ESCUELA SUPERIOR POLTÉCNICA DE

CHIMBORAZO
FACULTAD CIENCIAS
ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
CARRERA BIOQUÍMICA Y FARMACIA
TOXICOLOGÍA

PARÁCTICA No. 03 – DETERMINACIÓN DE MONÓXIDO DE CARBONO EN SANGRE

1. OBJETIVOS

2.1 Objetivos General

 Determinar la concentración de monóxido de carbono en una muestra de sangre.

2.2 Objetivos Específicos

 Conocer el fundamento en el que se basa la determinación de monóxido de carbono en
sangre.
 Aplicar la espectrofotometría para el análisis del nivel de carboxihemoglobina en
muestras de sangre.
 Determinar si existe riesgo de intoxicación de acuerdo a los niveles de monóxido de
carbono encontrados en sangre.

2. MARCO TEÓRICO

Monóxido de carbono (CO)

El CO es un gas que no emite olor, sin sabor y no irritante, por lo que su exposición puede
pasar completamente desapercibida. Es menos pesado que el aire, por lo que se acumula
en las zonas altas (de ahí la conveniencia de andar agachado en los incendios). Se origina
de la combustión incompleta de los combustibles orgánicos.

Se halla contenido en el gas ciudad, gases del tubo de escape de los automóviles y en
cualquier lugar en el que se produzca una combustión de un combustible como estufas de
carbón, braseros, calentadores de agua, hornos, humo de tabaco, etc, ocurriendo la
intoxicación en habitaciones mal ventiladas.

Entre sus orígenes industriales están: fundiciones de acero, fábricas de papel y plantas
productoras de formaldehído.

El origen más frecuente de esta intoxicación son los incendios, en los que hasta el 50% de
las muertes son debidas a esta intoxicación.

Los síntomas de sospecha van a depender de la concentración y rapidez con que se inhale
el gas. La inhalación masiva y aguda de gas ciudad produce rápidamente la pérdida del
conocimiento y parálisis respiratoria.

La inhalación lenta de menor concentración de gas causa cefaleas, cuadros de mareos con
zumbido de oídos, náuseas y vómitos; dolores abdominales y sensación de palpitaciones.
A continuación, se puede llegar hasta el coma, adquiriendo la piel una típica coloración rojo
cereza, aunque no en todos los casos.
Si la intoxicación se debe a un escape de gas de automóvil, basta un grado ligero de
intoxicación para mermar las facultades del conductor y hacerle perder la dirección, sobre
todo por la noche.
En esta situación se produce una mala adaptación a la oscuridad, mayor deslumbramiento
por los faros de otros coches, errores al calcular las distancias y reducción del campo
visual.

El análisis de sangre de monóxido de carbono se usa para detectar la intoxicación por

monóxido de carbono. La intoxicación puede ocurrir cuando se respira aire que contiene
demasiado monóxido de carbono (CO). Este gas no tiene color, olor ni sabor, así que no
se puede saber si lo está respirando. La prueba mide la cantidad de hemoglobina en la
sangre que se ha combinado con el monóxido de carbono.

El monóxido de carbono puede provenir de cualquier fuente que queme combustible.

Cuando se inhala monóxido de carbono, este sustituye al oxígeno que transporta la
hemoglobina de los glóbulos rojos en la sangre. Como resultado, el cerebro y otros tejidos
reciben menos oxígeno. Esto puede provocar síntomas graves o la muerte.

Los resultados se indican en forma de porcentaje. Muestran la cantidad de monóxido de

carbono que se ha combinado con la hemoglobina dividida por la cantidad total de
hemoglobina (multiplicada por 100). Cuanto mayor sea el porcentaje, mayor será el riesgo
de tener síntomas de intoxicación por monóxido de carbono. Una persona con valores
inferiores al 10% puede no tener ningún síntoma.

Estos valores son solamente una guía. Los límites de los valores "normales" varían de un
laboratorio a otro. Es posible que su laboratorio tenga límites diferentes. El informe del
laboratorio debe incluir los límites que su laboratorio usa para valores "normales". Además,
el médico evaluará sus resultados basándose en su salud y otros factores. Por lo tanto, un
valor que cae fuera de los límites normales enumerados aquí, aún puede ser normal para
usted.
Los resultados suelen estar disponibles inmediatamente.

Valores Normales

Monóxido de carbono

No fumadores: Menos del 2% de hemoglobina total

Fumadores: 4%-8% de hemoglobina total

Valores Altos
Los valores altos de monóxido de carbono en la sangre son causados por intoxicación por
monóxido de carbono. Los síntomas se agravan a medida que los niveles de monóxido de
carbono aumentan.

Síntomas relacionados con valores altos de monóxido de carbono

Porcentaje de
Síntomas
hemoglobina total
20%-30% Dolor de cabeza, náuseas, vómitos y problemas
para tomar decisiones
30%-40% Mareos, debilidad muscular, problemas de la vista,
confusión, y aumento de la frecuencia cardíaca y del
ritmo respiratorio
50%-60% Pérdida del conocimiento
Síntomas relacionados con valores altos de monóxido de carbono
Porcentaje de
Síntomas
hemoglobina total
Más del 60% Convulsiones, coma y muerte

Las mujeres y los niños suelen tener menos glóbulos rojos que los hombres. Por lo tanto,
las mujeres y los niños pueden tener síntomas más graves a niveles inferiores.

3. EQUIPOS Y MATERIALES

EQUIPOS MATERIALES SUSTANCIAS

Espectrofotómetro Tubos de ensayo Solución acuosa de

hidróxido de amonio

Campana de extracción de Gradilla Ditionito de sodio

gases (sólido).

Papel aluminio Suministro de monóxido

de carbono puro o
monóxido /nitrógeno
carbono.

Vasos de precipitación Suministro de oxígeno o

aire comprimido

Pipeta de 5ml

4. METODOLOGÍA
 Agregar 0,2 mL de la Agregar 20 mg de El blanco 15 mL de
muestra de sangre ditionito de sodio a cada solución de hidróxido
con 25 mL de porción x, y, z con 10 mL de amonio más 20
solución de hidróxido de solución de hidróxido mg de ditionito.
de amonio y mezclar. de amonio. Mezclar. Mezclar.

Saturar la porción "z" con Con las respectivas

Repartir en tres muestras se procede
monóxido de carbono
porciones iguales x, a leer en el
pasando gas a través de la
y, z. espectrofotometro a
solución durante 5 minutos.
540 nm y 579 nm.

En la porción "x" se Saturar la porción "y"

tapa el tubo. En las con oxígeno
porciones y, z se burbujeando oxígeno
debe tener cuidado puro a través de la
que no se forme solución durante 10
espuma. minutos.

5. RESULTADO Y DISCUSIÓN

RESULTADOS

A simple vista la sangre con alto contenido de carboxihemoglobina (tubo y) presenta el tono
carmín más marcado, en comparación con los tubos x & z, que contienen sangre inalterada y
sangre saturada con oxígeno respectivamente.
En la práctica se leyeron las muestras x, y & z en el espectrofotómetro a diferentes absorbancias,
obteniendo los siguientes resultados:

Λ= 540 nm Λ=579 nm
X= 0,584 X= 0,643
Y= 0,621 Y= 0,540
Z= 0,601 Z= 0,664

𝐴540 𝐴540
( )𝑥 −( )𝑧
𝐻𝑏𝐶𝑂 = 𝐴579 𝐴579
𝐴540 𝐴540
( )𝑧 − ( )𝑦
𝐴579 𝐴579
0,584 0,601
( )𝑥 −( )𝑧
0,643 0,664
𝐻𝑏𝐶𝑂 =
0,601 0,621
(0,664) 𝑧 − ( )𝑦
0,540
𝐻𝑏𝐶𝑂 = 1,22%

DISCUCIÓN

La carboxihemoglobina obtenida fue de 1,22%, encontrándose este valor dentro de los rangos
normales, menos del 2% en no fumadores. La medición del porcentaje de carboxihemoglobina
en la sangre por la técnica de espectrofotometría, se basa en comparación de los espectros de
absorción de carboxihemoglobina con la oxihemoglobina a una longitud de onda específica, ésta
reducción con un agente como el ditionito de sodio permite que la oxihemoglobina se reduzca
más, y no así la carboxihemoglobina, ya que el CO posee mayor afinidad por la hemoglobina,
observándose diferencia máxima en los espectros a 540nm, mientras que a 579nm que es el
punto isosbéstico se presenta la misma absorbancia.

6. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Conclusiones
 Se determinó que la concentración de monóxido de carbono fue de 1,22% en la muestra
de sangre analizada.
 Se determinó que el fundamento de la determinación de monóxido de carbono en sangre,
está dado en que la toxicidad de monóxido de carbono se debe a la combinación con la
hemoglobina para formar carboxihemoglobina (COHb); dado que la afinidad del monóxido
de carbono por la hemoglobina es cerca de 240 veces mayor que por el oxígeno, de esta
manera, la intoxicación puede ocurrir aun cuando pequeñas cantidades de CO se
encuentren presentes en la atmósfera.
 Se aplicó la espectrofotometría para analizar el nivel de carboxihemoglobina en la
muestra de sangre analizada
 Se determinó que la muestra de sangre analizada no existe riesgo de intoxicación, ya que
está dentro de los límites permitidos, los cuales presentan un valor de menos del 2% de
hemoglobina total en personas no fumadoras.

Recomendaciones
 Se recomienda seleccionar las partes de la muestra que presenten las características
más óptimas para el ensayo.
 Se debe trabajar con el respectivo protocolo para el manejo de sustancias tóxicas.
 Se debe trabajar con la protección requerida en el laboratorio, esto incluye guantes,
mascarilla, cofias y delantal.
 Seguir las respectivas instrucciones dadas por el docente de la catedra.

7. BIBLIOGRAFÍA

 Health Encyclopedia: monóxido de carbono, [Internet] 2017 [consultado el 16 de enero

del 2018] disponible en:
https://www.northshore.org/healthresources/encyclopedia/encyclopedia.aspx?Document
Hwid=hw3942&Lang=es-us
 Monóxido de carbono en sangre, [Internet] España-2017 [consultado el 16 de enero del
2018] disponible en:
https://www.cdc.gov/spanish/especialescdc/envenenamientoco/index.html
 Universidad de San Carlos de Guatemala. Determinación de niveles de contaminación
por monóxido de carbono. [Internet]. María Aurora Ruiz. Guatemala. Septiembre de 2011.
[Consultado el 16 de enero del 2018]. Disponible en:
http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/06/06_3188.pdf
ANEXOS

Grafico 1: Muestras y blanco. Grafico 2: Lectura de muestras en el

espectrofotómetro