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Procedimientos de Coprocultivo

Este documento presenta los procedimientos operativos estandarizados para realizar coprocultivos. Describe los procesos pre-analíticos, analíticos y post-analíticos para identificar posibles patógenos en las heces a través del cultivo de muestras y pruebas bioquímicas. El objetivo es aislar bacterias patógenas usando medios selectivos diferenciales y cultivos enriquecidos para permitir la separación de organismos. El manual provee definiciones clave y normas de referencia para garantizar la calidad

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Vanessa Vargas
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Procedimientos de Coprocultivo

Este documento presenta los procedimientos operativos estandarizados para realizar coprocultivos. Describe los procesos pre-analíticos, analíticos y post-analíticos para identificar posibles patógenos en las heces a través del cultivo de muestras y pruebas bioquímicas. El objetivo es aislar bacterias patógenas usando medios selectivos diferenciales y cultivos enriquecidos para permitir la separación de organismos. El manual provee definiciones clave y normas de referencia para garantizar la calidad

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LABORATORIO DE

LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA CLINICA CODIGO: BA – BJ – LC - 01
MICROBIOLOGIA CLINICA CODIGO: BA – BJ – LC - 01
MANUAL
MANUAL
Manual de Procedimientos de Coprocultivo VERSIÓN: 01
SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 1 - 20

MANUAL DE
PROCEDIMIENTOS DE
COPROCULTIVO

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

Baneza Katy Janampa Coras Nilda Aurea Apayco Espinoza Homero Ango Aguilar

Se prohíbe su reproducción total o parcial sin la autorización de BIOANALITIC. Se considera copia no controlada
a toda copia impresa que no lleve el sello de COPIA CONTROLADA. Documento de uso exclusivo de BIANALITIC.
Manual de Procedimientos de Coprocultivo VERSIÓN: 01
SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 2 - 20

CONTENIDO
CARATULA 1

I. INTRODUCCIÓN 2

II. OBJETIVOS Y CAMPO DE APLICACIÓN 4

2.1. Objetivos
2.2. Campo de aplicación
III. NORMAS DE REFERENCIA 4

IV. DEFINICIONES 4

V. PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDARIZADO DE COPROCULTIVO 6

5.1. PROCEDIMIENTO DE COPROCULTIVO EN BACTERIOLOGÍA 6


5.1.1. PROCESO PRE-ANALÍTICO
a) Metodología
b) Control de Calidad 7
c) Registro 8
5.1.2. PROCESO ANALÍTICO 9
a) Metodología
b) Control de Calidad 10
c) Registro 12
5.1.3. PROCESO POST-ANALÍTICO 13
a) Metodología
b) Control de Calidad 16
c) Registro 17

VI. ANEXOS 18
VII. BIBLIOGRAFIAS 20

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a toda copia impresa que no lleve el sello de COPIA CONTROLADA. Documento de uso exclusivo de BIANALITIC.
LABORATORIO
LABORATORIO DE
DE
MICROBIOLOGIA
MICROBIOLOGIA CLINICA
CLINICA
CODIGO:
CODIGO: BA – BJ – LC - 01
BA – BJ – LC - 01
MANUAL
MANUAL
Manual de Procedimientos de Coprocultivo VERSIÓN: 01
SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 3 - 20

I. INTRODUCCIÓN

La porción inferior del intestino tiene una flora bacteriana normal excesivamente
amplia. Los microorganismos con mayor prevalencia son los anaerobios ( Bacteroides,
bácilos gram positivos, Estreptococos), microorganismos entéricos gran negativos
y Enterococcus faecalis. Cualquier intento por aislar bacterias patógenas de las heces
implica la separación de las especies patógenas, usualmente a través del empleo de
medios selectivos diferenciales y de cultivos enriquecidos. Las principales causas de
trastornos gastrointestinales agudos incluyen a los virus, las toxinas (de:
Estafilococos, Vibriones, Escherichia coli ), bacilos entéricos gran negativos invasores,
los fermentadores lentos de la lactosa, la Shigella, la Salmonella y la Campilobacterias.
La importancia relativa de estos grupos tiene grandes discrepancias en las distintas
partes del mundo.

Las heces y los raspados rectales son los especimenes de que se dispone con mayor
facilidad. Debe anotarse, en el examen macrocópico la presencia de sangre, moco o
helmintos en la inspección inicial. Se suspenden los especímenes en un caldo selectivo
como el Caldo de Tetrationato y se cultivan sobre medios ordinarios así como en
medios selectivos diferenciales, por ejemplo Agar EMB, Agar McConkey, Agar S-S, para
permitir la separación de los bacilos gran negativos que no fermentan la lactosa de
otras bacterias entéricas comunes.

Los frotis teñidos pueden revelar una prevalencia de leucocitos y de ciertos


microorganismos anormales como Cándida o estafilococos, pero no pueden utilizarse
para diferenciar las bacterias entéricas patógenas de las de la flora normal, por lo que
deben realizarse otro tipo de pruebas para discriminar los tipos de bacterias presentes
en la muestra como son las pruebas bioquímicas.

II. OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN


2.1. OBJETIVO GENERALES
 El objetivo del presente manual, es describir los Procedimientos Operativos
Estandarizados del Coprocultivo.
 Identificar las posibles especies patógenas de microorganismos presentes en las vías
gastrointestinales (Heces) a través del coprocultivo.

2.2. OBJETIVO ESPECÍFICOS


 Conocer un conjunto de técnicas que nos permita diferenciar la morfología, y
características, para la Identificación el microorganismo patógeno, que se encuentran
en la materia fecal.
 Conocer cómo obtener la muestra de heces para un determinado coprocultivo.
 Interpretar resultados, validación, emisión del informe.

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 Realizar el respectivo control de calidad en cada uno de procesos operativos


estandarizados del coprocultivo.
 Realizar registros de control de calidad por cada proceso operativo establecido.

2.3. CAMPO DE APLICACIÓN


Bajo los alcances del presente manual, se encuentran todas las actividades
relacionadas a los Procedimientos Operativos Estandarizado de coprocultivo, que se
llevan a cabo en el Laboratorio de Microbiología Clínica Bioanalitic, que incluyen los
procesos pre-analíticos, analíticos y post-analíticos.

III. NORMAS DE REFERENCIA


 NTS Nº 072-2008 UPS de Patología Clínica
 NTS Nº 018
 ISO N° 17025

IV. DEFINICIONES

Cepa: en microbiología, conjunto de virus, bacterias u hongos que tienen el mismo


patrimonio genético.

Enfermedad: alteración o desviación del estado fisiológico en una o varias partes del
cuerpo, por causas en general conocidas, manifestada por síntomas y signos
característicos, y cuya evolución es más o menos previsible.

Enzima: catalizador biológico, normalmente una proteína, que mediatiza y promueve


un proceso químico sin ser ella misma alterada o destruida. Son catalizadores
extremadamente eficientes y muy específicamente vinculados a reacciones
particulares.

Fermentación: conversión biológica anaeróbica (sin oxígeno) de las moléculas


orgánicas, generalmente hidratos de carbono, en alcohol, ácido láctico y gases,
mediante la acción de ciertos enzimas que actúan bien directamente o como
componentes de ciertas bacterias y levaduras. En su uso más coloquial, el término
hace referencia a menudo a bioprocesos que no están estrictamente relacionados con
la fermentación.
Infección: invasión de un ser vivo por un agente patógeno que desencadena una
enfermedad.

Microorganismo: organismos microscópicos pertenecientes por regla general a virus,


bacterias, algas, hongos o protozoos.

Organismo: entidad biológica capaz de reproducirse o de transferir material genético,


incluyéndose dentro de este concepto a las entidades microbiológicas, sean o no
celulares. Casi todo organismo está formado por células, que pueden agruparse en

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Manual de Procedimientos de Coprocultivo VERSIÓN: 01
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órganos, y éstos a su vez en sistemas, cada uno de los cuales realizan funciones
específicas.

Patógeno: productor o causante de enfermedad.

Toxina: proteína responsable de la especificidad funcional de ciertas bacterias, que es


venenosa para determinados organismos. Entre las mejor conocidas, tanto por su
estructura como por los mecanismos de acción, figuran las toxinas colérica y tetánica
que interaccionan con las células diana a través de gangliósidos de membrana.

Vacuna: Antígeno procedente de uno o varios organismos patógenos que se


administra para inducir la inmunidad activa protegiendo contra la infección de dichos
organismos. Es una aplicación práctica de la inmunidad adquirida.

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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
VERSIÓN: 01
ANÁLISIS COPROLÓGICO
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V. PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO

En consideración a los procesos desarrollados en el Laboratorio de Microbiología Clínica,


se estableció los siguientes POEs de Análisis Coprológico, como se detalla a continuación:

5.1. PROCEDIMIENTO COPROLÓGICO EN BACTERIOLOGÍA


5.1.1. FASE PRE-ANALÍTICO
1. TOMA DE MUESTRA DE HECES
Toma de muestra - Heces: Hisopos rectales.
- Heces fresca o líquida (especialmente diarreicas).
- Si la muestra es sólida enviar 2 gramos de deposición y si es líquida de 3 a 5 mL.
- Para bebés y niños pequeños que usan pañales, se puede cubrir el pañal con un
envoltorio plástico.
Materiales - Frasco estériles de boca ancha
- Hisopo rectal
- Envolturas plásticas
Protocolo Heces:
- Recipientes limpios de boca ancha (necesariamente estéril) y con cierre hermético.
- Seleccionar zonas con sangre, moco o pus
- Heces pastosas: usar espátula del recipiente (no papel higiénico).
Hisopo rectal:
- Introducir el hisopo sobrepasando un poco el esfínter anal.
- Luego introducir el hisopo en medio de transporte Cary-Blair y enviar al laboratorio.
- Etiquetar muestra adecuadamente.
Trasporte al - Trasladar prontamente la muestra a laboratorio, pues la rápida proliferación de las
laboratorio bacterias comensales llevan a la destrucción de los Enteropatógenos, en especial si se
trata de gérmenes lábiles como la Shigella.
- Cary-Blair es un medio de conservación para el coprocultivo, tiene como máximo de
tiempo de 5 días a temperatura ambiental.
- Si la muestra no se procesa en 2h, se mantiene en refrigeración sólo hasta 48h.
Condiciones - Antes de recoger las heces evitar tomar medicamentos (antiácidos, antidiarreicos,
Parabasales antiparasitarios, antibióticos y laxantes), dependiendo del motivo del análisis.
- Evitar que las heces se contaminen con la orina.
- No se deben recoger las heces del sanitario o mezcladas con papel higiénico.
- Incluir en la muestra de deposición los trozos de epitelio o moco, sangre y pus.
- Datos clínicos del paciente: Edad, síntomas, tiempo de evolución del cuadro diarreico,
tipo de alimentos ingeridos, contacto con animales y cuáles, procedencia, ocupación.
Criterio - Salmonella, Shigella, bacilos tuberculosos, es preciso que se encuentren en grandes
cantidades y se hallen en varios exámenes.
- La presencia de sangre, suponer infección de E. coli, Shigella, Yersinia, etc.
- Presencia de sangre o pus, suponer proceso inflamatorio más o menos intenso
(enteritis y colitis)

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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
VERSIÓN: 01
ANÁLISIS COPROLÓGICO
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2. CONTROL DE CALIDAD DE LA FASE PRE-ANALÍTICA


 Supervisar que la toma muestra se haya tomado de forma correcta, observando sus
características macroscópicas de la muestra.
 Conocer el verdadero tiempo transcurrido después de la toma de muestra, según la
supervisión en el laboratorio.
 Los frascos e hisopos rectales se le haya proporcionado al paciente, estén en
condiciones estériles.
 Supervisar de qué manera estaba conservado la muestra, para su traslado al laboratorio
de microbiología clínica.
 Comprobar la efectividad del medio Cary-Blair, utilizando cepas patrón ATCC de
Salmonella y Shigella.

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REGISTROS
REGISTRO DE LA FASE PRE-ANALÍTICA DE COPROCULTIVO VERSIÓN: 01
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3. REGISTRO DE LA FASE PRE-ANALÍTICA

LABORATORIO REGISTRO N°
REGISTRO DE FASE PRE-ANALÍTICA COP/PA-001

COPROCULTIVO
Apellidos y nombre: ……………………………………………..………………………………………..…. Edad: ….…………….
Cama: ……………………… [Link].: …………………… Servicio: …………..…………………………. Fecha: ………………
Procedencia: ……………………………………………… Ocupación: …………………………………... Sexo: ……………….

CARACTERÍSTICAS ANTES DE LA TOMA DE MUESTRA RESPUESTA DEL PACIENTE

Datos clínicos del paciente: Síntomas, Tiempo de evolución.

¿Qué tipo de alimentos ha ingerido?


¿Tuvo contacto con animales? y cuáles son.
¿Cuándo se tomó la muestra: fecha y hora
¿Qué medio de conservación usó?
¿La muestra estaba en refrigeración?
Antes de recoger la muestra ¿Evitó tomar medicamentos, cuáles
fueron?
¿Evitó que las heces se contaminen con la orina?
¿Recogió las heces del sanitario o mezcló con papel higiénico?
¿Observó presencia de moco, sangre y pus en toma de muestra?
¿Observó que el recipiente se encontraba limpio y estéril con cierre
hermético de boca ancha?
Observaciones: _____________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________

……..……………………….. …………………………………. Fecha: / /


Bioanalista Jefe

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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
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ANÁLISIS COPROLÓGICO
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5.1.2. FASE ANALÍTICO


1. COPROCULTIVO
Identificar agentes infecciosos patógenos y oportunistas en estados agudos o crónicos
Objetivo
del tracto intestinal.
- Recolectar la muestra de heces, en frasco de boca ancha.
Muestra
- En ciertos casos la muestra se toma por hisopado rectal en medio Cary-Blair.
- 01 Tubo con medio Cary-Blair
- 5 mL de Solución Salina Fisiológica
- 5 mL de Caldo Selenito o Tetrationato
- 5 mL de Agua Peptonada Alcalina
- 01 Placa con Agar MK (Mac Conkey)
- 01 Placa con Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato)
- 01 Placa con Agar SS (Salmonella-Shigella)
Materiales - 01 Placa con Agar TCBS (Tiosulfato-Citrato-Sales Biliares)
- 01 Placa con Agar Tripticasa Soya (TS)
- Reactivo para las pruebas Bioquimicas (TSI, LIA, SIM, Urea, Citrato, etc)
- Azul de metileno. Set de Gram
- Placa con Agar Mueller Hinton
- Discos de antibióticos
- 01 Microscopio y 01 estufa
- 01 Mechero de Bunsen, portaobjeto, cubreobjeto, otros.
Antes de pasar a las placas con medios selectivo y diferenciales realizar:
- Tinción Gram (Para observar bacterias)
Criterios
- Tinción de Azul de Metileno (Para observar levaduras). Después proseguir con el
protocolo
Sembrar con una pipeta de Pasteur aproximadamente 1ml de heces en Solución Salina
Fisiológica, Caldo Selenito y o Caldo Tetrationato y en Agua Peptonada Alcalina.
1. Suspensión fecal con SSF (siembra directa a los medios)
Tomar una asada y sembrar por agotamiento de superficie a los siguientes medios de
cultivo selectivos y diferenciales:
- Placa con Agar MK (Mac Conkey), incubar a 37°C por 24h en aerobiosis.
- Placa con Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato) , incubar a 37°C por 24h en
aerobiosis.
- Placa con Agar CIN (Cefsulodin-Irgasan-Novoviocina), incubar a 25°C o
temperatura ambiente por 48 Hrs.
Protocolo - Placa con Agar PM (Preston Modificado), incubar a 42°C por 48h en microaerofilia.
2. Caldo Selenito o Tetrationato
Incubar 6-8 horas a 36°C y sembrar en placas con Agar Salmonella-Shigella, debe ser
sembrada paralelamente por el método de estrías por agotamiento por 24 horas a 37°
en aerobiosis. Agua Peptonada Alcalina
Incubar 6-8 horas a 36°C y sembrar en placas con Agar Tiosulfato
Citrato Sale Biliares, debe ser sembrada paralelamente por el
método de estrías por agotamiento por 24 horas a 37° en
aerobiosis.
3. Después de la incubación de todas las placas, inocular por 18h por
estrías al medio Agar Soya Tripticasa, para identificar con las

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PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
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pruebas bioquímicas, de la siguiente forma:

Pruebas bioquímicas
- Agar Mac Conkey (TSI, LI, SIM, MIO, Citrato, Urea, Fenilalanina, RM)
- Agar XLD (TSI, LI, SIM, MIO, Citrato, Urea, Fenilalanina, RM)
Identificación - Agar CIN (Manitol, Kligler, Oxidasa, SIM 36 y 22°C)
- Agar PM (Oxidasa, Catalasa)
- Agar Salmonella-Shigella (TSI, LI, SIM, Citrato, Urea)
- TCBS (Kligler, LIA MIO, Fermen. inositol)
Preparación del Agar Mueller Hinton
- Inocular la superficie seca de la placa de Mueller Hinton, estriando con el
hisopo en tres direcciones para asegurar una distribución uniforme del inóculo.
Antes de colocar los discos dejar secar la placa a temperatura ambiente
durante 3 a 5 minutos para que cualquier exceso de humedad superficial sea
absorbido.
- Colocar los discos individuales o multidiscos sobre la superficie del agar con la
ayuda de una pinza estéril o la punta de una aguja presionando suavemente
sobre cada disco para asegurar un contacto completo con la superficie del agar.
- Incubar lar placas en posición invertida a 35°C dentro de los 15 minutos
posteriores a la aplicación de los discos.

Antibiograma Nota: Distribuir los discos uniformemente, de modo que estén a una distancia
mínima de 25 mm uno del otro. No deben colocarse más de 12 discos en una
placa de 150 mm, ni más de 6 en una placa de 100 mm de diámetro interno, para
evitar la superposición de las zonas de inhibición. Un disco no debe ser removido
una vez que tomó contacto con la superficie del agar debido a que algunos
antibióticos se difunden rápidamente.

2. CONTROL DE CALIDAD DE LA FASE ANALÍTICO


2.1. CONTROL DE REACTIVOS:

Medios de Cultivos
Para conocer la efectividad de los medios selectivos y diferenciales, en caso que haya
expirado o sufrido algún cambio por la temperatura o almacenamiento del reactivo,
entonces es necesario enfrentar cepas patrón ATCC bien conocidas disponibles para el
crecimiento positivo de los siguientes medios: Agar Mac Conkey, Agar XLD , Agar CIN, Agar
PM, Agar SS , Agar TCBS y Agar Tripticasa Soya .

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PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
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ANÁLISIS COPROLÓGICO
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Solución salina fisiológica
Dependiendo del lugar de almacenamiento de la solución salina fisiológica (NaCl al
0.85%), sufren cambios estructurales en su composición química, teniendo un tiempo
determina de uso. Para hacer el control respectivo de este reactivo no basta con fijarse la
fecha de vencimiento, en qué condiciones se almacena dicho reactivo.

Set de Gram
Para poder conocer la efectividad de los colorantes, en caso que haya expirado o sufrido
algún cambio molecular por la temperatura o almacenamiento, entonces es necesario
tener a nuestra disposición dos cepas patrón ATCC bien definidas, que sean Gram
positivos o Gram negativos respectivamente. Luego enfrentarlos con nuestros colorantes
y después observar al microscopio. De esta manera conoceremos en realidad que tan
confiables son nuestros colorantes Gram.

2.1. EQUIPOS:

Microscopio compuesto binocular


Para conocer el estado actual de nuestro microscopio, es muy importante verificar los
lentes oculares (limpiarlo con paños especiales), regular la intensidad del foco, también la
mesa de desplazamiento debe correr gradualmente a medida que se giran los tornillos de
desplazamiento, el micrométrico y el macrométrico. Para tal efecto es importante tener a
nuestra disposición lentes oculares y lentes objetivos de repuesto compatible a nuestro
microscopio compuesto. De esta manera nos permita distinguir las diferencias que existen
con los lentes anteriores.

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REGISTROS
REGISTRO DE LA FASE ANALÍTICA DE COPROCULTIVO VERSIÓN: 01
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4. REGISTRO DE LA FASE ANALÍTICA

CLAW LABORATORIO REGISTRO N°


REGISTRO DE FASE ANALÍTICA COP/AN-001

COPROCULTIVO - CANTIDAD DE UTILIZACIÓN DE INSUMOS (grs) POR MES


Nombre del laboratorista: ……………………………………………………………………………………..………………………………………….…….…………
Mes: …………………………….. Distrito: …………………………….. Provincia: ………..………………………. Dpto.: ……………………………………..
Caldo Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Disc. Azul de
FECHA Gram
Selenito MK XLD CIN PM TCBS TS MH SS ATB Metilo

Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar
FECHA
TSI LIA SIM MIO Urea Indol Citrat. Kligler Rojo M Fenil. Manitol VP

Observaciones: ___________________________________________________________________

……..……………………….. …………………………………. Fecha: / /


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ANÁLISIS COPROLÓGICO
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5.1.3. FASE POST-ANALÍTICO

1. REPORTE DE LOS RESULTADOS


- Agar MK: Si el crecimiento de colonias es de color rosa, se trata de
Escherichia coli; Cuando el crecimiento de colonias es incoloras, inhibición
(parcial de proliferación) se trata de Proteus mirabilis; si el crecimiento de
las colonias son pequeñas, magenta es Enterococcus faecalis; si el
crecimiento de colonias de color rosa a verde se trata de Pseudomonas
aeruginosa; si el crecimiento de colonias de incoloras a color rosa trata de
Shigella dysenteriae; si el crecimiento de colonias es pequeñas opacas, rosa
se trata de Staphylococcus aureus.
- Agar XLD Cuando el crecimiento de colonias es grandes, planos, de color
amarillo, pueden haber algunas cepas inhibidas es Escherichia coli; Si el
crecimiento de las colonias son mucoides, amarillos son
Enterobacter/Klebsiella; Si el crecimiento de colonias de color rojo a
amarillo, la mayoría tienen centros de color negro se trata de Proteus; si el
crecimiento es de color rojo a amarillo con centros de color negro se trata
Examen de Salmonella, positiva a H2S; si el crecimiento es de color rojo de colonias
Macroscópico se trata de Pseudomonas/Shigella. Crecimiento escaso o nulo son bacterias
Crecimiento en Gram positivas.
Placas - Agar CIN: Presencia de colonias típicas es Yersinia sp. Si da colonias no
fermentadoras y mucosas se trata de Aeromonas sp.
- Agar Preston Modificado: Las colonias de Campylobacter sp. son redondos
irregular con bordes lisos. Ellos pueden tener colonias translúcidas, de color
blanco a la difusión, el crecimiento plano, transparente. Algunas cepas
parecen tan o ligeramente rosado.
- Agar SS: Cuando el crecimiento de colonias es de color de rosa claro a
incoloras se trata de Shigella sp. Mientras el crecimiento de colonias sea
incoloro, generalmente con centro de color negro se trata de Salmonella
sp. Pero sin inocular es de color rojo anaranjado, tono rosado.
- Agar TCBS: Dan colonias de tamaño mediano, lisas, opacas, de color
amarillo es el crecimiento de Vibrio sp.
- Agar Tripticasa Soya: Dan crecimiento para organismo aerobios y
anaerobios, Gram positivo y negativo, levaduras y hongos. Utilizados para
diferenciar especies de Haemophylus.

TSI (AGAR TRIPLE AZÚCAR HIERRO)

Reporte de resultados:
1. K/A (Fermentación sólo de glucosa) = Pico de flauta alcalina/profundidad ácida.
2. A/A (Fermentación de glucosa y lactosa) = Pico de flauta ácida/profundidad ácida.
3. K/K (No fermentación de glucosa y lactosa) = Pico de flauta alcalina/profundidad alcalina.
4. K/A/H2S (Fermentación de glucosa solamente producción de H 2S)
= Pico de flauta alcalina/profundidad ácida (negra).

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ANÁLISIS COPROLÓGICO
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Especie bacteriana Superficie Fondo Gas H2S


inclinada
Enterobacter sp. A K ++ -
Hafnia sp. K A + -
Klebsiella A A ++ -
Escherichia coli A A + -
Shigella sp. K A - -
Salmonella typhi K A + -
Citrobacter sp. K A + +++
Edwarsiella K A + +++
Serratia sp. K A - -
Proteus vulgaris K A + +++
Providencia sp. K A +o- -

RESULTADOS DEL MEDIO TSI

LIA (AGAR LISINA HIERRO)

Interpretación: A = Ácido
K = Alcalino
N = Neutra
R = Rojo (desaminación oxidativa)

Reporte de resultados:

1. K/K = Azul de Prusia / azul de Prusia (Desaminación oxidativa/descarboxilación)


2. K/A = Azul de Prusia / lila ( No desaminación)
3. Producción de H2S = Ennegrecimiento del medio
4. Producción de gas = Burbujas o levantamiento del medio de cultivo de las paredes del tubo.

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PROCEDIMIENTO
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ANÁLISIS COPROLÓGICO
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Especie bacteriana Superficie Fondo Gas H2S


inclinada
E. coli K KoN -o+ -
Shigella K A - -
Salmonella typhi K K - +o-
Salmonella paratyphi K A +o- +o-
Arizona sp. K KoN - +
Citrobacter sp. K A -o+ -o+
Edwarsiella sp. K K -o+ -
Klebsiella sp. K KoN +o- -
Enterobacter cloacae K A +o- -
Proteus vulgaris R A - -
Proteus mirabilis R A - -
RESULTADOS DEL MEDIO LIA

MIO (Movilidad, Indol y Ornitina)

Fundamento: 1 = Descarboxilación de ornitina


2 = Producción de indol
3 = Movilidad

Reporte de resultados

Prueba Movilidad Indol Ornitina


Positivo + + +
Negativo - - -

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LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA CLINICA CODIGO: BA – BJ – LC - 01
PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
VERSIÓN: 01
ANÁLISIS COPROLÓGICO
SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 16 - 20

APLICACIÓN
Especies Bacterianas Microorganismos Especies Bacterianas Microorganismos
Ornitina Positivo Ornitina negativo
Enterobacter + Klebsiella -
Proteus mirabilis + Enterobacter aglomerans -
Proteus morganii + Proteus vulgaris -
Yersinia enterocolitica + Yersinia pestis -
Yersinia pseudotuberculosis -

RESULTADOS DEL MEDIO MIO

2. CONTROL DE LA FASE POST-ANALÍTICA


Los resultados obtenidos después de procesar la muestra, pasa por un control de calidad
interno, que consiste en relacionar los valores obtenidos con los valores establecidos
permisibles, implantada por el gobierno MINSA.
Si el resultado no coincide con valores establecidos y la evidencia del paciente es sintomática,
se deben realizar una nueva prueba, para el descarte de un falso negativo.

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MICROBIOLOGIA CLINICA CODIGO: BA – BJ – LC - 01
REGISTROS
REGISTRO DE LA FASE POST -ANALÍTICA DE COPROCULTIVO VERSIÓN: 01
SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 17 - 20

3. REGISTRO DE LA FASE POST-ANALÍTICA

LABORATORIO REGISTRO N°
REGISTRO DE FASE POST-ANALÍTICA COP/PA-001

RESULTADO DEL COPROCULTIVO


Apellidos y nombre: ……………………………………………..……………………………………………………..…. Edad: ….…………….
Cama N°: ……………………… [Link].: …………………… Servicio: …………..…………………….……………. Fecha: ………………
Procedencia: ……………………………………………… Ocupación: ………………………………………………... Sexo: ……………….
Tipo de muestra: ( ) Heces sólida ( ) Heces líquida ( ) Heces disentérica

Toma de muestra: ( ) Hisopo rectal ( ) Frasco de boca


ancha
EXAMEN FÍSICO RESULTADO COPROCULTIVO TINCIÓN GRAM
Color: __________________________________ Leuc. Polimorfonucleares:……………………..
__________________________________ Bacilos Gram negativos………………………….
Aspecto: __________________________________ Bacilos cortos Gram negativos:………………

__________________________________ Diplococos Gram Negativos:…………………..


Mucosidad: TINCIÓN AZUL DE METILENO
__________________________________
Epitelio por Campo:……………………………….
__________________________________
Sangre: Levaduras:……………………………………………..
__________________________________
__________________________________ Piocitos:…………………………………………………

Observaciones: ____________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________

……..……………………….. …………………………………. Fecha: / /


Laboratorista Jefe

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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
VERSIÓN: 01
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SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 18 - 20
VI. ANEXOS

FLUJOGRAMA N° 01: PROCEDIMIENTO COPROLÓGICO EN BACTERIOLOGÍA

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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
VERSIÓN: 01
ANÁLISIS COPROLÓGICO
SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 19 - 20
COPROCULTIVO
Hisopado rectal
(3cm ampolla rectal)

Transporte

Medio Cary Blair

Aislamiento
Primario Secundario

Siembra en caldo
Se realiza la siembra selenito 37° C / 24 hrs
en agar Mac conkey o
XLD

37°C / 24 hrs

Crecimiento de colonias
de shigella- transparente
E. coli - amarillo

MEDIOS DIFERENCIALES Siembra en medio SS


selenito 37° C / 24 hrs
TSI LIA
Colonias de salmonella
transparente + puntos
negros (H2S)

TSI LIA
Repicar las colonias
características K = Alcalino (rojo) K= alcalino (lila)

A= Acido (amarillo) A= Acido (amarillo)

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VII. BIBLIOGRAFIA.

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 [Link]
 [Link]
.pdf

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN
CRISTOBAL DE HUAMANGA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS CODIGO: BA – BJ – LC - 01
ESCUELA DE FORMACION PROFESIONAL DE
BIOLOGIA
PRACTICA N°4 VERSIÓN: 01
MICROBIOLOGIA CLININCA BM 544 PÁGINA: 1-1

MANUAL DE
PROCEDIMIENTOS DE
COPROCULTIVO

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

Baneza Katy Janampa Coras Nilda Aurea Apayco Espinoza Homero Ango Aguilar

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