INHIBIDORES DEL CICLO DE KREBS
El clico tiene 3 inhibidores clásicos: Fluoracetato
El fluoracetato en forma de fluor acetil CoA reacciona con el oxalacetato y produce fluorcitrato, pero el
fluorcitrato la aconitasa no lo reconoce y se paraliza el ciclo.
El arsenito que es la forma trivalente del arsénico inhibe todos aquello compuestos multienzimaticos
que usan lipoamida como coenzima, y en el caso del ciclo el que usa lipoamida es el complejo
enzimático de α – cetoglutarato deshidrogenasa. Pero ojo la piruvato deshidrogenasa también usa
lipoamida y también es inhibida por el arsenito pero esa primera reacción ocurre
intramitocondrialmente pero no hace parte del ciclo, pero también es inhibda por el arsenito.
El arsenito inhibe piruvato deshidrogenasa, α – cetoglutarato deshidrogenasa, alfa cetoacidos de
cadenaramificada deshidrogenasa que tiene que ver con la catabolia de leucina, isoleucina y valina.
El malonato es inhibidor competitivo de la succinato deshidrogenasa.
REGULACIÓN DEL CICLO
Primero el aporte de sustratos (acetil CoA y oxalacetato), un punto importante en el aporte de sustratos
lo juega el complejo multienzimatico de la piruvato deshidrogenasa, ella es la que transforma piruvato a
Acetil CoA, aquí el NAD entra oxidado y sale reducido. La piruvato deshidrogenasa es inhibida por
sus productos (Acetil CoA y NAD reducido). Cuando intramitocondrialmente aumente los niveles de
Acetil CoA y NAD reducido, baja la actividad de la piruvato deshidrogenasa y se frena la velocidad del
ciclo por que no se produce acetil CoA. Además ella es regulada covalentemente también, asi que la
piruvato deshidrogenasa existe en dos formas: una forma carente de fosofato y otra desfosforilada,
entonces resulta que el cambio conformacional es inducido por una protein quinasa pero esta proteína
quinasa es dependiente de ATP y calcio, no de AMPc. Cuando el ATP aumenta intramitocondrialmente la
proteína quinasa sew activa y ella fosforila a la piruvato deshidrogenasa inactivandola. La
desfosforalizacion de la enzima es catalizada por fosfoproteínas fosfatasa, entonces esta fosfoproteínas
fosfatasa es dependiente de calcio y de magnesio; cuando se activa la fosfoproteínas fosfatasa lo que
hace es desfosforilar la piruvato deshidrogenasa activándose, y si ella se activa, aumentando la
producción de Acetil Coa y a su vez la velocidad del ciclo.
Pero resulta que las enzimas propias del ciclo también pueden ser reguladas. La citrato sintetasa es
inhibida por exceso de succinil CoA, de citrato (producto), NAD reducido, ATP y Acil CoA de cadena larga.
Otro punto de regulación isocitrato sintasa, inhibido por exceso de NAD reducido y ATP; estimulado por
exceso de NAD oxidado y ADP.
Y luego el complejo deα –cetoglutarato deshidrogenasa uqe también es inhibido por el producto de la
reacción que es succinil CoA y por exceso de NAD reducido.
Entonces que estamos viendo allí, que los metabolitos que indican a la célula defecto energético NAD
oxidado, ADO, Pi, etc. operan como estimuladores. Y los metabolitos que indican exceso de energía son
inhibidores.
Pero además el ciclo esta regulado por la cadena respiratoria, por que si la cadena respiratoria se
paraliza, no ocurrirá la reoxidacion de las enzimas para que se pueda perpetuar el ciclo. Otro punto
entonces es la velocidad de la cadena respiratoria.
Entonces los inhibidores de la cadena respiratoria también van a inhibir al ciclo por que el impiden a la
célula respirar, si la célula no reoxida las enzimas frena el ciclo, por que se cae la disponibilidad de NAD
oxidado y FAD oxidado y el ciclo se paraliza.
El ciclo juega un papel dual (antibolico): una catabólico por que permite la oxidación de glúcidos, lípidos
proteínas y anabólico o de síntesis por que el ciclo permite que le sean sustraído metabolitos para
usarlos como sustratos en rutas biosintetica. Por ejemplo se puede sustraer del ciclo succinil CoA para
utilizarla como sustrato junto con la glicina en la biosíntesis del hemo. Resulta que la biosíntesis se inicia
con acciones de succinil CoA y glicina, la delta aminolevulinato sintasa hace que se produzca un
complejo que es el Delta aminolevulinato y a partir de esre se genera el hemo.
Si nosotros le extraemos metabolitos al ciclo para usarlo como sustrato en rutas biosinteticas y no
rellenamos de metabolitos al ciclo entonces cabe la probabilidad que el ciclo se afecta en su velocidad.
Para eso existen
reacciones anapleroticas (de relleno): piruvato carboxilasa, Piruvato a oxalacetato y rellena el ciclo por
aquí. Otra reacción es la cataliza por la fosfoenol piruvato carboxiquinasa que transforma fosfoenol
piruvato en oxalacetato.
Otra reacción es la que cataliza L-glutamato deshidrogenasa transforma glutamato en α –cetoglutarato,
desamina oxidativamente al glutamato.
LANZADERA ASPARTATO - MALATO
El oxalacetato a nivel citosolico entra a formar por una malato deshidrogenasa citosolica en malato. El
problema es que estos equivalentes de reducción están siendo producidos en el citosol celular y hay que
llevarlos a la matriz mitocondrial.
Los equivalentes de reducción se entregan al oxalacetato y es convertido en malato, el malato aislado
por un sistema de transporte mitocondrial entra del citosol a la matriz y en la matriz la entra de malato
es compensada con la salidade α –cetoglutarato, osea que para que el malato pueda entrar, debe salir
del citosol α –cetoglutarato. El malato deshidrogena usando una malato deshidrogenasa
intramitocndrial, entonces el NAD entra oxidado y sale reducido. Los equivalentes de reducción que
estaban en el citosol ahora están en la matriz y entonces el malato se transforma en oxalacetato.
En el citosolo: el oxalacetato se convierte en malato para eso necesito que el NAD entre reducido y salga
oxidado, y ese NAD fue el que produjo el gliceraldehido 3P deshidrogenasa, entonces se perpetuar el
proceso glicolitico en condición de aerobiosis.
Ahora si el malato entra a la membrana y usando a la malato deshidrogenasa se convierten en
oxalacetato en la matriz, y el NAD entra oxidado y sale reducido.
Pero como el oxalacetato no es permeable a las membranas el no puede salir al citosol otra vez,
entonces la célula lo transamina, por medio el oxalacetato aspartato aminotransferasa fosfato piridoxal
setransamina aaspartato pero para que se transamina a aspartato necesita el concurso de glutamato
que proviene del cytosol y que llega a la matriz ayudado por un sistema de transporte, entonces el
glutamato le da el grupo amino aloxalacetato y lo convierte en aspartato pero el glutamto se convierte
en α –cetoglutarato, que es precisamente el que sale para compensar la entrada de malato.
El aspartato sale de la matriz al citosol, la salida de aspartato al citosol la compensa la entra de
[Link] en el citosolse invierte la reacción entonces el aspartato transamina aspartato
aminotransferasafosfato piridoxal para eso necesita del α –cetoglutarato que salió, cuando el aspartato
le entre el grupo aminoal α –cetoglutarato lo convierte en glutamato y el se convierte otra vez en
oxalacetato cerrando el ciclo.
Se mantiene en equilibrio lo que hay citosolicamente con lo que hay intramitocondrialmente. El objetivo
ha sido llevar los equivalentes de reducción producidos en el citosol a la matriz mitocondrial.
LANZADERA DEL α – GLICEROL FOSFATO
El objetivo va hacer el mismo.
La dihidroxiacetona fosfato es convertida en glicerol 3P usando una glicerol 3P deshidrogenasa citisolica
que esta ligada al NAD, entonces se oxida y los equivalente de reducción los tiene el glicerol 3P. Aquí en
la membrana esta ubicado un sistema enzimático que es glicerol 3P deshidrogenasa de membrana con
el centro activo mirando al citosol, que el glicerol 3P no tiene por qué entrar, él es deshidrogenado y
vuelto a convertir en dihidroxiacetona fosfato. Y del lado interno la enzima esta ligada al FAD acepta los
electrones y sale reducida. Glicerol 3P deshidrogenasa de membrana esta ligada al FAD y no al
NAD, entonces los equivalentes de reducción quedan en la membrana interna en forma de FAD
reducido. Hay células que prefieren lanzadera de malato aspartato como las células hepáticas pero hay
otras que prefieren lanzadera de α- glicerol fosfato como en el caso del cerebro
