Campylobacter y
Helicobacter
Generalidades
Familia
Campylobacteraceae,
que incluye los
generos
Campylobacter, Características
Arcobacter y
Sulfurospirillum • Son bacilos gramnegativos
con forma de espiral
• Baja relación de bases
guanina mas citosina en el
ADN
• Incapacidad para fermentar
u oxidar carbohidratos
• Requerimientos de
crecimiento microaerofilos
(es decir, crecimiento
restringido a la presencia de
Helicobacteraceae bajas concentraciones de
, que incluye oxigeno).
Helicobacter y
Wolinella.
Campylobacter
Morfología e identificación
Bacilos gramnegativos pequeños (0,2 a 0,5 mm de ancho y 0,5 a 5,0 mm de largo) y con
forma de coma, S o “alas de gaviota”.
Son móviles por la presencia de un flagelo polar.
En los cultivos viejos pueden tener aspecto cocoide.
Son microaerobias y necesitan para el crecimiento aerobio una atmosfera con
concentraciones bajas de oxigeno (5-7%) y elevadas de dióxido de carbono (5-10%).
C. jejuni crece mejor a 42 ºC que a 37 °C.
Se reconocen 32 especies y 13 subespecies
Morfología e identificación
Cultivo mixto de bacterias procedentes de una muestra fecal. Campylobacter
jejuni es la bacteria gramnegativa curvada y delgada (flecha).
Morfología e identificación
Tinción de Gram de Campylobacter jejuni
que muestra los bacilos gramnegativos en
forma de “coma” o “ala de gaviota”
(flechas). Los campylobacter se tiñen
débilmente y pueden ser difíciles de
visualizar. Aumento original × 1 000.
Factores de virulencia
La estructura de la pared celular de los microorganismos Campylobacter es la
típica de los gramnegativos.
C. jejuni es la especie mejor estudiada. Se han detectado adhesinas, enzimas
citotoxicas y enterotoxinas, su papel especifico en la enfermedad sigue
estando mal definido.
C. fetus esta recubierto de una proteina termoestable de tipo capsular
(proteína S) que evita la union de C3b a las bacterias y posterior efecto
bactericida del suero mediado por el complemento. C. fetus pierde su
virulencia cuando se elimina esta capa proteica
Patogénesis y enfermedades causadas
1. INFECCIONES GASTROINTESTINALES: ENTERITIS
La infección se adquiere por la vía oral proveniente de alimentos,
bebidas o del contacto con animales infectados o productos
animales.
Los microorganismos mueren cuando se exponen a los jugos
gástricos, por lo que las situaciones que disminuyen o neutralizan la
secreción de ácidos gástricos favorecen la enfermedad. Se Necesita
la ingestión de aproximadamente 104 microorganismos para
producir la infección
Patogénesis y enfermedades causadas
Campylobacter jejuni: Molecular biology and pathogenesis (PDF Download Available). Available from:
[Link]
pathogenesis [accessed May 22, 2017]
Patogénesis y enfermedades causadas
Los microorganismos proliferan en el intestino delgado, invaden el epitelio y
producen inflamación que da por resultado la aparición de eritrocitos y
leucocitos en las heces. Al parecer la invasión de tejido circunscrito junto con
la actividad tóxica son la causa de la enteritis.
La enfermedad gastrointestinal por C. jejuni se caracteriza por la aparición
de una lesión histológica en la superficie mucosa del yeyuno (como su
propio nombre indica), íleon y colon.
Patogénesis y enfermedades causadas
MANIFESTACIONES Clínicas:
Diarrea, fiebre y dolor abdominal intenso. Los pacientes afectados pueden
tener 10 o mas deposiciones al día durante el periodo de máxima actividad de
la enfermedad, y las heces pueden ser sanguinolentas en el examen
macroscópico.
La enfermedad suele ser autolimitada, aunque los síntomas pueden
prolongarse a lo largo de 1 semana o mas.
El espectro de manifestaciones clínicas engloba colitis, dolor abdominal
parecido a una apendicitis aguda y bacteriemia
Patogénesis y enfermedades causadas
2. INFECCIONES EXTRAINTESTINALES: Bacteriemia
C. jejuni y C. coli rara vez originan bacteriemia (1,5 casos por 1.000
infecciones intestinales).
C. fetus tiene tendencia a diseminarse desde el aparato digestivo hasta
el torrente sanguíneo o focos distantes.
C. fetus tiene varias proteínas dispuestas en la superficie (proteína S,
peso molecular de 100 000 a 149 000) que forman una estructura
capsular en la superficie del microorganismo que confiere resistencia al
efecto bactericida del suero mediado por el complemento y por los
anticuerpos.
Frecuente en los pacientes debilitados, ancianos e inmunodeprimidos,
como los que presentan hepatopatias, diabetes mellitus, alcoholismo
crónico o neoplasias.
Patogénesis y enfermedades causadas
3. INFECCIONES EXTRAINTESTINALES: Síndrome de Guillain-Barré
Asociación a C. jejuni y C. upsaliensis. Serotipo O:19 de C. jejuni
Afectación a una de cada 1.000 infecciones diagnosticadas.
Alteración autoinmune del sistema nervioso periférico que se
caracteriza por un proceso de perdida de fuerza simétrica a lo largo de
un periodo de varios días, mientras que la recuperación necesita
semanas o meses.
Causa: Reactividad antigénica cruzada entre los lipopolisacáridos de
superficie de algunas cepas de Campylobacter y los gangliósidos de los
nervios periféricos.
Patogénesis y enfermedades causadas
Síndrome de Guillain-Barré
Es causado por anticuerpos
dirigidos frente a las cepas
especificas de Campylobacter
pueden dañar los tejidos neurales
del sistema nervioso periférico
[Link]
sktop_7c62d642-[Link]
Patogénesis y enfermedades causadas
4. INFECCIONES EXTRAINTESTINALES: Artritis reactiva
Caracterizada por la inflamación dolorosa de las
articulaciones, que afecta a las manos, los tobillos y las
rodillas y que puede mantenerse desde 1 semana hasta varios
meses.
La artritis reactiva no se relaciona con la gravedad de la
enfermedad diarreica pero es mas frecuente en los pacientes
que poseen el fenotipo HLA-B27.
Epidemiología
Infección zoonótica; una gran variedad de animales actúan como reservorio.
Especialmente las aves de corral mal preparadas son un origen frecuente de
las infecciones humanas.
Las infecciones se adquieren tras la ingestión de comida contaminada, leche
sin pasteurizar o agua contaminada.
La transmisión de una persona a otra es rara.
La dosis infecciosa es elevada a no ser que los ácidos gástricos se neutralicen
o se encuentren ausentes.
Las infecciones por C. upsaliensis se contraen fundamentalmente por
contacto con los perros domésticos (portadores sanos o mascotas con
diarrea).
Epidemiología
The sources and outcomes of Campylobacter jejuni [Link] environmental reservoirs can
lead to human infection by C. jejuni. .
Epidemiología
FAO y WHO señalan que la incidencia de infecciones por Campylobacter
supera a las causadas por Salmonella y Shigella. Se cree que C. upsaliensis no
se aísla con las técnicas que se emplean habitualmente lo que aumentaría la
incidencia.
La enfermedad se produce esporádicamente a lo largo de todo el año, con un
pico de mayor incidencia en los meses de verano.
La incidencia máxima de esta enfermedad se produce en lactantes y niños
pequeños, con un segundo pico de incidencia en adultos de 20 a 40 años.
En los países en vías de desarrollo la incidencia de la enfermedad es mayor y
la enfermedad sintomática ocurre en los lactantes y niños pequeños, mientras
que el estado de portador crónico asintomático se observa en los adultos.
Diagnóstico de laboratorio
A. Muestras
Las heces diarreicas suelen ser la muestra.
B. Frotis
Los frotis de las heces con tinción de Gram pueden mostrar los bacilos típicos
en forma de “ala de gaviota”. Los Campylobacter son finos y no resulta sencillo
verlos. La microscopia electrónica de campo oscuro o de contraste de fase
puede mostrar la movilidad rápida característica de los microorganismos.
C. Detección de antígenos
Se comercializa una prueba inmunologica para la detección de C. jejuni y C.
coli. Algunas cepas de C. upsaliensis también son reactivas con esta prueba. Se
utiliza para estudios epidemiológicos.
Diagnóstico de laboratorio
D. cultivo
Medios de Temperatura Periodo de
Atmósfera
cultivo de incubación incubación
microaerófila
selectivos elevada extenso
O2 del 5% al CO2 del 5% al Resto de 48-72 horas o
42 °C
7% 10% nitrógeno) mas.
Diagnóstico de laboratorio
Los medios selectivos
Contener sangre o carbón con el fin de eliminar los radicales tóxicos de oxigeno
Se añaden antibióticos para evitar el crecimiento de los microorganismos
contaminantes.
El medio de Skirrow contiene vancomicina, polimixina B y trimetoprim para inhibir
el crecimiento de otras bacterias.
Otros medios selectivos también contienen antimicrobianos, como cefalotina o
cefoperazona y compuestos inhibidores; puesto que contienen una cefalosporina, no
permitirán la proliferación de Campylobacter fetus y de otras varias especies del
género Campylobacter.
Cuando los medios sin antibióticos se incuban a una temperatura de 36 a 37°C, se
pueden aislar otros campylobacter.
Diagnóstico de laboratorio
Campylobacter Agar (Skirrow), el extracto de carne y la peptona
proporcionan los nutrientes, mientras que el cloruro sódico mantiene el
equilibrio osmótico. La novobiocina y la colistina inhiben las bacterias
entéricas gram negativas, la cefazolina y la bacitracina inhiben las bacterias
gram positivas. La cicloheximida inhibe numerosos hongos. La sangre de
caballo proporciona nutrientes y, al suministrar catalasa y superóxido
dismutasa, destruye los radicales y peróxidos que se acumulan durante la
exposición al aire.
Campylobacter Agar (Butzler), la infusión de corazón, peptona de caseína y
extracto de levadura proporcionan nutrientes, mientras que el cloruro sódico
mantiene el equilibrio osmótico. La vancomicina inhibe los organismos gram
positivos, mientras que la trimetoprima y la polimixina B inhiben numerosos
organismos gram negativos. La sangre lisada de caballo proporciona
nutrientes y hemo para catalasa bacteriana.
Diagnóstico de laboratorio
Campilobacter jejuni en
Campylobacter Agar (Butzler),
Las colonias tienden a ser incoloras o
grises. Pueden ser acuosas y difusas o
redondas y convexas y a veces los dos
tipos de colonia aparecen en una placa
con agar.
Diagnóstico de laboratorio
Campilobacter jejuni en Agar Skirrow
Diagnóstico de laboratorio
E. Pruebas bioquimicas
C. jejuni y otros campylobacter patógenos para el ser humano son>
OXIDASA Y CATALASA POSITIVOS.
Los campylobacter no oxidan ni fermentan carbohidratos.
Los frotis teñidos con tinción de Gram muestran características morfológicas
típicas.
La reducción con nitrato, la producción de sulfuro de hidrógeno, las pruebas
de hipurato y las susceptibilidades a antimicrobianos se pueden utilizar para
la identificación adicional de las especies.
Tratamiento
La gastroenteritis por Campylobacter es típicamente una infección
autolimitada que se trata mediante la reposición de los líquidos y de
los electrolitos que se han perdido.
El tratamiento antibiótico se debe usar en los pacientes con
infecciones graves o con septicemia.
La eritromicina o la azitromicina son los antibióticos de elección
para el tratamiento de la enteritis, y las tetraciclinas o las quinolonas
se administran como fármacos de segunda elección.
En los niños pequeños se ha utilizado amoxicilina/acido clavulanico en
lugar de las tetraciclinas, que están contraindicadas.
Las infecciones sistémicas se tratan con aminoglucosidos,
cloranfenicol o imipenem.
Prevención y control
La exposición a Campylobacter entérico se
previene con la preparación correcta de los
alimentos (fundamentalmente de las aves de
corral)
Evitando los productos lácteos sin pasteurizar
Mejora de las medidas preventivas para evitar la
contaminación de los depósitos de agua.
Es improbable que se pueda llegar a eliminar el
estado de portador de Campylobacter en los
reservorios animales, como las gallinas y los pavos,
por lo que persiste el riesgo de infecciones a partir
de ellos.
Rosa Janneth Simaluiza, Zorayda Toledo, Sofia Ochoa and Heriberto Fernandez, 2015. The
Prevalence and Antimicrobial Resistance of Campylobacter Jejuni and Campylobacter coli in
Chicken Livers Used for Human Consumption in Ecuador. Journal of Animal and Veterinary
Advances, 14: 6-9.
DOI: 10.3923/javaa.2015.6.9
URL: [Link]
Campylobacter sp. was isolated from 32 (62.7%) of 51 chicken liver samples.
Transcripción de UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
“Estudio de Prevalencia y Resistencia a los antibacterianos de
Campylobacter spp. , Escherichia coli BLEE y Salmonella spp. en muestras
gastrointestinales de pollos faenados en camales industriales de la Provincia
de Pichincha-Ecuador”.
Valeria Sofia Poma Vivanco
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE Campylobacter spp. EN CIEGOS DE
POLLOS FAENADOS EN MATADEROS INDUSTRIALES DE LA PROVINCIA DE
PICHINCHA
Trabajo de Grado presentado como requisito parcial para optar por el
Título Profesional de Médico Veterinario Zootecnista
Andrea Irene Galárraga Mora
“Se tomaron muestras de ciegos de aves recién faenadas, durante la
evisceración y, mediante métodos microbiológicos se obtuvo como
resultado que el 53,5% de las muestras recolectadas fueron positivas a
Campylobacter spp. De las empresas participantes, 4 de ellas
presentaron aislamientos superiores al 50%”
Helicobacter
Generalidades
Clasificación
Helicobacter gástricos Helicobacter
• Helicobacter pylori enterohepáticos (colonizan
• Gastritis, úlceras péticas, el instetino)
adenocarcinoma gástrico y • Helicobacter cinaedi
linfomas de linfocitos B del
tejido linfoide asociado a la • Helicobacter fennelliae
mucosa gástrica (MALT) • Proctitis, proctocolitis o enteritis
en varones homosexuales
• Infrecuentes
Helicobacter pylori es un bacilo gramnegativo en forma de espiral
Morfología e identificación
H. pylori es oxidasa y catalasa positivo. No fermentan ni
oxidan carbohidratos. Pero fermentan aminoácidos.
Tiene una morfología característica: múltiples flagelos en
un polo
Es móvil (movilidad en sacacorchos)
Productor potente de ureasa.
Tienen forma espiral o bacilar en cultivos recientes y
adaptan una forma cocoide en los cultivos de mayor edad.
Microfotografía electrónica de barrido de H. pylori en un cultivo de 7 días. Los bacilos
y las formas cocoides (flechas) se encuentran unidas a las bolas paramagnéticas usadas
para la separación inmunomagnética.(Cortesía del Dr. L. Engstrand, Uppsala, Suecia.)
Patogénesis Citotoxina
vacuolizante Colonización gástrica,
(VacA)
Flagelos polares inflamación,
Productos
Produce una Producción de generados de alteración en la
proteína
inhibidora de
mucinasa y ureasa, mucinasa producción de ácido
fosfolipasa y fosfolipasa
ácido (bloquea •Atravesar el moco
gástrico y la
producción de IL 8
ácido gástrico)
gástrico mediante
movimiento activo •Daño celular
destrucción tisular.
Actividad de Proteínas de
ureasa adhesión a
•Neutralización de superficie
los ácidos gástricos •Adhesión a las
con el amoniaco células epiteliales
gástricas
Patogénesis
(1) H. pylori penetra la capa
mucosa del estómago y se
adhiere a la superficie de la
capa mucosa epitelial gástrica.
(2) Produce amoniaco por acción de
la ureasa, para neutralizar el
ácido gástrico.
(3) Migración y proliferación de H.
pylori al foco de infección.
(4) Se desarrolla la ulceración
gástrica con la destrucción de la
mucosa, inflamación y muerte
de las células del epitelio
gástrico.
Patogénesis
En voluntarios humanos,
la ingestión de H. pylori
produjo la aparición de
gastritis e hipoclorhidria.
Hay una intensa relación
entre la infección por H.
pylori y la ulceración
duodenal. El tratamiento
antimicrobiano produce la
eliminación de H. pylori y
mejora la gastritis y la
úlcera duodenal.
Patogénesis
[Link]
m/2010/mar/07-dr-drank-
broth-gave-ulcer-solved-
medical-mystery
Epidemiología
La tasa mas alta de portadores se encuentra en los países en vías de
desarrollo, donde el 70-90% de la población esta colonizada, la mayoría
antes de los 10 años.
En países industrializados, como Estados Unidos, se ha observado que la
prevalencia de colonización por H. pylori en individuos sanos es inferior al
40% y esta disminuyendo gracias a la mejoría en la higiene y al tratamiento
activo de los individuos colonizados.
Estudios también han demostrado que del 70% al 100% de los pacientes con
gastritis, ulceras gástricas y ulceras duodenales esta infectado por H.
pylori.
Epidemiología
El ser humano constituye el principal reservorio de H. pylori, y se
piensa que la colonización persiste durante toda la vida salvo que el
hospedador reciba un tratamiento especifico.
Posiblemente la transmisión se produzca por vía fecal-oral.
La colonizacion por H. pylori parece conferir protección frente a la
enfermedad producida por el reflujo gastroesofágico y los
adenocarcinomas de la región distal del esófago y del cardias gástrico.
H. cinaedi y H. fennelliae pueden producir gastroenteritis y bacteriemia,
sobre todo en pacientes inmunodeprimidos
Enfermedades causadas
H. pylori se asocia a gastritis
Gastritis Gastritis aguda Gastritis crónica
• colonización por H. pylori causa • Sensación de plenitud, náuseas, • Enfermedad se limita al antro
infiltración por neutrófilos y vómitos e hipoclorhidria. gástrico en pacientes con una
células mononucleares en la secreción de ácido normal o
mucosa gástrica. afecta a todo el estómago
(pangastritis) cuando se
suprime la secreción ácida.
linfoma MALT Carcinoma gástrico Úlceras pépticas.
• En un número de pacientes • El riesgo hasta 100 veces con • Se presenta en un 10-15% de los
muy pequeño, se puede una gastritis crónica. pacientes con gastritis crónica.
producir una población • Existe una sustitución de la Las úlceras se suelen localizar
monoclonal de linfocitos B mucosa gástrica normal por en focos con inflamación
fibrosis con proliferación de un intensa. Ulceras gástricas y
epitelio de tipo intestinal. duodenales.
Diagnóstico de laboratorio
A. Muestras
Se pueden usar las muestras de biopsia gástrica para el examen histológico o
triturarse en solución salina y utilizarse para cultivo. Se obtiene sangre para
determinar los anticuerpos séricos.
Diagnóstico de laboratorio
B. Microscopia
H. pylori se detecta en el examen histológico de las biopsias gástricas.
Prueba invasiva, se
Sensibilidad y
prefieren otras
especificidad de la prueba
alternativas para el
se aproximan al 100%
diagnostico habitual.
Diagnóstico de laboratorio
Biopsia con fijación inmediata. A)Numerosas formas bacilares Helicobacter pylori de tinte fucsia (flecha)
entre el moco de una foveola (hematoxilina-eosina, 1.000×). B)En la luz foveolar se observa algunos grupos
de bacilos color negro de aproximadamente 3μm (flecha) que corresponden a Helicobacter pylori (Warthin-
Starry, 1.000×). En ambos casos, nótese el epitelio gástrico bien conservado.
Diagnóstico de laboratorio
C. Detección de antígenos
Actividad de la ureasa
Es posible estudiar en la muestra de biopsia si existe actividad. La sensibilidad de la
prueba directa con muestras de biopsia oscila entre el 75% y el 95%; sin embargo, la
especificidad se aproxima al 100%. la principal limitación de este método es la
necesidad de tener una muestra de biopsia.
La prueba no invasiva de la ureasa realizada en el aliento humano tras el consumo de
una solución de urea marcada con un isotopo muestra una sensibilidad y especificidad
excelentes. Por desgracia, se trata de una prueba relativamente cara.
Antígenos en heces
Se han desarrollado una serie de inmunoensayos monoclonales y policlonales para la
identificación de antígenos de H. pylori excretados en las heces, cuya sensibilidad y
especificidad superan el 95%.
Control post tratamiento.
Diagnóstico de laboratorio
HELIC ABT
Tubo de plástico indicador con carga de urea
Diagnóstico de laboratorio
D. Cultivo
El crecimiento de H. pylori y de otros helicobacter necesita un medio
complejo complementado con sangre, suero, carbón, almidón o yema de
huevo, condiciones microaerófilas (oxigeno bajo y dióxido de carbono
aumentado) y un intervalo de temperatura de 30-37 °C.
H. pylori se adhiere a la mucosa gástrica y no se recupera de las heces o la
sangre. Se utiliza las biopsias trituradas.
El diagnóstico de infección por H. pylori se suele realizar con métodos no
invasivos (p. ej., inmunoensayo) y el cultivo se reserva para las pruebas de
sensibilidad a antibióticos.
Diagnóstico de laboratorio
E. Detección de anticuerpos
La serologia es una importante herramienta para la detección
selectiva en el diagnostico de H. pylori mediante la utilización de las
distintas pruebas comercializadas.
Los anticuerpos IgM desaparecen con rapidez, los anticuerpos de tipo
IgA e IgG pueden persistir durante meses o años.
Como los títulos de anticuerpos persisten durante muchos anos, esta
prueba no se puede emplear para discriminar entre infecciones
actuales y antiguas ni controlar el tratamiento.
Estos estudios resultan útiles para demostrar la exposición a las
bacterias, bien con fines epidemiológicos o para la valoración inicial
de un paciente sintomático.
Diagnóstico de laboratorio
Pruebas basadas en los ácidos nucleicos
En la actualidad, las pruebas basadas en la amplificación de los ácidos
nucleicos para detectar H. pylori y otros helicobacter entero hepáticos se
limitan a los laboratorios de investigación y no se emplean en los laboratorios
clínicos.
Tratamiento, prevención y control
El máximo éxito en el tratamiento curativo de la gastritis o la ulcera
péptica se ha conseguido mediante la combinación de un inhibidor de la
bomba de protones (p. ej., omeprazol), un macrólido (p. ej.,
claritromicina) y un b-lactámico (p. ej., amoxicilina) que se deben
administrar durante 7-10 días inicialmente.
El fracaso del tratamiento se suele deber a la resistencia a la
claritromicina. Se deberian realizar las pruebas de sensibilidad cuando el
paciente no responde al tratamiento.
Preguntas de revisión
Una familia de cuatro personas consumió una comida que incluía pollo mal cocido. A los
tres días, tres miembros de la familia presentaron una enfermedad caracterizada por
fiebre, cefalea, mialgias y ataque al estado general. Dos de los pacientes tenían diarrea y
dolor abdominal concomitantes. La tercera persona presentó diarrea después de haber
cedido los síntomas generales. Los coprocultivos produjeron Campylobacter jejuni. ¿Cuál
de las siguientes condiciones de cultivo tenía más posibilidades de aislar Campylobacter
jejuni?
(A) Medio de tiosulfato-citrato-bilis-sacarosa incubado a una temperatura de 37°C en oxígeno
al 5% y en CO2 al 10%
(B) Medio selectivo de Salmonella-Shigella incubado a una temperatura de 37°C en aire
ambiental
(C) Agar de MacConkey y agar entérico de Hektoen incubado a una temperatura de 42°C en
oxígeno al 5% y CO2 a 10%
(D) Agar de sangre de carnero al 5% incubado a una temperatura de 37°C en aire ambiente
(E) Un medio que contiene vancomicina, polimixina B y trimetoprim incubado a una
temperatura de 42°C en oxígeno al 5% y CO2 al 10%
Preguntas de revisión
Explique los factores de virulencia y la patogénesis de Helicobacter
pylori
Referencias
MURRAY, P.R et al. MICROBIOLOGÍA MÉDICA, Elsevier; 7ma Ed., España 2014.
JAWETZ, MELNICK & ADELBERG. MICROBIOLOGÍA MEDICA Editorial Mc Graw
Hill Interamericana, 25° Edición, México 2013
Greenwood, D., et al., (2007). Medical Microbiology.17th Edition. England.
Elsevier.
