UNIVERSIDAD NACIONAL SAN CRISTÓBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA Y METALURGIA

ESCUELA DE FORMACIÓN PROFESIONAL DE INGENIERÍA QUÍMICA

QUÍMICA ORGÁNICA I (QU-144)

PRÁCTICA N°5
CROMATOGRAFÍA DE CAPA DELGADA Y CROMATOGRAFÍA DE PAPEL

PROFESOR DE TEORÍA : Ing. Alcira Córdova Miranda

PROFESOR DE PRÁCTICA : Ing. Alcira Córdova Miranda

ALUMNOS :
 FERNÁNDEZ NAJARRO, Roberto Neyder
 QUISPE CORONADO, Dino
 LUQUE ESPINO, Diana Carolina
 PALIZA YARANGA, Soren Laleshka

DÍA DE PRÁCTICAS : Martes 10 a.m. – 1 p.m.

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA : 23 – 10 – 2018
FECHA DE ENTREGA DEL INFORME : 30 – 10 – 2018

AYACUCHO – PERÚ
2018
CROMATOGRAFÍA DE CAPA DELGADA Y CROMATOGRAFÍA DE PAPEL

I. OBJETIVOS
 Conocer y comprender los fundamentos de la cromatografía.
 Utilizar las diferentes técnicas cromatográficas para identificar y purificar
compuestos orgánicos.
 Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y que
puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).
 Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica).
En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas.
 Comparar la cromatografía con los procesos unitarios utilizados
anteriormente en cuanto a la eficiencia como métodos de separación y
purificación.

[Link]ÓN BIBLIOGRÁFICA
¿Qué es la Cromatografía?

La cromatografía es una de las técnicas más usadas para separar los distintos
componentes de una mezcla para su posterior estudio. Esta forma de separar
componentes de una mezcla se llama separación cromatográfica.

La cromatografía se aprovecha del movimiento de una mezcla por un soporte, por

ejemplo, papel o tela. Los elementos de la mezcla se mueven por el soporte a
diferentes velocidades separándose. Unos componentes se mueven por el soporte
más fácilmente y otros se detienen, esto hace que la mezcla se separe en bandas
de diferentes componentes.

La cromatografía se utiliza tanto para lograr la separación de los componentes de

una mezcla como para medir la proporción de cada elemento en la mezcla.

La ciencia que se encarga de estudiar los diferentes componentes de una

sustancia es la química analítica, por lo que la cromatografía es una técnica dentro
de la química analítica.

El soporte puede ser papel, un gas, otro líquido, etc. Es un método físico de
separación de componentes. Luego veremos porqué se separan, las fases y los
tipos de cromatografías.
 Fases de la Cromatografía
Las cromatografías se hacen en dos fases. Una estática y otra móvil.

En la fase estática o estacionaria, la mezcla se coloca sobre un soporte fijo, por

ejemplo papel. En esta fase tenemos ya la mezcla sobre un soporte, en nuestro
ejemplo un papel.
En la fase móvil se hace mover otra sustancia sobre la mezcla que ya está sobre
el soporte de la fase estática, por ejemplo un líquido que se mueve por el papel
con la mezcla. En la fase móvil empezará el proceso de separación de los
componentes de la mezcla al moverse a distintas velocidades por el líquido los
distintos componentes de la mezcla sobre el papel.
Tipos de Cromatografía

Aunque hay muchas y variadas técnicas cromatográfica, el objetivo de todas es

separar las sustancias que forman una mezcla y enviarlas secuencialmente un
detector para que las determine y cuantifique.

Todas se basan en el mismo fenómeno: permitir que las sustancias que forman
una mezcla entren en contacto con dos fases (un líquido y un gas, un sólido y un
líquido, etc.). Una de las fases es estática (no se mueve) y tenderá a retener las
sustancias en mayor o menor grado; la otra, fase móvil, tenderá a arrastrarlas.
Cada sustancia química tiene distinta tendencia a ser retenida y a ser arrastrada.
Dependiendo de la naturaleza de la fase estática y de la fase móvil se pueden
distinguir distintos tipos de cromatografía.
a) Cromatografía sólido-líquido: La fase estática o estacionaria es un sólido y la
móvil un líquido.

b) Cromatografía líquido-líquido: La fase estática o estacionaria es un líquido

anclado a un soporte sólido.

c) Cromatografía líquido-gas: La fase estática o estacionaria es un líquido no

volátil impregnado en un sólido y la fase móvil es un gas.
d) Cromatografía sólido-gas: La fase estacionaria es un sólido y la móvil un gas.

Según el tipo de interacción que se establece entre los componentes de la

mezcla y la fase móvil y estacionaria podemos distinguir entre.

a) Cromatografía de adsorción: La fase estacionaria es un sólido polar capaz de

adsorber a los componentes de la mezcla mediante interacciones de tipo polar.

b) Cromatografía de partición: La separación se basa en las diferencias de

solubilidad de los componentes de la mezcla en las fases estacionaria y móvil, que
son ambas líquidas.
c) Cromatografía de intercambio iónico: La fase estacionaria es un sólido que
lleva anclados grupos funcionales ionizables cuya carga se puede intercambiar por
aquellos iones presentes en la fase móvil.

d) Cromatografía en capa fina (CCF): En la cromatografía en capa fina (CCF) la

fase estacionaria consiste en una capa delgada de un adsorbente (como por
ejemplo gel de sílice, alúmina o celulosa) depositada sobre un soporte plano como
una placa de vidrio, o una lámina de aluminio o de plástico.
La CCF es una técnica analítica y tiene como objetivo el análisis de una mezcla de
componentes.

El proceso es similar a la cromatografía de papel con la ventaja de que se

desarrolla más rápidamente, proporciona mejores separaciones y se puede elegir
entre diferentes absorbente. La CCF es una técnica estándar en el laboratorio de
química orgánica. Debido a su simplicidad y velocidad, la CCF se utiliza a menudo
para monitorizar las reacciones químicas y también para el análisis cualitativo de
los productos de una reacción, puesto que permite conocer de manera rápida y
sencilla cuántos componentes hay en una mezcla.
III. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS EMPLEADOS
• Papel Whatman
• Placas de aluminio
• Tubo capilar
• cámara cromatográfica
• Luna de reloj
• Mechero de bunsen
• Probeta graduada
• Pipeta
• Lápiz
• Regla

ELUYENTES

• Etanol
• Cloruro de metileno
• Cloroformo
• acetato de etilo
• Metanol
• colorante

[Link] EXPERIMENTAL.
Ensayo N°1. Cromatografía de capa delgada (CCD), o cromatografía de
capa fina (CCF).
a) Separación de colorantes

Desarrollo de la cromatografía: Disponer de cromatofolios de 2x6 cm

aproximadamente y marcar ligeramente con lápiz una línea base a una
distancia de 0,5 cm del borde inferior de la placa. Preparar un tubo capilar de
manera tal que uno de sus extremos quede en punta, (estirar un tubo capilar
en el mechero). Aplicar una muestra de colorantes con el capilar preparado
sobre la línea base de la placa cromatográfica (hacer un punto con el lápiz en
el medio, para aplicar la muestra), procurando que la aplicación no se corra
más de un milímetro de diámetro. Dejar secar el disolvente de la muestra
aplicada e introducir la placa en una cámara cromatografía que contenga el
 eluyente (se puede usar un vaso de precipitados de 100mL) y taparlo con una
luna de reloj. Utilizar como eluyente cualquiera de los siguientes disolventes
que contenga como eluyente cualquiera de los siguientes disolventes:
metanol:agua 3:1 (cada grupo de trabajo debe utilizar un disolvente diferente y
comparar, anotar de todos los grupos). Dejar subir o “correr” el disolvente
hasta que llegue a 0,5 cm del extremo superior de la placa. Sacar la placa de
la cámara, marcar con el lápiz el frente del eluyente y dejar secar. Marcar el
contorno de las manchas y hacer un dibujo de la placa para presentar los
resultados en su informe. Calcular el Rf de cada mancha.

b) Separación de los componentes del aceite esencial de anís

Repetir el procedimiento anterior (desarrollo de la cromatografía), en lugar del

extracto de espinaca poner en la placa aceite esencial de anís, disuelto en
diclorometano y utilizar como eluyente benceno: diclorometano (4:1), (2:1),
(1,1) y (1:3). Cada grupo de trabajo debe utilizar un sistema de solvente
diferente y comparar, anotar de todos los grupos. Observar las placas en la
lámpara ultravioleta, marcar las manchas con un lápiz y dibujar. Luego revelar
con agua: ácido sulfúrico (1:1), observar y dibujar la placa para su informe.
Calcular el Rf.

Ensayo N°2. Cromatografía de capa delgada (CCD), o cromatografía de

capa fina (CCF).
Utilizar papel Whatman N°1, cortado aproximadamente de 2x8 cm, marcar un
línea con un lápiz a 1cm del borde inferior, aplicar la muestra (mezcla de
aminoácidos) con un tubo capilar, ponerlo en la cámara cromatográfica que
contiene el eluyente (n-butanol: ácido acético: agua [Link]), cubrir con una
luna de reloj. Cuando la fase móvil llegue a 1cm del borde superior, retirar el
papel, marcar el frente del eluyente, dejar secar el papel, revelar con
ninhidrina. Calcular el Rf.

[Link]

ENSAYO N°1 a
• En la separación del colorante se llegó a observar que el solvente empieza
a ascender de manera continua hasta llegar a la parte superior de la placa.
En este ensayo se ve que los alcoholes son más efectivos.
• Al observar el papel donde hemos hecho la cromatografía, vemos dos
bandas o zonas, que corresponden a los distintos pigmentos. Según su
 grado de solubilidad con el eluyente se reconocen estas bandas y en este
orden:
 Pigmento a
 Pigmento b

ENSAYO N° 1 b
 En el ensayo no se pudo observar a simple vista la banda o zona, para lo
cual se necesita rociar con el ácido sulfúrico y se lleva a un equipo
revelador, en cual logramos observar tres bandas o zonas.

VI. DISCUSIÓN DE RESULTADO

 Se ha observado que el Rf obtenido con los distintos eluyentes varía, esto
nos muestra la efectividad de los diferentes eluyentes utilizados. En el
ensayo de separación de pigmentos de la espinaca se llega a la conclusión
de que los alcoholes son buenos eluyentes.
 Los cálculos que realizamos son a base de la observación en la práctica.

ENSAYO N°1 CCP Y CCF

a) Separación de colorantes
En este ensayo los Rf varían porque se utilizan eluyentes diferentes y
cada eluyente tiene una manera distinta de hacer ascender al soluto.
b) Separación de componentes del aceite esencial de anís.
En este ensayo de anís se obtuvieron Rf distintos, esto se debe a que la
proporción de (benceno: diclorometano) utilizado en el ensayo fueron
diferentes.
ENSAYO N°2 Cromatografías de papel.
En la cromatografía de papel el Rf hallado es único porque solo se forma una
figura en el papel whatman y no es como en los otros ensayos en que se
pueden hallar 3 Rf en un solo ensayo.
VII.CÁLCULO
ENSAYO N°1 a

ENSAYO N° 1 b
VIII. CONCLUSIONES
 El pigmento mayoritario fue zona a.
 La cromatografía es la técnica más eficiente al compararla con
destilaciones, cristalización, o extracciones, esto porque es aplicable a la
gran mayoría de las sustancias.
 La cromatografía en columna, nos permite usar una gran cantidad de la
sustancia a separar, y la cromatografía en capa fina, nos permite realizar
separaciones múltiples, al mismo tiempo, y sometidas al mismo proceso
separativo.
 Por medio de esta práctica, logramos comprender las técnicas de la
cromatografía.

[Link]

 Es importante que la línea de extracto en el papel no quede sumergida en

el eluyente.
 Una vez puesta la placa, rápidamente tapar la cámara cromatográfica con
una luna de reloj.
 Se recomienda que el eluyente no debe tocar la marca de lápiz hecha en
la placa.
 La placa debe estar visible para observar a que rapidez asciende y para
extraerlo cuando esté cerca de la marca hecha en la parte superior de la
placa.
 Tener cuidado al introducir la placa en la cámara cromatográfica ya que de
eso depende la eficiencia del experimento.

[Link]

1. ¿Qué significa cromatografía? Es un Método de análisis que permite la

separación de gases o líquidos de una mezcla por adsorción selectiva,
produciendo manchas diferentemente coloreadas en el medio adsorbente;
está basado en la diferente velocidad con la que se mueve cada fluido a
través de una sustancia porosa.

2. ¿Qué es un cromatograma? Un cromatograma es el resultado gráfico de la

cromatografía. En el caso de separación óptima, los diferentes picos o
manchas del cromatograma se corresponden a los componentes de la
mezcla separada.
3. ¿Cuáles son los adsorbemos más utilizados en cromatografía de capa
delgada?

La cromatografía en capa fina es una técnica cromatografía que utiliza una

placa inmersa verticalmente. Esta placa cromatografía consiste en una fase
estacionaria polar (comúnmente se utiliza sílica gel) adherida a una
superficie sólida. La fase estacionaria es una capa uniforme de un
absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio,
aluminio u otro soporte. Para realizar la CCF, se debe apoyar la placa
cromatografía sobre algún recipiente o cámara que contenga la fase líquida
de aproximadamente un centímetro (la distancia entre el principio de la
placa y la muestra que se desea analizar).

4. ¿Qué es un eluyente?

Eluyente es la fase móvil que atraviesa la columna. Relativo a la

capacidad de una sustancia para limpiar o diluir.

5. ¿Qué es un revelador?

Los reveladores cromatográficos se usan en cromatografía de capa fina o

TLC. En esta técnica se coloca la muestra a analizar (una gota) sobre una
placa de sílica-gel. Esta placa se introduce verticalmente en un vaso donde
hay un disolvente (o una mezcla de disolventes), de forma que el disolvente
no toque la muestra. La sílica de la placa ira absorbiendo el disolvente
(capilaridad) y la muestra también subirá por la placa. La altura que alcance
la muestra dependerá del disolvente empleado (su polaridad) y de que se
componga la muestra. Normalmente las muestras están compuestas de
varias cosas, de forma que se obtienen una serie de manchas a distintas
alturas. Para identificar las muestras se usa el Rf que consiste en medir y
dividir la altura que ha alcanzado la mancha entre la altura que ha alcanzado
el disolvente y hay que decir siempre que disolvente has utilizado.

6. En que consiste la cromatografía de columna.

En la cromatografía de columna las moléculas de una mezcla son separadas
en base a la afinidad de las moléculas por la fase estacionaria o por la fase
móvil. Si una molécula A tiene más afinidad por la fase estacionaria que la B,
B bajará más rápido que A. Existen muchos tipos de cromatografía de
columna.
 7. Cuáles son las ventajas y desventajas de la cromatografía con respecto
a las otras técnicas de separación y purificación conocidas en práctica
anteriores.
• Las ventajas, son que se puede usar tanto para cualificar como para
cuantificar sustancias.
• Desventajas, a medida que el uso lo requiera, la cromatografía usa
aparatos muy caros, que requieren de entrenamiento especializado.

8. ¿Cuáles son las aplicaciones más útiles de la cromatografía de papel?

La cromatografía en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios

para realizar unos análisis cualitativos ya que pese a no ser una técnica muy
potente no requiere de ningún tipo de equipamiento.

La fase estacionaria está constituida simplemente por una tira de papel filtro.
La muestra se deposita en un extremo colocando pequeñas gotas de la
solución y evaporando el disolvente. Luego el disolvente empleado como
fase móvil se hace ascender por capilaridad. Luego se coloca la tira de papel
verticalmente y con la muestra de abajo dentro de un recipiente que contiene
fase móvil en el fondo.

Después de unos minutos cuando el disolvente deja de ascender o ha

llegado al extremo se retira el papel y se deja secar. Si el disolvente elegido
fue adecuado y las sustancias tienen color propio se verán las manchas de
distinto color separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el
papel se somete a procesos de revelado.

Hay varios factores de los cuales depende una cromatografía eficaz: la

elección del disolvente y la del papel de filtro.

XI. BIBLIOGRAFÍA

Neysi. Definición de cromatografía. Recuperado el 28 de octubre de 2018,

de: [Link]
Vergara, N. Extracción de pigmentos de espinaca. Recuperado el 28 de
octubre de 2018, de: [Link]
pigmentos en los colorantes.