“Año del Diálogo y la Reconciliación

Nacional”
Universidad Nacional Del Piura
Facultad de Ciencias de la Salud
Escuela profesional de Medicina Humana

Nombres y Apellidos:
Héctor David Zapata Vilcherrez

Materia:
Estructura Función Celular y Tisular II

Tema:
Laboratorio No11
“Proteinas Totales y Fraccionadas”

Profesor:
Dra. Violeta Morin Garrido
Dr. Holguin

Ciclo de Estudios:
III Ciclo

Fecha de Entrega:
24 de julio del 2018
 LABORATORIO N°11

PROTEÍNAS TOTALES Y FRACCIONADAS.

Determinación de proteínas totales albuminas y globulinas.

Objetivo: el alumno conozca un método de análisis y la importancia de su

síntesis y funciones y el papel del hígado.
SIGNIFICACIÓN CLINICA
La albúmina se sintetiza mayoritariamente en el hígado y es la principal proteína
que ejerce presión oncótica en los vasos sanguíneos para regular el intercambio
de agua entre los vasos y los tejidos. La albúmina también tiene una importante
función de transporte para muchas sustancias y participa en el crecimiento y
reparación de tejidos.
Las globulinas se sintetizan en diferentes partes del cuerpo, como hígado o
sistema inmune, y entre ellas destacan proteínas de transporte y anticuerpos, las
globulinas sintetizadas por el hígado son las alfa y beta las gammaglobulinas son
sintetizadas por el sistema inmune.
La albumina se mide principalmente como indicativo de posibles problemas en
el hígado o en los riñones, para diagnosticar déficits nutricionales o para
investigar las causas de edemas, incluyendo edema pulmonar.
Si los valores de globulinas totales se salen fueran de los rangos normales, se
suelen determinar las diferentes fracciones de globulinas por separado (alfa-1,
alfa-2, beta y gamma) mediante electroforesis. La concentración exacta de cada
tipo de globulinas ofrece información de diagnóstico relevante sobre diversas
enfermedades, entre ellas infecciones, trastornos del sistema inmunitario,
enfermedades inflamatorias crónicas y algunos tipos de cáncer, como el mieloma
múltiple o la macroglobulinemia.

Valores normales

Los rangos de referencia de proteínas séricas totales son una guía que debe
evaluarse de forma individual según el paciente y sus condiciones particulares,
por lo que suelen variar ligeramente entre diferentes fuentes. Se suelen
considerar valores normales:

 Proteína total: 6.4-8.3 g/dL (gramos por decilitro) o 64-83 g/L (gramos
por litro)
 Albúmina: 3.5-5.0 g/dL o 35-50 g/L
 Globulinas alfa-1: 0.1-0.3 g/dL o 1-3 g/L
 Globulinas alfa-2: 0.6-1.0 g/dL o 6-10 g/L
 Globulinas beta: 0.7-1.1 g/dL o 7-11 g/L
  Ratio A/G (albúmina/globulina): superior a 1 se considera normal.

Hay factores que pueden afectar a los valores de proteínas totales y que se
deben tener en cuenta antes de realizar el análisis, como
algunos medicamentos (corticoides, estrógenos, andrógenos, somatotropina u
hormona del crecimiento, insulina), infecciones y heridas, enfermedades
crónicas, embarazo o inactividad física (por ejemplo, en pacientes
hospitalizados).

Causas de valores altos

Los valores altos de albúmina (hiperalbuminemia) son raros y suelen deberse
a deshidratación. Puede producirse por sudoración excesiva y ejercicio intenso
prolongado. Entre sus síntomas destacan náuseas y vómitos.

Los valores altos de globulinas se producen en situaciones y enfermedades

que pueden ser graves:

 Enfermedades y cánceres sanguíneos: mielonoma múltiple, linfoma

de Hodgkin, leucemia, macroglobulinemia, anemia hemolítica.
 Enfermedades autoinmunes: artritis reumatoide, lupus, sarcoidosis,
hepatitis autoinmune.
 Enfermedades infecciosas: tuberculosis, VIH.
 Enfermedades renales
 Enfermedades hepáticas

Valores bajos
Los valores bajos de albúmina se pueden deber a causas como:

 Malnutrición y deficiencia proteica.

 Enfermedades renales
 Enfermedades hepáticas
 Enfermedades autoinmunes: artritis reumatoide, lupus.
 Problemas digestivos: malabsorción intestinal, enfermedad de
Crohn, enfermedad celíaca.
 Diabetes no controlada
 Hipertiroidismo
 Fallo cardíaco o del sistema circulatorio
 Intoxicación hídrica

Los valores bajos de globulinas son raros y en algunos casos se relacionan con
inmunodeficiencias.
MATERIAL

 Jeringa
 Alcohol
 Algodón
 Ligadura
 Tubos de ensayo de 13x100
 Gradilla
 Pipetas 1ml
 Pipetas 5m
 Muestra: sangre (suero)

EQUIPOS:

 Espectrofotómetro
 Centrifuga

Fundamentos del Método

Determinación de proteínas totales:

Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ion cúprico, en medio
alcalino para dar un complejo color violeta con máximo de absorción a 450 nm,
cuya intensidad es proporcional a la concentración de proteínas totales en la
muestra.

Determinación de Albumina:

La albumina reacciona específicamente sin preparación previa con la forma

aniónica del bromo Cresolsulfon Ftaleina (BCF), en presencia de un exceso de
colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbancia a 625 nm
respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albúmina
presente en la muestra.

PROCEDIMIENTO

DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES:

CONDICIONES DE REACCION

- Longitud de onda: 540 nm en espectrofotómetro o en fotocolorímetro con filtro

verde (520-560 nm).

- Temperatura de reacción: 37o C

- Tiempo de reacción: 15 minutos

- Volumen de muestra: 50 ul
- Volumen de Reactivo EDTA/Cu: 3,5 ml

- Volumen final de reacción: 3,55 ml

PROCEDIMIENTO

En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), colocar:

B S D
Agua destilada 50 ul
Suero patrón 50 ul
Muestra 50 ul
Reactivo EDTA/Cu 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Mezclar con varilla. Incubar 15 minutos a 37°C. Leer en espectrofotómetro a 540

nm o en fotocolorímetro con filtro verde (520-560 nm) llevando a cero con el
Blanco de Reactivo.
 Valores Normales:
Proteínas totales 4-7 gr./100ml
Albumina de: 4-6 mg/100ml
Globulinas de 1.9-2.9gr/ 100ml
DETERMINACIÓN DE ALBUMINA
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 625 nm en espectrofotómetro o en fotocolorímetro con filtro
rojo (620-650 nm)
- Temperatura de reacción: 15-28o C
- Tiempo de reacción: 10 minutos
- Volumen de muestra: 10 ul
- Volumen de Reactivo A: 3,5 ml
- Volumen final de reacción: 3,51 ml
PROCEDIMIENTO En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D
(Desconocido), colocar:
B S D
Suero Patrón 10 ul
Muestra 10 ul
Reactivo BCF 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml
Mezclar con varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28o C durante 10 minutos.
Leer en espectrofotómetro a 625 nm o en fotocolorímetro con filtro rojo (620-
650 nm) llevando a cero con el Blanco de Reactivo.
Valores normales:
Albumina de 4-6 mg/100ml.
Cálculos de los resultados
Metodo de control de calidad
Standatrol S- de proteinas : Abs O.45 conc de estatandars: 7 grs% Factor :Abs/
con = 0.45/7 = 0.064 Abs del problema o desconocido : 0.46 conc del
desconocido = 0.46/ factor (0.064) =7.18 VN: 4-7.5 gr./ 100 ml
Standatrol S- de albumina: Abs O.35 conc del estandars : 5 grs% Factor: Abs/
con = 0.35/5= 0.07 Abs del problema o desconocido : 0.40 conc del desconocido
= 0.37 / factor (0.07) = 5.28 VN: 4-6 mg/ 100ml Globulinas = 7.18-5.28= 1.9 V.N
= 1.9-2 gr/100ml

CUESTIONARIO
1. ¿Para qué es útil la determinación de proteínas totales y
fraccionadas?

Las proteínas totales son útiles a la hora de realizar el seguimiento de los

cambios en los niveles de proteínas que causan diversos estados de
enfermedad. Generalmente la comprobación de las proteínas totales se realiza
junto con otras pruebas como la electroforesis de proteínas, la seroalbúmina o
las pruebas de la función hepática.

La determinación de los niveles de proteínas totales es útil en la detección de:

 Hiperproteinemia causada por deshidratación, hemoconcentración o

aumento en la concentración de protein
́ as especificas.
 Hipoproteinemia por hemodilución producida por un defecto en la
́ tesis proteica, catabolismo proteico excesivo o perdidas
realización de la sin
excesivas (hemorragias).

La deshidratación, las enfermedades hepáticas crónicas y el mieloma múltiple

son estados que pueden producir niveles altos de proteínas totales.
El descenso de los niveles de proteínas totales es propio del fallo hepático
terminal y de la enfermedad renal.

Con frecuencia se calcula una proporción de albumina/globulina a fin de obtener

información adicional. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta
todos

2. ¿Cuál es el destino final de Inter conversión o eliminación de proteínas?

El destino de las proteínas es intercambiarse en AA y formar otras proteínas o

productos especializados o - sintetizar Purinas y Pirimidinas y en el recambio
perderse como urea producto de excreción y ser metabolizadas en el ciclo de
Krebs.

La degradación de las proteínas debe estudiarse fundamentalmente a dos

niveles dependiendo de la localización del proceso:

 tracto digestivo:

Se procesan las proteínas exógenas o ingeridas de la dieta; es la denominada

digestión de proteínas.

Este proceso digestivo permite obtener los aminoácidos en forma libre,

necesarios para sintetizar las proteínas propias, así como otras biomoléculas
que se forman partir de ellos.

 interior de la célula:

Se procesan las proteínas endógenas, lo que se suele conocer bajo la

denominación de recambio proteico.

Este recambio proteico es de gran utilidad para reciclar los aminoácidos de

proteínas que ya no son útiles para el organismo y generar nuevas proteínas, u
otras biomoléculas a partir de aminoácidos preexistentes.

Además, también sirve para la eliminación de aminoácidos dañados.

3. ¿Cuáles son las reacciones generales de interconversión de los

aminoácidos?

Las reacciones generales de aminoácidos incluyen transaminación,

deshidratación, descarboxilación, racemización y desaminación oxidativa.
Transaminación y deshidratación son las formas de desaminación no oxidativa
de los aminoácidos. Todas las enzimas que participan en estas reacciones
emplean como coenzima el Fosfato de Piridoxal.

Transaminación

Las enzimas de transaminación antiguamente se conocían como

Transaminasas, pero en la nomenclatura moderna se designan como
Aminotransferasas. Catalizan el intercambio del Nitrógeno entre los -
aminoácidos y diversos -oxoácidos producidos en el metabolismo. Como
resultado de este intercambio, el aminoácido original se convierte en un
cetoácido u oxoácido y el oxoácido original se transforma en aminoácido.

Deshidratasas

Las reacciones de deshidratación son características de los aminoácidos

alifáticos hidroxilados Serina y Treonina. Las enzimas que catalizan estas
reacciones pertenecen al grupo de las Liasas, las dos más importantes son
Serina Deshidratasa (EC 4.2.1.13) y Treonina Deshidratasa.

Las reacciones de deshidratación se clasifican como una forma de desaminación

no oxidativa de los aminoácidos.

4. Como interviene la nutrición en los estados de malnutrición proteico y

calórico y que repercusión tiene las características osmolares y buffer de
las proteínas.
La desnutrición calórico-proteica (DCP), antes llamada malnutrición calórico-
proteica, es una deficiencia energética causada por el déficit de todos los
macronutrientes. Suele estar acompañada de deficiencias de muchos
micronutrientes. La DCP puede ser súbita y completa (inanición) o gradual. La
gravedad varía desde deficiencias subclínicas hasta una emaciación evidente
(con edema, alopecia y atrofia cutánea) y la inanición. Con frecuencia, afecta a
varios sistemas orgánicos. Para el diagnóstico, suelen realizarse pruebas de
laboratorio, entre ellas, la medición de la albúmina sérica. El tratamiento consiste
en corregir los déficits de líquidos y electrolitos con soluciones por vía IV y luego
reponer, de manera gradual, los nutrientes por VO siempre que sea posible.

La respuesta metabólica inicial es el descenso de la tasa metabólica. Para

aportar energía, en primer lugar, el organismo degrada grasa parda. Sin
embargo, más tarde, cuando estos tejidos pierden sus reservas, el cuerpo puede
usar proteínas para obtener energía, lo que conduce a un balance negativo de
nitrógeno. Se degradan las vísceras y los músculos, y se pierde peso. Esta
pérdida de peso de los órganos es más marcada en el hígado y el intestino, en
el corazón y los riñones, y menor en el sistema nervioso.

DCP primaria

En todo el mundo, la DCP afecta sobre todo a niños y adultos mayores que no
tienen acceso a los nutrientes, si bien una causa frecuente en este último grupo
es la depresión. La DCP también puede ser resultada de ayuno o de anorexia
nerviosa. El maltrato también puede ser una causa en estos grupos etarios. En
los niños, la DCP crónica primaria tiene dos formas comunes: el marasmo y el
kwashiorkor. La forma en que se presenta depende del equilibrio entre las
fuentes de energías no proteicas y proteicas. La inanición es una forma aguda y
grave de DCP primaria.

En los niños, la DCP primaria crónica tiene dos formas frecuentes: marasmo y
kwashiorkor.

 Marasmo
 Kwashiorkor

El marasmo (también llamado forma seca de la DCP) causa pérdida de peso y

depleción de la grasa y de la masa muscular. En los países industrializados, el
marasmo es la causa más frecuente de DCP en los niños.

El kwashiorkor (también llamado la forma edematosa o húmeda de la DCP) es

un riesgo que se observa luego del abandono temprano de la lactancia materna,
que suele suceder cuando nace un hermano menor que desplaza al otro del
pecho. Los niños con kwashiorkor tienden a ser mayores que los afectados por
marasmo. El kwashiorkor también puede ser resultado de una enfermedad
aguda, con frecuencia gastroenteritis u otra infección (probablemente, en estos
casos es secundario a la liberación de citocinas), en un niño que ya tiene DCP.
Una dieta más pobre en proteínas que en calorías es más probable que cause
kwashiorkor que marasmo. El kwashiorkor es menos frecuente que el marasmo
y tiende a limitarse a regiones específicas del globo terrestre, como el África
rural, el Caribe y las islas del Pacífico. En estas áreas, los alimentos autóctonos
(p. ej., batata, mandioca, patatas dulces, plátanos verdes) tienen bajo contenido
proteico y son ricos en hidratos de carbono. En el kwashiorkor, las membranas
celulares dejan extravasar los líquidos, y esto hace que se pierdan líquido
intravascular y proteínas; en consecuencia, aparece un edema periférico.

La inanición es la falta total de nutrientes. En ocasiones es voluntaria (como en

el caso del ayuno o de anorexia nerviosa), aunque puede ser secundaria a
factores extrenos (p. ej., durante hambrunas o exposición a la naturaleza).

DCP secundaria

Este tipo suele ser resultado de:

 Trastornos que afectan la función gastrointestinal: estos trastornos

pueden interferir con la digestión (p. ej., insuficiencia pancreática), la
absorción (p. ej., enteritis y enteropatías) o el transporte linfático de
nutrientes (p. ej., fibrosis retroperitoneal y enfermedad de Milroy).
 Trastornos consuntivos: en este tipo de trastornos (p. ej., sida, cáncer y
EPOC) y en la insuficiencia renal, el catabolismo causa un exceso de
citocinas, que a su vez ocasionan desnutrición por mecanismos como la
anorexia y la caquexia (pérdida de masa muscular y de grasa). Una
insuficiencia cardíaca en fase final puede producir una caquexia cardíaca,
que es una forma grave de desnutrición; la mortalidad es particularmente
elevada. Los factores que contribuyen a la caquexia cardíaca son la
congestión hepática pasiva (que causa anorexia), el edema en el tracto
gastrointestinal (que afecta la absorción) y, en la enfermedad avanzada,
el aumento de los requerimientos de O2 debido al metabolismo anaerobio.
Los trastornos consuntivos pueden disminuir el apetito o alterar el
metabolismo de los nutrientes.
 Condiciones que pueden aumentar las demandas metabólicas:
infecciones, hipertiroidismo, feocromocitoma y otros trastornos
endocrinos, quemaduras, traumatismos, cirugías y otras enfermedades
críticas.
5. ¿Cómo interviene la sobrealimentación de las proteínas en el manejo
del nitrógeno y de riesgos? Problemas de ácido úrico “Gota”, obesidad,
¿colesteronemia?
El exceso de proteínas no solo da la gota sino el recambio forma grasa permite
el engorde y subir de peso aumentar el colesterol, formar más urea y ácido úrico
por lo tanto desarrolla enfermedades crónico degenerativas la gota, HTA,
Sobrepeso y arterioesclerosis entre otras y propician el infarto cardíaco.

El exceso de ácido úrico en sangre predispone a padecer gota. Este exceso de

ácido úrico se puede acumular en las articulaciones o en distintos órganos. El
tratamiento adecuado es una dieta baja en purinas (compuestos que se
producen por la digestión de las proteínas de la dieta o se sintetizan como tales
por el organismo). Recomendaciones nutricionales

Las recomendaciones nutricionales para el paciente hiperuricémico son:

1 Disminuir la ingesta de alimentos ricos en purinas.

2 Evitar el alcohol de forma drástica.

3 Reducir la cantidad de proteínas ingeridas por cada kilo de peso ideal, no del
peso actual. Para ello, debemos disminuir la cantidad de carne y pescado, no
sobrepasando los 100 g al día.

4 Beber abundante agua (más de 2 litros por día).

5 Reducir el peso corporal; sin embargo, esta reducción debe ser de forma
gradual, ya que una dieta muy baja en calorías produce un aumento de los
niveles de ácido úrico y puede provocar crisis de gota.

6 Evitar el ayuno prolongado.

 BIBLIOGRAFÍA

 http://www.bioquimica.dogsleep.net/Teoria/archivos/Unidad90.pdf
 https://themedicalbiochemistrypage.org/es/amino-acid-metabolism-
sp.php
 https://www.msdmanuals.com/es-pe/professional/trastornos-
nutricionales/desnutrici%C3%B3n/desnutrici%C3%B3n-
cal%C3%B3rico-proteica-dcp
 https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/28proteinas.pdf
 http://www.wiener-
lab.com/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/albumina_a
a_sp.pdf
 http://dspace.ucuenca.edu.ec/bitstream/123456789/3819/1/TECL13.pdf