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ÍNDICE
[Link] ............................................................................................................................... 2
2. INTRODUCCIÓN ................................................................................................................... 2
[Link] ............................................................................................................................. 3
4. MARCO TEÓRICO ................................................................................................................ 3
4.1. ALMIDÓN ......................................................................................................................... 3
4.2. HIDRÓLISIS DE ALMIDÓN .......................................................................................... 4
5. RESULTADOS ....................................................................................................................... 6
6. DISCUSIÓN DE RESULTADOS ......................................................................................... 7
7. CONCLUSIONES .................................................................................................................. 7
8. RECOMENDACIONES ......................................................................................................... 7
9. CUESTIONARIO .................................................................................................................... 8
10. FUENTES DE INFORMACIÓN ....................................................................................... 12
11. ANEXOS ............................................................................................................................. 12
12. APENDICE .......................................................................................................................... 13
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En la practica de laboratorio aprenderemos sobre la hidrolisis de almidón. Se utilizan
las muestras de los medios de cultivo realizado en el laboratorio anterior para observar
si ocurre la hidrolisis de almidón. Para realizar el experimento a cada grupo se le
atribuyo una placa con el agar nutritivo; esta placa se dividió en dos sectores: sector A
para el aire y el sector B para el agua. Los resultados obtenidos por cada grupo
fueron anotados y repartidos llegando a la conclusión que en proceso de hidrolisis de
almidón no se encontró resultado alguno, es decir, no hubo reacción positiva o
negativa.
2. INTRODUCCIÓN
El almidón es una sustancia de reserva muy importante en la dieta humana. Además,
las múltiples aplicaciones prácticas en la industria de esta molécula hacen revalorizan
más todavía su interés económico a nivel mundial. El almidón es una macromolécula
que es el principal compuesto de las reservas de energía de los vegetales, esto hace
que sea el principal aporte de calorías a la dieta de todos los animales, incluyendo el
ser humano. Es el compuesto principal de todas las harinas (arroz, trigo, maíz, patata,
etc.). En la hidrolisis de almidón se utiliza el Lugol, el cual con el almidón forman un
complejo color café-purpura que desaparece cuando el almidón ha sido degradado.
Por eso en el laboratorio se realizo el procedimiento para la hidrolisis de almidón
utilizando las muestras del laboratorio anterior para determinar si hay reacción del
Lugol con el almidón.
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Verificar la reacción de los microorganismos frente al Lugol para determinar el
consumo de almidón del medio de cultivo mediante la diferencia de coloración
resultante.
4. MARCO TEÓRICO
4.1. ALMIDÓN
El almidón es una sustancia de reserva muy importante en la dieta humana. Además,
las múltiples aplicaciones prácticas en la industria de esta molécula hacen revalorizan
más todavía su interés económico a nivel mundial. El almidón es una macromolécula
que es el principal compuesto de las reservas de energía de los vegetales, esto hace
que sea el principal aporte de calorías a la dieta de todos los animales, incluyendo el
ser humano. Es el compuesto principal de todas las harinas (arroz, trigo, maíz, patata,
etc.).
El almidón está formado por 2 tipos de moléculas, la amilosa y la amilopectina (20% y
80% respectivamente), que se pueden unir una con otra mediante enlaces
glucosídicos 1->4. Dependiendo de la especie vegetal las proporciones de una y otra
pueden variar.
La primera de ellas, la amilosa, está formada por repeticiones del orden de cientos a
miles de D-glucopiranosa (se denominan así los azucares que forman una estructura
en anillo con sus 5 carbonos y un oxígeno, en el caso del almidón se refiere a la forma
cíclica de la glucosa), unidas por enlaces glucosídicos alfa 1->4, formando largas
cadenas sin ramificar o con algunas pocas ramificaciones en los enlaces alfa entre los
carbonos 1 y 6 (1->6). De estas ramificaciones se pueden llegar a crear
macromoléculas de hasta un millón de Da. Tridimensionalmente se condensa
formando une hélice (con 6 glucosas por vuelta) y forma alrededor del 25% del
almidón, los almidones comerciales ricos en amilosa pueden llegar a contener una
proporción de entre el 50 y el 75% de amilosa y se extraen del maíz. En el interior de
la hélice se encuentran los átomos de hidrógeno haciendo la región interior altamente
hidrofóbica y es una región donde se suelen asociar lípidos de carácter polar. En los
cereales el porcentaje de lípidos en el almidón ronda entre el 0,5 y el 1%.
La amilopectina es el componente mayoritario del almidón, aproximadamente un 75%,
también está formado por ramificaciones de glucosa, salvo que en este caso están
altamente ramificado, cada 20 o 30 moléculas de glucosa mediante un enlace a-D
glucopiranosa (1->6). La amilopectina no forma hélices y puede alcanzar un peso
molecular muy elevado hasta unos 200 millones de Da. Algunos almidones están
compuestos de forma exclusiva por amilopectina y se denominan céreos. El almidón
está formado químicamente por regiones cristalinas, propias de la amilopectina, y
regiones no cristalinas que se alternan. En el caso de la amilopectina de patata se
encuentran, en ocasiones, enlaces de tipo éster fosfato en la posición O-6 o menos
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frecuentemente en el oxígeno O-3 de los que salen las ramificaciones propias de esta
molécula.
Estudios realizados a principios del siglo XXI parecen demostrar que el almidón tuvo
un papel crucial en el éxito evolutivo del Homo sapiens. Respecto a sus familiares
primates más cercanos, el ser humano cuenta con hasta 3 veces más amilasa, la
enzima encargada de degradar el almidón vegetal. Esta mayor eficacia en su dieta
vegetal podría haber sido crucial para el desarrollo del cerebro humano, que consume
grandes cantidades de azúcar.
4.2. HIDRÓLISIS DE ALMIDÓN
Los carbohidratos o polisacáridos son compuestos que tienen importantes funciones
estructurales y de energía en los seres vivos. Tanto su digestión como movilización
(degradación de polisacáridos de almacenamiento) comportan una ruptura secuencial
de unidades de monosacáridos de los extremos no reductores de los polímeros de
glucosa. El metabolismo de los carbohidratos se produce de maneras diferentes, por
ejemplo en las plantas no se produce una digestión (con pocas excepciones), las
plantas sintetizan tanto monosacáridos como polisacáridos de almacenamiento de
energía mediante la fotosíntesis, mientras que en los animales obtienen carbohidratos
al ingerirlos de la dieta, también los animales pueden sintetizar carbohidratos como el
glucógeno (polisacárido de almacenamiento de energía) a partir de sus unidades
monoméricas de glucosa. La digestión de los carbohidratos comienza una vez que los
alimentos son introducidos en la boca, aquí comienza un proceso llamado hidrólisis el
cual se lleva a cabo mediante la división de una molécula de agua del medio por
medio de un ácido. El hidrógeno del agua se une al oxigeno del extremo de una de las
moléculas de azúcar; el OH se une al carbono libre del otro residuo de azúcar. Como
resultado de esta reacción, se tiene la liberación de un monosacárido. Este proceso es
realizado por las enzimas amilasas de la saliva (también encontradas en tejidos
vegetales y jugos pancreáticos), ya que producen un acido que es el que causa la
ruptura de la molécula de agua logrando así reducir los polisacáridos hasta unidades
más simples como oligosacaridos y monosacaridos, a continuación estos pasan al
intestino donde se produce otra hidrólisis de los carbohidratos restantes por las
amilasas pancreáticas que tienen una actividad mayor que las amilasas de la saliva
cuya actividad es limitada por su rápida inactivación por la acidez gástrica, como
productos se obtienen más monosacáridos que pasan a través la pared intestinal,
para posteriormente llegar al torrente sanguíneo para finalmente ingresar al interior
celular por medio de proteínas que se localizan en la membrana celular. Este proceso
es aplicable generalmente para muchos polisacáridos por la acción de los ácidos
diluidos producto de las enzimas.
El almidón es el carbohidrato de reserva más abundante en los tejidos vegetales. Se
encuentran en grandes cantidades de tubérculos y semillas de cereales y
leguminosas. Este polisacárido contiene alrededor de un 20% de una fracción
insoluble en agua llamada amilosa y un 80% de una fracción soluble denominada
amilopectina. Ambas fracciones están constituidas por unidades de -D-glucosa su
diferencia estructural es que la primera está formada por cadenas lineales de glucosa
con enlaces (14) y la segunda son cadenas lineales (14) y ramificadas
(16) de glucosa.
En los animales la digestión del almidón empieza en la boca con la acción de la -
amilasa que se secreta en la saliva. Esta enzima cataliza la hidrólisis de la cadena
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lineal (amilosa) y la ramificada (amilopectina) del almidón, rompiendo enlaces -
(14) interiores (endoamilasa) para formar una mezcla de dextrinas (oligosacaridos
entre estos están la amilodextrina, eritrodextrina, acrodextrina y maltodextrina), Sin
embargo esta enzima solo degrada parcialmente la amilopectina, porque no es capaz
de romper los enlaces (16) que se encuentran en los puntos de ramificación (la
amilosa es transformada totalmente mientras que la amilopectina se conserva en un
40-45% sin hidrolizar). Para continuar su degradación en el intestino es necesaria la
acción de una “enzima desramificante”, la (16)-glucosidasa esta tiene la acción de
exponer un grupo nuevo de ramificaciones con enlaces (14), que pueden ser
atacadas por la -amilasa, hasta alcanzar una nueva serie de ramificaciones con
enlaces (16). El resultado final de la acción secuencial de estas dos enzimas es la
degradación completa del almidón obteniendo glucosa
En los vegetales se encuentra también -amilasa y -amilasa (en granos de cereales),
esta enzima ataca enlaces (14) pero no puede catalizar la hidrólisis de los enlaces
(16) y por lo tanto no cataliza la hidrólisis completa de la amilopectina.
Es igual de importante mencionar que la -amilasa requiere un activador como el
cloruro sódico y es sensible a pH ácidos, es inactiva a un pH aproximadamente de 3.3,
su rango optimo de acción es a pH entre 5-7, por otro lado la -amilasa no requiere de
un activador, y es menos estable al calor que la primera, su pH optimo es de 4.5.
La hidrólisis del almidón se puede demostrar por la aparición de D-glucosa (azúcar
reductor), el cual puede ser detectado con los reactivos de Benedict, Fehling y otros el
reactivo de Benedict está constituido por una disolución de sulfato de cobre II, citrato
de sodio y carbonato de sodio. Al tratar al azúcar con estos reactivos experimentan
una reacción de oxidación. El cobre II en disolución acuosa, de color azul se reduce a
cobre I, el cual precipita como oxido de cobre I de color rojo. Otra manera de
demostrar la hidrólisis del almidón es por la desaparición del color azul característico
de la prueba del yodo-yoduro.
Figura 1. Hidrólisis de almidón
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5. RESULTADOS
Tabla 1. Resultados de Hidrolisis de almidón de todos los grupos.
Placa Resultados
Grupo N°1 No se observó cambio.
Colonia “A” de bacterias
Ambiente: Baño FIA
Colonia “B” de bacterias No se observó cambio.
Ambiente: grifo baño FIA
Grupo N°2 No se observó cambio.
Colonia “A” de bacterias
Ambiente: Biblioteca FIA
Colonia “B” de bacterias No se observó cambio.
Ambiente: grifo baño FIC
Grupo N°3 No se observó cambio.
Colonia “A” de bacterias
Ambiente: Laboratorio Microbiología
Colonia “B” de bacterias No se observa cambio.
Ambiente: Grifo baño FIC
Grupo N°4 No se observa cambio.
Colonia “A” de bacterias
Ambiente: Aula vacía
Colonia “B” de bacterias No se observa cambio.
Ambiente: Estanque de arquitectura
Grupo N°5 No se observa cambio.
Colonia “A” de bacterias
Ambiente: Aula vacía
Colonia “B” de bacterias No se observa cambio.
Ambiente: Estanque de arquitectura
Fuente: Grupo 1, grupo 2, grupo 3, grupo 4 y grupo 5.
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6. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
No hay reacción del medio de cultivo con el Lugol. No da un resultado positivo o
negativo.
7. CONCLUSIONES
8. RECOMENDACIONES
Verificar si el Lugol está en buenas condiciones.
No mover de manera agitada la placa ya que podría variar los resultados.
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9. CUESTIONARIO
9.1. Definir:
Enzima: Son sustancias orgánicas de naturaleza proteica,
elaboradas por las células que tienen como función acelerar o
provocar las reacciones químicas que se efectúan en los seres vivos.
Las enzimas son de acción específica ya que actúan exclusivamente
catalizando un tipo de reacción química. (Kceres, 2018)
Hidrolisis: significa destrucción, descomposición o alteración de una
sustancia química por el agua. En el estudio de las soluciones
acuosas de electrólitos, el término hidrólisis se aplica especialmente
a las reacciones de los cationes (iones positivos) con el agua para
producir una base débil, o bien, a las de los aniones (iones negativos)
para producir un ácido débil. (Ecured, 2018)
Fermentación: Es un proceso de tipo catabólico, es decir, de
transformación de moléculas complejas, en moléculas simples,
dentro del metabolismo. Así la fermentación es un proceso catabólico
de oxidación que tiene lugar de forma incompleta, siendo además un
proceso totalmente anaeróbico (sin presencia de oxígeno), dando
como producto final un compuesto de tipo orgánico, el cual
caracteriza por lo general, a los distintos tipos de fermentaciones
existentes, pudiendo así realizar una clasificación y una
diferenciación. (Guía, 2018)
9.2. ¿A qué se denominan enzimas extracelulares y enzimas intracelulares
(endoenzimas)?
Enzimas extracelulares llamadas también enzimas digestivas son las enzimas
elaborados en el interior de las células pero luego son expulsadas al exterior de las
células para que desarrollen su función por ejemplo , DNA polimerasa y enzimas
intracelulares son las enzimas que se utilizan en la misma célula que se elaboran por
ejemplo, amilasa.
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9.3. ¿Qué es almidón?,¿Qué es la proteína?
Almidón: Es un polisacárido de reserva alimenticia predominante en las plantas,
constituida por amilasa y amilopectina. El almidón es la sustancia con la que las
plantas almacenan su alimento en raíces como es el caso de la yuca, tubérculos
como la papa, frutas y semillas (cereales). Pero, no solo es una importante
reserva para las plantas también para los seres humanos tiene una alta
importancia energética ya que proporciona el 70 al 80% de las calorías que
consumimos los humanos por vía de los alimentos. (Gamon, 2018)
Proteínas: son compuestos orgánicos constituidos por aminoácidos dispuestos
en una cadena lineal y unidos por vínculos péptidos. Las proteínas son
ensambladas a partir de los aminoácidos usando la información codificada en
los genes. Cada proteína tiene su propia secuencia de aminoácidos que se
especifica por la secuencia de nucleótidos del gen que codifica esta proteína.
(Avilés, 2018)
9.4. ¿Qué son los polipéptidos?
La unión de varios aminoácidos forma un polipéptido, que es una cadena que
contiene hasta cincuenta aminoácidos. Si la cadena tiene más de 50 (por lo
general cientos o miles), recibe el nombre de proteína. (Bastidas, 2018)
Figura 2. Polipéptidos.
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9.5. ¿Cómo se almacena la energía en la célula?
La energía se almacena en los alimentos en forma de hidratos de carbono,
grasas y proteínas. Estos componentes
alimenticios básicos se descomponen en
nuestras células para liberar la energía
acumulada. Puesto que toda la energía se
degrada finalmente en calor, la cantidad de
energía liberada en una reacción biológica se
calcula a partir de la cantidad de calor
producido.
Figura 3. ATP
Almacenamiento de Energía ATP: Una molécula de ATP se compone de adenosina (una
molécula de adenina unida a una molécula de ribosa) combinada con tres grupos de
fosfatos (Pi) inorgánicos. Cuando la enzima ATPasa
actúa sobre ellos, el último grupo fosfato se separa de la molécula ATP, liberando
rápidamente una gran cantidad de energía (7.6 kcal/mol) esto reduce el ATP a
ADP (difosfato de adenosina) y Pi.
¿Cómo se acumuló originalmente esta energía?
El proceso de almacenaje de energía formando ATP a partir de otras fuentes químicas
recibe el nombre de fosforilación. Mediante varias reacciones químicas, un grupo fosfato
se añade al ADP, convirtiéndose en trifosfato de adenosina (ATP).
El Catabolismo (Degradación): Consiste en la transformación de biomoléculas
complejas en moléculas sencillas mediante la liberación de gran cantidad de energía en
los enlaces covalentes que la forman, en reacciones químicas exotérmicas. Las
reacciones catabólicas liberan energía; un ejemplo es la glucólisis, un proceso de
degradación de compuestos como la glucosa, cuya
reacción resulta en la liberación de la energía retenida en sus enlaces químicos.
El Anabolismo(Biosíntesis) : Es el proceso responsable de la síntesis de moléculas
orgánicas más complejas a partir de otras más sencillas o de los nutrientes, para lo que
se requiere de energía. Las reacciones anabólicas, utilizan la energía liberada para
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recomponer enlaces químicos y construir componentes de las células como lo son las
proteínas y los ácidos nucleicos.
Las reacciones del catabolismo y anabolismo ocurren en secuencia, no aisladamente,
por lo que el producto de una reacción se convierte
en el sustrato de la siguiente. Las reacciones metabólicas se encuentran reguladas con
absoluta precisión por la actividad de las diferentes enzimas celulares.
(METABOLISMO,PRODUCCIÓN Y ALMACENAMIENTO DE ENERGÍA, 2018)
9.6. Mencione algunas características del ciclo de Krebs.
Ciclo de Krebs
Es un ciclo metabólico en todas las células que utilizan oxigeno durante el
proceso de respiración celular.
Características:
• Ciclo de Krebs, en honor a su descubridor; o ciclo del ácido cítrico por ser
el
primer producto que se forma en el mismo.
• Función principal: vía final común de oxidación de los hidratos de carbono,
de los lípidos y las proteínas.
• Suministra sustratos para gluconeogénesis, desaminación de aminoácidos
y
lipogénesis.
• En mamíferos el tejido más activo es el hígado.
• Se conocen muy pocas anormalidades genéticas de sus enzimas en
humanos. ([Link], 2018)
Figura 8. Ciclo de Krebs
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10. FUENTES DE INFORMACIÓN
Avilés, J. C. (20 de Abril de 2018). Proteina. Obtenido de
[Link]
Bastidas, J. (20 de Abril de 2018). Prote. Obtenido de
[Link]
Ecured. (20 de Abril de 2018). Hidrólisis. Obtenido de [Link]
Gamon, R. (20 de Abril de 2018). ¿Qué es el almidon? Obtenido de
[Link]
Guía, L. (20 de Abril de 2018). Fermentación. Obtenido de
[Link]
Kceres, M. (20 de Abril de 2018). Que son las enzimas . Obtenido de
[Link]
METABOLISMO,PRODUCCIÓN Y ALMACENAMIENTO DE ENERGÍA. (20 de Abril de 2018).
Obtenido de
[Link]
[Link]
[Link], N. (20 de Abril de 2018). Caracteristicas del ciclo. Obtenido de
[Link]
11. ANEXOS
PROCEDIMIENTO
Hidrolisis de almidón
Primero preparamos los medios en el cual colocaremos dos tipos de bacterias el
cual las vamos a separar en 2 sectores (A y B) para ver cuál de estos tipos de
bacterias utiliza el almidón.
Luego se colocarán en las placas petri las cuales contienen las muestras del
laboratorio anterior.
En nuestro caso los dejamos por 48 horas y luego en los dos sectores los cuales
los hemos separado en las zonas “A” y “B” le agregamos Lugol y tomaremos
nota de lo que suceda.
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12. APENDICE
Figura 1. Grupo 1
Fuente: Grupo 1
Figura 2. Grupo 2
Fuente: Grupo 2
Figura 3. Grupo 3
Fuente: Grupo 3
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Figura 4. Grupo 4
Fuente: Grupo 4
Figura 5. Grupo 5
Fuente: Grupo 5
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