SEÑALE LAS DIFERENCIAS ENTRE LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS
1. Señale las diferencias entre la pared celular de las bacterias gram
positivas y negativas.
BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
No tiene membrana externa Membrana externa: forma un saco rígido alrededor de la
bacteria.
No tiene espacio periplásmatico Espacio periplásmatico: espacio entre la membrana
citoplasmática y la interna de la membrana externa.
Capa de peptidoglucano muy desarrollado, hasta 40 La de peptidoglucano presenta una sola capa
capas
La capa S está unida a la capa de peptidoglucano. La capa S está unida directamente a la membrana
externa
Contiene LPS
No contiene LPS
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Muy sensible a la penicilina Poco sensible a la penicilina
retienen la tinción azul Quedan decoloradas.
Conservan el complejo yodocolorante Pierden el complejo yodocolorante
Poseen ácidos teicoicos y lipoteicoicos, Poseen proteínas con concentraciones elevadas.
2. Señale 5 determinantes de patogenicidad de las bacterias gram positivas
y 5 de las bacterias gram negativas.
Gram (+): Coagulasa
. Estafiloquinasa
Hialuronidasa
B lactamasa.
Lipasas, fosfolipasas, nucleasas
Gram (-): Lipopolisacáridos
enzimas hidrolíticas
capsula
adhesinas
endotoxinas
3. Fundamente la coloración de gram interrumpido.
Los fundamentos de diferenciación de Gram positivo y Gram negativo. Los fundamentos de la
técnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y
Gram negativas. La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de
peptidoglucano, además de dos clases de ácidos teicoicos: Anclado en la cara interna de la
pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido lipoteicoico, y más en
la superficie, el ácido teicoico que está anclado solamente en el peptidoglucano (también
conocido como mureína)Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas
CUESTIONARIO N° 2: MICROBIOLOGÍA
es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (de composición
distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano
unida a una membrana exterior por lipoproteínas. La membrana exterior está hecha de proteína,
fosfolípido y lipopolisacárido. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen diferencialmente
debido a estas diferencias constitutivas de su pared. La clave es el peptidoglicano, ya que esel
material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Grampositivas lo poseen en
mucha mayor proporción que las Gram negativas. La diferencia que se observa en la resistencia
a la decoloración se debe a que la membrana externa de las Gram negativas es soluble en
solventes orgánicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa
de peptidoglicano que posee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de
cristal violeta/yodo que se formó previamente, y por lo tanto este complejo se escapa,
perdiéndose la coloración azul-violácea. Pero por el contrario, las Grampositivas, al poseer una
pared celular más resistente y con mayor proporción dé peptidoglicanos, no son susceptibles a
la acción del solvente orgánico, sino qué este actúa deshidratando los poros cerrándolos, lo que
impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-
violácea
1. Se procede a extraer la muestra, que consiste en un raspado faríngeo, para lo cual con
ayuda del hisopo y la bajalengua.
2. Se continúa expandiendo la muestra por todo el portaobjeto.
3. Hay que fijar la muestra con ayuda de calor (mechero), sin quemar la
muestra.
4. Se tiñe con cristal violeta, esperar 1 minuto y enjuagar con agua
corriente.
5. Se agrega el mordiente (lugol), esperar 1 minuto y enjuagar con agua corriente.
6. Se decolora con el alcohol o la acetona, esperar por 30 segundos y enjuagar
7. Se tiñe con safranina, se espera por 1 minuto y se enjuaga con agua corriente.
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8. Se debe esperar a que se seque completamente a temperatura ambiente.
9. Se agrega el aceite de inmersión y observar en el microscopio.
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