Tema N°1 .

Cálculos en Biología
Solución al cuestionario 1:

1. ¿Cómo se prepraran 20 mL de Persulfato de amonio (APS) al 10%?

10% = 10 gr en 100 mL
x = gramos de APS al 10% para 20 ml

10 gr 100 mL
x 20 mL

Resultado: x= 2 gr

Conclusión: Se necesitará 2 gr de APS y enrazaremos hasta 20 mL para obtener 20 mL

de APS al 10%

2. ¿Cómo se preparan 500 mL de TBE 1x a partir de una solución stock de TBE 10x?
Ci= 10x [Link]=[Link]
Vi= ?? (mL de TBE 10 x para 500 mL 10x(??) = 1x(500mL)
de TBE 1x) ? ? = 50 mL de TBE 10 x
Cf= 1x
Vf= 500 mL Se necesitará 50 mL de TBE 10x +
450 mL de H2Oddd.

3. ¿Cómo se preparán 50 mL de NaCl 3,3M?

M = 3,3 W(g) = M. PF.V

PF= 58,4
W(g)= 3,3(58,4)(0,005L)
V= 50 mL=0,005 L
W(g)= 9,6 g de NaCl

Conclusión: Disolver 9,6 g de NaCl en 50 ml de H20ddd.

4. ¿Cómo se preparán 50 mL de MgCl2 1M?

M=1 W(g) = M. PF.V
PF= 95,2
W(g)= 1(95,2)(0,005L)
V= 50 mL=0,005 L
W(g)= 4,76 de MgCl2

Conclusión: Disolver 4,76 g de MgCl2en 50 ml

5. ¿Cómo se preparán 210 mL de solución stock de poliacrilamida al 6% a partir de un
stock de poliacrilamida al 21% y TBE 10x?

Para poliacrilamida:

Ci = 21x
Vi= ?? Para poliacrilamida:
Cf = 6x
Vf= 210 ml Poliacrilamida 6%
TBE 1x
[Link]=[Link] H20ddd
21x(??) = 6x(210mL)
?? = 60 mL de Poliacrilamiida al 21%

Para TBE:

Ci = 10x CONCLUSIÓN
Vi= ??
Cf = 1x Se necesitará 60 mL de
Vf= 210 ml Poliacrilamida, más 21 mL de
TBE 1x y 129 mL de H20ddd
[Link]=[Link]
10x(??) = 1x(210mL)
?? = 21 mL de TBE 10x

6. ¿Cómo se preparán 210 mL de solución stock de poliacrilamida al 8% a partir de un

stock de poliacrilamida al 21% y TBE 10x?

Para poliacrilamida:

Ci = 21x
Vi= ?? Para poliacrilamida:
Cf = 8x
Vf= 210 ml Poliacrilamida 8%
TBE 1x
[Link]=[Link] H20ddd
21x(??) = 8x(210mL)
?? = 80 mL de Poliacrilamiida al 21%

Para TBE:

Ci = 10x CONCLUSIÓN
Vi= ??
Cf = 1x Se necesitará 80 mL de
Vf= 210 ml Poliacrilamida, más 21 mL de
TBE 1x y 109 mL de H20ddd
[Link]=[Link]
10x(??) = 1x(210mL)
?? = 21 mL de TBE 10x
7. ¿Cómo se preparán 42 mL de solución stock de poliacrilamida al 10% a partir de un
stock de poliacrilamida al 21% y TBE 10x?

Para poliacrilamida:

Ci = 21x
Vi= ?? Para poliacrilamida:
Cf = 10x
Vf= 42 ml Poliacrilamida 8%
TBE 1x
[Link]=[Link] H20ddd
21x(??) = 10x(42mL)
?? = 20 mL de Poliacrilamiida al 21%

Para TBE:

Ci = 10x CONCLUSIÓN
Vi= ??
Cf = 1x Se necesitará 20 mL de
Vf= 210 ml Poliacrilamida, más 21 mL de
TBE 1x y 169 mL de H20ddd
[Link]=[Link]
10x(??) = 1x(210mL)
?? = 21 mL de TBE 10x
Solución al cuestionario N°2:

1. ¿Cómo se preparan 640 mL de solución tampón 0,5x a partir de un stock 8x?

Ci= 8x

Vi= ?? (mL de Solucion tampón [Link]=[Link]

Stock)
8x(??) = 0,5x(640mL)
Cf= 0,5x
? ? = 40 mL de Solucion tampón
Vf= 640 mL Stock 8x

Conclusión: Se necesitará 40 mL de Solucion tampón Stock 8x + 600 mL de H2Oddd.

2. ¿Cómo se pueden preparar las siguientes soluciones?

a. 100 mL de polietilenglicol (PEG) 8000 al 40% (p/v).
b. 47 mL de una solución de cloruro de sodio al 7% (p/v).
c. 200 mL de una solución de etanol al 95% (v/v).

a.
𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜(𝑔)
%p/v = 𝑥100
𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛(𝑚𝐿)
40 = m x100
100 Se necesitará 40 g de PEG8000 en 100 ml para obtener PEG 8000 al 40%
m = 40 g.

b.
7 g de NaCl 100 ml
? g de NaCl 47 ml

? = (47x7)/100 = 3,29 g de Nacl

Se necesitará 3,29 g de NaCl más 36,71 de H2Oddd para obtener Nacl al 7%

c.
95 Etanol 100 ml
X Etanol 100 ml

Se necesitará 190 ml de Etanol al 95% más 10 ml de H2Oddd para obtener

X =190 de Etanol
200 ml de Etanol al 95%

3. Si 25 mg de NaCl se disuelven en un volumen final de 500 mL ¿Cuál es el porcentaje

(p/v) de la concentración de NaCl en la solución?

%p/v = 0,025 g = 0,005 %

500 mL
 4. Si se añaden 8 mL de agua destilada a 2 mL de etanol al 95% ¿Cuál es la concentración
de la solución de etanol diluida?

Ci= 95% [Link]=[Link]

Vi= 2 mL 95%(2) = ??% (10mL)

Cf= ?? (concentración final)

? ? = 19 %
Vf= 10 mL

Conclusión: La concentración final de la solución de etanol diluida es de 19%.

5. ¿Cuántos microlitros de SDS al 20% se necesitan para obtener 1.5 mL de SDS al 0.5%?

Ci= 20% Vi= ??uL

Cf= 0,5 Vf= 1,5 mL

[Link]=[Link]

20%(??ul) = 0,5%(1,5uL)

? ? = 0.037 ul

Conclusión: Se necesitarán 0,037 uL de SDS al 20% más 1,46 mL de H20ddd para

obtener 1,5 mL de SDS al 0.5%

6. ¿Cuál es el peso molecular de la glucosa (C6H12O6)?

Número de atomos Elemento químico Peso molecular Total por elemento

6 C 12 72
12 H 1 12
6 O 16 96
TOTAL 180

7. ¿Cómo se preparan 200 mL de NaCl 0,3 M?

M = 3,03 W(g) = M. PF.V

PF= 58,4 W(g)= 0,3(58,4)(0,2L)

V= 200 mL=0,2 L W(g)= 3,5 g de NaCl

Conclusión: Disolver 3,5 g de NaCl en 200 mL de H20ddd.

8. ¿Cómo se preparan 50 mL de hidroxido de sodio (NaOH) 20 mM?

M = 20 mM= 2x10-2
PF= 40 W(g) = M. PF.V
V= 50 mL=0,05 L W(g)= 2x10-2 (40)(0,05L)
 W(g)= 0,04 g de NaCl

Conclusión: Disolver 0,04 g de NaOH en 50 mL de H20ddd.

9. ¿Cuántos moles de NaCl hay en 50 mL de una solución al 0.15 M?

M= n 0.15= n n= 0,438 número de moles

PF . V(L) 58.4(0,05) en solución .

10. A partir de una solución de Tris 1M ¿Cómo se preparan 400 mL de Tris 0.2 M?

Ci= 1 M Vi= ??uL

Conclusión: Se necesitará 80 mL
Cf= 0.2 M Vf= 400 mL de Tris 1m más 320 mL de
H20ddd para obtener 400 mL de
CiVi = CfVf
Tris 0.2 M
1M (??) = 0.2 M (400mL)
?? = 80 mL de Tris 1M

11. ¿Cómo se preparan 4 mL de una solución de NaCl 50 mM a partir de un stock de NaCl

2M?

Ci= 2 M Vi= ??uL

Cf= 50 mM= 0,05 M Vf= 4 mL Conclusión: Se necesitará 0.1 mL

de NaCl 2M más 3.9 mL de
CiVi = CfVf H20ddd para obtener 4 mL de
2M (??) = 0,05 M (4mL) NaCl 50 mM.
?? = 0.1 mL de NaCl 2M

12. Exprese una solución de NaCl 2.5 M en un porcentaje

W(g) = [Link].V
Asumiendo que el V(L) = 1 Litro, el W(g) será 146
=25(58,4)(V)
W(g) =146 Por tanto:
V(L) 𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜(𝑔)
%p/v = 𝑥100
𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛(𝑚𝐿)

= 146 g x 100
1000 ml

%p/v = 14,6

Conclusión: La solución de NaCl expresada en %p/v = 14,6

13. ¿Cuál es la concentración molar de una solución de NaCl al 10%?
NaCl 10% = 10 gr en 100 mL de solución

W(g)= M. PF. V(L)

10 g = M (58,4)(0,1L) Conclusión: La concentración molar de NaCl al 10% es 0.584
M= 0.584

14. ¿Cuál es la molaridad de una solución de carbonato sódico (Na2CO3) a 1 N?

W(g)= M. PF. V(L)

10 g = M (58,4)(0,1L) Conclusión: La concentración molar de NaCl al 10% es 0.584
M= 0.584

15. Una solución de ácido fuerte tiene una concentración de protones de 1 x 10-5 M. ¿Cuál
es el pH de la solución?
pH = - log (1x10-5) Conclusión: El pH de la solución es igual a 5
pH = 5

16. La concentración de protones de una solución de un ácido fuerte es 2.5 x 10-4 M ¿Cuál
es el pH de la solución?
pH = - log (2,5x10-4) Conclusión: El pH de la solución es igual a 3
pH = 3
17. El pH de una solución acido fuerte es de 3.75. ¿Cuál es la concentración de protones
de la solución?
pH = - log [H+]
Conclusión: La concentración de protones es 1.78 x 10-4 mol/L
10-3.75 = [H+]
[H+] = 1.78 x 10-4 mol/L

18. Una solución tiene un pH de 4.5. ¿Cuál es el pOH de la solución?

pH + pOH = 14
4.5+ pOH = 14
pOH = 9.5

19. ¿Cuál es la concentración de OH- y el pH de una solución de HCl 0.01 M?

HCl H+ + Cl-
0.01 M 0.01 M 0.01 M

pH = - log (0.01) Conclusión: El pH de la solución es igual a 2

pH = 2

20. ¿Cuál es el pH de una solución de hidróxido de sodio (NaOH) 0.02 M?

NaOH Na+ + OH-

0.02 M 0.02 M 0.02 M Conclusión: El pH de la solución es igual
a 12.3
pOH = - log (0.02) 1.7+pH = 14
pOH = 1.7 pH = 12.3
Solución al cuestionario N°3: Sobre PCR

1. Veinte nanogramos de ADN genómico humano son necesarios para una PCR. La
solución stock del molde se encuentra a una concentración de 0.2 mg ADN/mL,
¿Cuántos microlitros de la solución stock deberían utilizarse?
Ci = 0.2 mg
Vi = 1 ml
Cf = 20 ng
Conclusión: Se necesitará 2 ul de la
Vf = ??
solución stock

CiVi = CfVf
0.2mg (1 ml) = 20 ng (Vf)
Vf= 2 ul

2. Una única molécula de ADN es amplificada por PCR durante 25 ciclos. Teóricamente,
¿Cuántas moléculas de amplicón se generarán?

Conclusión: Se generarán 33 554 432

225= 33 554 432 copias

3. Partiendo de 600 moleculas de ADN molde, ¿Cuántos amplicones se generarán

despues de 25 ciclos de amplificación?

En 25 ciclos con 1 molécula:

225= 33 554 432 copias Conclusión: Se generarán 2.01 x 1010
copias
Partiendo de 600
600 x 225= 2.01 x 1010 copias

4. Del problema anterior, si se lleva a cabo en un volumen de reacción de 100 uL,

¿Cuántas moleculas de producto amplificado estarán presentes en 0.001 uL?

2.01 x 1010 copias 100 uL

?? copias 0.001 uL

?? = 201 326 copias Conclusión: En 0.001 ul se se obtendrán

201 326 copias.

5. Un producto de PCR de 800 pb que tiene un contenido de G+C del 55% es sintetizado
en una reacción que contiene 50 mM de KCl y 2,5 mM MgCl2. ¿Cuál es la Tm del
amplicón?.

𝑆𝐴𝐿
Tm = 81.5 + 16.6 x Log[ ] + 0.41 (% G+C) – (500/L)
1.07+0.7 [𝑆𝐴𝐿]
Tm= 81.5 + 16.6 x Log [ 56.33 / (1.07 + 0.7 (56.33)] + 0.41 (55)-(500/800)
Tm= 105.8 °C
6. Un stock de cebadores que consiste en dos cebadores necesarios para una PCR tiene
una concentración de 25 uM. ¿Qué volumen del stock de cebadores debería ser
añadido a 100 uL de reacción para que la concentración de cebadores en la reacción
sea de 0,4 uM?
25 uM (Vi) = 0.4 uM(100 uL)
Vi = 1.6
Conclusión: Se necesitarán 1.6 uL del
F: 1.6 uL stock de cebadores por cada cebador .
R: 1.6 uL
Total: 3.2 uL

7. Una PCR de 100 uL contiene cebadores a una concentarción de 0.4 uM. ¿Cuántas
picomoles de de cebadores hay en la reacción?

0.4 uM x 106 pm
1 uM Conclusión: Existen 4x10-5 pm en la
reacción.
4x10-5 pm

8. Un cebador con la secuencia ATCGGTAACGATTACATTC se va a utilizar en una PCR.

Utilizando la formula descrita anteriormente, ¿Cuál es la Tm de dicho oligonucleótido?

Tm = 2(A+T) + 4 (G+C) Conclusión: La Tm es de 52°C

Tm = 2 (12) + 4(7)

Tm= 52

9. Un cebador con la secuencia ATCGGTAACGATTACATTC va a ser utilizado en una PCR.

La PCR contiene 0.05 M KCl y 2.5 mM de MgCl2. Usando la formula proporcionada en
este apartado, ¿Cuál es la Tm de este oligonucleotido?

• %G+C = bases G + C en el amplicón x100 = (7/ 19) x 100 = 36.8 %

Número total de bases en el amplicón
• [SAL] = [K+]+4[Mg 2*]0.5
= 0.05 + 4(2.5)0.5
= 6.37
𝑆𝐴𝐿
Tm = 81.5 + 16.6 x Log[1.07+0.7 [𝑆𝐴𝐿]] + 0.41 (% G+C) – (500/L)
= 81.5 + 16.6 x Log( 6.37/ (1.07+0.7(6.37)))+ 0.41 (36.8) – 500/19
Tm = 71.3 °C

Conclusión: La Tm es de 71.3°C

10. Una mezcla de dNTP se prepara combinando 40 uL de cada stock 10 mM dNTP. Cuatro
uL de esta mezcla de dNTP se añaden a una PCR que tiene un volumen final de 50 uL.
a. ¿Cuál es la concentración de cada dNTP en la mezcla?
b. ¿Cuál es la concentración total de dNTP en la PCR? Expresar la concentración en
micromolaridad.
11. Proponga el protocolo de amplificación [volumen (uL)] para el siguiente caso:

Volumen de reacción = 10 uL

CASO:

360 GC Enhacer al 10%, Buffer de PCR Amplitaq Gold® 360 1X, 1.25 mM de MgCl2, 200 μM de
cada dNTP, 0.75 μM de cada cebador (P1 y P2), 0.08 U/μL de la enzima AmpliTaq Gold® 360
DNA polimerasa y 40 ng de ADN en un volumen de reacción final de 10μL. El programa de
amplificación fue: un ciclo de denaturación inicial de 94 oC por dos minutos; seguido de 30
ciclos de, denaturación a 94 oC por 30 segundos, una temperatura de hibridización de 60 oC
por 30 segundos y una temperatura de extensión de 72 oC por un minuto; finalmente, una
extensión de 72 oC por diez minutos en un Termociclador Veriti®.

Componente Ci Cf Volumen
360 GC Enhancer 100% 10 % 1 uL
Buffer de PCR Amplitaq Gold® 360 10X 1x 1 uL
MgCl2 25 mM 1.25 mM 0.5 uL
dNTP mix 2.5 mM
dATP 200 uM 0.8
dTTP 200 uM 0.8
dCTP 200 uM 0.8
dGTP 200 uM 0.8
Cebador 1 20 uM 0.75 uM 0.3 uL
Cebador 2 20 uM 0.75 uM 0.3 uL
AmpliTaq Gold® 360 5U/uL 5 U /uL 0.08 U/uL 0.1 uL
H20 - - 4
TOTAL 10 uL
ADN 20 ng/uL 40ng 5 uL

Solución 25 mM(Vi)=1.25mM(10 uL)

360 GC Enhancer: Vi = 0.5 uL

CiVi=CfVf Se necesitará 0.5 uL de MgCl2

100%(Vi)=10%(10 uL) Cebador 1 y 2

Vi = 1 uL CiVi=CfVf

Se necesitará 1 uL de 360 GC Enhacer. 20uM(Vi)=0.75uM(10 uL)

Buffer de PCR Amplitaq Gold® 360 Vi = 0.3

CiVi=CfVf Se necesitará 0.3 uL de c/cebador

10x(Vi)=1x(10 uL) dNTP mix

Vi = 1 uL Concentración inicial = 10mM

Se necesitará 1 uL de Buffer. *Si el mix de 4 dNTP es 10 mM, la

concentración por dNTP es 2.5 mM
MgCl2
CiVi=CfVf
CiVi=CfVf
2.5mM(Vi)=200uM(10 uL)

Vi = 0.8 uL ADN

Se necesitará 0.8 uL de cada dNTP CiVi=CfVf

AmpliTaq Gold® 360 20ng(10uL)=40(Vf)

CiVi=CfVf Vf = 5 uL

5 U/ul(Vi)=0.08(10 uL) Se necesitará 5 uL de ADN

Vi = 0.1 uL

Se necesitará 0.1 uL de AmpliTaq Gold®

360

RUN METHOD:

94 °C 72 °C
2 min 30 ciclos 10 min

94 °C
30 seg 72 °C
60 seg
60 °C
30 seg