suero o plasma humana. La prueba se pueden usada
por trabajadores de la salud con una capacitación mínima y sin equipos de laboratorio.

Cuando es dispensado un volumen adecuado de muestra en el pozo de muestra del casete de

prueba, la muestra migra por acción capilar a través del casete. Los anticuerpos IgG, IgM, o IgA
contra el VHC, si están presentes en la muestra se unirán con los conjugados del VHC. El
inmunocomplejo es capturado entonces en la membrana por los antígenos de fusión de VHC pre-
recubiertos, no conjugados formando una banda de color borgoña en la línea T, indicando un
resultado positivo de la prueba o reactiva para VHC Ab. La ausencia de color en la banda T
sugiere un resultado negativo de la prueba. La prueba contiene un control interno (banda C) la
cual muestra un color borgoña por la formación del inmunocomplejo de anticuerpos de control,
independientemente de la formación del color en la banda T. De lo contrario, el resultado de la
prueba no es válido y la muestra debe ser analizada de nuevo con otro dispositivo.

La prueba rápida es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral de doble antígeno. La prueba

del casete consiste en lo siguiente:

1) Una almohadilla con conjugado coloreado de borgoña que contiene los antígenos de fusión
recombinantes de VHC (Núcleo, NS3, NS4 y NS5) conjugado con oro coloidal (conjugados
VHC), y un control de anticuerpo conjugado con oro coloidal

2) Una membrana de nitrocelulosa que contiene las bandas de prueba (banda T) y la banda control
(banda C). la banda T se encuentra recubierta con antígenos de HVC recombinantes, y la banda
C está recubierta con un control de anticuerpo.

TITULO: BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 7

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MATERIALES

1. Bolsas de aluminio selladas que contiene:

a. Un dispositivo de casete
b. Un desecante 2. Goteros de plástico
3. Diluyente de muestra (REF SB-R0023C, 5 ml/botella)
4. Un inserto (instrucciones de uso)
5.Reloj o cronómetro

PROCEDIMIENTO
Paso 1: Lleve las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es refrigerada o
congelada. Mezcle bien la muestra antes del ensayo una vez descongelado.
Paso 2: Cuando esté preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el dispositivo.
Colóquelo sobre una superficie limpia y plana.
Paso 3: Asegúrese de marcar el dispositivo con la identificación del paciente.
Paso 4: Llene el gotero con la muestra. Con el gotero en posición vertical, dispense 1 gota (aprox
30-40 µL) de la muestra dentro del pozo de muestra asegurándose de que no se formen burbujas.
Inmediatamente adicione 1 gota (aprox 35-50 µL) de diluyente de la muestra en el pozo de
muestra con la botella en posición vertical.

Paso 5: Contabilice el tiempo.

Paso 6: Los resultados deben ser leídos a los 15 minutos. Los resultados positivos o reactivos se
hacen visibles transcurrido 1 minuto. No lea los resultados después de 20 minutos.
Para evitar confusiones descarte el casete después de leer el resultado.

TITULO: BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 8

 INFORMES DE LABORATORIO

TITULO: BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 9

 INFORMES DE LABORATORIO

BIBLIOGRAFIA

 Choo, Q.L., G. Kuo, A.J. Weiner, L.R. Overby, D.W. Bradley,and M.

Houghton. Isolation of a cDNA clone derived from a blood-borne non-
A, non-B viral hepatitis genome. Science 1989; 244:359
 Kuo, G., Q.L. Choo, H.J. Alter, and M. Houghton. An assay for
circulating antibodies to a major etiologic Virus of human non-A, non-
B hepatitis. Science 1989; 244:362 3. Van der Poel, C. L., H.T.M.
Cuypers, H.W. Reesink, and P.N.Lelie.
 Confirmation of hepatitis C Virus infection by new four-antigen
recombinant immunoblot assay. Lancet 1991; 337:317 4. Wilber, J.C.
Development and use of laboratory tests for hepatitis C infection: a
review. J. Clin. Immunoassay 1993; 16:204
 Kuo,G, Choo Q-L, Alter, HJ, et al. An assay for circulating antibodies
to a major etiologic virus of human non-A, non-B hepatitis. Science
1989. 244:362-4.
 Esteban JI, Gonzalez A, Hernandez JM, et al. Evaluation of antibodies
to hepatitis C virus in a study of transfusion-associated hepatitis. N
Engl J Med 1990. 323:1107-12.

TITULO: BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 10

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PRUEBA RÁPIDA ONSITE HCG ORINA – TIRA DE

ANÁLISIS
PRUEBA CUANTITATIVA

FUNDAMENTO

La ad-bio hCG Combo Rapid Test es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral.

El casete de prueba contiene: 1) una almohadilla de conjugado de color vino tinto el cual
contiene conjugado de anticuerpo monoclonal anti-hCG con oro coloidal (conjugados
hCG Ab), 2) una tira de membrana de nitrocelulosa que contiene una línea de prueba
(línea T) y una línea de control (línea C).
La línea T se encuentra pre cubierta con otro anticuerpo anti hCG, y la línea C se
encuentra pre cubierta con anticuerpo de control. Cuando un volumen adecuado de
muestra de ensayo se dispensa sobre la almohadilla de la tira de prueba, la muestra
migra por acción capilar a través de la tira. Si hay presencia de hCG en la muestra en
un nivel igual o superior a 12.5 mUI/mL en muestras de suero o plasma o igual o superior
a 25 mUI/mL en muestras de orina, la muestra se une a los conjugados hCG Ab. El
immunocomplejo es capturado en la membrana por el anti hCG Ab pre cubierto,
formando una línea T de color vino tinto, indicando un resultado positivo de la prueba
para hCG.
La ausencia de la línea T sugiere un resultado negativo. La prueba contiene un control
interno (línea C) que debe presentar una línea de color vino tinto del inmunocomplejo
de anticuerpo de control independientemente del desarrollo de color en la línea T. De
otro modo, el resultado de la prueba no es válido y la muestra debe ser analizada de
nuevo con otro dispositivo.

TITULO: BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 11

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PROCEDIMIENTO
Paso 1: Lleve los componentes de muestras y ensayos a temperatura ambiente en caso de
estar refrigerados o congelados Una vez descongelada, mezcle bien la muestra antes de
realizar el análisis.
Paso 2: Recolecte de 150 a 200 uL o de 3 a 4 gotas de orina en un contenedor de muestras
Paso 3: Para el empaque del tubo.
- La primera vez que se utiliza un nuevo tubo, anote la fecha en que se abre junto
con la fecha de vencimiento presente en la etiqueta.
- Cuando esté listo para usar, saque la cantidad necesaria de tiras del tubo.
- Inmediatamente cierre el tubo para evitar su contaminación y humedad.
Las tiras de prueba en el tubo deben ser utilizadas dentro de los 30 días siguientes a la
fecha de su apertura por primera vez. La exposición repetida A la humedad extrema
puede reducir el tiempo de conservación después de la primera apertura del paquete.
Para el paquete Kit caja:
- Tome la cantidad deseada de bolsas selladas de la caja.
- Cuando esté listo para probar, abra la bolsa por la muesca y extraiga la tira reactiva.
Paso 4. Sumergir la tira en la muestra de por lo menos 10 segundos.
No permita que espécimen sobrepase el nivel indicado por las flechas en al tira de de la
tira. Por su parte, creó el temporizador.

TITULO: BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 12

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Paso 5: Retire la tira de la muestra, y colóquela en un lugar con una superficie plana y
seca.
Paso 6: Los resultados pueden leerse en el transcurso de 5 a 10 minutos. Los resultados
positivos son visibles en un tiempo de 1 minuto.
No se recomienda realizar la lectura luego de 10 minutos. Para evitar confusiones,
deseche el dispositivo de prueba después de interpretar su resultado.

TITULO: BACTERIAS GRAM NEGATIVAS 13