INTRODUCCIÓN

La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se

obtiene fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena
principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el
mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos
niveles se mantengan y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se
precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el páncreas.
La glucosa es un azúcar que es utilizado por los tejidos como forma de energía
al combinarlo con el oxígeno de la respiración. Cuando comemos el azúcar en
la sangre se eleva, lo que se consume desaparece de la sangre, para ello hay
una hormona reguladora que es la insulina producida por el páncreas (islotes
pancreáticos). Esta hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los
tejidos y sea utilizada en forma de glucógeno, aminoácidos, y ácidos grasos.
Cuando la glucosa en sangre está muy baja, en condiciones normales por el
ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagón que hace lo contrario y
mantiene los niveles de glucosa en sangre. Cuando la insulina es insuficiente,
la glucosa se acumula en sangre, y si esta situación se mantiene, da lugarar
una serie de complicaciones en distintos órganos. Esta es la razón principal por
la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras
enfermedades y alteraciones que también la provocan.

OBJETIVOS
 Reconocer la importancia que tiene la glucosa en el organismo y las
diferentes patologías que se presenta por una alteración en el
metabolismo del analito.
 Que capaz de identificar mediante prueba de laboratorio la presencia del
analito (Glucosa).
 Identificar la presencia del analito y su aplicación en la clínica.
Reconocer que pruebas auxiliares ayudan al diagnóstico del paciente.
MARCO TEORICO

1. La glucosa

Es un glúcido o carbohidrato, más precisamente un monosacárido, la estructura

más sencilla dentro de los azúcares simples, presente en forma libre en las
frutas y la miel. Entre los carbohidratos de absorción rápida, la glucosa es la
que se absorbe más rápidamente.

La glucosa es una fuente importante de energía para la mayoría de las células

del cuerpo, incluidas las del cerebro. Los carbohidratos que se encuentran en
las frutas, los cereales, el pan, la pasta y el arroz se transforman rápidamente
en glucosa en el cuerpo, lo que eleva el nivel de dicho azúcar en la sangre.

Las hormonas producidas en el cuerpo llamadas insulina y glucagón ayudan a

controlar los niveles de azúcar en la sangre. Es un examen que mide la
cantidad de un azúcar llamado glucosa en una muestra de sangre.

2. Características

La glucosa, libre o combinada, es el compuesto orgánico más abundante de la

naturaleza. Es la fuente primaria de síntesis de energía de las células,
mediante su oxidación catabólica, y es el componente principal de polímeros de
importancia estructural como la celulosa y de polímeros de almacenamiento
energético como el almidón y el glucógeno.

A partir de su estructura lineal, la D-glucosa sufre una ciclación hacia su forma

hemiacetálica para dar sus formas furano y pirano (D-glucofuranosa y F-
glucopiranosa) que a su vez presentan anómeros alfa y beta. Estos anómeros
no presentan diferencias de composición estructural, pero si diferentes
características físicas y químicas.

La glucosa es uno de los tres monosacáridos dietéticos, junto con fructosa y

galactosa, que se absorben directamente al torrente sanguíneo durante la
digestión. Las células lo utilizan como fuente primaria de energía y es un
intermediario metabólico. La glucosa es uno de los principales productos de la
fotosíntesis y combustible para la respiración celular.

Todas las frutas naturales tienen cierta cantidad de glucosa (a menudo con
fructosa), que puede extraerse y concentrarse para preparar un azúcar
alternativo. Sin embargo, a escala industrial tanto el jarabe de glucosa
(disolución de glucosa) como la dextrosa (glucosa en polvo) se obtienen a partir
de la hidrólisis enzimática de almidón de cereales (generalmente trigo o maíz).

3. Biosíntesis

Los organismos fotoautótrofos, como las plantas, sintetizan la glucosa en la

fotosíntesis a partir de compuestos inorgánicos como agua y dióxido de
carbono, según la reacción:

Los seres heterótrofos, como los animales, son incapaces de realizar este
proceso y toman la glucosa de otros seres vivos o la sintetizan a partir de otros
compuestos orgánicos. Puede obtenerse glucosa a partir de otros azúcares,
como fructosa o galactosa. Otra posibilidad es la síntesis de glucosa a partir de
moléculas no glucídicas, proceso conocido como gluconeogénesis. Hay
diversas moléculas precursoras, como el lactato, el oxalacetato y el glicerol.

También existen ciertas bacterias anaerobias que utilizan la glucosa para

generar dióxido de carbono y metano según esta reacción:
4. Fundamento :

En el método GOD-POD, en un primer paso la glucosa oxidasa cataliza la

oxidación de la D-glucosa a ácido D-glucónico conformación de peróxido
dehidrógeno. Éste es utilizado por la peroxidasa para oxidar a la 4-
aminofenazona y al fenol, dandolugar a una quinonaiminacoloreada. La
intensidad de color será proporcional a laconcentración de glucosapresente
inicialmente. (Enocasiones se utilizan otrossustratos en lugar de 4-
aminofenazona+fenol, tales comoo-dianisidina, guayacol y ABTS.)

La glucosa por acción de la glucosa oxidasa se transforma en ácido Glucónico

y peróxido de hidrogeno. El peróxido de hidrogeno en presencia de la 4-
aminofenazona y la Peroxidasa se transforma en una quinonimina coloreada
cuyo color es directamente proporcional a la concentración del analito.
Esquema de la reacción:

5. Análisis de glucosa en sangre

El análisis de la glucosa Mide la cantidad (concentración) de glucosa presente

en la sangre y sobre todo serealiza para estudiar la posible presencia de una
diabetes mellitus o sacarina. Como es una enfermedad muycompleja y con
grandes repercusiones de salud es un análisis muy discriminativo y útil que se
realiza de formabastante rutinaria. Como se ha indicado, la diabetes
dependiente de insulina cursa con un aumento de laconcentración de glucosa
en sangre (glucemia), que se produce de manera repentina y la hiperglucemia
essevera. Una hiperglucemia superior a 140 mg/dL detectada en más de una
ocasión en ayunas es un índice deposible diabetes, diagnóstico que debe
confirmarse con otras pruebas. La determinación de glucosa sanguínea es una
prueba muy frecuente en bioquímica y se puede llevar a cabo tanto por
métodos químicoscomo enzimáticos, siendo estos últimos los más
específicos.Hay dos tipos de métodos químicos:

a) Reductimétricos, que se basan en la capacidad reductora de la

glucosa. Debido a la presencia en lamuestra de otros compuestos
reductores, estos métodos dan cifras superiores a las correspondientes
a laglucosa verdadera.
b) Furfurálicos, se basan en la capacidad de la glucosa para formar
furfural al sufrir deshidratación en unmedio ácido. Un ejemplo es el
método que emplea o-toluidina.
 En cuanto a los métodos enzimáticos:
a) Método de la hexoquinasa, emplea las enzimas hexoquinasa y glucosa-6-
fosfato deshidrogenasa. Por cada molécula de glucosa se forma una de
NADPH, que puede medirse espectrofotométricamente a 340 nm. Es el
método de referencia recomendado por las organizaciones internacionales.
b) Método de glucosa oxidasa y peroxidasa (GOD-POD), es el que se
utiliza en esta práctica para medir los niveles de glucosa sanguínea de
ratas diabéticas y controles.

6. Forma en que se realiza el examen:

Se necesita una muestra de sangre. Esto se realizará antes del procedimiento

de la glucosa a través de la venopunción o flebotomía.

¿Por qué se hace esta prueba?

Por lo general, la prueba de glucosa en la sangre se hace para detectar la

diabetes mellitus.

¿Recomendaciones para el análisis de glucosa?

La forma más fácil de detectar la diabetes es medir la cantidad de azúcar en la

sangre (glucosa) antes de que el paciente coma o beba algo por la mañana. En
la mayoría de los casos, el paciente deberá ayunar durante la noche anterior,
no comer ni beber nada más que agua después de la cena y por la mañana
antes de la extracción de sangre.

7. Significado Clínico

La glucosa es la mayor fuente de energía para las células del organismo, la

insulina facilita la entrada de glucosa en las células.

La diabetes mellitus es una enfermedad que cursa con una hiperglucemia,

causada por un déficit de insulina.
 El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
clínicos y de laboratorio.
8. Valores normales de glucosa en la sangre:

Los valores normales son entre 70 y 105 mg por decilitro. En los niños
pequeños se aceptan valores de 40 a100 mg/dl.

Los valores más bajos de 40-50 mg/dl se consideran bajos (hipoglucemia).

Los valores más altos de 128 mg/dl se consideran altos (hiperglucemia).

9. Factores que intervienen:

Muchas formas de estrés (traumatismos, infartos, anestesia general,..)

pueden aumentar los niveles deglucosa en sangre de forma pasajera.

La cafeína también puede aumentarlos

Fármacos: algunos pueden aumentar los niveles de glucosa en sangre u

orina, otros pueden disminuir losniveles en sangre y otros pueden interferir en
los resultados obtenidos con las tiras reactivas para medir laglucosuria
(antidepresivos, antihipertensivos, hormonas femeninas, etc...)

El alcohol y analgésicos pueden disminuirla

Los tratamientos con sueros en vena, ya que contienen dextrosa (azúcar)

Embarazo
CONCLUSIONES
 Aprendimos a realizar la prueba de medición de glucosa en suero con el
reactivo de determinación de glucosa.
 Así mismo pudimos observar que al dejar reaccionar el reactivo con la
muestra ya se podía observar una diferencia de colores (cualitativo).
 Utilizamos nuevamente el equipo espectrofotómetro para medir la
absorbancia , y con los datos obtenidos pudimos aplicar las fórmulas de
para determinar el Fc, y la Abs total de la muestra .
 Debemos tomar en cuenta de la D.O obtenida se le debe restar la D.O
de la base.

RECOMENDACIONES
 Se recomienda seguir los procedimientos de la guía para obtener mejores
resultados.
 Trabajar siempre bajo la supervisión y ayuda del docente a cargo.
 Estar en todo momento con el equipo de bioseguridad necesaria como
guantes y mandil.
 Calibrar bien el equipo, para una mejor lectura ya que estos al final serán
dato importante para la obtención de datos.
 Desechar cuidadosamente todos los materiales contaminados y lavar
adecuadamente los materiales de laboratorio.

BIBLIOGRAFIA
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Glucosa-en-suero
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lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/glicemia_enzimatic
a_aa_liquida_sp.pdf

CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es la finalidad del blanco? ¿Cómo se ajusta el espectrofotómetro

con el blanco? ¿Ha realizado un blanco de reactivos o de suero? por
qué?
- El blanco el es tubo el cual esta solo con la solución del reactivo es decir
con 2ml de Reactivo de determinación de glucosa, la finalidad de este es
que al determinar la absorbancia del mismo nos sirve para que una vez
obtenida la observancia de las otras muestras, le restaremos la d.o de
este reactivo para obtener unos mejores resultados; así como también
nos sirve para calibrar el espectrofotómetro con este, y es en base a
este que se mide la absorbancia de las muestras restantes.

- Se debe colocar la muestra blanco en la celda respectiva del

espectrofotómetro , luego cerrar el equipo y presionar el botón de
0%ADJ y luego
100%ADJ , los cuales
se muestran en la
siguiente figura
 2. Calcule la concentración de glucosa en el suero indicando los cálculos
realizados.
El calculo de glucosa total en el suero se encuentran en la parte de
Resultados del informe , los cuales vuelvo a presentar .

3. Si la concentración de glucosa hubiera sido superior a 800 mg/dL.

¿Cómo actuaria?
Primero debemos saber que En un paciente sano: en ningún momento
se superan los 200mg/dL
En un paciente diabético: la glucemia a las 2 horas es superior a 200
mg/dL y al menos otro valor intermedio es también superior a 200
mg/dL.

Puede que el paciente este en un coma hiperglucémico hiperosmolar no-

cetonémico (CHHNC) se caracteriza por una severa hiperglicemia
(niveles de glucosa por encima de 600 a 800 mg/dL) .

El índice de mortalidad del CHHNC es bastante alto (50% o más),

primariamente debido a la edad de la población que lo padece a las
causas agudas que lo precipitan.

TUBOS DENSIDAD ABSORBANCIA FC

OPTICA

Blanco 0.061

Standard 0.290 0.290 – 0.061 = 0.229 100

𝐹𝐶 = = 436
0.229
Muestra 1 0.330 0.330 – 0.061 = 0.269 Abs1=436x0.269=117

Muestra 2 (se tomó del 0.392 0.392 – 0.061 = 0.331 Abs2=436x0.331=144

mismo tubo del
paciente de la muestra
1)

Muestra 3 ( Otro 0.429 0.429 - – 0.061 = 0.368 Abs3=436x0.368=160

paciente )
 El tratamiento está primariamente dirigido hacia la sustitución de fluídos
y electrolitos mientras se administran cuidados de soprte. La terapia con
insuina está diseñada para hacer retornar lentamente en 24-48 horas los
niveles de glucosa a niveles normales.
Cuando el tratamiento es exitoso, el enfermo puede ser
significativamente sensible a una insulina de más. En último término, el
enfermo alcanzará en control metabólico mediante la dieta y/o agentes
orales.

4. Para la determinación ha utilizado un método enzimático. ¿Se trata de

un método cinético? Fundamente su respuesta.
Sí, ya que la cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones
químicas que son catalizadas por las enzimas. El estudio de la cinética y
de la dinámica química de una enzima permite explicar los detalles de su
mecanismo catalítico, su papel en el metabolismo, cómo es controlada
su actividad en la célula y cómo puede ser inhibida su actividad por
fármacos o venenos o potenciada por otro tipo de moléculas.

En general, no se determina la concentración de enzimas en tejidos y/o

fluidos orgánicos, sino su actividad. El motivo es que la concentración de
enzimas en suero es baja; sin embargo, dada su elevada capacidad
catalítica es posible determinar su actividad con fiabilidad y se
presupone que, por lo general, la actividad es proporcional a la
concentración.
Por tanto, es sumamente importante el procesado adecuado de las
muestras, para que se garantice la conservación de la estructura
proteica, fácilmente alterable por variaciones de:
temperatura, pH muy ácidos o alcalinos, detergentes, metales pesados o
la presencia de microorganismos en el recipiente, lo cual degradaría la
proteína. La conservación de los sueros a Tª ambiente genera la
inactivación de las enzimas.