TALLER DE BIOQUÍMICA 2, PARA ESTUDIO
1. La cinética de una enzima viene medida como función de la [S] en ausencia
y presencia del inhibidor a una [I]=10-4 M. A partir de los siguientes
resultados:
[S]x10-5 M 0,3 0,5 1 3 9
v0 (µmoles/min.) sin I 10,4 14,5 22,5 33,8 40,5
v0 (µmoles/min.) con I 2,1 2,9 4,5 6,8 8,1
a) Representar v0 frente a [S] y 1/Vmax. frente a 1/[S].b ) Calcular Vmax. y
Km en ausencia y presencia de inhibidor. c) ¿Qué tipo de inhibición es esta?.
d) Calcular la KI
2. La enzima aspartato transcarbamilasa cataliza la primera reacción propia de
la síntesis de pirimidinas. En un estudio de ésta enzima, utilizando aspartato
como sustrato, en presencia de CTP 0,5 M y en ausencia del mismo, se
obtuvieron los siguientes datos:
Aspartato (mM) 1 2 3 4 5 7 9 10 12 15 16 17
V0 sin CTP (u.a.) 0,45 0,8 1,7 2,9 3,4 4,3 5,1 5,3 5,6 5,8 5,8 5,8
V0 con CTP 0,5 M 0,2 0,4 0,7 1 1,4 2,4 3,7 4,2 4,8 5,5 5,6 5,6
a) Sin utilizar ninguna representación gráfica, estímese el valor de K0,5. b)
Utilizando la ecuación de Michaelis-Menten, calcular V0 para una [S]=3
mM. ¿Existe alguna discrepancia entre éstos datos y los experimentales?.
Justificarlo. c) ¿Qué efecto tiene el CTP sobre la actividad enzimática?
3. a) ¿Qué concentración de inhibidor competitivo se requiere para dar un 75%
de inhibición, cuando la concentración de sustrato es de 1,5 x 10-3 M,
sabiendo que la Km de la enzima por dicho sustrato vale 2,9 x 10-4 M, y que
la Ki para el inhibidor es de 2 x 10-5 M?. b) ¿Hasta que concentración debe
elevarse el sustrato para restablecer el valor de velocidad obtenido en
ausencia del inhibidor?.
4. Una glutaminasa de hepatocito hidroliza distintas concentraciones de
glutamina, en presencia o ausencia de dos inhibidores diferentes,
obteniéndose los siguientes resultados:
Calcular: a) en cada caso el tipo de inhibición existente, b) el valor de los
correspondientes parámetros cinéticos (Km, Ki, Vmáx).
5. Una enzima se ensayó para distintas concentraciones de su substrato
específico, en ausencia y presencia de un inhibidor ([I]=1mM),obteniéndose
los siguientes resultados:
Calcular la KM y la Vmáx en ambos casos y la KI para el inhibidor. ¿Qué clase de
inhibición se produce?.
6. Una isomerasa tiene, en ausencia de inhibidor, una Km para su sustrato de
6,7 x 10-4 M, y su Vmax es de 300 µmol/min. Calcúlese la Ki y el porcentaje
de inhibición para un inhibidor competitivo, sabiendo que con [S]= 2 x 10-5 M
y [I]= 10-5 M, se obtiene una velocidad inicial de 1,5 µmol/min.
7. Calcular la velocidad inicial que se obtendrá en una reacción enzimática si la
velocidad máxima es de 10 µmol/min y la concentración de sustrato es a)
10Km, b)Km/3.
8. Calcular qué concentración de substrato, expresada en función de la KM nos
dará una velocidad de reacción igual al 60% de la Vmáx
9. Calcular la relación entre la concentración de substrato necesaria para una
velocidad 90% de la Vmáx y la requerida para una velocidad 10% de la Vmáx
para una enzima cuya cinética sigue la ecuación de Michaelis-Menten.
10. Calcular la concentración de un inhibidor competitivo (KI= 10-7M) necesaria
para que la velocidad sea un 20% de la Vmáx de una reacción enzimática
(KM=1,6x10-4M cuando la [S]=0,4 mM).
Éxitos
