Procedimientos de Coprocultivo
Procedimientos de Coprocultivo
LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA CLINICA CODIGO: BA – BJ – LC - 01
MICROBIOLOGIA CLINICA CODIGO: BA – BJ – LC - 01
MANUAL
MANUAL
Manual de Procedimientos de Coprocultivo VERSIÓN: 01
SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 1 - 20
MANUAL DE
PROCEDIMIENTOS DE
COPROCULTIVO
Baneza Katy Janampa Coras Nilda Aurea Apayco Espinoza Homero Ango Aguilar
Se prohíbe su reproducción total o parcial sin la autorización de BIOANALITIC. Se considera copia no controlada
a toda copia impresa que no lleve el sello de COPIA CONTROLADA. Documento de uso exclusivo de BIANALITIC.
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SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 2 - 20
CONTENIDO
CARATULA 1
I. INTRODUCCIÓN 2
2.1. Objetivos
2.2. Campo de aplicación
III. NORMAS DE REFERENCIA 4
IV. DEFINICIONES 4
VI. ANEXOS 18
VII. BIBLIOGRAFIAS 20
Se prohíbe su reproducción total o parcial sin la autorización de BIOANALITIC. Se considera copia no controlada
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LABORATORIO
LABORATORIO DE
DE
MICROBIOLOGIA
MICROBIOLOGIA CLINICA
CLINICA
CODIGO:
CODIGO: BA – BJ – LC - 01
BA – BJ – LC - 01
MANUAL
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I. INTRODUCCIÓN
La porción inferior del intestino tiene una flora bacteriana normal excesivamente
amplia. Los microorganismos con mayor prevalencia son los anaerobios ( Bacteroides,
bácilos gram positivos, Estreptococos), microorganismos entéricos gran negativos
y Enterococcus faecalis. Cualquier intento por aislar bacterias patógenas de las heces
implica la separación de las especies patógenas, usualmente a través del empleo de
medios selectivos diferenciales y de cultivos enriquecidos. Las principales causas de
trastornos gastrointestinales agudos incluyen a los virus, las toxinas (de:
Estafilococos, Vibriones, Escherichia coli ), bacilos entéricos gran negativos invasores,
los fermentadores lentos de la lactosa, la Shigella, la Salmonella y la Campilobacterias.
La importancia relativa de estos grupos tiene grandes discrepancias en las distintas
partes del mundo.
Las heces y los raspados rectales son los especimenes de que se dispone con mayor
facilidad. Debe anotarse, en el examen macrocópico la presencia de sangre, moco o
helmintos en la inspección inicial. Se suspenden los especímenes en un caldo selectivo
como el Caldo de Tetrationato y se cultivan sobre medios ordinarios así como en
medios selectivos diferenciales, por ejemplo Agar EMB, Agar McConkey, Agar S-S, para
permitir la separación de los bacilos gran negativos que no fermentan la lactosa de
otras bacterias entéricas comunes.
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IV. DEFINICIONES
Enfermedad: alteración o desviación del estado fisiológico en una o varias partes del
cuerpo, por causas en general conocidas, manifestada por síntomas y signos
característicos, y cuya evolución es más o menos previsible.
Se prohíbe su reproducción total o parcial sin la autorización de BIOANALITIC. Se considera copia no controlada
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Manual de Procedimientos de Coprocultivo VERSIÓN: 01
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órganos, y éstos a su vez en sistemas, cada uno de los cuales realizan funciones
específicas.
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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
VERSIÓN: 01
ANÁLISIS COPROLÓGICO
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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
VERSIÓN: 01
ANÁLISIS COPROLÓGICO
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REGISTROS
REGISTRO DE LA FASE PRE-ANALÍTICA DE COPROCULTIVO VERSIÓN: 01
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LABORATORIO REGISTRO N°
REGISTRO DE FASE PRE-ANALÍTICA COP/PA-001
COPROCULTIVO
Apellidos y nombre: ……………………………………………..………………………………………..…. Edad: ….…………….
Cama: ……………………… [Link].: …………………… Servicio: …………..…………………………. Fecha: ………………
Procedencia: ……………………………………………… Ocupación: …………………………………... Sexo: ……………….
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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
VERSIÓN: 01
ANÁLISIS COPROLÓGICO
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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
VERSIÓN: 01
ANÁLISIS COPROLÓGICO
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pruebas bioquímicas, de la siguiente forma:
Pruebas bioquímicas
- Agar Mac Conkey (TSI, LI, SIM, MIO, Citrato, Urea, Fenilalanina, RM)
- Agar XLD (TSI, LI, SIM, MIO, Citrato, Urea, Fenilalanina, RM)
Identificación - Agar CIN (Manitol, Kligler, Oxidasa, SIM 36 y 22°C)
- Agar PM (Oxidasa, Catalasa)
- Agar Salmonella-Shigella (TSI, LI, SIM, Citrato, Urea)
- TCBS (Kligler, LIA MIO, Fermen. inositol)
Preparación del Agar Mueller Hinton
- Inocular la superficie seca de la placa de Mueller Hinton, estriando con el
hisopo en tres direcciones para asegurar una distribución uniforme del inóculo.
Antes de colocar los discos dejar secar la placa a temperatura ambiente
durante 3 a 5 minutos para que cualquier exceso de humedad superficial sea
absorbido.
- Colocar los discos individuales o multidiscos sobre la superficie del agar con la
ayuda de una pinza estéril o la punta de una aguja presionando suavemente
sobre cada disco para asegurar un contacto completo con la superficie del agar.
- Incubar lar placas en posición invertida a 35°C dentro de los 15 minutos
posteriores a la aplicación de los discos.
Antibiograma Nota: Distribuir los discos uniformemente, de modo que estén a una distancia
mínima de 25 mm uno del otro. No deben colocarse más de 12 discos en una
placa de 150 mm, ni más de 6 en una placa de 100 mm de diámetro interno, para
evitar la superposición de las zonas de inhibición. Un disco no debe ser removido
una vez que tomó contacto con la superficie del agar debido a que algunos
antibióticos se difunden rápidamente.
Medios de Cultivos
Para conocer la efectividad de los medios selectivos y diferenciales, en caso que haya
expirado o sufrido algún cambio por la temperatura o almacenamiento del reactivo,
entonces es necesario enfrentar cepas patrón ATCC bien conocidas disponibles para el
crecimiento positivo de los siguientes medios: Agar Mac Conkey, Agar XLD , Agar CIN, Agar
PM, Agar SS , Agar TCBS y Agar Tripticasa Soya .
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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
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ANÁLISIS COPROLÓGICO
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Solución salina fisiológica
Dependiendo del lugar de almacenamiento de la solución salina fisiológica (NaCl al
0.85%), sufren cambios estructurales en su composición química, teniendo un tiempo
determina de uso. Para hacer el control respectivo de este reactivo no basta con fijarse la
fecha de vencimiento, en qué condiciones se almacena dicho reactivo.
Set de Gram
Para poder conocer la efectividad de los colorantes, en caso que haya expirado o sufrido
algún cambio molecular por la temperatura o almacenamiento, entonces es necesario
tener a nuestra disposición dos cepas patrón ATCC bien definidas, que sean Gram
positivos o Gram negativos respectivamente. Luego enfrentarlos con nuestros colorantes
y después observar al microscopio. De esta manera conoceremos en realidad que tan
confiables son nuestros colorantes Gram.
2.1. EQUIPOS:
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REGISTROS
REGISTRO DE LA FASE ANALÍTICA DE COPROCULTIVO VERSIÓN: 01
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Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar Agar
FECHA
TSI LIA SIM MIO Urea Indol Citrat. Kligler Rojo M Fenil. Manitol VP
Observaciones: ___________________________________________________________________
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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
VERSIÓN: 01
ANÁLISIS COPROLÓGICO
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Reporte de resultados:
1. K/A (Fermentación sólo de glucosa) = Pico de flauta alcalina/profundidad ácida.
2. A/A (Fermentación de glucosa y lactosa) = Pico de flauta ácida/profundidad ácida.
3. K/K (No fermentación de glucosa y lactosa) = Pico de flauta alcalina/profundidad alcalina.
4. K/A/H2S (Fermentación de glucosa solamente producción de H 2S)
= Pico de flauta alcalina/profundidad ácida (negra).
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PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
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ANÁLISIS COPROLÓGICO
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Interpretación: A = Ácido
K = Alcalino
N = Neutra
R = Rojo (desaminación oxidativa)
Reporte de resultados:
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PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
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Reporte de resultados
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PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
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ANÁLISIS COPROLÓGICO
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APLICACIÓN
Especies Bacterianas Microorganismos Especies Bacterianas Microorganismos
Ornitina Positivo Ornitina negativo
Enterobacter + Klebsiella -
Proteus mirabilis + Enterobacter aglomerans -
Proteus morganii + Proteus vulgaris -
Yersinia enterocolitica + Yersinia pestis -
Yersinia pseudotuberculosis -
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REGISTROS
REGISTRO DE LA FASE POST -ANALÍTICA DE COPROCULTIVO VERSIÓN: 01
SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 17 - 20
LABORATORIO REGISTRO N°
REGISTRO DE FASE POST-ANALÍTICA COP/PA-001
Observaciones: ____________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
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PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE
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VI. ANEXOS
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ANÁLISIS COPROLÓGICO
SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 19 - 20
COPROCULTIVO
Hisopado rectal
(3cm ampolla rectal)
Transporte
Aislamiento
Primario Secundario
Siembra en caldo
Se realiza la siembra selenito 37° C / 24 hrs
en agar Mac conkey o
XLD
37°C / 24 hrs
Crecimiento de colonias
de shigella- transparente
E. coli - amarillo
TSI LIA
Repicar las colonias
características K = Alcalino (rojo) K= alcalino (lila)
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VII. BIBLIOGRAFIA.
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN
CRISTOBAL DE HUAMANGA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS CODIGO: BA – BJ – LC - 01
ESCUELA DE FORMACION PROFESIONAL DE
BIOLOGIA
PRACTICA N°4 VERSIÓN: 01
MICROBIOLOGIA CLININCA BM 544 PÁGINA: 1-1
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