Identificación de Bacilos
Gram Positivos
DOCENTE:
LUZ ASTRID VELASQUEZ M.
Bacterióloga.
Especialista en microbiología clínica.
EPIDEMIOLOGÍA
● Corinebacterias son flora normal de piel y
mucosas en hombres y otros mamíferos
● Han sido recuperados de garganta y conducto
auditivo ppal/
● Distribuidos ampliamente en el medio ambiente.
● Algunas especies se comportan como
patógenos oportunistas. ( C. diphteriae, C.
urealyticum, C. jeikeium, Dermobacter
hominis)
IMPORTANCIA CLÍNICA
● Su aislamiento genera confusión por ser ambientales y
por pertenecer a flora normal.
● Aislamiento de significado clínico:
● Recuperación a partir de muestras estériles
● Recuperación de muestras no estériles correctamente
recogidas y transportadas
● Aislamiento predominante en cultivo primario
● En orina : cultivo puro ( >= 10 4 ufc/ml) o cultivo
predominante ( >= 10 5 ufc/ml)
● Cultivos positivos por este aislamiento a repetición
● Observación en el gram con fuerte reacción leucocitaria
IMPORTANCIA CLÍNICA
● Causan infecciones comunitarias:
farinfitis, abscesos faringeos y periamigdalianos,
endocarditis, abscesos mamarios, prostatitis crónica,
ITU, I. piel y tejidos blandos, linfadenitis, I. cavidad oral.
● Causan infecciones nosocomiales: ITU,
I. tejidos blandos, endocarditis, I. herida quirúrgica, I. en
prótesis y catéteres, neumonía, meningitis ( derivaciones
en LCR), peritonitis ( diálisis peritoneal ambulatoria)
Corynebacterium diphteriae
● Existen portadores asintomáticos de C. diphteriae.
● Transmisión respiratoria.
● La inmunización disminuye frecuencia de la enfermedad
pero no evita colonización faringea.
● Microorganismo toxigénico, la inmunización se realiza
con toxoide.
● Individuos inmunizados pueden desarrollar difteria
clínica de menor gravedad.
PATOGÉNESIS
● C. diphteriae Difteria en
niños
● Se establece en capa
superficial de
mucosas respiratoria
y piel
● Potente exotoxina
afecta al corazón
(miocarditis), nervios
(desmielinización) y
riñones (necrosis
tubular)
IDENTIFICACIÓN
● Muestra: hisopado
nasofaríngeo. Transporte
inmediato
● Tinción : Azul de metileno.
Coloración de loeffler, Van.
Stoltemberg. Observación
de granulos
metacromáticos.
● Cultivo: agar sangre,
agares selectivos como
● DETECCIÓN DE TOXINA
agar Tinsdale, agar DIFTÉRICA
cistina telurito (CTBA) POR MEDIO DE ELISA
C. jeikeium
● Causa infecciones NOSOCOMIALES
● Afecta paciente con dispositivos
biomédicos, con neutropenia, sida o
cáncer.
● Coloniza piel de paciente hospitalizado y a
menudo se asocia a septicemia
endógena.
● También se transmite entre pacientes
hospitalizados.
C. urealyticum
● Se recupera de orinas alcalinas, donde
favorece la formación de cristales de
estruvita.
● Afecta ancianos inmunosuprimidos,
pacientes con manipulación de vía
urinaria.
● Causa: cistitis incrustada, endocarditis,
infección de heridas, neumonía. No crece
en los medios comunes. DXN. Clínico.
Arcanobacterium
● Ppales. Especies: A. haemolyticum, A.
pyogenes, A. bernardiae
● Catalasa - , B-hemolíticos, crecimiento a las 48
horas, a 37 C, en CO2
● Cuadros clínicos: faringitis, abscesos
periamigdalianos y faringeos en pacientes con
enfermedad periodontal (colonia rugosa)
● I. en heridas, ulceras y celulitis (colonia lisa)
Listeria Spp.
● 6 especies dentro de este genero: L. ivanovii, L.
innocua, L. welshiemeri, L. seeligeri, L. grayi, L.
monocytogenes (importancia clínica ser humano).
● Es ambiental, está en la flora fecal de animales. Puede
multiplicarse a 4 C, contamina zona de preparación de
alimentos.
● Transmisión listeriosis : alimentos contaminados,
infección vertical, infección cruzada en UCI neonatos.
● Patogénesis : Penetra epitelial de sistema digestivo,
invade macrófagos esplénicos y hepáticos, llega a SNC
y útero de mujeres embarazadas
L. monocytogenes
● Cuadros clínicos :
1. Tropismo por SNC: meningitis,
encefalitis,septicemia.
2. Atraviesa placenta: amnionitis, aborto,
parto prematuro, mortinato, I. en el feto
3. Otros cuadros: endocarditis, artritis,
osteomielitis, endoftalmitis.
Existen portadores asíntomáticos que
excretan Listeria Spp. en materia fecal
IDENTIFICACIÓN
● MUESTRA: LCR, hemocultivos, placenta,
líquido amniótico, absceso cerebral,
aspirado gástrico, alimentos, endometrio.
● GRAM: BGP, robusto y pequeño
● CATALASA : +
● Movilidad a 25 C: +, en sombrilla
● VP-RM : +
● CAMP + : L. monocytogenes
Erysipelothrix
● E. rhosiopathiae, E. tonsillarum
● Representa zoonosis y enfermedad ocupacional en
veterinarios, pescadores, carniceros. Reservorio cerdos,
patos y peces.
● Cuadro clínico: celulitis. Con diseminación en
inmucomprometidos.
● DXN: - Biopsia de piel ( moo. Se ubica en tejido
subcutáneo). Hisopado no tiene utilidad!!!
- GRAM en biopsia : BGP alargados y delgados
- Contexto epidemiológico.
Erysipelothrix
● Cultivo : debe incubarse hasta por 7 dias.
● Crece en 5 % CO 2, a 37 C, en agar
sangre y agar chocolate, en ambiente
aerobio.
● Colonias puntiformes, pigmento verde
después de 48 h de incubación.
● Catalasa negativa, Identificación con
métodos automatizados ( API, VITEK).
BACILOS GRAM POSITIVOS FORMADORES
DE ESPORAS: Bacillus
● Nueva clasificación (análisis filogenético):
● Alicyclobcillus
● Paenibacillus
CATALASA +
● Brevibacillus
MÓVILES, PERÍTRICOS
● Aneurinibacillus ANAEROBIOS FACULTATIVOS
● Virgibacillus ESPORULADOS
● Gracilibacillus MESÓFILOS
● Salibacillus ALGUNOS SICRÓFILOS Y
● Geobacillus TERMÓFILOS
● Ureibacillus
ESPORULACIÓN
● Las bacterias esporuladoras en condiciones favorables se
reproducen indefinidamente en su forma vegetativa:
germinación.
● Las esporas presentan gran resistencia al calor, radiaciones y a
los productos químicos. Problema salas de cirugía, apósitos y
vendas.
● Las bacterias formadoras de esporas, se caracterizan por la
posición de la endoespora en la célula madre antes de ser
liberada.
● La espora pude ser central, terminal o sub terminal, y la célula
original puede o no hincharse para acomodar la espora.
GÉNERO BACILLUS
Contiene 70 sp.
Los más conocidos son:
B. subtilis, B. anthracis, B.
cereus, B. licheniformis,
B. megaterium, B. pumilus, B.
sphaericus, y el B.
thuringiensis.
BACILLUS ANTHRACIS
MORFOLOGÍA
● Bacilo Gram. positivo de gran tamaño (1- 1.5 um
por 4 a 10um).
● Inmóvil, encapsulado, dispuesto en cadenas y
que forma esporas ovales.
Bacillus anthracis
● Es el agente etiológico del ÁNTRAX
● Ántrax es actualmente endémico en :
Asia, Sur América, Australia, Norte
América, África y europa.
● Se considera zoonosis. Enfermedad en
humanos similar a la del ganado y
hervíboros
● Las esporas son muy resistentes !!!
(meses y decadas)
PATOGÉNESIS
● Tres rutas para entrar al ser humano:
1. Inhalación : esporas. Bronconeumonía aguda,
mediastinitis y septicemia.
2. Cutánea : lesión macular roja que se desarrolla a
vesícula con necrosis. Carbunco, linfadenitis,
septicemia.
3. Gastrointestinal : vómito, diarrea, sangrado intestinal,
septicemia.
Las tres formas pueden llevar a septicemia, luego a
meningitis
Purulenta y posteriormente a la muerte
IDENTIFICACIÓN
● Es no móvil.
● No fermentadores de: xylosa, manitol,
lactosa.
● Fermentadores de: glucosa, sucrosa y
maltosa
● Reduce nitratos a nitritos.
● Voges proskauer positivo.
● Sensible a la penicilina.
DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO
Cultivo Bacillus anthracis
● En AS de carnero las colonias
tienen aspecto de cabellera de
medusa.
● Cada colonia es una hilera
continua de bacilos con
apariencia de vidrio pulido,
alcanzando un diámetro de
3mm, después de 18 a 24
horas de incubación.
● Produce hemólisis ligera.
● Para que las esporas se
produzcan se requiere de
oxígeno y la temperatura
MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD
EN EL LABORATORIO
● El aislamiento y la ID. Presuntiva de B. anthracis
puede ser realizada con seguridad en un
laboratorio de rutina de microbiología.
● El trabajo debe ser realizado en cabina de
bioseguridad.
● La vacunación no es requerida para el manejo
mínimo de el organismo.
● Someter al autoclave las muestras y los cultivos
ACTINOMICETOS AEROBIOS
● mas de 40 géneros, 16 de importacia clínica humana y veterinaria
● Actinomadura
● Corynebacterium
● Dermatophilus
● Gordonia
● Mycobacterium
● Nocardia
● Rhodococcus
● Streptomyces
● Saccharomonospora
● Saccharopolyspora
● Thermoactinomyces
● Thropheryma
● Tsukamurella
● Amycolatopsis
● Micromonspora
● Nocardiopsis
Rhodococcus
● R. equi, principal especie en el ser humano
● Ampliamente distribuido en el ambiente
(estiercol, suelo, agua de mar)
● Oportunista raro que afecta a pacientes
gravemente inmunocomprometidos y VIH
positivos
● Cuadros clínicos: neumonía granulomatosa,
abcesos en SNC.
● BGP, no esporulado, inmóvil. Colonia lisa,
irregular y mucoide. Difícil identificación!!!
Nocardia
BGP, FILAMENTOSOS Y RAMIFICADOS
PPALES Sp: N. asteroides y N.
brasiliensis
SAPROFITO AMBIENTAL, INFECCIÓN POR
INOCULACIÓN DIRECTA O INHALACIÓN.
CAUSA MICETOMA, INFECCIÓN PULMONAR
Y DISEMINADA
EN CULTIVO: Crece en medios comunes.
Colonias cerebriformes (cirspeta).
Necesita de dos a tres semanas de
incubación
Actinomicetoma:
Enfermedad progresiva,
Crónica y destructiva de
Tejidos blandos
Agentes etiológicos:
Nocardia
Actinomadura
Streptomyces
Granulo en biopsia de