UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y MATEMÁTICA
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA
CITOGENÉTICA
“DETERMINACIÓN DE LA CROMATINA SEXUAL EN EPITELIO DE
MUCOSA ORAL”
Alumnos:
Fuentes Quineche, Shirley
Inga Angulo, Lisbet
Torres Coelho, Carlota Dea
Profesora:
Maritza San Martín
2015
DETERMINACIÓN DE LA CROMATINA SEXUAL EN EPITELIO DE MUCOSA ORAL
I. INTRODUCCIÓN
Está plenamente demostrado que el corpúsculo de Barr resulta de la condensación e inactivación
parcial de todo cromosoma X en exceso de uno. En la década de 1950 este examen fue utilizado para
determinar el "sexo genético". Con el advenimiento de las técnicas para el estudio de los cromosomas
humanos, se pudo establecer la buena correlación existente entre la cromatina de Barr y los
cromosomas X. La proliferación de laboratorios de citogenética y la extensión de esta disciplina a la
práctica clínica han hecho que el estudio citogenético sea solicitado directamente, desplazando el
examen de la cromatina, el que en algunos laboratorios ha sido suprimido por su poca fidelidad.
El resultado de esta práctica tiene por objetivo analizar el resultado de este examen y correlacionarlo
con el cariotipo para estimar su validez actual.
II. MARCO TEÓRICO
En todos los mamíferos, uno de los cromosomas X permanece condensado. Aparece como una masa
que se tiñe intensamente con los colorantes nucleares, adyacente a la membrana del núcleo, llamada
corpúsculo de Barr o cromatina sexual (por Murray Barr que lo descubrió en las neuronas del gato
hembra). El corpúsculo de Barr solamente se encuentra en las células de la hembra y nunca en las de
los machos, en condiciones normales.
Correspondería al fenómeno de compensación de dosis, según la hipótesis de Lyon. El significado
citológico de la cromatina sexual o corpúsculo de Barr es, simplemente, el resultado de la
heterocromatización positiva (inactivación) de uno de los cromosomas X presentes en las células de
los mamíferos.
Esta inactivación se realiza en estadíos tempranos del desarrollo, en cada una de las células de los
embriones femeninos y afectos a cualquiera de los dos cromosomas X; es al azar. Todas las células
descendientes de aquella en que la inactivación tuvo lugar, tendrán el mismo cromosoma X inactivo.
El resultado de la inactivación al azar del cromosoma X, es que las hembras son mosaicos, que
constan de dos poblaciones celulares distintas con un origen común; en una población de células el
cromosoma inactivo será el que procede de la madre (Xm) y en las otras el paterno (Xp).
La técnica de la cromatina sexual es rápida y sencilla. Se realiza en núcleos interfásicos. No requiere
de cultivo de células. Da el estado de los cromosomas sexuales de forma inmediata.
Figura 1. Inactivación al azar del cromosoma X.
Figura 2. Células interfásicas de hombre XY. Células de mujer XX señalando el corpúsculo de Barr.
III. MATERIALES Y MÉTODO
A. MATERIALES
- Láminas portaobjeto
- Alcohol 96°
- Frasco koplin
- HCl 5N
- Carbolfucsina
- Aceite de inmersión
- Microscopio
B. MÉTODO
Se procedió a tomar las muestras de epitelio bucal con raspado de epitelio bucal con la ayuda de un
portaobjeto y seguidamente se hizo un frotis sobre otro portaobjeto y se dejó secar al ambiente. Para
fijar la muestra se colocó en un frasco koplin con alcohol de 96° durante 15 minutos y se dejó secar al
ambiente. Posteriormente se colocó la lámina en otro frasco koplin con HCl a 5N para la hidrólisis
durante 20 minutos y se enjuagó con agua corriente; seguidamente se coloreó con carbolfucsina
durante 1 minuto, el colorante fue previamente filtrado, luego se procedió a decolorar con alcohol 96°
al corriente y finalmente de observó al microscopio a 100x con aceite de inmersión.
IV. RESULTADOS
Figura 3. La flecha indica el corpúsculo de Barr. Aumento 1000x
En mujeres se observaron claramente los corpúsculos de Barr los cuales son la expresión del
cromosoma inactivo X de la mujer (ya que como ya sabemos la mujer tiene 2 cromosomas sexuales
XX uno activo y uno inactivo), mientras que en el hombre no se observó ninguno ya que este sujeto
no presenta cromosoma X inactivo y por lo tanto solo contiene sus respectivos cromosoma sexuales
XY
V. DISCUSIONES
En las mujeres si se observaron estos corpúsculos lo cual expresa la inactivación de uno de sus
cromosomas X ya que la cromatina X o corpúsculo de Barr es un cromosoma inactivo que puede verse
en algunas células en interfase como una masa de heterocromatina adherida a la membrana nuclear
y se observa como un pequeño punto adicional.
Las niñas recién nacidas, tienen menor porcentaje de expresión de la cromatina de Barr, pero nunca
al extremo de aparecer falsamente negativa.
La cromatina X positiva < 2% en un varón, es indicativa de la presencia de un segundo cromosoma X
en por lo menos algunas células. En estas circunstancias, es aconsejable no basar el diagnostico de
síndrome de Klinefelter solo en este examen, pues no permite distinguir al varón XX del XXY. Se
estima que la incidencia del primero es uno de cada 20.000 hombres.
Los corpúsculos de Barr en los cuales en el hombre como normalmente debe ser no se observaron
estos corpúsculos debido a que no posee el cromosoma x inactivo o en su defecto no posee un
cromosoma X adicional por lo que se podría decir que es un sujeto XY normal ya que si poseyera un
cromosoma X adicional (si se hubiesen observado en el sujeto corpúsculos de Barr), presentaría el
síndrome de Klinefelter (47 XXY) lo cual indica a individuos con fenotipo masculino y con cromatina
"X, pero en este caso como ya se mencionó no fue así.
VI. CONCLUSIONES
- Todas las mujeres normales presentan corpúsculo de Barr en sus células a menos que se
trate de una mujer con síndrome de Turner que padece de monosomía (45, X).
- La cromatina sexual o corpúsculo de Barr solo se presenta en mujeres no en varones, a menos
que se tratara de un hombre con síndrome de Klinefelter (47 XXY).
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
- DAHER, V. et al. 1986. Cromatina de Barr: análisis de su valor actual. Rev. Chil. Pediatr. 57(6):
506-509. Consultado el 26 de abril de 2015 en: [Link]
- DE LEÓN, N. et al. 2013. Métodos de diagnóstico en Genética Clínica
- UNAV. 2015. Inactivación del cromosoma X. (2012). Consultado el 23 abril de 2015 en:
[Link]
