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Informe 7

La práctica tuvo como objetivo determinar la creatinina en muestras mediante espectrofotometría y aplicar la Ley de Beer-Lambert. La creatinina se forma a partir del metabolismo muscular y es filtrada por los riñones, por lo que su nivel en sangre indica la función renal. Los estudiantes midieron la absorción de muestras conocidas para construir una curva de calibración y así cuantificar la creatinina en muestras desconocidas.
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Informe 7

La práctica tuvo como objetivo determinar la creatinina en muestras mediante espectrofotometría y aplicar la Ley de Beer-Lambert. La creatinina se forma a partir del metabolismo muscular y es filtrada por los riñones, por lo que su nivel en sangre indica la función renal. Los estudiantes midieron la absorción de muestras conocidas para construir una curva de calibración y así cuantificar la creatinina en muestras desconocidas.
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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

LA MOLINA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA


CURSO: BIOQUÍMICA – LABORATORIO

INFORME DE LA PRÁCTICA N° 7

TÍTULO: DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE CREATININA


Integrantes:

Alumno Código

Castro Aguilar, Nadia 20180454

Catari Justo, Antonio 20151387

Mori Ozambela, Ana Nilú 20170365

Ureta Atoche, Edmundo 20161462

Horario de práctica: Jueves, 8:00 am - 10:00 am

Profesor de laboratorio: Gallardo Vásquez, Guillermo José

Fecha de la práctica: 16/05/19

LA MOLINA – LIMA – PERÚ

I. INTRODUCCIÓN
II. OBJETIVOS

1. Observar aplicación directa y útil de la Ley de Lambert y Beer en los métodos

espectrofotométricos con uso de un único estándar, particularmente para la

cuantificación de creatinina.

2. Ejercitarse en el concepto de factor de calibración para cálculos de concentraciones

en espectrofotometría.

III. MARCO TEÓRICO

La creatinina es el producto de degradación de la creatina. La creatina es un derivado de los


aminoácidos arginina, glicina y metionina, el cuerpo la fabrica básicamente en el hígado, los
riñones y el páncreas, y también puede obtenerse a través de una dieta rica en carne o
pescado (podemos encontrar unos 5 gr., de creatina por cada kilo de carne). Se acumula
básicamente en los músculos esqueléticos (aproximadamente un 98 %) en forma de creatina
libre unida a una molécula de fosfato (PCr o fosfocreatina). La PCr sirve como fuente
inmediata de energía para la contracción muscular para lo que se degrada produciendo
creatinina. Esta es llevada a la sangre a través riñones los cuales la filtran del cuerpo en la
orina (puede también ser medida en la orina).

3.1. Creatina y creatinina


La creatina es una sustancia elaborada por el organismo que se encuentra en cada célula
humana y tiene la función de almacenar energía. Sólo con la ayuda de la creatina es posible
el rendimiento físico y mental.
La creatina es elaborada en nuestro organismo a partir de los aminoácidos glicina, arginina y
metionina, principalmente en el hígado, los riñones y el páncreas. De allí es transportada en
el torrente sanguíneo a todas las células del cuerpo. Ya que la creatina participa en todos los
procesos que requieren energía, las células musculares, cerebrales y nerviosas contienen
mucha creatina. La creatina almacenada en una persona que pesa 70 kg es
aproximadamente 120 g.
La mayor parte de la creatina (aprox. el 95 %) está almacenada en la musculatura porque la
creatina desempeña un papel esencial en la contracción muscular. La incorporación de la
creatina a la célula muscular desde la sangre tiene lugar a través de un transportador de
creatina situado en la membrana celular impulsado por el sodio.
Alrededor del 60–70 % de toda la creatina muscular se encuentra almacenada en forma de
la molécula fosfocreatina, rica en energía. Los 30–40 % restantes se encuentran libres. Aparte
del adenosín trifosfato (ATP), la creatina es la fuente energética más importante del cuerpo.
Todas las células del organismo pueden utilizar solamente al adenosín trifosfato (ATP) como
sustancia suministradora de energía, pero debido a que el cuerpo sólo puede almacenar
cierta cantidad de ATP en un momento dado, el ATP debe ser elaborado y suministrado
continuamente por el metabolismo.
El ATP se elabora a partir de grasas y carbohidratos, los suministradores de energía a largo
plazo. Cuando la célula consume energía, el ATP “alto en energía” es convertido al adenosín
difosfato (ADP) “bajo en energía”. Como un acumulador, la creatina (en forma de
fosfocreatina) recarga el ADP bajo en energía al ATP alto en energía hasta que el ATP vuelve
a estar disponible a partir de la conversión de grasas y carbohidratos.
Los músculos contienen de 3 a 4 veces más fosfocreatina que ATP y por ello esta sustancia
almacena energía a corto plazo, especialmente cuando el consumo de ATP es mayor que su
síntesis a partir de los carbohidratos y las grasas. La concentración de fosfocreatina y la
regeneración del ATP son factores decisivos en ejercicios continuos que requieren un gran
esfuerzo. El aumento en la concentración de creatina y fosfocreatina acelera la regeneración
del ATP, lo que conduce directamente a que se libere y ponga a disposición aún más energía.

FISIOLOGÍA
La creatinina, aminoácido de origen no proteínico, es un ingrediente del tejido muscular que
se forma por la acción de la creatinfosfocinasa (CPK) cuando se requiere energía para
procesos metabólicos.
Cuando se consume energía, forma el metabolito inactivo creatina, que pasa del músculo a
la circulación a un índice constante. En los varones se producen en cantidades más grandes
que en las mujeres debido a su masa muscular mayor.
El glomérulo renal filtra al creatinina y los túbulos no lo reabsorben, por lo cual, el índice de
excreción en la orina es también constante. Al parecer, las concentraciones sanguíneas
fluctúan incluso menos que los valores urinarios, tal vez por la capacidad de los túbulos para
secretar creatinina en presencia de concentraciones aumentadas en el suero. La creatinina
es excretada sin cambio en la orina debido a que se modifica poco durante su paso a través
de la neurona. Los riñones al excretan con mayor facilidad que al urea o el ácido úrico.

Análisis de creatinina
La creatinina es una molécula de deshecho que se genera a partir del metabolismo muscular.
La creatinina proviene de la creatina, una molécula muy importante para la producción de
energía muscular. Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en
creatinina cada día. La creatinina se transporta desde los músculos por medio de la sangre
hacia el riñón. Los riñones filtran la mayoría de la creatinina y la eliminan en la orina.
Aunque es una sustancia de deshecho, la creatinina es una prueba diagnóstica esencial, ya
que se ha observado que su concentración en sangre indica con bastante fiabilidad el estado
de la función renal. Si los riñones no funcionan bien, no eliminan bien la creatinina y por lo
tanto ésta se acumula en la sangre. Por esto la creatinina puede avisar de una posible
disfunción o insuficiencia renal, incluso antes de que se presenten síntomas. Por eso la
creatinina suele figurar en los análisis de sangre que se realizan comúnmente.
La cantidad de creatinina que aparece en la sangre de un individuo depende de su masa
muscular, por tanto, esta concentración será constante para cada individuo si no varía su
masa muscular.
Los valores de referencia son:
● Neonatos 0.3 – 1.2 mg/dl
● Infantes 0.2 – 0.4 mg/dl
● Niños 0.3 – 0.7 mg/dl
● Adolescentes 0.5 – 1 mg/dl
● Mujeres adultas 0.5 – 1.1 mg/dl
● Varones adultos 0.6 – 1.2 mg/dl

La razón de la elevación de la Creatinina sérica en neonatos es que esta refleja, en los


primeros días de vida, el valor materno y es proporcionalmente elevada para la masa
muscular del neonato. Esta cifra desciende progresivamente 3 hasta valores estables al cabo
de dos o tres semanas.
Algunos fármacos pueden producir una elevación anormal de las concentraciones de
creatinina en sangre. Una concentración muy elevada de creatinina en la sangre puede
indicar la necesidad de someterse a diálisis para eliminar las sustancias de deshecho de la
sangre.

Métodos de análisis:
* Reacción de Jaffe modificada (picrato en medio alcalino cinético)
* Enzimático colorimétrico (creatininasa-peroxidasa)
* Enzimático UV (creatininasa GLDH).

Significado clínico
La creatinina es la menos variable de las sustancias nitrogenadas no proteínicas (NNP) en el
suero y es un indicador sensible de la función renal. Es un producto del metabolismo
muscular, que pasa a la sangre y es excretado en la orina virtualmente a un índice constante.
Por tanto, su concentración en suero es también constante en la persona sana. De todas las
sustancias NNP, sólo la creatina precursor de la creatina es usada por el cuerpo. Se almacena
para proporcionar el desgaste muscular.
Con propósitos de diagnóstico, la creatinina se correlaciona con los cambio del nitrógeno de
urea sérico (NUS), pero es más exacta como una indicación del índice de filtración glomerular
(IFG) debido a que se produce en cantidades relacionadas con la masa muscular, que cambia
muy poco, en tanto en que los valores NUS se elevan en respuesta a varios factores. Por ello
se usan como indicador cuando hay disfunción renal o en aquellos casos en que incierta la
causa de un valor elevado.
La creatinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente de los músculos y
puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células. La producción de
creatinina depende de la modificación de la masa muscular. Varía poco y los niveles suelen
ser muy estables. Se elimina a través del riñón. En una insuficiencia renal progresiva hay una
retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico.
La creatinina es un compuesto relativamente inestable, especialmente en la orina, por lo que
en el laboratorio se previene la degradación congelando suero separado o la orina. El uso
clínico de la medición de creatinina sérica ha aumentado con la introducción de equipos
automáticos de análisis rápido.
El dosaje de creatinina es un indicador útil para evaluar la función glomerular renal, teniendo
en cuenta el prerrequisito que la producción de creatinina y su excreción sean iguales. Esto
se cumple en individuos sanos con dieta normal. Las variaciones interindividuales en estas
condiciones son mínimas mientras que las interindividuales son muy fluctuantes debido a:
- Diferencia en la masa muscular y por tanto de producción de creatinina en distintos
individuos.
- Diferencia en la ingesta de carne. Un kg. de carne contiene 2-5 g. de creatina que se
convierte en creatinina en el proceso de cocción. 15-30 % de la creatinina excretada
diariamente es de origen alimentario.

La creatinina en suero no es un buen indicador de la tasa de filtración glómerular (enlace con


clearance) solamente cuando ésta ha disminuido a valores de 60-40 mL/min/1.73 m2 su valor
se encuentra aumentado.

Patologías
La Creatinina sufre filtración glomerular pero no se reabsorbe y su secreción tubular es
mínima. La razón más importante del aumento de este metabolito en sangre es la mala
filtración glomerular. Esto se puede valorar rápidamente con la determinación de creatinina
en sangre cuando está presente en valores por encima de los normales y combinando
posteriormente estos resultados con los niveles en orina (Aclaramiento de creatinina) El
aumento de los niveles en sangre también podría indicar un gran recambio muscular
patológico porque el músculo se está “rompiendo”, o bien fisiológico si el individuo presenta
una gran masa muscular (deportistas por ejemplo).
Una de las aplicaciones clínicas de emergencia más importantes de la determinación de
creatinina en sangre es la detección de la INSUFICIENCIA RENAL AGUDA que es la
disminución rápida en horas o días de la función renal con caída de la filtración glomerular y
en algunos casos disminución en la producción de orina acompañada de retenciones
nitrogenadas y alteraciones hidroeléctricas y acido básicas.

Durante el curso de esta enfermedad los valores de creatinina sufren un gran aumento en un
periodo corto mostrando valores que superan los 1.5 mg/dl. Se clasifica en
• Insuficiencia renal aguda Prerrenal
• Insuficiencia renal aguda intrínseca
• Insuficiencia renal aguda Postrenal.

i) Las concentraciones séricas de creatinina disminuyen en: Cualquier proceso de


desgaste muscular profundo como en:
- La distrofia muscular, debido a una reducción en la masa corporal total y por ende, de
la cantidad de creatina convertida a creatinina cada día.
- También puede encontrarse disminución en los casos de miastenia gravis por las
mismas razones.

ii) Las concentraciones séricas de creatinina aumentan en:


● Insuficiencia renal crónica secundaria a glomerulonefritis crónica, nefrosis diabética,
riñón poliquístico, nefroesclerosis, pielonefritis crónica y gota, para nombrar algunos,
debido a la incompetencia de los riñones para excretar la creatinina.
● Los valores séricos de creatinina pueden ser normales en algunos casos de
insuficiencia renal aguda o crónica leve debido a que el valor plasmático de la
creatinina emplea de 7-10 días para estabilizarse cuando el IFG disminuye.
● Una creatinina plasmática elevada indica insuficiencia renal grave de larga duración.
Un incremento de 4-5 mg/100ml es evidencia de disfunción importante.
● La nefritis crónica con uremia puede provocar valores tan altos como 20-30 mg/100
ml.
● Uropatía obstructiva de larga duración, que puede presentarse en hipertrofía
prostática, estenosis uretral bilataeral y cálculos renales, debido la dificultad para el
flujo libre de la orina y del IFG. La depuración renal es baja.
● Disminución crónica del IFG debido a causas prerrenales, como se observa en
insuficiencia cardiaca congestiva.
● Valores falsos reportados en algunos métodos de análisis (prueba original de Jaffe)
que originan interferencias secundarias por reacción de otras sustancias.
● Algunas personas con masa muscular muy grande, que producen cantidades mayores
de creatinina, por lo general, la elevación es ligera.
● Cetoacidosis diabética, debido a una lectura falsamente elevada por el aumento de
cetonas en el suero.
● Rechazo de trasplante de riñón, debido a una filtración escasa de productos de
desecho por el riñón ineficaz. En tales casos, el indicador más sensible de la función
renal pueden ser las determinaciones en serie de creatinina sérica.

IV. MATERIALES Y EQUIPOS

V. METODOLOGÍA

A. Precipitacion de proteinas

Para la determinación de creatinina y de otros compuestos en sangre total, la


presencia de proteínas perturba las reacciones necesarias para su cuantificación,
por ello es que debe realizarse un proceso previo (desproteinización), con el cual
además de remover las proteínas se logra:
* Disminuir o impedir turbidez y opacidad.
* Evitar formación de espuma
* Evitar formación de precipitados
* Hacer posible la obtención de líquidos translucidos (que absorben cierta cantidad
de radiación y dejan pasar otra)

El siguiente es un metodo quimico de desproteinizacion que hace uso de acido como


desproteinizante al desnaturalizar y precipitar la proteina por cambio brusco de pH.
Este metodo de desproteinizacion es conocido como “Desproteinizacion de Folin -
Wu”. El agente desproteinizante es el acido tungstico obtenido mediante la siguiente
reaccion:

Na2WO4.2H2O + H2SO4 → H WO + Na SO
2 4 2 4

B. Reaccion de color: (Reaccion de JAFFÉ)


Rotular 3 tubos de prueba como “blanco” , “estandar” , “muestra” y preparar la
siguiente bateria de tubos:

TUBO REACTIVO BLANCO ESTÁNDAR MUESTRA


Sol. estándar de creatinina - 3,0 mL -

Muestra clarificada (filtrado) - - 3,0 mL

H2O destilada 3,0 mL - -

Sol. de picrato alcalino 1:1 1,5 mL 1,5 mL 1,5 mL


(preparado en el momento)

Mezclar y agitar por inversión: dejar reposar por 10 minutos y leer a 520nm

VI. RESULTADOS

Absorbancia λóp= 520 nm 0.029 0.192 0.098

Absorbancia corregida - 0.163 0.069

Concentración (mg/mL) - 0.006 4.14x10^-4

VII. DISCUSIÓN

La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina del organismo casi exclusivamente

por filtración renal. Su determinación en suero, así como la depuración de creatinina

endógena constituyen parámetros importantes para el diagnóstico de diversas afecciones

renales. (Cétola, 2000)

La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de Jaffe) produciendo un cromógeno

rojo. La velocidad de esta reacción, bajo condiciones controladas, es una medida de la

concentración de creatinina de la muestra puesto que se comporta como una reacción

cinética de primer orden para la creatinina. Por otra parte, se ha demostrado que los

cromógenos no-creatinina que interfieren en la mayor parte de las técnicas convencionales,

reaccionan dentro de los 30 segundos de iniciada la reacción. De manera que entre los 30

segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la reacción, el incremento de color se debe

exclusivamente a la creatinina. (Perazzi, et. al., 2011)


Los valores promedios del nivel de creatinina en vacas Holstein puro de 16 a 20 meses de

edad el nivel es de 1.59 a 1.72 mg%, en vacas de 3 a 7 años de edad el nivel es de 2.49

mg%, mas posee una desviación estándar de ±0.25. (Enciclopedia Bovina)

Nuestra muestra poseía una concentración de 1.24 mg%, esto cae dentro del rango normal

para una vaca de entre 16 y 20 meses. En caso que nuestra muestra hubiera sido de una

vaca entre 3 y 7 años, nuestros niveles estarían aproximadamente 0.84 unidades por debajo

del rango medio. Esto puede deberse a que la muestra no era fresca o que al momento de

sacar la muestra, la vaca no había consumido niveles altos de creatina, dado que la creatinina

es un producto residual del metabolismo de la creatina. Si los niveles de creatinina hubieran

sido mayores a los del rango indicado en la Enciclopedia Bovina de la UNAM, esto se debería

a fallas en el sistema excretor, específicamente en los riñones, que son los órganos que filtran

esta sustancia.

El nivel de concentración de creatinina en la sangre de hombres adultos son entre 0.7 y 1.3

mg/dL, en mujeres de 0.5 a 1.2 mg/dL, en niños pequeños se aceptan valores de 0.2 a 1.0

mg/dL. Si los datos obtenidos en el laboratorio fueran de un humano se trataría de un niño.

(Henry, et. al., 1974). En caso que nuestra muestra hubiera pertenecido a sangre de un ser

humano, los niveles de creatinina estarían fuera del rango normal, por encima de este. Ello

sería un indicio de algún tipo de fallo renal, y debería tenerse precaución en estos casos.

Los valores más altos de 4 mg/dl se deben a un fallo renal importante. Puede aparecer la

creatinina elevada en sangre en: acromegalia, deshidratación, distrofia muscular, eclampsia,

glomerulonefritis, nefropatía diabética, obstrucciones renales (piedras, tumores), pielonefritis,

problemas cardiacos. Puede aparecer la creatinina disminuida en: distrofia muscular

avanzada o miastenia gravis. (Burtis & Ashwood, 2001)

VIII. CONCLUSIONES

Al desproteinizar la muestra de sangre, se debió tomar con cuidado durante el proceso del

filtrado en el cual se trabajó con una solución proveniente de la, “desproteinización de Folin-

Wu”, donde se buscó separar la creatinina de la presencia de glucosa, triglicéridos y colesterol


en la sangre oxalatada, para poder obtener una muestra incolora. Durante este metodo un

mal calentamiento y/o filtrado puede dar valores no adecuados al usar el espectrofotómetro.

IX. CUESTIONARIO

PROBLEMAS ENCARGADOS

1. Una solución aislada de E. coli da una absorbancia de 0.793 a 260 nm en una

celda de 1 cm a pH 4,5. Si el es 197, calcular la concentración en mg/mL

2. Calcule el coeficiente de extinción molar a 361 nm para la acuobalamina en


tampón fosfato 0.1 M a pH 7,0 a partir de los siguientes datos obtenidos en una
celda de 1 cm.

SOLUCIÓN [ ] * 10-5 M Io I

A 2.23 93.1 27.4

B 1.9 94.2 32.8


3. En una determinación de glucosa se obtuvieron los siguientes resultados:

Glucosa (mg%) 50 75 100 125 150 175 200 250

Glucosa

(mg/mL) 0.5 0.75 1 1.25 1.5 1.75 2 2.5

Transmitancia 92.9 89.9 86.3 84.3 81.3 78.7 73.8 70.5

Absorbancia 2.032 2.046 2.064 2.074 2.09 2.104 2.132 2.152

Factor 1 0.246

Factor 2 0.366

Factor 3 0.484

Factor 4 0.603

Factor 5 0.717

Factor 6 0.831

Factor 7 0.938
Factor 8 1.162

Factor 0.668375

promedio

- - - Fc

Transmitancia= Conc. Muestra 1 1.372 mg/ml

88.3%

Absorción 2.054

Transmitancia= Conc. Muestra 2 1.382 mg/ml

85.1%

- Absorción 2.07 -

4. Para evaluar un metabolito “X” una muestra fue sometida a dilución tomando
una parte de ella con 4 partes de agua y luego fue comparada
espectrofotométricamente con un estándar de 10 mg/mL obteniéndose las
siguientes lecturas de absorbancias: blanco = 0.023, estándar= 0.357, y muestra
0.677. Calcule la concentración de la muestra

- TUBO BLANCO TUBO ESTÁNDAR TUBO MUESTRA

Absorbancia 0.023 0.357 0.677

Absorbancia - 0.334 0.654

corregida

Concentración - 10 19.58

(mg/mL)
5. ¿Qué es factor de dilución? explique mediante un ejemplo.

El factor de dilución (FD) es un número que indica las veces que debe diluirse una solución
para obtener una de menor concentración. La solución puede tener disuelto ya sea un soluto
sólido, líquido o gaseoso. Por lo tanto, su concentración depende del número de partículas
del soluto y del volumen total V.

Ejm:

Una solución de NaCl 0,3 M se utilizó para preparar una solución diluida de NaCl 0,015 M.
Calcular el valor del factor de dilución.

El factor de dilución es 20. Esto indica que para preparar la solución diluida de NaCl 0,015 M,
hubo que diluir 20 veces la solución de NaCl 0,3 M:

FD = Ci / Cf

0,3 M / 0,015 M

20

6. ¿Qué es factor de calibración? explique mediante un ejemplo.

El factor de calibración Fc es un término que relaciona la concentración de una sustancia


con su absorbancia.

Fc= Cst/Ast

Donde con el factor de calibración se puede fácilmente determinar la concentración de una


muestra desconocida (muestra problema) si se conoce su absorbancia.

Se preparan dos soluciones de una misma sustancia a concentraciones diferentes y se


miden sus absorbancias.

Si se preparan dos soluciones de una misma sustancia a concentraciones diferentes y se


miden sus absorbancias y sus concentraciones. El factor de calibración debe ser considerado
válido, sólo bajo las condiciones particulares de la calibración, las que deben ser mantenidas
a fin que se pueda usar este factor en determinaciones futuras.
Cuando se trabaja con líquidos biológicos , como por ejemplo : sangre , orina, suero para
calcular el contenido por 100ml o por mil el resultado obtenido se multiplica por un factor
que representa la dilución de la muestra al realizar el análisis .este factor representa la
relación entre la cantidad real de una muestra usada y el volumen tomado como base.

7. Explique la preparación de la muestra de sangre para la determinación de


creatinina

Para la determinación de creatinina y de otros compuestos en sangre total, la presencia


de proteínas perturba las reacciones necesarias para su cuantificación por ello debe
realizarse la desproteinización : se logra remover las proteínas , disminuir la turbidez ,evitar
formación de espuma, evitar formación de precipitados

La creatinina está presente en el músculo ,cerebro y sangre , se sintetiza a partir de los


aminoácidos glicina , arginina y metionina , y Mg+2 y aporte de energía . se elimina
diariamente como un constituyente normal de la orina en cantidad constante para cada
sujeto . debido a su concentración constante en la sangre es de interés diagnóstico y
pronóstico en las nefropatías e insuficiencia renal . la determinación de creatinina en la
sangre es una de las principales pruebas que nos habla de la buena operatividad del riñón
,que es encargado de la depuración . los valores normales de creatinina en suero son de
0.8-1.4 mg/dL.

8. Diferencias entre la solución stock, estándar, solución de trabajo.

Solución Estándar.

Una solución estándar o disolución estándar es una disolución que contiene una
concentración conocida de un elemento o sustancia específica, llamada patrón primario que,
por su especial estabilidad, se emplea para valorar la concentración de otras soluciones,
como las disoluciones valorantes.
En nutrición clínica, una solución estándar de aminoácidos es una disolución que contiene
cantidades fisiológicas de aminoácidos esenciales y no esenciales, y están diseñadas para
pacientes con función orgánica normal
Solución Stock.
Se denomina solución stock a composiciones concentradas de nutrientes las cuales están
formuladas por sales minerales que se emplean en un medio particular debido al elevado
número de compuestos que incluyen que algunos de ellos se emplea en baja concentración
resulta más práctica , esto hace más rápida la futura preparación de medios y minimiza los
errores .
Solución de trabajo: La solución trabajo es la muestra con la cual se desarrollara la evaluación
de concentración de creatinina para determinar su concentración.

9. ¿Qué función cumple la creatinina? Escriba su fórmula


La creatinina es un compuesto orgánico generado a partir de la degradación de la creatina
(que es un nutriente útil para los músculos). Se trata de un producto de desecho del
metabolismo normal de los músculos que habitualmente produce el cuerpo en una tasa muy
constante (dependiendo de la masa de los músculos), y que normalmente filtran los riñones
excretándola en la orina. La medición de la creatinina es el modo más simple de monitorizar
la correcta función de los riñones.

Medir la creatinina del suero es una prueba simple y es el indicador más común de la función
renal. Un aumento en los niveles de creatinina de la sangre solamente es observada cuando
hay un marcado daño en las nefronas (RC). Por lo tanto, esta prueba no es conveniente para
detectar estados tempranos de enfermedad del riñón. Una mejor valoración de la función del
riñón es la prueba de aclaramiento de creatinina. La separación de creatinina puede ser
calculada con precisión usando la concentración de la creatinina del suero y alguna o todas
las variables siguientes: sexo, edad, peso, y raza según lo sugerido por la National Diabetes
Association con una recolección de orina de menos de 24 horas. Algunos laboratorios
calcularán el ClCr si está escrito en la forma de solicitud de la patología; y, la edad, el sexo,
y el peso necesarios son incluidas en la información del paciente.

Fórmula de creatinina:

10. ¿Qué papel cumplen los siguientes reactivos en la cuantificación de creatina?

10.1. Tungstato de sodio

Se utiliza para originar el ácido túngstico, que actúa como agente desproteinizante. La
desproteinización se da por medio de una desnaturalización causada por un cambio brusco
del pH. De esta forma se puede hacer precipitar fácilmente a las proteínas de la sangre y
cuantificar la concentración de creatina.

10.2. Ácido sulfúrico

También es parte de la reacciona que genera al ácido túngstico

10.3. Ácido pícrico

Es el resultado de agregar picrato alcalino a la solución con creatina. La absorbancia de este


ácido es la que se usa para la determinación indirecta de la concentración de creatina.
11. El coeficiente de extinción molar de un complejo yodo-glucógeno a 450nm es
0,20. Calcule la concentración del glucógeno en una solución de complejo en yodo
que tiene una absorbancia de 0,36, medida en una cubeta de 3cm.

BIBLIOGRAFÍA

➢ Aranzamendi Rios, Marilyn Calderón Pinto, Nadia Belén Challa, Vita Ursula Gonzalo M.,
María Del Pilar. (2016). La creatinina. 15 de setiembre 2016, de Universidad Andina
Néstor Cáceres Velasquez Sitio web: http://creatininametabolismo.blogspot.pe/
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Bioquímica. Universidad Agraria La Molina, Lima, Perú.
➢ Briceño de Ascuña, Y. (1979). Bioquímica I Laboratorio manual de trabajos prácticos.
Lima.
➢ Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM). (2009). Manual de Prácticas
Bioquímica Clínica. Recuperado de:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MANUALBIOQUIMICACLINICA_10817.pdf

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