UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

TESIS PARA OPTAR POR EL TITULO

DE DOCTORA EN QUÍMICA Y FARMACIA

TEMA:
OBTENCIÓN DEL ACEITE DE SEMILLA DE NIM
POR EXTRACCIÓN DE GASOLINA NATURAL
ESTUDIO PRELIMINAR

AUTORA:
Q.F. MARTHA CECILIA HIDALGO LEÓN

TUTORA:
DRA. ZOILA LUNA ESTRELLA

Guayaquil - Ecuador

2002
En mi calidad de Directora de
Tesis. Certifico que este
trabajo ha sido elaborado por
la Q.F. Martha Cecilia Hidalgo
León, por lo que autorizo su
presentación.

________________________
Dra. Zoila Luna Estrella
Directora de Tesis
 La responsabilidad por los
hechos, ideas y doctrinas,
expuestas en esta tesis,
Corresponden
exclusivamente a su autor.

_______________________
Q.F. Martha Cecilia Hidalgo León
 DEDICATORIA
El presente trabajo Investigativo
se lo dedico a:

· Mis queridos y adorados padres

Luis Hidalgo C. y Luz León N.
por su apoyo incondicional
tanto moral como económico,
por sus consejos, por ayudarme
a alcanzar la meta deseada.

· A mis hermanos Mario, Ruben,

Armando y Luis por su cariño y
amistad, por los momentos
felices y alegres que hemos
compartido y seguiremos
compartiendo.
 AGRADECIMIENTO

· En primer lugar mi agradecimiento

sincero a la MsC. Olga González S.
Sub-directora del Instituto de
Química de la ESPOL, Asesora del
presente trabajo de investigación, por
su gran y valiosa ayuda para llevar a
feliz termino el presente trabajo, por
sus enseñanzas y sobre todo por
haberme brindado su amistad.

· Al Ing. Justo Huayamave, Jefe del

Laboratorio de Hidrocarburos del ICQ
– ESPOL, por permitirme desarrollar
la tesis en el laboratorio.

· Al Dr. Gastón Del Rosario, Analista

del Laboratorio de Hidrocarburos, por
su ayuda en la realización de esta
tesis.

· A la Dra. Zoila Luna Estrella,

Directora de Tesis.
 RESUMEN

Debido al peligro que sufre la agricultura, amenazada por la contaminación de

plaguicidas químicos, se busca dar en esta tesis un pequeño aporte para

frenar esta contaminación, que perjudica al hombre en su salud así como

también al medio ambiente que lo rodea. Es por eso que este trabajo

investigativo cubre la obtención de un plaguicida botánico como el aceite de

semilla de Nim (Azadirachta indica A, juss), que gracias a su principio activo

azadirachtina, provoca una alteración del ciclo vital del insecto, evitando que

este se alimente, mude y se reproduzca, siendo totalmente inocuo para el

hombre y los animales.

Trabajos anteriores ya han extraído el aceite de NIM con diferentes

solventes destacándose el agua, el sulfuro de carbono, tricloro etileno y el

hexano siendo este último, el ideal para realizar las extracciones, pero con

costos muy elevados debido a que es un solvente muy caro. Lo que se realizó

en este trabajo es obtener el aceite con un corte de gasolina natural que tenga

las propiedades similares al hexano como su punto de ebullición, con lo que el

costo de este aceite plaguicida sería más accesible para los agricultores y por

ende se ayudaría al consumo alimentos más sanos.

Los resultados de esta investigación, fueron los esperados ya que no solo se

logró un aceite que cumple con los parámetros de calidad, sino que también se

obtuvo un rendimiento mayor del aceite.

 SUMMARY

Due to danger that suffers the agriculture, threatened by the pollution of

plaguicide chemical, is sought to give in this thesis a small contribution to

stop this pollution, that perjudices to the man in its health as well as to the

environment that surrounds it. Therefore that this investigative work covers

the obtainment of a plaguicide botanical as oil of Nim (Azadirachta indica A,

juss), that thanks to its active principle azadirachtine, provokes an alteration

of the vital cycle of the insect, avoiding that this is fed, moved and is

reproduced, being totally innocuous for the man and the animals.

Previous projects already they have extracted oil from NIM with different

solvent being emphasized the water, the carbon sulphur, trichlor ethylene

and the hexane being this last, the ideal to accomplish the extractions, but

with very high costs due to the fact that it is a very expensive solvent. What

was accomplished in this work is to obtain oil with a natural gasoline court

that had the similar properties to the hexane as its boiling point, with what

the cost of this oil plaguicide would be more accessible for the farmers and

by would be helped foods consumption more sound.

The results of this investigation, they were waited since not alone was

achieved an oil that complies with the parameters of quality, but also was

obtained a greater yield of the oil.

 INDICE

Introducción 1

Problema 4

Hipótesis 5

Objetivos 6

Capitulo I: Marco Teórico

1. El NIM

1.1 Generalidades 7

1.2 Distribución 7

1.3 Características del NIM 8

1.4 Ecología 8

1.5 Descripción Botánica 9

1.6 Composición Química 11

1.6.1 Azadirachtina 11

1.6.2 Mellantriol 13

1.6.3 Nimbin y Nimbidin 13

1.6.4 Salannin 13

1.6.5 Otros 14

1.7 Aplicaciones de la planta 14

1.7.1 Corteza 15

1.7.2 Madera 15

1.7.3 Flores 16

1.7.4 Hojas 16

1.7.5 Torta 17

1.7.6 Aceite 18
Capitulo II: Plaguicidas

2.1 Generalidades 21

2.2 ¿Qué es u plaguicida? 22

2.3 Clasificación 22

2.4 Los plaguicidas en el Ecuador 25

2.5 Impacto Ambiental 25

2.6 Impacto Salud Humana 26

2.7 Impacto Socio-Económico 26

2.8 Los plaguicidas Botánicos 27

2.8.1 Ventajas 27

Capitulo III: Solvente Gasolina

3.1 Generalidades 28

3.2 Gasolina Natural 30

3.3 La Gasolina como Disolvente 30

Capitulo IV: Materiales y Métodos

4.1 Antecedentes 32

4.2 Metodología 32

4.2.1 Tratamiento de la semilla 32

4.2.2 Obtención del Corte Solvente 34

4.2.3 Extracción del aceite de NIM 35

4.2.4 Recuperación del Solvente 35

4.2.5 Purificación del aceite 36

4.3 Análisis realizados 36

4.3.1 Análisis cromatográfico 37

4.3.2 Propiedades Organolépticas 38

4.3.3 Indice de refracción 38

4.3.4 Densidad 38
 4.3.5 Punto de Inflamación 39

4.3.6 Viscosidad Saybolt 39

4.3.7 Punto de Congelamiento 40

4.3.8 Indice de acidez 40

4.3.9 Solubilidad 41

4.4 Control de Calidad 41

Capitulo V: Resultados e Interpretación

5.1 Obtención del peso real de la muestra 42

5.2 Rendimiento de extracción de aceite 43

5.3 Relación entre materia prima inicial y residuo 45

5.4 Solvente Recuperado 47

5.5 Análisis Realizados al aceite 49

a. Propiedades Organolépticas 49

b. Propiedades físico-químicas 50

c. Ensayos de solubilidad 50

5.6 Análisis Cromatográfico del corte solvente 51

Capitulo VI: Conclusiones 53

Capitulo VII: Recomendaciones 54

Anexos

Anexo 1: Árbol de NIM 55

Anexo 2: Composición Química 56

Anexo 3:Evolución de Plaguicidas 57

Anexo 4: Ciclo de los plaguicidas 58

Anexo 5: Estadísticas en el Ecuador 59

Anexo 6: Solventes Empleados 60

Anexo 7: Poder Solvente 63

Anexo 8: Diagrama del Proceso 64

Anexo 9: Tratamiento de semillas 65

Anexo 10: Obtención del Corte Solvente 66

Anexo 11: Extracción del aceite de NIM 67

Anexo 12: Purificación del aceite 68

Anexo 13: Análisis realizados 69

Bibliografía 71
 INTRODUCCION

Las dificultades de carácter ecológico que sufre nuestro planeta, es fruto del

abuso del hombre sobre el medio ambiente que se demuestra en las

alteraciones del agrosistema.

El uso exagerado de plaguicidas, pesticidas, insecticidas, etc., por parte del

hombre, ha ocasionado graves problemas en nuestro entorno. Es

imprescindible asumir con sensatez la búsqueda de nuevas alternativas, que

eviten el deterioro de los recursos naturales.

Es incuestionable la gran utilidad que suministra el empleo de pesticidas

químicos en la agricultura, en la batalla contra enfermedades que afecta al

hombre y a los animales. Pero el exagerado empleo de agroquímicos ha traído

como resultado trastornos a la salud y a dado origen a la resistencia en las

plagas, lo que exige aumentar las dosis de estas sustancias.

Según informes de la Organización Mundial de la Salud (O.M.S), la intoxicación

indirecta o directa por plaguicidas, perjudica anualmente a dos millones de

personas y el tres por ciento de la población en desarrollo. Estudios llevados a

cabo en países como Nicaragua el 86 % de la población se encuentra expuesta

a la intoxicación por pesticidas. Costa Rica posee una elevada incidencia de

envenenamiento por plaguicidas, el consumo medio es de 4 Kg por persona, 8

veces la media mundial.

En el Ecuador existen casos reportados por envenenamiento por pesticidas,

pero no hay una estadística exacta.

De igual manera se ha reportado que en el mundo existen 600 ingredientes

activos y 50.000 formulaciones comerciales de plaguicidas y solamente 10

empresas controlan el 80% del mercado global, y el mercado en América del

Sur representa el 10,8%, existiendo una tendencia a experimentar un aumento

por las diferentes habilidades que la propia industria utiliza y las políticas de

subsidio de los gobiernos para el empleo de los agroquímicos en general.

Ante este panorama desesperanzador presentado por las estadísticas es

recomendable adoptar otras medidas como técnicas naturales basado en

principios agroecológicos, como es el uso de productos extraídos de plantas

que tengan propiedades plaguicidas como es el caso de la semilla del árbol de

NIM, cuyo principio activo no es perjudicial y además no crea resistencia en

las plagas.

El NIM es un árbol miembro de la familia de las Meliáceas, originario del sur

este de Asia, principalmente de países como la India, Pakistán, Sri Lanka,

siendo utilizado desde hace 5000 años.

Ingreso al país en el año de 1.978 a la provincia de Manabí, se adapta a

cualquier tipo de suelo debido a sus raíces muy profundas, así como también a

una amplia variedad de climas, tolerando temperaturas dentro de un rango de

9,5 °C a 37°C.

Las características propias del árbol permiten que sea utilizado en la industria

química, en la preparación de cosméticos, dentífricos, etc.

La semilla objeto de nuestro estudio tiene una elevada concentración de

Azadirachtina, principio activo que tiene propiedades plaguicidas. Así como

también posee otros componentes que le dan características amebicidas,

antibacteriana, antiacné, antiseborreico, barrera antiparasitaria en la

prevención de gingivitis, etc.

Debido a la inocuidad con el ser humano, los animales y la fauna benéfica del

campo, puede ser empleado como plaguicida natural biodegradable en los

cultivos lo que va a beneficiar la diversidad biológica de los sistemas, así como

la seguridad alimentaria, disminuyendo ostensiblemente los casos por

intoxicación por plaguicidas.

Por esta razón se quiere demostrar en el presente trabajo, que el empleo de

plaguicidas originado de las semillas de un árbol con estas propiedades, evitará

la contaminación de la flora y la fauna y por ende ayudará a proveer al hombre

de alimentos que beneficiaran a la salud, en vez de perjudicarla como lo hacen

los agroquímicos.
 PROBLEMA

¿Se tendrá un mayor rendimiento de aceite de

NIM, realizando la extracción con un corte

solvente de gasolina natural?

 HIPÓTESIS

El uso del método de extracción con gasolina

natural, aumentará la cantidad de insecticida

obtenido de la semilla del NIM, cuya aplicación

disminuirá, la contaminación del suelo, agua y

principalmente de los alimentos.

 OBJETIVOS

GENERAL:
Contribuir al conocimiento del método de

extracción del aceite de semilla de NIM con

gasolina natural.

ESPECIFICOS:
§ Obtener el aceite al nivel de laboratorio.

§ Establecer las condiciones del proceso de

extracción.

§ Determinar el rendimiento de extracción.

 1. EL NIM

1.1 Generalidades

El árbol de nim desde hace 5000 años ha sido ampliamente utilizado en la

medicina y en la actualidad se lo emplea en la cosmética, en fitosanitarios así

como también por sus propiedades es utilizado como plaguicida cuyos principios

activos se lo encuentra en las semillas, la cual será objeto del presente

estudio.

1.2 Distribución

El origen de este árbol es incierto, se cree que es originario de la región de

Assan y Myanmar de la India, país en el que es considerado como una

farmacia. Es muy difundido en Pakistán, Myanmar, Sri Lanka, Talandia,

Malasia e Indonesia.

Este árbol ha sido introducido y establecido en los trópicos y subtrópicos,

especialmente en las áreas más secas del Sur de Asia, las Islas el Pacífico,

Australia, Sur y Centro América, el Caribe, el Sub Sahara Africano y el Medio

Oriente.

En nuestro país este árbol es poco conocido, fue introducido a la provincia de

Manabí en el año de 1.978, también hay cultivos en Santa Elena y en Guayaquil

encontramos estos árboles en el Hospital Alejandro Mann y en los viveros de

la ESPOL.
Se calcula que en todo el mundo existen entre 64 a 91 millones de ejemplares.

1.3 Características del Nim

Reino : Vegetal

División : Spermatophyta

Subdivisión : Angiosperma

Clase : Dicotiledonea

Subclase : Archichamyda

Orden : Geraniales

Sub-orden : Rutineae

Familia : Meliaceae

Genero : Azadirachta

Especie : Azadirachta indica A, juss

Sinónimo : Antelea azadirachta, Melia

Nombres comunes : Nim, neem, margosa, caoba criolla

Brechelt, A Fernández, C 1995. El árbol de nim para la agricultura y el medio

ambiente.

1.4 Ecología

Este árbol se desarrolla en climas tropicales y subtropicales. La precipitación

lluviosa que requiere es de 400 a 1200 mm, su rango de temperatura para

crecer puede ser de 9,5 a 37°C, no soporta el frío extremo.

 Tabla Nro. 1 Tolerancia del nim a factores climáticos y de suelo

Límites Intervalo Límites inferiores Óptimo Superiores

Lluvia (mm) < 300 500 – 800 1800 2000 – 2500

Temperatura (°C) 4 10 – 20 27 40 – 49

Arcilla (%) < 25 25 – 45 > 45 > 70

Arena (%) <50 50 – 75 > 75 > 85

Marco (m) < 1,8 x 1,8 3x3–4x5 >7x7

Fuente: El insecticida botánico neem, un control eficaz de plagas, 1993

El suelo en el que se desarrolla debe ser profundo, permeable y arenoso

aunque también lo puede hacer en suelos rocosos, secos no así en suelos

salinos, duros y barrosos. Crece en suelos ácidos, pero la acidez de este, se

neutraliza con la caída de las hojas que tienen un pH de 8,2. Por lo que se

podría decir que crece bien en suelos alcalinos, con altos niveles de Na, CO32- y

CO3H-. El pH del suelo varía entre 5.2 a 7. En suelos deficientes de zinc y

potasio, el crecimiento es deficiente.

1.5 Descripción Botánica

Las plantas de nim se producen vegetativamente por acodos, cortes, injertos;

generalmente son cultivadas de la semilla en viveros, las plantas de semillero

se mantienen en el vivero de 1 a 2 años antes de transplantar, para obtener un

máximo de rendimiento de semillas, los árboles deben ser plantados

espaciadamente para proporcionar el desarrollo completo de la copa. La

siembra realizada de forma directa es más eficaz en coste, a continuación una

breve descripción botánica. Anexo 1

La cofia de la raíz es relativamente corta en comparación con sus raíces

laterales, ya que pueden alcanzar una longitud de hasta 15 m, lo que es muy

beneficioso para zonas secas.

El tronco es recto con una altura de 15 a 25 m y el diámetro oscila entre 30 a

90 cm. La corteza moderadamente gruesa y fuertemente surcada, cuyas

fisuras son de color rojizo- castaño.

Las hojas son alternas, de 10 a 38 cm agrupándose en el extremo de las ramas,

los periodos de deshoje son cortos, siempre está verde y la muda solo ocurre

dependiendo del clima.

Las flores se caracterizan por ser de colores blancas o cremas, pequeñas,

bisexuales, de aroma agradable a miel, lo que atrae a las abejas, las flores se

encuentran reunidas en forma de racimos.

Las semillas presentan la particularidad se debe a que es una drupa carnosa y

suave, de forma helicoidal con una longitud de hasta 2 cm de largo. Su color

inicial es verde y cuando se madura adquiere un color amarillo, cerca de las

doce semanas después de la floración, su pulpa es dulce, en cuyo interior se

encuentra un germen que contiene en su interior aceite en un porcentaje de

45%.

El árbol de nim comienza a producir semillas a partir de los 3 a 5 años y es

completamente productivo a los 10 años, llegando incluso a producir hasta 50

kg de semillas anualmente.
1.6 Composición Química

Los componentes principales del nim son los esteroides, alcaloides,

flavonoides, glucósidos y primordialmente terpenoides existiendo en un

número aproximado de 100.

Los limonoides (triterpenoides) de mayor importancia por su concentración y

actividad que han demostrado ser excelentes para inhibir el crecimiento de los

insectos, dividiéndose en nueve grupos que son:

Azadirona Presente en el aceite de la semilla.

Amorastaitina Aparece en las hojas.

Vepinina En el aceite.

Vilasinina En las hojas

Geduninina Se haya en el aceite de la semilla y en la corteza

Nimbina En las hojas y las semillas

Nimbolina Igualmente en las semillas

Salanina En las hojas y semillas.

Otros componentes aislados: azadirachtina, salanim, melantriol, ácido

margósico, nimbin, nimbidin, nimbicelim, azadirone, sitosterol, meliacina entre

otros.

1.6.1 Azadirachtina

Fórmula empírica: C35H44O16

Peso Molecular: 720 g

Es el principal ingrediente activo aislado de la semilla de nim en una proporción

de 0,1 a 0,9%. Existen nueve isómeros de la azadirachtina que se encuentran

muy relacionados. Los tipos A y B se hallan en una mayor proporción de 83 % y

16 % respectivamente. El 1% restante los conforma los tipos C, D, E, F, H, I, K.

Es un 90% efectivo sobre la mayoría de los parásitos, cerca de doscientas

especies de insectos nocivos para las plantas al tiempo que respeta la fauna

auxiliar, siendo inofensivo para los vertebrados en general y los mamíferos

incluidos el hombre. Anexo 2A

La azadirachtina posee una estructura similar a las hormonas ecdisonas del

insecto que controla el proceso de la metamorfosis, afectando a un órgano

similar a la glándula pituitaria del humano, que regula la secreción de las

hormonas. La metamorfosis necesita la sincronía cuidadosa de las hormonas y

los cambios fisiológicos deben ser acertados, la azadirachtina va actuar como

un bloqueador, es decir, obstruye la producción, entonces los insectos no

mudan y por supuesto se rompe el ciclo vital.

Uno de los elementos principales que forma parte de la azadirachtina es el

magnesio que se encuentra en un porcentaje de 2 – 4 por gramo.

La principal limitación que presenta es su rápida degradación que dura

aproximadamente cinco días. Otro factor que participa de una manera

indirecta es la temperatura, su acción es más efectiva a altas temperaturas,

porque, los insectos se hallan mas activos y el efecto anticomida es

conseguido mas efectivamente que a temperaturas bajas.

La azadirachtina es un biopesticida natural efectivo contra 175 especies en

dosis menores de 10 ppm que constituye una alternativa válida, frente a la

utilización de pesticidas sintéticos más agresivos para el medio ambiente.

1.6.2 Mellantriol

Aislado en el año de 1967 por Lavie es otro inhibidor de la alimentación, con

una estructura al igual que la azadirachtina muy complicada, se encuentra en

concentraciones muy bajas, comprobándose su efectividad en cosechas de la

India afectadas por una plaga de langosta. Anexo 2B

1.6.3 Nimbin y Nimbidin

Estos dos componentes tienen actividad antivirus, por lo cual ha tenido gran

éxito empleándolo contra el virus del vaccinia, el virus de la patata y el virus

de las enfermedades venéreas de las aves, es decir evita las enfermedades

virales de cosecha y del ganado. Anexo 2C y 2D

El nimbidin se encuentra en un 2% por gramo y es el componente primario de

los principios amargos obtenidos cuando las semillas son extraídas con alcohol.

1.6.4 Salannin

Este triterpenoide fue el tercer elemento aislado que también actúa

inhibiendo la alimentación, pero no va a influir en las mudas del insecto. Las

plagas en las que se ha hecho estudios tanto en laboratorio como en terreno

son entre las principales la langosta migratoria, el escarabajo rayado del

pepino, el escarabajo japonés, entre otros. Anexo 2E

1.6.5 Otros

Otros ingredientes de menor importancia trabajan como antihormonas,

investigaciones han demostrado que estos productos paralizan el mecanismo

de tragar, evitando que los insectos coman, entre estos componentes se

encuentra el diacetilazadirachtinol, aislado de frutas frescas que es muy

eficaz como la azadirachtina. Recientemente se han aislado del nim dos

compuestos relacionados con el salannin que son el salannol y los 3 –

diacetilsalannin.

En resumen los extractos del Neem actúan en los insectos de formas

diferentes:

Impide la alimentación, destruye e inhibe el desarrollo de huevos, larvas o

crisálidas, bloquea la metamorfosis de las larvas o ninfas, destruye su

apareamiento y comunicación sexual, esteriliza a los adultos, envenena a larvas

y adultos, bloquea la habilidad para tragar (reduce la movilidad intestinal),

envía errores a la metamorfosis en varios periodos de desarrollo del insecto.

Inhibe la formación de quitina (material que compone el esqueleto del insecto).

Impide que se realicen las mudas, necesarias para entrar en la siguiente etapa

del desarrollo, de tal forma que actúa como regulador de crecimiento del

insecto.

1.7 Aplicaciones de la Planta

Debido a la singularidad de esta planta se puede emplear la corteza, la

madera, las hojas, las flores, el fruto, la torta y el aceite de la semilla,

dependiendo del ingrediente activo que se encuentre en mayor proporción.

1.7.1 Aplicaciones de la corteza:

La corteza caracterizada por ser amarga, astringente, acre y fresca, se la

utiliza como antídoto contra el veneno de serpientes y alacranes, en la

industria química debido a su alto contenido de taninos, como cosmético,

materia colorante, gomas, dentífrico. También empleada para elaborar

cuerdas debido a la gran producción de tannis.

En forma de cremas para enfermedades de la piel, es útil para la tos, pérdida

de apetito, se la utiliza para curar las heridas, utilizada para provocar vómito,

debido a sus características previenen la gingivitis y la piorrea, los extractos

de la corteza tienen características antiinflamatorias y diuréticas.

El compuesto químico nimbidim encontrado en la corteza, es eficaz contra la

dermatitis seborreica, úlceras por quemaduras, herpes labial, verrugas y

caspa. Además posee actividad espermaticida y antibacteriana contra

organismos gram-positivos.

La savia es refrigerante por lo que es útil para enfermedades de la piel y

debilidad en general. La goma exudada de la corteza se la considera

estimulante, demulcente y tónico que es apto para infecciones, cataratas,

entre otros.

1.7.2 Aplicación de la madera

La madera de nim es dura, densa, de opaca a lustrosa, fragante, repele a los

insectos y hongos, su porción central posee una coloración rojiza mientras que

la porción intermedia es gris blanquesino o amarillento grisáceo con una

gravedad especifica promedio de 0,68; con un valor de energía de 16,92

megajoules/kg (Lemmens, 1995) y una humedad de 14%.

Una vez que ha sido aserrada se la puede utilizar para la fabricación de

cajones, estantes, carretas, vigas, herramientas de labranza, muebles,

armarios, roperos, etc. También es empleada como leña dando un buen carbón

como resultado.

1.7.3 Aplicación de las flores

Son astringentes, con propiedades antihelminticas, y no tóxicas.

1.7.4 Aplicación de las hojas

Debido a la cantidad apreciable de minerales, carotenos y proteínas (12 -

18%) se utiliza como abono, fertilizante verde, para alimento de ganado aunque

por su sabor amargo estos prefieren otros alimentos.

Las hojas son empleadas para purificar la sangre, es decir eliminar toxinas.

Estudios realizados con extractos acuosos de un 10% de hojas frescas son

efectivos contra las infecciones parásitas, se ha demostrado que tiene efecto

antiinflamatorio significativo, también se considera inhibidor de la coagulación

por lo que se lo emplea en el tratamiento de mordeduras de serpientes. El

aceite esencial de las hojas tiene acción fungicida suave.

 Tabla Nro. 2 Composición química de las hojas frescas de nim

Humedad 59 %

Proteínas 7,1 %

Grasa 1,0 %

Fibra 6,2 %

Carbohidratos 22,9 %

Minerales 3,4 %

Calcio 510 mg/100 g

Fósforo 80 mg/100 g

Hierro 17 mg/100 g

Tiamina 0,04 mg/100 g

Niacina 1,4 mg/100 g

Vitamina C 218 mg/100 g

Ácido glutámico 73,3 mg/100 g

Tirosina 31,50 mg/100 g

Ácido aspártico 15,50 mg/100 g

Alanina 6,40 mg/100 g

Prolina 4,00 mg/100 g

Glutamina 1,00 mg/100 g

Valor calórico 1290 kcal/kg

Fuente: www.neemfoundation.org/comp.htm

1.7.5 Aplicación de la torta de nim

La torta es un subproducto obtenido de las semillas luego que se ha extraído el

aceite, que presenta en su composición aminoácidos esenciales y no esenciales

como la valina y el triptófano. El contenido de nitrógeno oscilan entre el 2–3%,

que por sus propiedades impiden la desnitrificación del suelo, protege contra
las termitas, hormigas y nemátodos, reduce el número de hongos, bacterias.

Actúa como pesticida natural cuando es adicionada al suelo.

Tabla Nro. 3 Composición química de la torta de nim

Proteínas 13 – 35 %

Carbohidratos 26 – 50 %

Fibra cruda 8 – 26 %

Grasa 2 – 13 %

Ceniza 5 –18 %

Ceniza insoluble en ácido 1 –17 %

Fuente: www.neemfoundation.org/comp.htm

Entre los principales minerales que contienen se encuentran el fósforo,

potasio, calcio y magnesio. La torta es fácil de almacenar y no es atacada por

hongos. La mezcla de la torta con urea provee de un gran contenido de

nutrientes aumentando la producción de cultivos. También puede servir como

alimento de aves de corral.

1.7.6 Aplicación del aceite

El extracto del aceite se lo aplica como plaguicida natural y fungicida. También

se aplica como jabón medicinal por su acción antiséptica. Se puede emplear

como combustible de lamparas, aceite lubricante para maquinas debido a que

se degrada menos y no se seca.

Estudios científicos preliminares atribuyen al nim beneficios en contra de

enfermedades como:

SIDA: Pruebas llevadas a cabo en el laboratorio realizadas en células

infectadas con VIH han dado como resultado una fuerte reacción

inmunológica que produce la disminución drástica de las proteínas virales,

estimulando la destrucción de los agentes infecciosos.

Cáncer: Resultan eficaces en la disminución de tumores y disolución de estos,

utilizándose en forma masiva en Japón.

Diabetes: Gotas de aceite son útiles en pacientes insulinodependientes,

ayudándoles a disminuir la dosis y en algunos casos haciendo que la función del

páncreas se regularice trayendo como resultado que se suprima la

administración de insulina. En cambio en pacientes no insulinodependientes, ha

favorecido la desaparición de esta terrible enfermedad.

Úlceras: Actúa disminuyendo los trastornos provocados por la úlcera gástrica,

evita las flatulencias, regula el pH y cura las lesiones.

Enfermedades del Corazón: Evita la formación de trombos, disminuye el

colesterol, y reduce la presión arterial lo que evita el riesgo de un ataque al

corazón.

Mal de Chagas: Investigaciones realizadas por el Instituto Max Plack de

Alemania y el Instituto de Oswaldo Cruz en Río de Janeiro - Brasil

consideran que los extractos elaborados a partir de las hojas de nim pueden

ser considerada como la respuesta para esta terrible enfermedad que afecta a
miles de persona cada año. Como es conocida esta enfermedad es causada por

el Tripanosoma cruzi que ataca en la noche mordiendo y aspirando la sangre

de las personas y animales domésticos, su excremento pasa a la circulación

desencadenando la enfermedad. Al ser aplicados los extractos se va a

provocar un fallo en las funciones del insecto lo que evitará que el insecto se

multiplique.

Malaria: Enfermedad característica de países tropicales, causada por el

Plasmodium falciparum que provoca fiebres y escalofríos, el componente

gedunin es muy eficaz como la quinina.

 2. PLAGUICIDAS

2.1 Generalidades

En los últimos 50 años, el aumento poblacional ha exigido al hombre servirse

del suelo en forma intensiva con el fin de obtener un rendimiento agrícola

mayor para contar con los recursos alimenticios necesarios. Anexo 3

La agricultura se ve amenazada por las plagas lo cual obliga al manejo y

utilización de sustancias químicas conocidos como plaguicidas que

representan uno de los principales contaminantes del ecosistema y provoca

daños a la salud. Según datos de la Organización Internacional de las Uniones

de Consumidores refieren que cada cuatro horas muere un trabajador agrícola

y que 375000 individuos se intoxican anualmente. Anexo 4

Esto ha obligado a buscar nuevas opciones como lo es la agricultura orgánica

que consiste en el uso de agentes microbiológicos, cuya acción es atacar a los

insectos, provocándoles enfermedades específicas con lo cual se los elimina

por esa vía sin envenenarlos, estos productos son totalmente inocuos para la

salud humana y los animales.

Otra alternativa de interés para encontrar productos naturales aplicados al

control de plagas en la agricultura son las plantas. Tal es el caso del aceite de

semillas del árbol de Nim cuyo principal componente es la azadirachtina que

provoca una alteración en el comportamiento de los insectos e inhibe la

deposición de los huevos. Este plaguicida presenta una elevada

biodegradabilidad, sobre todo por la acción de la radiación U.V, con una

persistencia en campo de 4-8 días y posibilidad de sinergismo con otros

productos naturales como Bacillus thurigiensis.

El efecto residual de los productos del Nim, es disminuido en algunos días en

un lapso de cinco a siete días. En el caso de los efectos sistémicos y con la

aplicación de altas concentraciones, estos permanecen algo más. No obstante

esto parece ser suficiente para obtener un buen control de plagas.

2.2 ¿Qué es un plaguicida?

Se define como plaguicida a una sustancia o mezcla, de cualquier estado físico

cuya finalidad es la de combatir, controlar, prevenir enfermedades o plagas,

en la que se incluye vectores de enfermedades humanas o de los animales, las

especies no deseadas de plantas o animales que causan perjuicio o que

interfieren de cualquier otra forma en la producción, elaboración,

almacenamiento, transporte o comercialización de alimentos, productos

agrícolas, madera y productos de madera o alimentos para animales en general

el objetivo es proteger al hombre de organismos que afectan al ambiente,

animales y/o alimentos.

2.3 Clasificación

Los plaguicidas se clasifican de acuerdo a:

Ø Según su actividad biológica

Ø Su grado de toxicidad

Ø Por su naturaleza química

 Tabla Nro 4.- Según su Actividad Biológica

Plaguicida Organismo que controla

Insecticida Larvicida Larvas de insectos

Formicida Hormigas

Pulguicida Pulgas

Piojicida Piojos

Aficida Pulgones

Acaricida Garrapaticida Garrapatas

Nematicidas Nemátodos

Molusquicidas Moluscos

Rodenticidas Roedores

Avicida Columbicida Aves (palomas)

Bactericida Bacterias

Fungicida Hongos

Herbicida Plantas indeseables

Antibióticos Microorganismos
Fuente: García Inés. Contaminación por fitosanitarios. Plaguicidas.

Tabla Nro 5.- Por su Toxicidad.- Clasificación de toxicidad de la

EPA/EE.UU

Clase Oral Dérmica Inhalación

(mg/Kg) (mg/Kg) (mg/L)
Extremadamente peligroso 50 o menos 200 o menos 0,2

Altamente peligroso 50 – 500 200 – 2.000 0,2 - 2,0

Moderadamente peligroso 500 – 5.000 2000 – 20.000 2,0 - 20

Ligeramente peligroso 5.000 y más 20.000 y más 20 y más

Fuente: British Crop Protection Council. The Pesticide Manual. 10 Ed. Royal Society of Chemistry.

1994.
 Tabla Nro 6.- Por su Naturaleza Química

Tipos Ejemplos

Bipiridilos Paraquat.

Carbamatos Baygon; Lannate; Sevin; Carbaryl;

Temik (aldicarb); Furadan.

Compuestos organoclorados Thiodan; Endosulfan; Aldrin; Endrin;

Mirex; DDT.

Compuestos organofosforados Diazinon; Sistemin; Disulfuton;

Parathion; Malathion; Bidrin; Mocap.

Derivados fosforados Fosfuro de aluminio; Fosfuro de zinc;

Fosfuro de calcio.

Derivados halogenados Bromuro de metilo; Cloroformo;

Dibromocloropropano; Dicloruro de

etileno; Dicloropropeno.

Derivados cumarínicos Warfarina; Coumactor; Counatetrail;

Bromadiclona; Cumaclor; Difacinona;

Pindona; Clorofacinona.

Derivados de la urea Linuron; Linex; Lorox; Afalon.

Piretroides y piretrinas Karate; Alletrina; Tetrametrina;

Permetrina; Decametrina; Esmetrina;

Cipermetrina.

Tiocarbamatos Dithane; Manzate; Mancozeb; Manex

Polyram; Trimiltox; Antracol.

Triazinas Bensulide; Bromacil; Diuron; Fenuron;

Monuron; Propazine.
Fuente: http://uaca.ac.cr/acta/1999nov/jgarcia.htm.indice
2.4 Los Plaguicidas en el Ecuador

Según las estadísticas del Banco Central del Ecuador y el Servicio de

Información Agropecuaria SICA, en nuestro país al año se importan

aproximadamente 20 toneladas métricas de plaguicidas distribuidos entre

insecticidas, herbicidas y fungicidas. Anexo 5

Cuadro 1: Importación de Plaguicidas en el Ecuador

Enero – Agosto 1999 Enero – Agosto 2000

Plaguicidas
Millones US $ TM Millones US $ TM

Fungicida 28,28 5,76 33,10 8,36

Herbicida 13,30 2,70 14,68 3,70

Insecticida 11.58 2,24 11,26 2,17

Fuente: Análisis de la regulación de Pesticidas en los EEUU. Análisis de los pesticidas en el Ecuador.

Se desprende de los datos expuestos en el Cuadro 1 que existe un aumento

en un 33 % la importación de plaguicidas considerando el volumen en toneladas

métricas (TM) importadas en periodos iguales en el año 1999 y el año 2000.

2.5 Impacto Ambiental

El uso de plaguicidas químicos ha generado la persistencia ambiental de

residuos tóxicos y la contaminación de recursos hídricos con degradación de la

flora y fauna. Un ejemplo destacado son los plaguicidas organoclorados con una

persistencia de 30 años después de aplicados. La sustitución de los pesticidas

químicos generadores de efectos indeseables por plaguicidas biodegradables

permite reducir la contaminación de los recursos hídricos y del suelo así como

la recuperación de la flora y la fauna afectada.

El extracto de la semilla de nim no genera resistencia en las plagas por lo que

no será necesario incrementar las cantidades del insecticida natural.

2.6 Impacto en la salud humana

La OMS reporta que anualmente se intoxican aproximadamente dos millones

de trabajadores agrícolas de los cuales las ¾ partes de afectados pertenecen

a los países subdesarrollados. En nuestro país existen dificultades para

obtener registros y estadísticas fiables. Un vehículo importante es la

ingestión de alimentos contaminados por plaguicidas lo que contribuye a

bioconcentración y bioampliación.

2.7 Impacto Socio – económico

En países desarrollados ha sido prohibido el uso de ciertos plaguicidas por los

efectos dañinos que provocan en el ser humano y principalmente por la

ruptura del equilibrio ecológico del planeta. En cambio en países

subdesarrollados toman como excusa de que no pueden prohibir el uso de

ciertos plaguicidas por razones de costo y eficacia.

La implantación de alternativas de bajo costo en la obtención del aceite

biodegradable permitirá incursionar en la producción masiva del aceite para lo

cual se requiere del cultivo a mayor escala del árbol de NIM que

decididamente incide en la generación de nuevas plazas de trabajo ya que no

existen grandes cultivos que pueden abastecer de materia prima al mercado

naciente.

2.8 Los plaguicidas Botánicos

Las plantas poseedoras de sustancias químicas con propiedades repelentes son

utilizadas como plaguicidas, destacándose entre ellos el piretro, la nicotina, la

rotenona, etc. Sin embargo, estos plaguicidas son empleados generalmente en

huertos caseros o pequeñas parcelas.

En comparación con los plaguicidas químicos que son importados anualmente,

estos no representan ni el 1% del total de pesticidas.

2.8.1 Ventajas

El auge de estos insecticidas, en reemplazo de los químicos, esta sustentado

en un sinnúmero de ventajas como:

1. Menos contaminantes por ser limpios ecológicamente;

2. Biodegradables;

3. No origina genes de resistencia

4. Mínima toxicidad para mamíferos incluido el hombre;

5. Recomendable para cultivos de exportación, ya que el empleo de los mismos

esta aprobado por organismos internacionales.

Las pruebas realizadas con el aceite de nim en diferentes cultivos de ciclo

corto; han originado buenos resultados empleando diversos métodos de

aplicación.
 3. SOLVENTE GASOLINA

3.1 Generalidades

Para extraer el aceite de nim se han llevado a cabo muchos métodos de

obtención, destacándose, aquellos que se realizan con disolventes por que van a

contribuir a los estudios científicos como medios para la realización química.

Entre los solventes que se han utilizado se destacan el agua, benceno, hexano,

sulfuro de carbono y tricloro etano. Anexo 6

Los solventes que extraen la mayor cantidad del aceite son el tricloro etano y

el sulfuro de carbono pero debido a su alto poder solvente arrastra en la

destilación otros componentes que van a interferir en la acción plaguicida del

aceite, por tal motivo el hexano es el disolvente que cumple los parámetros de

extracción. Anexo 7

Pero como es sabido este tipo de disolventes tienen costos elevados y siendo

utilizados en estas extracciones saldrían costos altos en estos extractos.

Por tal motivo lo que se pretende realizar en el presente trabajo investigativo

es realizar un proceso de extracción, aplicando un corte solvente destilado a

presión atmosférica de la gasolina natural, que tenga propiedades similares al

hexano.

Para obtener este corte solvente con características del hexano se va a

emplear la destilación ASTM, que consiste en una destilación simple, en la que

se van a emplear equipos y procedimientos especificados rigurosamente en el

ASTM. Book of Standards.

Este método se fundamenta en el hecho de que consta de una sola etapa de

equilibrio y la fuente única de reflujo será la cantidad de condensado que se

forma.

Para finalmente seguir con la obtención del aceite mediante proceso de

extracción sólido – líquido llevado a cabo a presión atmosférica utilizando

como solvente el hexano destilado a partir de la gasolina, fundamentándose el

método en que el punto de ebullición va a modificar las volatilidades relativas

de los componentes de la mezcla de alimentación.

La gasolina es un subproducto del petróleo, el cual se lo obtiene por

diferentes etapas siendo estas las siguientes:

1. Proceso de destilación de los componentes del petróleo, uno de los cuales

es la gasolina.

2. Proceso de desintegración de los componentes pesados del petróleo, para

convertirlos en gasolina y gas licuado.

3. Procesos para mejorar las características de las gasolinas como el de

isomerización, reformación catalítica, alquilación y adición de compuestos

oxigenantes como el metil terbutil éter y metil teramil éter.

4. Procesos de purificación, para que su calidad cumpla con las normas de

calidad y las normas ecológicas, tales como la hidrodesulfuración.

3.2 Gasolina Natural

Mas del 10% de la gasolina total es elaborada con gas natural. Alrededor

del año 1912, la gasolina natural trajo la atención, debido a que en esa época

se agudizo la demanda de combustible para motores.

La gasolina natural, obtenida del gas natural, requiere, generalmente, solo un

tratamiento de endulzamiento para la eliminación de ácido sulfhídrico.

Las gasolinas naturales están clasificadas por la Natural Gasoline

Manufacture’s Association of America (1948):

Tabla Nro 7: Primeros ensayos realizados a la Gasolina

Presión de vapor Reid 0.7 – 2.4 Kg/ cm2

Porcentaje evaporado a 60°C 25 – 85

Porcentaje evaporado a 135°C No menos de 90

Punto final No mayor de 190°C

Corrosión Negativo corrosiva

Ensayo “Doctor” Negativo (dulce)

Color No menor de +25

Fuente: Refinación de Petróleos, W.L. Nelson

De acuerdo con el porcentaje evaporado a 60°C y la presión de vapor la

gasolina natural se divide en 24 grados.

3.3 La Gasolina como Disolvente

La gasolina también se la puede emplear como un buen disolvente orgánico

aunque es aplicada principalmente como carburante en motores de explosión,

químicamente es una mezcla de hexano y heptano. Las propiedades físicas de

la gasolina están comprendidas entre los límites siguientes:

Intervalo de destilación 60 – 120 °C

Peso específico 0.66 – 0.684

Indice de refracción 1.375 – 1.387

La gasolina empleada como disolvente y diluyente debe cumplir los siguientes

parámetros:

Tabla Nro 8: Gasolina: Parámetros

Peso específico 0.760 –0.810

Residuo de evaporación Menor del 0.2%

Destilación hasta 150 °C 10% como máximo

Destilación hasta 190 °C 80% como mínimo

Destilación hasta 200 °C 90% como mínimo

Punto de inflamación Mayor de –25 °C

Velocidad de evaporación 16 como máximo.

Fuente: Disolventes y plastificantes. Luis Blas

Otro tipo de gasolina es la especial 100/160 caracterizándose por:

Tabla Nro. 9: Gasolina 100/160

Peso específico 0.720 –0.760

Punto inicial de destilación No inferior a 100 °C

Destilación hasta 160 °C 95% como mínimo

Punto de inflamación –20 a -10 °C

Velocidad de evaporación 8 como máximo.

Fuente: Disolventes y plastificantes. Luis Blas
 4. MATERIALES Y MÉTODOS

4.1 Antecedentes

El presente trabajo investigativo se enmarca en las características de un

estudio de carácter prospectivo y analítico para realizar la “Obtención del

Aceite de Semilla de NIM por Extracción con Gasolina Natural”. Este estudio

preliminar pretende determinar las características de extracción del aceite

de la semilla de NIM que permitirán optimizar el proceso de extracción y

mejorar su rendimiento. Las corridas, análisis y tratamiento de las muestras

se realizaron en el laboratorio de Hidrocarburos de la Escuela Superior

Politécnica del Litoral, en el periodo Agosto 2001 – Febrero 2002.

4.2 Metodología

4.2.1 Tratamiento de la semilla

Universo: El universo de estudio está constituido por las semillas del árbol de

NIM, obtenidos en el Centro Manabita de Desarrollo Comunitario (CEMADEC)

estas semillas se caracterizan por estar libres de pulpa.

Muestras: Las muestras comprenden 15 extracciones donde la cantidad de

semilla, el volumen de solvente y la temperatura son constantes.

El tratamiento cubre los siguientes pasos: (Anexo 8)

· Selección:

Ø Criterio de Inclusión: Se considera a las semillas que cumplan con

los parámetros de madurez .

Ø Criterio de Exclusión: Se excluyen todas aquellas semillas que

presenten deformaciones, manchas, etc.

· Limpieza: Esta se realiza para eliminar las impurezas, que traen las

semillas como tierra, piedritas, restos de hojas, hierbas, etc.

Posteriormente se realizó un lavado con abundante agua.

· Secado: Una vez que la semilla ha sido lavada, se debe secarla muy bien

para evitar que se altere su principio activo o que se pudran sus tejidos,

por lo cual se la extiende sobre una malla de hilo, sacudiéndola

regularmente para que el secado sea uniforme, esto se llevo a cabo en un

lugar muy ventilado, ya que no se seca al sol directamente por que, puede

afectar o evaporar los principios activos de las mismas.

· Descascarado: Este paso se realiza manualmente, para evitar dañar la

materia prima.

· Molienda: Se la ejecuta con un molino de tornillo sin fin.

· Almacenamiento: Para el almacenamiento se utiliza frascos de vidrio de

boca ancha, bien tapados, se lo almacena en un lugar fresco y oscuro para

protegerlos del polvo, humedad, insectos y sobre todo para preservar al

máximo sus principios activos. (Anexo 9)

· Variables:

Cualitativas Cuantitativas

· Aspecto de la semilla Destilación ASTM

· Corte hexano Rendimiento de extracción

· Análisis Cromatográfico · Indice de Refracción

· Propiedades organolépticas del aceite: · Densidad

· Color · Punto de Inflamación

· Olor · Viscosidad Saybolt

· Solubilidad · Punto de Congelamiento

· Indice de Acidez

4.2.2 Obtención del corte solvente

La gasolina natural que se empleó como disolvente proviene del Campo Ancón

perteneciente al cantón Santa Elena de la provincia del Guayas.

Es de anotar que la gasolina fue sometida a una destilación simple para

obtener un corte solvente con un rango de ebullición de 34 – 70 °C para

garantizar las características del hexano, cuyo punto de ebullición es de 67 °C.

Para la destilación del corte solvente se utilizo el equipo descrito en el Anexo

10 y cuyo procedimiento se describe a continuación.

Utilizando una probeta se mide 100 mL de gasolina natural el cual se lo

trasvasa a un balón de destilación ASTM, se lo coloca en el equipo y una vez

que este alcanza la temperatura del corte que es de 70 °C, se retira la

probeta en el que se recoge el corte para guardarlo en una botella ámbar y se

lo almacena en refrigeración ya que es un solvente muy volátil.

4.2.3 Extracción del aceite de NIM

Para efectuar la extracción del aceite de NIM con

entrada salida
de agua
el corte solvente (figura 1), se usa un método de
de agua

refrigerante
extracción continua, con el extractor Soxhlet, el
dedal de
celulosa
proceso a seguir es el siguiente:
sifón

La semilla molida (35 g) se la coloca en un dedal de

balón
celulosa, introduciendo éste en el sifón, en el balón
calentador

se deposita el solvente (corte, 250 ml) que se lo

eléctrico

calienta a la temperatura de ebullición del hexano

Figura 1: Extracción Soxhlet (67 °C), cuando los vapores empiezan a ascender

por el tubo lateral se van a condensar en el

refrigerante, retornando a la sustancia en el cartucho. Una vez que se nivela el

solvente con los tubos comunicantes, se sifonea por el tubo y cae en el balón,

arrastrando consigo el aceite de NIM, este ciclo se repite varias veces,

durante la extracción que dura 6 horas. (Anexo 11)

4.2.4 Recuperación del Solvente

La recuperación del solvente, se la realiza empleando el equipo de destilación

ASTM. El método usado es el mismo que se empleó para obtener el corte

solvente; es decir se destila hasta 70 °C recuperándose el solvente en la

probeta, quedando el aceite de NIM en el balón. La recuperación termina tan

pronto deja de gotear el solvente en la probeta, evitando que el aceite se

comience a quemar.
 4.2.5 Purificación del Aceite

Para eliminar completamente todo vestigio del solvente en el aceite se realizó

una destilación con arrastre de vapor, cuyo procedimiento es el siguiente:

H2 O En el primer balón (ver figura 2), se introduce

H2 O agua hasta la mitad sellándolo con un tapón

provisto de un tubo de seguridad y un tubo de

desprendimiento doblado que a su vez posee otro

Balón B
Balón A

tapón en el extremo para tapar el segundo balón

que contiene la muestra (aceite), éste tiene otro

tubo de desprendimiento con tapón que une el

Figura 2: Destilación con arrastre de
vapor refrigerante. (Anexo 12)

Antes de proceder a calentar el agua del primer balón, se conecta el

refrigerante a una entrada y salida de agua a temperatura ambiente.

El vapor de agua que se genera en el primer balón ingresa al balón que contiene

la muestra y libera al aceite de los residuos de solvente, que son recogidos en

una fiola al final del refrigerante.

4.3 Análisis realizados

Para conocer las características que presenta el aceite se realizaron varios

análisis con el objeto de establecer sus propiedades físico – químicas, las

mismas que fueron realizados varías veces para garantizar la repetibilidad de

los resultados. (Anexo 13)

4.3.1 Análisis Cromatográfico

El corte solvente de gasolina natural, que se empleó para realizar la extracción

del aceite de NIM, fue sometido a un análisis cromatográfico para lo cual se

utilizó el Cromatografo Perkin-Elmer 8500.

La cromatografía es un método físico de separación, mediante el cual los

componentes a separar se distribuyen entre dos fases:

· Una fase móvil constituido por el helio, y

· Una fase estacionaria de Metyl silicona (PEG, CarbowaxTM)

Durante la corrida de un cromatograma la fase móvil arrastra las moléculas de

la muestra a través de un lecho de la fase estacionaria. Durante el trayecto

las distintas moléculas de la muestra son retardadas por la fase estacionaria

en función de la interacción entre los componentes de la muestra y las fases:

estacionaria y móvil, dado que las interacciones entre la muestra y las fases

son selectivas, para nuestro caso se utilizó las siguientes condiciones de

operación:

Tipo de columna: Capilar

Componente de arrastre: Helio

Tipo de detector: FID

Temperatura fija: 70 °C

Longitud de columna: 50 m x 0.32 mm

Presión: 30 PSI

Siendo estas interacciones selectivas lo que significa que para un análisis

especifico las fases son diferentes para cada componente.

4.3.2 Propiedades Organolépticas

Esta determinación es fundamentalmente subjetiva, los caracteres

organolépticos son las cualidades de las sustancias perceptibles directamente

por los sentidos.

· Color Visual: Coloración perceptible a través del órgano de la visión.

· Olor: Percepción característica de la sustancia a través del olfato.

4.3.3 Indice de refracción

Para determinar el índice de refracción se empleó el refractómetro de ABBE

Bausch & Lomb. El análisis mediante el uso del refractómetro se basa en la

relación aire – sustancia, es decir la razón de la velocidad de un rayo de luz a

través de la sustancia.

El índice de refracción de una sustancia dada varía con la longitud de onda del

rayo de luz refractado y con la temperatura. Salvo indicación contraría el

índice de refracción viene referido a la longitud de onda correspondiente a la

línea D 589,3 nm de la luz del sodio, y a una temperatura de 20 °C.

4.3.4 Densidad

La determinación de la densidad de las muestras de aceite se realizó

empleando el picnómetro, el cual debe estar a una temperatura constante de

25 °C, inicialmente se procede a llenar el picnómetro con la muestra hasta el

borde del tubo capilar, luego se pesa y finalmente se aplica la siguiente

formula:

Picnómetro con Muestra

Densidad =
Picnómetro con Agua

4.3.5 Punto de Inflamación (Norma INEN 808)

En razón de que el aceite puede contener residuos de solvente, es conveniente

determinar el punto de inflamación y que nos permite verificar la pureza del

aceite o si éste está exento de residuos solventes. Este método se

fundamenta en la medición de la temperatura, en la que los vapores emitidos se

inflaman por primera vez.

La muestra de aceite de NIM, se coloca en un vaso Cleveland, calentándose de

manera rápida en un principio y cada 2 grados al acercarse al punto de

inflamación, se aplicará un aumento lento de temperatura (1 grado).

El equipo que se utilizó durante el ensayo es el determinador de punto de

inflamación de copa abierta Cleveland.

4.3.6 Viscosidad Saybolt (INEN 1 981)

Este análisis consiste en medir el tiempo de flujo en segundos de 60 cm3 de

muestra a través de un orificio universal, calibrado en condiciones

normalizadas.
El viscosímetro Saybolt consta de las siguientes partes:

Un tubo de carga en el que se coloca el aceite de NIM, la parte inferior del

tubo es roscado y tendrá un tope para fijarlo dentro del baño, provisto de un

tapón de corcho para evitar que el aceite se escurra antes de empezar el

ensayo.

Un baño termostático, provisto de un dispositivo de agitación y de medios de

calentamiento, encontrándose a una distancia mayor de 3 cm del tubo de

carga. La temperatura de ensayo para el aceite es de 40 °C.

Copa receptora de vidrio con capacidad de 60 cm3. Además de cronómetros

graduados en décimas de segundos.

El análisis de las muestras de aceite se realizaron aplicando las condiciones

descritas en la Norma INEN 1981.

4.3.7 Punto de Congelamiento (ASTM D 2386)

Este método mide la resistencia de la muestra a la cristalización, para lo cual

se emplea una pequeña cantidad de aceite en un tubo de ensayo, el que es

introducido en un baño de hielo. Se considera que se ha alcanzado su punto de

congelamiento cuando la muestra a solidificado.

4.3.8 Indice de Acidez

La acidez es una expresión del porcentaje de los ácidos grasos libres. Para

realizar este análisis se emplea un método volumétrico, que se define como el

peso en miligramos de hidróxido de sodio necesario para neutralizar un gramo

de materia grasa.

40,0 VN
Indice de Acidez =
P

El índice de acidez de la muestra se realiza como procedimiento de calidad.

4.3.9 Solubilidad

Al aceite de NIM se le practicó, ensayos de solubilidad en diferentes

solventes, entre estos tenemos: agua, acetona, tolueno, iso octano, éter,

solución de cloruro de sodio, para establecer el grado de solvencia con

respecto a solventes distintos al utilizado.

4.4 Control de Calidad

Para certificar la fidelidad de los resultados obtenidos se siguen las normas

INEN, ASTM y las Buenas Practicas de Laboratorio, para disminuir los

errores que pudieran presentarse durante la realización de la investigación

desde el momento de la obtención de la muestra, siguiendo con el proceso de

extracción, recuperación del solvente, conservación del aceite, así como

diferentes análisis realizados y finalmente la interpretación de los resultados

obtenidos.
 5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

En el presente capítulo se presentan los resultados obtenidos durante

el desarrollo de la investigación y que mantiene la secuencia en el

proceso de obtención del aceite.

5.1 Obtención del Peso Real de la Muestra

Después de que la muestra fue sometida al tratamiento de selección, limpieza

y secado se procede al descascarado para continuar con la molienda.

En el descascarado se obtiene el primer resultado, por que la muestra va a

perder peso. Tomando como base 1 Kg de semilla (con cáscara) se va a conocer

el peso real de la semilla limpia que será empleada en la extracción del aceite.

Como se observa en el gráfico 1; la semilla limpia (libre de cáscara)

corresponde a un 55%, mientras que la cáscara corresponde a un 45%.

Cáscara
45%

Semilla
55%

Fuente: La Autora
Esto indica que a partir de 1 Kg de semilla con cáscara; se obtiene 550 g

de semilla lista para ser empleada en la extracción, lo que representa

una pérdida de 450 g, más o menos la mitad del peso inicial de

referencia.

5.2 Rendimiento de extracción de aceite

Para establecer el rendimiento del aceite en la extracción se ensayaron 15

extracciones, manteniendo en cada uno de ellas el peso inicial de la muestra, la

cantidad de solvente, la temperatura. El tiempo aplicado varía entre 4 a 6

horas, fijando finalmente el tiempo de extracción de 6 horas en la mayoría de

las corridas en razón de que los rendimientos aumentan a medida que se

incrementa el tiempo de extracción, como se aprecia en la Tabla 1.

En el gráfico 2 se puede apreciar los puntos que representan las muestras 1,

2, 3, 4 con rendimiento menor que de 5 en adelante, en donde se aplicó 6

horas.

Los puntos 7 y 8 se presentan superiores esto indica que el aceite, contenía

todavía solvente en su composición, por lo que se realiza la purificación del

aceite, utilizando para ello la destilación con arrastre de vapor.

 Tabla 1: Rendimiento del aceite de NIM

Nro. Extracción Peso muestra Aceite Obtenido Rendimiento

(g) (g) (%)

1 35 18.4 53

2 35 18 51

3 35 17.1 49

4 35 17 49

5 35 24.2 69

6 35 22.7 65

7 35 25.3 72

8 35 25.4 73

9 35 23.2 66

10 35 22.5 64

11 35 22.8 65

12 35 22.4 64

13 35 22.6 65

14 35 22 63

15 35 21 60
Fuente: La Autora
 Gráfico 2: Rendimiento de Aceite de NIM

100

90

80

70

60
Porcentaje (%)

Aceite
50
Promedio
40

30

20

10

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

Nro. de Extracciones

Fuente: La Autora

En conclusión, a partir de 35 g de semilla se obtiene como promedio 21,64 g de

aceite lo que representa el 62 % de rendimiento.

5.3 Relación entre Materia Prima Inicial y Residuo

La tabla 2 corresponde a la relación entre la materia prima que se emplea y el

residuo (torta), que queda después de la extracción. Como se observa en la

columna 3 de la tabla, los residuos de cada extracción se mantienen más o

menos constantes, en un porcentaje promedio de 44.

 Tabla 2: Relación entre Materia Prima Inicial y Residuo

Nro. Extracción Peso muestra Peso muestra Residuo

inicial después (%)

(g) extracción (g)

1 35 16.4 47

2 35 15.2 43

3 35 15.6 45

4 35 16.5 47

5 35 14.8 42

6 35 15.1 43

7 35 16 46

8 35 16.5 47

9 35 16 46

10 35 14.8 42

11 35 14.3 41

12 35 15 43

13 35 14.3 41

14 35 15.8 45

15 35 15.5 44
Fuente: La Autora

Así lo demuestra estadísticamente en el gráfico 3.

Gráfico 3: Relación entre la Materia Prima y el Residuo

100

90

80

70
Porcentaje (%)

60
Promedio
50
Residuo
40

30

20

10

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

Extracciones

Fuente: La Autora

5.4 Solvente Recuperado

En la Tabla 3; se ha considerado la relación del solvente que se recupera

después de realizar la extracción del aceite.

Como se observa en la columna 2 de la tabla, el peso en gramos del solvente

varía entre 164,8 a 168, esta variación se debe al grado de refrigeración del

solvente, este peso corresponde 250 ml de solvente.

En la columna 4, se representa el porcentaje de solvente recuperado, las

muestras 1, 2, 3, 4 indican un porcentaje mayor de recuperado a las

subsiguientes, esto se debe a que en ellas se utilizaron menos tiempo de

extracción (5 a 4 horas).

Tabla 3: Solvente Recuperado

Nro. Solvente Inicial Solvente después de Recuperado

Extracción (g) extracción (g) (%)

1 166.8 71.7 43

2 166.8 71 43

3 164.9 72 44

4 164.3 71.3 43

5 165.9 61 37

6 165.9 62.9 38

7 168 60 36

8 166.1 50 30

9 168.3 54.4 32

10 166.4 62.2 37

11 163.9 61.5 38

12 165 60 36

13 164.8 59 36

14 165.1 60.5 37

15 165.1 61 37
Fuente: La Autora

En el gráfico 4; se representa el porcentaje del solvente recuperado, como se

observa el promedio es de 38%, indicando que el 62 % del solvente se evapora.

 Gráfico 4: Recuperación de Solvente

100

90

80

70

60
Porcentaje

50

40

30

20

10

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

Ext racciones

S olvent e Recup erado P rom edio

Fuente: La Autora

5.5 Análisis realizados al aceite

Para conocer la calidad del aceite, se le practicó diferentes análisis para

determinar sus propiedades físicas y químicas, siguiendo los procedimientos de

las normas INEN y ASTM.

a. Propiedades Organolépticas

· Color: El color que presenta el aceite de NIM, es café amarillento.

· Olor: Este se caracteriza por ser desagradable y muy fuerte, al estar

mucho tiempo en contacto con él causa escozor en la nariz.

b. Propiedades Físico – Químicas

Tabla 4: Propiedades Físico – Químicas del Aceite de NIM

Análisis Realizado Resultado
Indice de Refracción (25°C) 1.453

Densidad (25°C) 0.87

Punto de Inflamación 68 °C

Viscosidad Saybolt 235 cSt

Punto de Fusión 21 °C

Indice de acidez 5.37

Fuente: La Autora

c. Ensayos de solubilidad

Como se mencionó en el capitulo 4 se realizó ensayos de solubilidad del aceite,

los resultados obtenidos se indican en la Tabla 5.

Tabla 5: Solubilidad del Aceite de NIM

Agua Insoluble

Acetona Soluble

Etanol Soluble

Éter Soluble

Isooctano Soluble

Solución de NaCl Insoluble

Tolueno Soluble
Fuente: La Autora
5.6 Análisis Cromatográfico del corte solvente

La gasolina es una mezcla compleja de hidrocarburos destilados del petróleo,

que se caracteriza por contener hidrocarburos con bajo peso molecular que

son volátiles en comparación con los otros derivados del petróleo. Para

realizar la extracción del aceite de NIM se empleó un corte solvente, por lo

que se creyó necesario conocer que átomos de carbono forman parte de su

composición.

El perfil cromatográfico obtenido para el corte solvente que se muestra en el

Cromatograma, presentan picos con tiempos de retención hasta 5 minutos.

Este corte de gasolina contiene una estructura químicamente diferentes

entre 2 y 7 átomos de carbono, pero que comparten algunas características,

por los tiempos de retención entre los diferentes componentes son muy

cercanos.

En la Tabla 6 se indica el porcentaje de la composición del corte solvente.

Tabla 6: Composición del corte solvente

Número de átomos de
Porcentaje
Carbono
C2 8

C3 23

C4 15

C5 13

C6 9

C7 3

Otros: n-isómeros 29

Fuente: La Autora
 Chromatogram
Sample Name : Corte Solvente Sample # : 1 Page 1 of 1
File Name : C:\TC4\EXAMPLES\NIM_001A.RAW Date : 18/03/02 01:12 p.m.
Method : GASOLINA.MTH Time of Injection: 26/02/02 01:58 p.m.
Start Time : 0.00 min End Time : 5.0 min Low Point: 5.21 mV High Point: 15.85 mV
Scale Factor : 1.0 Plot Offset : 5 mV Plot Scale: 10.6 mV

Corte Solvente de Gasolina Natural

Peak Time Area Height Area BL Area/Height

# [min] [mV.s] [mV] [%] [s]
1 2.514 124.00 68.32 0.2 BB 1.82
2 2.600 1943.00 1068.70 3.0 BV 1.21
3 2.668 5481.00 3939.65 8.3 VB 1.39
4 2.898 15101.00 101152.47 22.9 BB 1.49
5 2.999 9764.00 7296.77 14.8 BB 1.34
6 3.200 635.00 491.59 1.0 BB 1.29
7 3.401 8723.12 5527.29 13.3 BV 1.58
8 3.518 4575.38 3066.54 7.0 VB 1.49
9 3.648 5787.50 3716.00 8.8 BB 1.56
10 3.898 129.95 74.33 0.2 BV 1.75
11 3.972 4177.05 2190.86 6.3 VB 1.91
12 4.256 686.00 326.88 1.0 BB 2.10
13 4.386 5765.00 2863.30 8.8 BE 2.01
14 4.444 189.00 166.58 0.3 EB 1.13
15 4.667 534.50 375.16 0.8 BB 1.42
16 4.832 2206.50 1362.42 3.3 BB 1.62
 6. CONCLUSIONES

Después de realizar esta investigación se puede concluir que:

1. El corte solvente que se obtuvo de la Gasolina Natural del Campo

Ancón tiene un rango de ebullición entre 34 y 70 °C.

2. Las características del corte solvente guardan relación con los

hidrocarburos comprendidos entre C2 y C7.

3. El rendimiento del corte solvente es del 35% en volumen.

4. El germen de la semilla, a partir de la cual se extrae el aceite,

representa el 55% del peso total de la semilla.

5. La pasta de la semilla de NIM representa el 44%.

6. El porcentaje de aceite extraído representa el 62%.

7. Las características físico-químicas del aceite son típicas para un

aceite y su viscosidad le confiere la propiedad de fijarse en las

plantas, favoreciendo su acción insecticida.

8. El aceite es delicado, dado que su estado cambia bajo la influencia de

la temperatura, en un rango inferior a 21 °C y superior a 80 °C.

9. El aceite de NIM, puede ser utilizado de manera distinta, en

emulsión con agua y aplicarlo en diferentes productos: jabón, pasta,

cremas, etc.
 7. RECOMENDACIONES

Las recomendaciones que se pueden dar después de haber realizado esta

investigación son las siguientes:

1. Fomentar el uso de insecticidas naturales biodegradables, por que se

tendrían cultivos más sanos, lo que disminuiría enfermedades debido a

alimentos contaminados con los insecticidas químicos.

2. Promover el cultivo de árboles de NIM, para aprovecharlo no solamente

para la elaboración del aceite plaguicida sino también para utilizar todas

las partes del árbol como las hojas, corteza, etc. que tienen aplicaciones

muy importantes.

3. Utilizar el residuo (torta) que queda como subproducto de la extracción

para aprovecharlo como abono orgánico, ya que este residuo, según

estudios realizados tiene un 2 - 3 % de nitrógeno, lo que impide la

desnitrificación del suelo.

4. Continuar con la investigación utilizando una destilación fraccionada,

para obtener un corte solvente que se acerque más a la temperatura de

ebullición del hexano.

 ANEXO 1: Árbol de Nim

Flores
Semillas

Hojas

Tronco
ANEXO 2: Composición Química

(A) Azadirachtina

(B) Mellantriol

(C) Nimbim

(D) Nimbidin

(E) Salannin
 ANEXO 3: Evolución de Plaguicidas

1800 - 1920 Estos plaguicidas carecían de especificidad, sumamente

tóxicos tanto para el agricultor como para los organismos a

los que no estaban dirigidos. Derivados de la elaboración de

gas de carbón y de la química orgánica, entre estos

tenemos: creosota, nitrofenoles, clorofenoles, etc

1945 – 1955 Los plaguicidas de este periodo fueron obtenidos por

síntesis orgánica, los que presentaban, efectos nocivos

para el ambiente, entre estos tenemos a los productos

orgánicos clorados, DDT, y otros.

1955 - 1970 Entre los principales plaguicidas de este periodo tenemos a

los inhibidores de la colinesterasa, carbamatos, compuestos

organofosforados, obtenidos por medio de síntesis

orgánica, que presentaban menor persistencia, cierto

grado de toxicidad para el agricultor y problemas de tipo

ambiental.

1970 - 1985 En esta etapa se perfeccionó las relaciones estructura-

actividad de los plaguicidas, presentaban cierta falta de

selectividad, resistencia, persistencia y costo, entre estos

se destacan los piretroides sintéticos.

1985 Estos plaguicidas fueron obtenidos por la ingeniería

genética, cuya acción es la transferencia de genes para los

plaguicidas biológicos a otros organismos tanto plantas

como animales benéficos. También va a provocar una

alteración de tipo genético en las plantas para que resistan

la acción de los plaguicidas.

 ANEXO 4: Ciclo de los Plaguicidas

Plaguicidas

Herbicidas y
Fertilizantes

Atmósfera Suelo
Agua de riego

Capacidad de
intercambio
catiónico del
suelo Agua
Agua
superficiales
subterránea

Cultivos

Seres vivos
ANEXO 5: Estadísticas en el Ecuador

Importación de Productos Agroindustriales

Periodo Enero – Agosto 1999

7% 4% 3%

Fungicidas

Herbicidas

86%
Insecticida

Otros Insumos
Agropecuarios

Importación de Productos Agroindustriales

Periodo Enero – Agosto 2000

4% 3% 1%
9%

Fungicidas

Herbicidas

Insecticida
83%
Otros Insumos
Agropecuarios
Otros Productos
 ANEXO 6: Solventes Empleados

Agua
Fórmula : H2O

Peso Molecular : 18 g/mol

Punto de Ebullición : 100 °C

Punto de Fusión : -110,8 °C

Densidad : 1,00 g/cm3

Características : Líquido incoloro, sin sabor e insípido

Aplicaciones : Solvente universal, empleado en todas las industrias

Benceno
Fórmula : C6H6

Sinónimos : Benzol; Ciclohexatrieno

Peso Molecular : 78,12 g/mol

Punto de Ebullición : 80,1 °C

Punto de Fusión : 5,5 °C

Densidad : 0,87865 20
4

Características : Líquido incoloro claro volátil. Olor característico y

agradable.

Aplicaciones : Fabricación de tintes, plásticos, explosivos,

detergentes, disolvente de laca, cera y aceites.

 Hexano
Fórmula : C6H14

Sinónimos : N – hexano

Peso Molecular : 86,17 g/mol

Punto de Ebullición : 68,95 °C

Punto de Fusión : - 95

Densidad : 0,6603 20
4

Características : Líquido incoloro con un olor parecido al del petróleo,

sus vapores son más densos que el aire.

Aplicaciones : Como disolvente, desnaturalizante de alcohol, en la

formulación de productos adhesivos, lacas, cementos

y pinturas. Extracción de aceite de semillas.

Sulfuro de Carbono
Fórmula : CS2

Peso Molecular : 76,14 g/mol

Punto de Ebullición : 46,3 °C

Punto de Fusión : -110,8 °C

Densidad : 1,26 22
20

Características : Líquido volátil, incoloro, tóxico, inflamable.

Aplicaciones : Industria textil, fabricación de tiocompuestos,

disolventes, extracción de aceites, fabricación de

pesticidas.
 Tricloro Etano
Fórmula : Cl2C:CHCl

Sinónimos : Tricloro etileno; 1,1,3 tricloro etileno; tricloruro de

etileno.

Peso Molecular : 131,40 g/mol

Punto de Ebullición : 87,2 °C

Punto de Fusión : -73 °C

Densidad : 1,466 20
20

Características : Líquido, incoloro con olor dulce similar al cloroformo

Aplicaciones : Como solvente desengrasante; en medicina como

anestésico.
 Anexo 7: Poder Solvente

PODER SOLVENTE

Agua Benceno Hexano Sulfuro de Tricloro

Carbono etileno

SOLVENTES
ANEXO 8: Diagrama del Proceso

Materia Prima
(semillas)

Selección

Pesado

Secado al
Descascarado
sol

Pesado

Molienda

Extracción de Aceite
con corte de gasolina
natural

Recuperación de aceite
 ANEXO 9: Tratamiento de Semillas

a) Semillas con
cáscara y sin cáscara
b) Pesada de semilla

c) Pesada de semilla molida

d) Semillas
ANEXO 10: Obtención del Corte Solvente

a) Destilador ASTM

b) Corte solvente
c) Solvente y semilla en cartucho
lista para la extracción.
ANEXO 11: Extracción del aceite de NIM

a) Extracción Soxhlet

b) Mezcla aceite - solvente

c) Residuo
ANEXO 12: Purificación del Aceite

a) Destilación con arrastre de vapor

b) Aceite
 ANEXO 13: Análisis Realizados

a) Análisis Cromatográfico

b) Indice de Refracción c) Densidad

 e) Viscosidad Saybolt
d) Punto de Inflamación

f) Punto de Congelamiento
g) Indice de acidez
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