UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ORIENTE
Nombre: Evelin Fátima Acosta Villarroel
Materia: Análisis Clínica I
Semestre: 6to Sem.
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GENERALIDADES
La transaminasa GPT es una enzima con gran concentración en el hígado y en menor
medida en los riñones, corazón y los músculos.
Es una enzima que se encuentra principalmente en el hígado y que en sangre debe
estar en niveles bajos
Cuando hay una lesión de estos órganos la enzima es liberada a la sangre y aparece
elevada en los análisis.
Un daño o enfermedad en cualquiera de estos tejidos conduce a un aumento en los
niveles séricos.
Como es una transaminasa más específicamente hepática que la GOT, aparece más
elevada en las enfermedades hepáticas que en otras, por eso el cociente GPT/GOT
será mayor de 1 en ciertas enfermedades hepáticas como la hepatitis vírica.
En el caso contrario, aparece menor de 1 en la cirrosis hepática, congestión hepática
o tumores hepáticos.
En el caso de que se produzca algún tipo de lesión o enfermedad en alguno de estos
órganos, los niveles de GPT aumentan y pueden ser percibidos a través de una
analítica.
La prueba de GPT se suele realizar junto con otras pruebas de hígado, como pueden
ser el GOT la GGT o la fosfatasa alcalina, dado que se usa para diagnosticar y evaluar
condiciones y problemas hepáticos.
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METODOLOGIA ANALITICA
Las transaminasas (o aminotransferasas) son enzimas transferasas que catalizan la
reacción de transferencia del grupo amino (-NH2) de un aminoácido a un α-
cetoglutarato (un α-cetoácido). Las transaminasas más conocidas son:
- Glutamato-oxalacetato transaminasa (GOT), llamada también aspartato
aminotransferasa (AST).
- Glutamato-piruvato transaminasa (GPT), o bien alanina aminotransferasa (ALT).
Las transaminasas están por todo el organismo. La GOT o AST está en el hígado,
miocardio, riñón, encéfalo y musculatura esquelética. La GPT o ALT está presente en
concentraciones mucho más elevadas en el hígado que en los demás tejidos.
La GOT cataliza la siguiente reacción:
Aspartato + α-Cetoglutarato ⇔ Oxalacetato + Glutamato
La GPT cataliza esta otra reacción:
Alanina + α-Cetoglutarato ⇔ Piruvato + Glutamato
Estas enzimas son importantes en la producción de varios aminoácidos, y su medición
en sangre se utiliza para diagnosticar y rastrear muchas enfermedades, y en especial
para evidenciar la presencia de daño hepático. Sus valores normales se indican en los
partes médicos de laboratorio y varían según la metodología analítica adoptada. Un
valor elevado de las transaminasas suele ser indicativo de daño en el hígado.
Las transaminasas requieren la coenzima piridoxal-fosfato, que se convierte en
piridoxamina en la primera fase de la reacción, cuando un aminoácido es convertido
en un ácido ceto. La piridoxamina enlazada a la enzima reacciona con alanina,
oxalacetato o alfa-cetoglutarato, dando piruvato, ácido aspártico o ácido glutámico,
respectivamente.
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Cuando el azúcar en sangre es bajo, el organismo debe romper las proteínas en
aminoácidos, a expensas del tejido muscular. La preferencia de las transaminasas del
hígado por el oxalacetato o el alfa-cetoglutarato desempeña un papel fundamental en
la canalización del nitrógeno desde el metabolismo de los aminoácidos a asparagina
y glutarato, para la conversión a urea que sirve como excreción del nitrógeno. Del
mismo modo sucede en los músculos, donde el uso del piruvato en la transaminación
produce alanina, que es llevada por la corriente sanguínea al hígado. Allí, otras
transaminasas regeneran el piruvato, que proporciona un valioso precursor para la
gluconeogénesis. Este ciclo de la alanina es análogo al ciclo de Cori, que permite el
metabolismo anaerobio en los músculos.
INTEPRETACION CLINICA
GPT alto; causas y síntomas
No se puede hablar de síntomas de las transaminasas altas, pues esta condición no
causa síntomas por sí misma, sino que depende de la patología subyacente. Además,
muchos de estos síntomas no son específicos de una sola enfermedad sino que son
comunes a multitud de afecciones. La GPT alta no es una enfermedad, sino que es la
consecuencia de una enfermedad, es un síntoma más.
No obstante sí que hay ciertos síntomas comunes a muchas afecciones del hígado
que provocan un aumento del GPT. Estos son los síntomas hepáticos y del GPT alto:
• Dolor en la zona derecha superior del abdomen.
• Sensación de malestar general.
• Náuseas y vómitos.
• Cansancio después de comer y digestiones pesadas.
• Pocas ganas de comer.
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• Ictericia, piel y ojos de color amarillo.
• La orina se oscurece
• Las heces se aclaran.
Causas GPT alto
• Enfermedades hepáticas como cirrosis o hepatitis.
• Envenenamiento causado por plomo.
• Exposición al tetracloruro de carbono.
• Necrosis o descomposición de un tumor.
• Ingesta de ciertos medicamentos.
• El crecimiento acelerado, sobretodo en niños pequeños.
Cómo bajar GPT alto
Lo más saludable es depurar el hígado anualmente, por ejemplo, comiendo estos
alimentos para limpiar el hígado, pues es de vital importancia el buen funcionamiento
de este órgano. Pero si ya vas tarde y te han aumentado los niveles de GPT aquí te
explicamos cómo bajarlos:
• No comas grasas ni comida procesada.
• Evita las comidas muy dulces y muy saladas.
• No consumas alcohol.
• Bebe mucha agua, al menos 2,5 litros diarios.
• Come fruta, evitando aquellas con muchos ácidos orgánicos como las fresas, el
melón o la sandía.
• Toma alguna de estas infusiones para limpiar el hígado.
GPT bajo; causas y síntomas
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Igual que cuando es alto, un bajo nivel de GPT no presenta ningún síntoma, sino que
en todo caso los síntomas que habrá serán los causados por la afección o condición
previa que lo provoca.
Debemos partir de la base de que las transaminasas deben estar en niveles bajos, que
eso es lo normal, pero en el caso de que presentes unos valores más bajos de los que
se consideran normales se puede deber a muchas condiciones distintas. Las dos
principales son las siguientes:
• Déficit de vitamina B6: este elemento es necesario para el funcionamiento y
desarrollo de las enzimas hepáticas. Ya sea por un mal estilo de vida, alimentación
deficiente o alguna otra enfermedad la carencia de esta vitamina causa un descenso
en los valores de GPT.
• Embarazo: El nivel de transaminasas cae durante el embarazo.
Para aumentar los valores de GPT (ALT) debe llevar una dieta equilibrada con
suficiente aporte de vitaminas. Es especialmente importante una ingesta adecuada de
vitamina B6 (piridoxina) ya que puede haber un déficit de esta vitamina.
Los siguientes alimentos contienen una gran cantidad de vitamina B6 (piridoxina):
Carnes: Pollo, magro de cerdo, pavo.
Frutas y verduras: Plátanos, patatas.
Frutos secos: Pistachos, nueces.
Pescados: Salmón, sardinas.
PROCEDIMIENTO
Metodología Cinética-UV-IFCC
Determinación de la actividad enzimática utilizando el piridoxal fosfato
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Para obtener resultados rastreables al método de referencia IFCC, es necesario utilizar
el procedimiento bi-reactivo, para que la enzima sea totalmente activada por el
piridoxal fosfato.
Procedimiento de la muestra
1. En un tubo rotulado Muestra o Calibrador, pipetear 0,800 mL de la mezcla
Reactivo 1 + Reactivo 3.
2. Adicionar 0,100 mL de muestra o de calibrador de enzimas, homogeneizar e
incubar en baño- María a 37 ± 0,2 ºC por 5 minutos. Después de esta incubación, se
puede esperar hasta 30 minutos para iniciar la medición cinética con la adición del
Reactivo 2.
3. Ajustar el cero del fotómetro a 340 nm con agua destilada o desionizada.
4. Adicionar 0,200 mL del Reactivo 2, homogeneizar y transferir inmediatamente
a una cubeta termostatizada a 37 ± 0,2 ºC. Esperar 1 minuto.
5. Registrar la absorbancia inicial (A1) y disparar simultáneamente el cronómetro.
Después de 2 minutos registrar la absorbancia (A2).
Para verificar la linealidad de la reacción, registrar la absorbancia a intervalos de 1
minuto y verificar si la diferencia de absorbancia por minuto es equivalente.
Determinación de la actividad enzimática sin la utilización del piridoxal
fosfato
Preparación del reactivo de trabajo. Transferir el contenido de un frasco de Reactivo 2
a un frasco de Reactivo 1 y homogeneizar suavemente. El reactivo de trabajo es
estable 14 días entre 2 - 8 ºC y 24 horas entre 15 - 25 ºC cuando no hubiera
contaminación química o microbiana. Anotar la fecha de expiración. Opcionalmente se
puede preparar un volumen menor de reactivo de trabajo mezclando 1 parte de
Reactivo 2 con 4 partes de Reactivo 1 (ejemplo: mezclar 0,200 mL de Reactivo 2 y
0,800 mL de
Reactivo 1).
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Para preservar el desempeño, los reactivos deben permanecer fuera de la temperatura
de almacenamiento solamente el tiempo necesario para obtener el volumen a utilizar.
Evitar la exposición a la luz solar directa.
Procedimiento de la muestra
1. En un tubo rotulado Muestra o Calibrador, pipetear 1,0 mL del reactivo de
trabajo.
2. Ajustar el cero del fotómetro a 340 nm con agua destilada o desionizada.
3. Adicionar 0,100 mL de muestra o calibrador de enzimas, homogeneizar y
transferir inmediatamente a una cubeta termostatizada a 37 ± 0,2 ºC. Esperar 1 minuto.
4. Registrar la absorbancia inicial (A1) y disparar simultáneamente el cronómetro.
Después de 2 minutos registrar la absorbancia (A2).
Para verificar la linealidad de la reacción, registrar la absorbancia a intervalos de 1
minuto y verificar si la diferencia de absorbancia por minuto es equivalente.
Una absorbancia inicial (A1) igual o menor a 0,8 es indicativa de que la muestra tiene
actividad elevada de ALT. En este caso, diluir la muestra y repetir la medición (ver
linealidad).
Como ocurre en toda medición de la actividad enzimática, la rigurosa observancia del
tiempo y de la temperatura de incubación es de gran importancia para la calidad de los
resultados obtenidos.
Los procedimientos sugeridos son adecuados para fotómetros cuyo volumen mínimo
de reacción de medición es igual o menor a 1,0 mL. Debe verificarse la necesidad de
ajuste de volumen según el fotómetro utilizado. Los volúmenes de muestra y reactivo
pueden ser modificados proporcionalmente sin perjuicio del desempeño del ensayo y
el procedimiento de cálculo se mantiene inalterado. En caso de reducción de los
volúmenes es fundamental que se observe el volumen mínimo necesario para la
medición fotométrica. Volúmenes de muestra menores a 0,010 mL son críticos en
aplicaciones manuales y deben ser usados con cautela porque aumentan la
imprecisión de la medición.
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CALCULOS
∆A/minuto Muestra o Calibrador = (A1 - A2)/2
Actividad Del Calibrador
Factor =
∆ A/min Calibrador
ALT (U/L) = ∆A/min Muestra x Factor
Muestra
A1 = 1,925 A2 = 1,851
1,925 - 1,851
∆A/min Muestra = = 0,037
2
Calibrador
A1 = 1,875 A2 = 1,733
1,875 - 1,733
∆A/min Calibrador = = 0,071
2
Actividad del Calibrador (U/L) = 125
125
Factor = = 1761
0,071
Actividad de la ALT (U/L) = 0,037 x 1761 = 65
VALORES DE REFERENCIA
Intervalo de referencia
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Se debe utilizar los intervalos únicamente como orientación. Se recomienda que cada
laboratorio establezca, su propio rango de valores de referencia en la población de
animales atendida.
Estudios de precisión
Los estudios de precisión fueron realizados en el sistema Labtest/Labmax 240®,
utilizando muestras con valores de actividad iguales a 89 y 272 U/L para el
procedimiento con piridoxal fosfato y 80 y 282 U/L para el procedimiento sin piridoxal
fosfato.
LINEALIDAD
El resultado de la medición es lineal entre de 3,5 y 400 U/L
