Mantenimiento y conservación de cultivos Microbianos.
Yenifer Samary Gonzalez Gomez (1006476801), Maria Fernanda Barrera Vera (1094277745), Oriana
Geraldíne Capacho Melo (1010126277), Edinson Yesid Mape Torres ().
Laboratorio de Citología Microbiana, Grupo A, Departamento de Ciencias Básicas-facultad de
microbiología, Universidad de Pamplona.
RESUMEN: En la actualidad las potencialidades de los microorganismos son explotadas en diversos sectores, ahí
la importancia de contar con colecciones bien conservadas que cumplan las premisas de un buen proceso de
conservación; que el cultivo a conservar sea puro, evitando que se produzcan contaminaciones durante el proceso de
conservación; que durante el tiempo de conservación sobrevivan al menos el 70-80% de las células y que estas células
permanezcan genéticamente estables. Hasta la fecha se han descrito diversos métodos de conservación, con los cuales
se trata de mantener el cultivo viable y con un mínimo de cambios genéticos, lo más cercano posible al aislamiento
original. En este trabajo se discuten los principios, ventajas y desventajas de cada uno de ellos y las posibilidades de
instrumentación en los diferentes laboratorios de acuerdo a las posibilidades económicas del mismo y a las
características del microorganismo, lo que lo convierte en un material de consulta primaria para el entrenamiento del
personal con escasa o ninguna formación al respecto. 1
ABSTRACT: Currently, the potentialities of microorganisms are exploited in various sectors, hence the importance
of having well-preserved collections that meet the premises of a good conservation process; that the crop to be
conserved is pure, avoiding contamination during the conservation process; that during the time of conservation
survive at least 70-80% of the cells and that these cells remain genetically stable. To date, several conservation
methods have been described, with which the aim is to keep the crop viable and with a minimum of genetic changes,
as close as possible to the original isolation. This paper discusses the principles, advantages and disadvantages of
each of them and the possibilities of instrumentation in different laboratories according to the economic possibilities
of the same and the characteristics of the microorganism, which makes it a primary reference material for staff
training with little or no training in this regard.
Palabras Claves: Conservación, Cultivo Puro, Mantenimiento
número y valor de los cultivos, costo, suministro y
transporte de cepas, así como la frecuencia del uso
1. INTRODUCCIÓN:
de los cultivos.2.3
Desde tiempos remotos los microorganismos han
sido empleados como materiales esenciales de El método de conservación que se elija debe
trabajo en la obtención de medicamentos garantizar la supervivencia de al menos el 70 % de
(antibióticos, vitaminas y aminoácidos), las células por un período considerable de tiempo,
elaboración de alimentos (pan, queso, leche, de forma tal que la población sobreviviente se
bebidas y licores) y fabricación de solventes y asemeje a la original como sea posible, conserve
reactivos, entre otras aplicaciones. El creciente uso las propiedades de importancia de los cultivos y
de estos materiales biológicos en la biotecnología minimice la ocurrencia de los eventos genéticos.
y la protección medioambiental han fortalecido la De igual manera debe reducir al mínimo el riesgo
necesidad de mantener los cultivos microbianos de de contaminación y permitir que la pureza del
manera que las propiedades que los hacen cultivo permanezca inalterable.
importantes permanezcan estables. Clasifican en la primera de estas categorías la
Con frecuencia la elección de la técnica más congelación (a –70 °C y –196 °C) y la liofilización
adecuada para conservar cultivos microbianos como técnicas que minimizan al máximo el riesgo
resulta difícil, pues deben tomarse en de cambio genético en las células y las mantienen
consideración los criterios de viabilidad y pureza viables por 10 años o más, ventajas que han
de las cepas, cambios poblacionales y genéticos, condicionado su extensa utilización para conservar
disímiles materiales biológicos (cultivos de
1
ARTICULO
hongos, bacterias y levaduras, algas, suero, células Politécnico Nacional. Escuela Nacional de Ciencias
sanguíneas, entre otros) y que sean reconocidas Biológicas. 2000:
como técnicas de elección. El elevado costo de los 3. Floccari M. Métodos de conservación de cultivos
equipos que emplean estos métodos dificulta su bacterianos. Rev Arg Microbiol. 1998.
implementación en muchas instituciones, las que
en ocasiones hacen uso del servicio de
mantenimiento y conservación mediante estos, los
cuales brindan colecciones de cultivos
reconocidas. A mediano plazo, es el término que
agrupa las técnicas con las que se logran mantener
la viabilidad de los cultivos entre 2 y 5 años. Se
destacan en este grupo la desecación en diferentes
soportes (arena, sílica gel, perlas de vidrio) donde
la paralización del crecimiento se produce por
eliminación del agua disponible, así como el
almacenamiento en tierra, parafina líquida y la
suspensión en agua estéril. La resiembra periódica
es una técnica que permite la supervivencia de los
cultivos en cortos períodos de tiempo, por eso se
reconoce como un método de conservación a corto
plazo. Se basa en transferir el cultivo del medio
seco a uno fresco proporcionándole las
condiciones óptimas de crecimiento, lo que
condiciona el elevado riesgo de contaminación y
variabilidad de las características de las cepas, las
cuales constituyen sus principales desventajas. 2,3
Por último, es frecuente encontrar que una técnica
de preservación resulte más efectiva para un grupo
microbiano que para otro, lo que indica que
además de considerar los aspectos anteriores es
necesario revisar la literatura disponible sobre los
microorganismos en cuestión y las alternativas de
mantenimiento utilizadas, y adecuarlas a la
situación real de la organización. Podemos
entonces resaltar que no existe una técnica
universal para conservar adecuadamente todos los
microorganismos.
REFERENCIAS:
1. Arencibia D, Gámez R, Rosario L. Métodos
generales de conservación de microorganismos. Cuba:
Centro de Productos Naturales (CPN, CNIC), Centro de
Química Farmacéutica (CQF) 2008
2. Castro G, Hernández JT, Aquino C. Manual sobre
conservación de microorganismos. México: Instituto
