CROMATOGRAFÍA DE GASES ACOPLADA A ESPECTROMETRÍA DE MASAS
Y CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN (HPLC)
Duarte L1
Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia – Programa de Química,
Facultad de Ciencias, Av. Central del Norte 39-115, Tunja –Colombia
1. ABSTRACTC
In this practice I go to him end the foundation of gas chromatography
connected to espectrofotometría of masses and chromatography liquidates of
high resolution HPLC, being these two technologies of separation very seemed
in his foundation but different in the form in which they remove I finish in the
practice and in the type of sample that is analyzed, beside being very important
and indispensable for the chemical analysis
2. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas
La cromatografía de gases es una técnica utilizada para la separación de
compuestos en una muestra
Los compuestos pasan a través de la columna y estos registran un tiempo de
retención, dependiendo del tamaño de la molécula mayor o menor será su tiempo
de retención a mayor masa molecular mayor tiempo; este tiempo es representado
como señales en una gráfica (cromatógrafo)
Para los dod equipos observados en la practica se tienen los siguientes
parámetros
Fase estacionaria: Columna en espiral cromatografica ,
empaquetada con (sílice o alúmina)
Fase móvil: Gas de arrastre en este caso (Helio) ya que es un gas
inerte
Muestras que puedo analizar : muestras liquidas (compuestos
volátiles), también separar gases con un volumen de 20µL
Esta técnica no es destructiva pero la espectrometría de masas si es
destructiva
En este laboratorio tenemos a la cromatografía de gases en el equipo (varian
GAS CHROMATOGRAPH – 3400 )
En el equipo podemos encontrar un zona de carga e inyección, jeringas en
unidades de µL, un manómetro que me mide las presiones a la cual la muestra
está pasando por el equipo, una columna, un horno que genera un calentamiento
y controla la temperatura de la columna, un detector ;Finalmente un cromatografo
que me registra las señales
En el segundo equipo de cromatografía de gases (VARIAN CP- 3800 GAS
CHROMATOGRAPH)
Este equipo también cuenta con una zona de carga e inyección , jeringas, un
medidor de presión, un horno y una fase estacionaria con una columna en espiral
mas delicada y delgada de 15mL de longitud , 1,5µ𝑚 , un detector ,cromatografo y
acoplamineto a un espectrómetro de masas.
Este cromatógrafo de gases lo puedo acoplar a la espectrometría de masas para
no solo separar el compuesto sino también para identificar los compuestos, en
esta incide un rayo de electrones sobre la muestra y lo descompone en sus grupos
funciónales
Cromatografia liquida de alta resolución (HPLC)
Al igual que las demás cromatografías esta nos permite la separación de
compuestos presentes en una mezcla , la diferencia de esta a las otras
cromatografías esta nos permite separar compuestos de alta masa molecular
como agroquímicos , proteínas , hormonas ,fármacos ,además de enantiomeros
La muestra es cargada en el inyector con una jeringa y inyectada al equipo esta es
bombeada por una bomba que transporta la sustancia cuando pasa por la
columna y el detector ,seguido de la inyección pasa por una fase estacionaria
(columna) y por un detector ya sea (ultravioleta visible , indicador de refracción ,
entre otros ) y finalmente pasa por el cromatografo donde se registran las señales
Fase móvil: solventes contenidos en reservorios estos tienen que ser muy
puros (soluciones Buffer para mantener el pH , H2O tipo 1 grado HPLC) ,
estos son des-gasificados para no alterar la muestra ni dañar el equipo
Fase estacionaria :Columna HPLC con empaquetamiento con sílice
A continuación se comparan los 3 equipos diferentes vistos en el laboratorio
EQUIPO 1 EQUIPO 2 EQUIPO 3
Laboratorio Alimentos
Biocatálisis (RN) – Escuela
Localización LN311
de Química
Fotografía
Marca comercial HP KNALIER Agilent Technologies
Referencia hp HEWLETT KNALIER Agilent Technologies
PACKARD SERIES 1200 Series
1100
Número de 3 3 5
módulos
Tipo de Detector UV-VIS , INDICE UV-VIS , INDICE UUV-VIS
REFRACCIÓN REFRACCIÓN
Accesorios HORNO , INDICE HORNO , INDICE COMPUTADOR
REFRACCION , REFRACCION (SOFTWARE )
COMPUTADOR ,COMPUTADOR
(SOFTWARE ) (SOFTWARE)
Partes principales BOMBA TIPO PISTON BOMBA BOMBA
, HORNO RESERVORIOS ,DEAGASIFICADOR
RESERVORIOS, COLUMNA HORNO,
COLUMNA , DETECTO RESERVORIOS,
DETECTOR LAMPARA LAMPARA COLUMNA,
ULTRAVIOLETA ULTRAVIOLETA DETECTOR ,
LAMPARA
ULTRAVIOLETA
Columnas 1 COLUMNA 2 COLUMNA C-18 Y 1 COLUMNAS
disponibles H
Tipo de bomba TIPO PISTON BOMBA BOMBA
(PERISTALTICA) ISOCRATICA CUATERNARIA
Sistema para MANUAL SISTEMATICO SISTEMATICO
automezclado de
fase móvil
Volumen de 20µL 20µL- 100µL 20µL
inyección
Tipo de inyector MANUAL MANUAL MANUAL
CONLUSION
Se determinaron las diferencias primero de cromatografía de gases acoplada a
espectrometría de masas con HPLC y segundo la comparación, fundamento y
practica de los tres equipos de HPLC observados en los laboratorios
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.
Datos tomados de la clase teórica y equipos de la Universidad Uedagógica
y Tecnológica de Colombia
