Espectroscopia Raman
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Ger CéspedesEspectroscopia Raman
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INTRODUCCION:
Cuando una radiación pasa a través de un medio transparente una fracción del haz
se dispersa en todas direcciones. Dicha dispersión sufre cambios cuatizados de
frecuencia, como resultado de transiciones entre niveles de energía vibracionales
de la molécula, que se producen a raíz del proceso de polarización, diferenciándola
así, de la dispersión de radiación ordinaria.
En 1928 el físico Chandrasejara Venkata Raman descubrió que la longitud de onda
de una pequeña fracción de la radiación dispersada por ciertas moléculas difiere de
la del haz incidente, y además, que los desplazamientos de la longitud de onda
dependen de la estructura química de las moléculas responsables de la dispersión.
Los espectros Raman se obtienen al irradiar una muestra con una potente fuente
láser de radiación monocromática visible o infrarroja. Durante la irradiación, se
registra el espectro de la radiación dispersada un cierto ángulo (por lo general 90
grados) con un espectrómetro adecuado. Las intensidades de las líneas Raman son
el 0,001 por 100 de la intensidad de la fuente.
DESARROLLO:
1) Instrumentación:
Los instrumentos para la espectroscopia Raman moderna constan de tres
componentes: una fuente láser (1a); un sistema de iluminación de la muestra (1b) y
un espectrómetro adecuado (1c). Los requerimientos de funcionamiento de estos
componentes son muy rigurosos debido a la inherente debilidad de la señal de
dispersión.
1a) Fuente láser
Las fuentes utilizadas en la espectrometría Raman moderna son casi siempre
láseres, debido a su alta intensidad necesaria para producir dispersión Raman lo
suficientemente intensa como para poderse medir con una relación señal/ruido
razonable. En la siguiente tabla se enumeran cinco de los láseres más utilizados en
la espectroscopia Raman:
Tipo de fuente láser Longitud de onda, nm
Ion argón 488,0 o 514,5
Ion criptón 530,9 o 647,1
Helio/ neón 632,8
Láser de diodos 782 o 830
Nd/YAG 1.064
1b) Sistemas de iluminación de la muestra
En la manipulación de las muestras en la espectroscopia Raman puede emplearse
el vidrio para las ventanas, lentes y otros componentes ópticos, en lugar de los
haluros cristalinos que resultan más frágiles y menos estables a los componentes
atmosféricos. Además, es posible examinar muestras pequeñas a través de la
fuente láser, ya que, se logra enfocar con facilidad sobre una zona pequeña de la
muestra y, a su vez, la radiación emitida sobre una rendija.
-Muestras líquidas: la manipulación de estas muestras son a través de un filtro de
interferencia de paso de banda estrecho que transmite una única señal de la fuente
láser y elimina las otras líneas. La mayor ventaja en cuanto a la manipulación de la
muestra en espectroscopia Raman se debe a la débil dispersión producida por el
agua que permite una fuerte absorción de radiación facilitando así, particularmente
en sistemas biológicos e inorgánicos y para los estudios relacionados con los
problemas de polución de agua.
-Muestras sólidas: Se obtienen, a menudo, llenando una pequeña cavidad con la
muestra finalmente pulverizada. Los polímeros, por lo general, se pueden examinar
directamente sin tratamiento previo de la muestra. En el caso poco común de
dispersores débiles, como sucede con las muestras de gases diluidos, la cubeta se
coloca, a veces, entre los espejos de la fuente laser, lo que da lugar a un aumento
de la potencia de excitación. Otro medio para producir espectros Raman de
muestras gaseosas consiste en el uso de cubetas de paso múltiple.
La muestra gaseosa se introduce en un tubo de vidrio cilíndrico con espejos en
ambos extremos. El haz láser de excitación pasa a través de una pequeña ventana
en unos de los espejos y luego a través de la muestra gaseosa numerosas veces.
La disposición Raman resultante, perpendicular al tubo de la muestra y al haz láser
de excitación, se focaliza después sobre la rendija de entrada de un espectrómetro
mediante una gran lente.
-Muestreo con fibra óptica: Se utiliza una lente objetivo microscópica para enfocar
el haz de excitación láser sobre uno de los extremos del conjunto de fibras de
entrada que llevan la radiación a una sonda de fibra óptica que esta inmensa en la
muestra.
1c) Espectrómetros Raman:
Son instrumentos de transformada de Fourier con detectores de germanio enfriados
o instrumentos multicanal con dispositivos de acoplamiento de carga. Estos
detectores, a diferencia de los tubos fotomultiplicadores, son sensibles a la radiación
de 782 nm producida por láseres de diodo, los cuales provocan la excitación Raman
de muchos compuestos sin generar una fluorescencia apreciable.
Aplicaciones de la Espectroscopia Raman
La espectroscopia Raman se ha aplicado al análisis cualitativo y cuantitativo de
sistemas inorgánicos, orgánicos y biológicos.
Es posible realizar análisis cuantitativos de muestras muy pequeñas debido a que
los haces láser se pueden enfocar con mucha precisión. Para estos análisis se
utilizan instrumentos denominados microsondas de láser. Las microsondas de laser
se han utilizado para determinar analitos en células bacterianas aisladas,
componentes en partículas individuales de humo y cenizas en suspensión y
especies en inclusiones microscópicas en minerales.
Sistemas inorgánicos
En técnica Raman para la investigación espectroscópica de sistemas inorgánicos
se pueden utilizar disoluciones acuosas, además, las energías vibracionales de los
enlaces metal-ligando se encuentran, por lo general, entre 100 y 700 cmˆ-1.
Los espectros Raman son fuentes de información potencialmente útiles respecto a
la composición, estructura y estabilidad de los compuestos de coordinación.
A través de esta técnica espectral numerosos complejos de halógenos y
halogenoides pueden investigarse y también, gracias a la misma, se han podido
calcular las constantes de disociación de ácidos fuertes como el H2SO4, HNO3,
entre otros.
Sistemas orgánicos
Los espectros Raman presentan regiones útiles para la detección de grupos
funcionales y también, regiones que permiten identificar compuestos específicos,
además de proporcionar información acerca de ciertos tipos de compuestos
orgánicos.
La banda Raman es intensa y su posición depende de la naturaleza de los
sustituyentes y de su geometría. Los estudios de esta espectroscopia son
apropiados para proporcionar información útil acerca de los grupos funcionales
olefínicos y también de los derivados cicloparafínicos, estos últimos, tienen un pico
Raman característico en la región de 700 a 1.200 cmˆ-1 en donde se atribuye a una
vibración de respiración en la que los núcleos se mueven hacia adentro y hacia
afuera simétricamente con respecto al centro del anillo. La posición del pico
disminuye de forma continua desde 1.190 cmˆ-1 para el ciclopropano hasta 700
cmˆ-1 para el ciclooctano, por lo tanto, la espectroscopia Raman constituye una
excelente herramienta para la estimación del tamaño del anillo en las parafinas
cíclicas.
Sistemas biológicos
La espectroscopia Raman se ha aplicado ampliamente para el estudio de sistemas
biológicos. Entre las ventajas de esta técnica se incluyen el pequeño tamaño de
muestra requerido, la mínima interferencia del agua, el detalle espectral y la
sensibilidad respecto a los factores conformacionales y del entorno.
Otros tipos de Espectroscopia Raman
Espectroscopia Raman de resonancia
Hace referencia a un fenómeno en donde la intensidad de las líneas aumenta
rápidamente cuando la longitud de onda de excitación se aproxima a la longitud de
onda del pico de absorción electrónica. Los espectros Raman de resonancia se
pueden obtener de forma bastante selectiva, ya que, la excitación se puede dirigir
hacia una banda de absorción especifica.
La circulación de la muestra se suele realizar de dos maneras: bombeando la
disolución o el líquido a través de un capilar instalado en el compartimento de la
muestra o girando una cubeta cilíndrica que contiene la muestra, a través del haz
del láser.
La aplicación más importante de la espectroscopia Raman de resonancia es el
estudio de moléculas biológicas en unas condiciones fisiológicamente significativas,
es decir, en presencia de agua y a unas concentraciones de bajas a moderadas.
Espectroscopia Raman de superficie aumentada
La espectroscopia Raman de superficie aumentada supone la obtención de los
espectros de la manera usual, de muestras que se adsorben sobre la superficie de
partículas metálicas coloidales o sobre superficies rugosas de piezas de estos
metales.
Se han utilizado varias técnicas para la manipulación de la muestra en la
espectroscopia de superficie aumentada. En unas de las técnicas, partículas de
plata u oro coloidal se suspenden en una disolución diluida (normalmente acuosa)
de la muestra. A continuación, la disolución se mantiene o se hace fluir a través de
un tubo de vidrio estrecho mientras se excita con un haz láser. En otro de los
métodos, se deposita una delgada película de partículas metálicas coloidales sobre
una placa de vidrio, y se añaden una o dos gotas de disolución de la muestra sobre
la película. Luego se obtiene el espectro Raman de forma usual. Alternativamente,
la muestra se puede depositar sobre un electrodo metálico rugoso, que a
continuación se retira de la disolución y se expone a la fuente de excitación láser.
Espectroscopia Raman no lineal
Las técnicas no lineales se han utilizado para superar algunos de los inconvenientes
de la espectroscopia Raman convencional, entre ellos, su baja eficiencia, su
limitación a las regiones visible y ultravioleta cercano, y su susceptibilidad a la
interferencia de la fluorescencia. La principal desventaja de los métodos no lineales
es que tienden a ser específicos para el analito, y a menudo requieren varios láseres
sintonizables distintos que se puedan aplicar a distintas especies.
CONCLUSION:
Espectroscopia Raman y su aplicación a la Criminalística
En el examen de documentos cuestionados, donde se pretenda establecer la
existencia de manipulaciones o adulteraciones en el mismo o corroborar su
autenticidad por medio de análisis de la composición de los pigmentos de sus tintas
para posterior comparación, se ha optado siempre por utilizar métodos y técnicas
no destructivas a fin de obtener confiable y valiosa información sin perder ni alterar
la evidencia documental. Sin embargo, los mismos por lo general ofrecen resultados
meramente cualitativos y son muy sensibles con poca cantidad de muestra, siendo
necesario recurrir a técnicas más efectivas, como las cromatografías y
espectrométricas, pero que requieren la extracción de muestra del documento para
su correcto análisis, comprometiendo su integridad.
Asimismo, es cada vez más evidente el interés por el análisis forense de
documentos impresos por inyección de tinta o laser, ya que, han proliferado
enormemente en oficinas y hogares en los últimos tiempos por la gran cantidad que
ofrecen y los costos relativamente accesibles, que las han convertido rápidamente
en herramientas idóneas para la falsificación de documentos tales como pasaportes
y billetes, siendo necesario un método eficaz que pueda diferenciar y comparar sus
tintas.
Es por ello que los métodos espectroscópicos de Raman han adquirido gran
notoriedad en los últimos tiempos para este tipo de análisis, puesto que no requieren
la alteración del documento por la extracción de muestra, y brindan la posibilidad de
reproducir los resultados obtenidos.
BIBLIOGRAFÍA:
[Link]
_An%C3%A1lisis_Forense_de_Tintas_de_Impresora
Libro: “Principios de análisis instrumental 5ª Ed” - Douglas Skoog, James
Holler, Timothi Nieman
