NORMA TÉCNICA NTC
COLOMBIANA 719
1994-10-19
ALIMENTO PARA ANIMALES.
DETERMINACIÓN DE LA DIGESTIBILIDAD CON
PEPSINA DE LA PROTEÍNA DE ORIGEN ANIMAL
E: ANIMAL FOOD. DETERMINATION OF PEPSIN DIGESTIBILITY
OF ANIMAL PROTEIN.
CORRESPONDENCIA:
DESCRIPTORES: alimento para animales; pepsina;
proteína animal.
I.C.S.: 65.120.00
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación (ICONTEC)
Apartado 14237 Bogotá, D.C. - Tel. 6078888 - Fax 2221435
Prohibida su reproducción Segunda actualización
PRÓLOGO
El Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación, ICONTEC, es el organismo
nacional de normalización, según el Decreto 2269 de 1993.
ICONTEC es una entidad de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya Misión es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y protección al consumidor. Colabora con el
sector gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en
los mercados interno y externo.
La representación de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalización Técnica
está garantizada por los Comités Técnicos y el período de Consulta Pública, este último
caracterizado por la participación del público en general.
La NTC 719 (Segunda actualización) fue ratificada por el Consejo Directivo de 1994-10-19.
Esta norma está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.
A continuación se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a
través de su participación en el Comité Técnico 312201 Alimentos para animales.
AGROINDUSTRIAS U.V.E. S.A. INSTITUTO COLOMBIANO AGROPECUARIO
BASF QUÍMICA COLOMBIANA S.A. INSTITUTO DE MERCADEO AGROPECUARIO
CONYCAL DE COLOMBIA LLOREDA GRASAS S.A.
FINCA S.A. MINISTERIO DE AGRICULTURA
GRASAS S.A. NUTRIANÁLISIS
INDUSTRIA ARROCERA DE LA SABANA SOLLA S.A.
ITALCOL S.C.A.
ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales.
DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 719 (Segunda actualización)
ALIMENTO PARA ANIMALES.
DETERMINACIÓN DE LA DIGESTIBILIDAD CON PEPSINA
DE LA PROTEÍNA DE ORIGEN ANIMAL
1. OBJETO
1.1 Esta norma establece un método cuantitativo para la determinación de la digestibilidad
con pepsina de la proteína de origen animal.
1.2 El método por filtración que se describe en la presente norma es aplicable a toda proteína
de origen animal, pero no para proteínas vegetales o mezcla de ambos tipos.
2. ENSAYOS
2.1 PRINCIPIO DEL MÉTODO
Consiste en someter la muestra previamente desengrasada a digestión durante 16 h con una
solución ácida y caliente de pepsina, agitando constantemente. El residuo insoluble se separa
por filtración, se seca y se le determina la masa, bien sea para calcular el porcentaje de residuo o
bien para determinar el contenido de proteína no digerible; en el filtrado se cuantifica la proteína
digerible.
2.2 APARATOS
Agitador mecánico
Microscopio (opcional)
Tamiz ICONTEC de 1 mm (No.18)
Embudo Gooch No. 4
Equipo para filtración al vacío
Papel de filtro tipo Whatman No.2 o su equivalente
Estufa con control de temperatura
Erlenmeyer de 250 cm3 de boca esmerilada con tapa.
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2.3 REACTIVOS
2.3.1 Solución al 0,002 % de pepsina
Se disuelve pepsina de actividad 1:10 000 en ácido clorhídrico a 0,075 N y se calienta a una
temperatura entre 42 oC y 45 oC. La solución debe agitarse suavemente hasta asegurar la
completa disolución de la pepsina. Debe prepararse justamente antes de emplearse.
2.3.2 Alcohol etílico
2.4 PROCEDIMIENTO
2.4.1 Extracción
La muestra se muele de forma que pase a través de un tamiz de 1 mm (No.18) y se somete a
extracción por el siguiente método:
a) Se prepara un dedal extractor con papel de filtro tipo Whatman No. 2 o su
equivalente
b) Se determina una masa de 1,0 g ± 0,001 g de muestra, se coloca dentro del dedal y
se extrae durante 1 h con éter a una velocidad de 3 gotas a 4 gotas por segundo. Si
se utiliza un extractor tipo Soxhlet, la parte superior del dedal debe extenderse sobre
el tubo de sifoneamiento para evitar la pérdida de partículas sólidas. Si el papel que
contiene la muestra está totalmente sumergido en el sifón del extractor, la muestra
debe estar completamente envuelta en el papel. Debe observarse que el solvente no
arrastre partículas sólidas. Cuando se quiera calcular aproximadamente el contenido
de grasa, se evapora el éter, se seca y se determina la masa del residuo
c) Se retira del extractor el papel de filtro que contiene la muestra y se deja secar a la
temperatura ambiente; se desenvuelve y mediante un pincel se transfiere
cuantitativamente la muestra desengrasada al erlenmeyer de digestión (véase el
numeral 2.2), evitando contaminaciones con las cerdas del pincel o las fibras del
papel de filtro. Luego se continúa como se indica en el numeral 2.4.2.
2.4.2 Digestión con pepsina
A la muestra desengrasada una vez transferida al frasco agitador o erlenmeyer de 250 cm3, se le
agregan 150 cm3 de la solución de pepsina-ácido clorhídrico (véase el numeral 2.3.1) recién
preparada y previamente calentada a temperatura de 42 oC a 45 oC; se tapa el frasco agitador o
erlenmeyer, se coloca dentro del agitador a una baja velocidad para mantener una suave
agitación y se incuba durante 16 h a una temperatura de 45 oC.
2.4.3 Determinación del residuo no digerible
a) Una vez finalizada la incubación, el contenido del frasco o erlenmeyer se filtra
cuantitativamente a través de un papel de filtro tipo Whatman No.2 o su
equivalente (previamente pesado), mediante un equipo para filtración al vacío. El
residuo se lava con 3 porciones de 10 cm3 de agua caliente. El filtrado se completa
a un volumen de 250 cm3 con agua destilada y se conserva para determinar la
proteína digerible.
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b) El residuo retenido en el filtro se lava con etanol y se succiona hasta sequedad. Se
retira el papel de filtro con el residuo y se introduce en la estufa, que se ha
calentado previamente a una temperatura de 105 oC ± 5 oC durante 30 min.
Posteriormente se saca, se enfría, se determina la masa y se calcula el residuo no
digerible.
Nota. El residuo seco se puede observar al microscopio si se desea.
2.4.4 Determinación de la proteína digerible. Del filtrado obtenido en el numeral 2.4.3.a), se
toma una alícuota, se deposita en el balón de kjeldahl y se determina la proteína digerida según
el procedimiento descrito en la NTC 282. En forma paralela debe cuantificarse el contenido de
proteína en un blanco de enzimas.
2.5 CÁLCULOS
2.5.1 La digestibilidad se calcula mediante la siguiente ecuación:
A
% D= x 100
B
Donde:
%D = porcentaje de proteína digerible
A = proteína digerida
B = proteína total
2.5.2 El residuo no digerible se calcula mediante la siguiente ecuación:
C
% ND = x 100
E
Donde:
% ND = porcentaje de residuo no digerible
C = residuo no digerido, en gramos
E = masa de la muestra, en gramos
Nota. Para el cálculo de la digestibilidad debe tenerse en cuenta el blanco de la proteína de la enzima.
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3. APÉNDICE
3.1 NORMA QUE DEBE CONSULTARSE
La siguiente norma contiene disposiciones que, mediante la referencia dentro de este texto,
constituye disposiciones de esta norma. En el momento de la publicación era válida la edición
indicada. Todas las normas están sujetas a actualización; los participantes, mediante acuerdos
basados en esta norma, deben investigar la posibilidad de aplicar la última versión de la norma
mencionada a continuación:
NTC 282: 1986, Métodos de ensayo para la harina de trigo.
3.2 DOCUMENTO DE REFERENCIA
AMERICAN OFFICIAL ANALITICAL CHEMISTRY. Pepsin digestibility of animal protein feeds. Filtration
method final action. USA. AOAC Official Methods of Analysis 1990, 15 th Edition (AOAC 971, 09).
