UNIVERSIDAD DE CUENCA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA
MANIPULACIÓN DE SÓLIDOS
DYNAMIC LIGHT SCATTERING:
DISPESIÓN DINÁMICA DE LA LUZ
Stalin Coronel1
1 Universidad de Cuenca, Facultad de Ciencias Químicas, Carrera de Ingeniería Química.
Cuenca-Ecuador
Autor para correspondencia: [Link]@[Link]
Fecha de entrega: 28 de marzo de 2017
1.- Introducción
Como parte de una serie de trabajos de investigación en el tema de caracterización de
partículas sólidas, en este trabajo se abarcará la técnica de medición de partículas nanométricas
conocida como DLS. La Dispersión de Luz Dinámica “DLD” o “DLS” por sus siglas en inglés de
Dynamic Light Scattering es una de las técnicas más populares de dispersión de luz que nos permite
medir partículas desde 0.1 nm de diámetro hasta decenas de µm. También conocida como QELS
(Quasi Elastic Light Scattering) o como PCS (Photon Correlation Spectroscopy), su principio
básico es simple: la muestra es iluminada por un rayo láser y las fluctuaciones de la luz dispersa son
detectadas por un rápido detector de fotones a un ángulo θ de dispersión conocido.
Desde el punto de vista microscópico las partículas dispersan la luz y proyectan información
acerca de su movimiento, el análisis de la fluctuación de la luz dispersada nos proporciona
información acerca de las partículas. Experimentalmente se caracterizan calculando la función de
correlación de intensidad G(𝜏), cuyo análisis proporciona el coeficiente de difusión de las partículas.
En la práctica, la medición de tamaño de partícula de polvos nanométricos requiere la dispersión de
estos en un solvente apropiado, lo que normalmente se logra con el uso de tenso-activos específicos.
2.- Objetivos
Explicar el DLS como técnica de caracterización de tamaño de partículas, así como
sus aplicaciones más importantes en el campo de la Ingeniería Química.
Investigar bibliográficamente las bases teóricas en las que se sustenta la técnica de
Dispersión de Luz Dinámica y exponerlas en el trabajo de manera oral y escrita.
Conocer el procedimiento experimental y cómo interpretar los resultados de una
técnica de Dispersión de Luz Dinámica a través de la lectura de una tesis o un artículo
científico en el que se utilice la técnica.
Sentar las bases de la técnica DLS y explicarla en una presentación didáctica en clase
para incidir sobre los compañeros una investigación más profunda sobre el tema.
3.- Contenido
I. Dispersión de la Luz
La dispersión (o difusión) de la luz es el fenómeno mediante el cual la radiación electromagnética,
al chocar con pequeñas partículas de tipo coloidal o incluso molecular, es desviada en su dirección
de propagación, de forma aparentemente caótica. La medida de la luz dispersada (o difusa) da lugar
a técnicas muy útiles en la determinación de la concentración de sustancias en suspensión, así como
en la caracterización de la forma y del tamaño de las partículas coloidales y macromoleculares.
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Durante la propagación de la luz en un medio cualquiera, la acción del vector campo eléctrico de la
onda electromagnética produce la polarización del medio, es decir, las moléculas adquieren un
momento dipolar cuya polaridad cambia de forma oscilante con la misma frecuencia que la del
campo. De acuerdo con las leyes de la electrodinámica clásica, los dipolos oscilantes se convierten
en fuentes emisoras de radiación. De acuerdo a la radiación emitida, la dispersión se clasifica en:
Dispersión clásica, elástica o estática
Dispersión cuasi-elástica, o dinámica
Dispersión inelástica o, más propiamente, Raman.
Teoría de Rayleigh Teoría de Mie
La teoría de Rayleigh es aplicable para La teoría de Mie es una descripción exacta de
partículas pequeñas y moléculas cuyos cómo las partículas esféricas de todos los
diámetros son menores que 1/10 de la longitud tamaños y las propiedades ópticas dispersan la
de onda del láser (alrededor de 60 nm para un luz. Cuando las partículas llegan a ser
láser Helio-Neón), la dispersión desde una mayores que λ / 10, la dispersión cambia de
partícula iluminada por un láser polarizado ser isotrópica a una distorsión en la dirección
verticalmente será esencialmente isotrópica, de dispersión hacia adelante. Esta dispersión
es decir, igual en todas las direcciones. La produce un patrón como un lóbulo de antena,
intensidad de luz que producen es con un lóbulo delantero más nítido y más
proporcional a d6, donde d es el diámetro de la intenso en las partículas más grandes. La
partícula. Es la dispersión de Rayleigh de las dispersión de Mie no es fuertemente
moléculas del aire, la que nos da el cielo azul. dependiente de la longitud de onda, y cuando
en el aire se encuentra una gran cantidad de
partículas materiales, produce el resplandor
casi blanco alrededor del Sol. También nos da
la luz blanca en la bruma y la niebla.
FIGURA 1: DISPERSIÓN DE RAYLEIGH Y MIE
FUENTE: M. Olmo, R. Nave, Hyperphysics, 2000.
II. Movimiento Browniano
El movimiento browniano es el movimiento aleatorio de las partículas debido al bombardeo de las
moléculas disolventes que las rodean. Normalmente la técnica DLS se usa para la medición de
partículas suspendidas dentro de un líquido, el DLS mide el movimiento browniano y lo relaciona
con el tamaño de las partículas.
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Cuanto mayor sea la partícula, más lento será el movimiento browniano. Las partículas más
pequeñas son "golpeadas" aún más por las moléculas de disolvente y se mueven más rápidamente.
Para la técnica DLS es necesaria una temperatura conocida con precisión, ya que se requiere
conocimiento de la viscosidad (ya que la viscosidad de un líquido está relacionada con su
temperatura). La temperatura también necesita ser estable, de lo contrario las corrientes de
convección en la muestra causarán movimientos no aleatorios que arruinarán la interpretación
correcta del tamaño. La velocidad del movimiento browniano se define por una propiedad conocida
como el coeficiente de difusión traslacional (usualmente dado el símbolo D).
FIGURA 2: MOVIMIENTO BROWNIANO
FUENTE: G. Meira, s. f. Grupo Polímeros Santa Fé
III. Diámetro Hidrodinámico
El tamaño de una partícula se calcula a partir del coeficiente de difusión traslacional utilizando la
ecuación de Stokes-Einstein;
𝒌𝑻
𝒅(𝑯) = (1)
𝟑𝝅𝜼𝑫
En donde:
d(H) es el diámetro hidrodinámico.
D es el coeficiente de difusión traslacional.
k es la constante de Boltzmann
T es la temperatura absoluta
𝜂 es la viscosidad.
Hay que tener en cuenta que el diámetro que se mide en la técnica DLS es un valor que se refiere a
cómo una partícula se difunde dentro de un fluido, referido como diámetro hidrodinámico. El
diámetro que se obtiene por esta técnica es el diámetro de una esfera que tiene el mismo coeficiente
de difusión traslacional que la partícula. El coeficiente de difusión de traslación dependerá del
tamaño del núcleo de la partícula, de cualquier estructura superficial, la concentración y el tipo de
iones en el medio.
IV. DLS como técnica de caracterización de la materia
El equipo consta de una fuente de luz láser de He-Ne (λ0 = 632.8 nm), el cual incide sobre la muestra
a analizar, que se encuentra convenientemente termostatizada mediante un baño en una cubeta a
temperatura controlada. Un detector constituido por un tubo fotomultiplicador montado sobre un
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brazo móvil permite obtener mediciones de la intensidad de luz dispersada a los θ comprendidos
entre 20º y 160º.
FIGURA 3: COMPONENTES DE UN INSTRUMENTO DLS
FUENTE: M. Olmo, R. Nave, Hyperphysics, 2000.
En un experimento de Dispersión de luz dinámica, se mide la luz dispersada en intervalos de tiempo,
τ, pudiéndose observar que la intensidad fluctúa alrededor de un valor medio, como consecuencia
del movimiento aleatorio de las partículas. Este comportamiento puede racionalizarse a través de la
denominada función de auto-correlación, g(τ). que representa el promedio de los valores de la
intensidad de luz medida a diferentes valores del intervalo de tiempo, τ. tiempos.
En la siguiente figura se muestra esquemáticamente la medición de DLS y del auto-correlador digital
asociado. La función de auto-correlación indica cómo está de correlacionado un proceso (o una
variable) consigo misma a distintos tiempos.
FIGURA 1: ESQUEMA DLS
FUENTE: Luis M. Gugliotta, Georgina S. Stegmayer, Jorge R. Vega,2007.
Cómo funciona
En la dispersión dinámica de la luz, se mide la velocidad a la que se difunden las partículas debido
al movimiento browniano. Esto se realiza midiendo la velocidad a la cual la intensidad de la luz
dispersada fluctúa cuando se detecta, usando una disposición óptica adecuada. Cuando la luz llega
a pequeñas partículas, la luz se dispersa en todas las direcciones (dispersión de Rayleigh) siempre y
cuando las partículas sean pequeñas en comparación con la longitud de onda. Una fuente de luz
monocromática, usualmente un láser, se dispara a través de un polarizador y en una muestra la luz
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dispersada pasa a través de un segundo polarizador donde es recogida por un fotomultiplicador y la
imagen resultante es proyectada sobre una pantalla. Esto se conoce como un patrón moteado.
FIGURA 4: REPRESENTACIÓN ESQUEMATICA DE UN PATRÓN DE PUNTOS
FUENTE: Jones M ,2010.
Todas las moléculas de la solución son golpeadas con la luz y todas las moléculas difractan la luz
en todas las direcciones.
La luz difractada de todas las moléculas puede interferir constructivamente (regiones de luz) o
destructivamente (regiones oscuras). Este proceso se repite a intervalos de tiempo cortos y el
conjunto resultante de patrones de manchas se analiza mediante un auto-correlador que compara la
intensidad de luz en cada punto a lo largo del tiempo. Los espacios oscuros son donde las adiciones
de fase de la luz dispersada son mutuamente destructivas y se cancelan mutuamente. Las manchas
brillantes de luz en el patrón moteado son donde la luz dispersada de las partículas llega con la
misma fase e interfiere constructivamente para formar un parche brillante.
La velocidad a la que se producen estas fluctuaciones de intensidad dependerá del tamaño de las
partículas
FIGURA 5: ONDAS DE LUZ EN PARTÍCULAS
FUENTE: Dynamic Light Scattering: An Introduction in 30 Minutes, 2010
Es posible medir directamente el espectro de frecuencias contenido en las fluctuaciones de
intensidad que surgen del movimiento browniano de las partículas, pero es ineficaz hacerlo. La
mejor manera es usar un dispositivo llamado un autocorrelador digital.
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Ventajas Desventajas:
1) La medición es absoluta en el sentido 1) El método obtiene distribuciones en
que no se requieren estándares de base a la intensidad de coeficientes de
calibración. difusión.
2) La medición es “no invasiva”, es 2) La distribución obtenida presenta baja
decir que la muestra se puede resolución (que se puede mejorar
recuperar después de la medición. midiendo a varios o múltiples
3) La medición es rápida, obteniéndose ángulos).
buenos resultados en unos pocos 3) Se debe eliminar el polvo (dispersores
minutos. indeseados), como en cualquier
4) La medición se efectúa sobre una técnica basada en la dispersión de luz.
muestra de millones de partículas, por 4) Mide radio hidrodinámico, es cual es
lo que no existen problemas de afectado por la forma de la partícula.
muestreo. 5) No puede distinguir entre cambios de
5) La preparación de la muestra es muy forma o estado de oligomerización.
simple, requiriéndose normalmente la 6) Necesita fraccionamiento para
dilución de la muestra original. resolver oligómeros presentes en una
6) Adecuado para estudiar cinética de mezcla.
agregación
V. Función de Correlación
Se ha visto que las partículas en una dispersión están en un constante y aleatorio movimiento
Browniano y que esto hace que la intensidad de la luz dispersa fluctúe en función del tiempo. El
correlador utilizado en un instrumento DLS construirá la función de correlación G (τ) de la
intensidad dispersada.
𝐺(𝜏) = 𝐼(𝑡) ∗ 𝐼(𝑡 + 𝜏)
En donde τ es la diferencia de tiempo del correlador. Para un gran número de particular
monodispersas en movimiento Browniano, la función de correlación es una función exponencial
decreciente en el tiempo de correlación τ.
VI. Cómo interpretar los resultados de un DLS
El tamaño de una partícula se obtiene de la función de correlación utilizando varios algoritmos. Hay
dos enfoques que se pueden tomar:
a) Ajustar un único exponencial a la función de correlación para obtener el tamaño medio
(diámetro medio z) y una estimación del ancho de la distribución (índice de polidispersidad)
b) Ajustar una exponencial múltiple a la función de correlación para obtener la distribución de
los tamaños de las partículas (como los mínimos cuadrados no negativos (NNLS) o
CONTIN.
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FIGURA 6: PARTÍCULAS GRANDES Y PEQUEÑAS
FUENTE: Jones M ,2010.
La distribución de tamaños obtenida es una gráfica de la intensidad relativa de la luz dispersada por
partículas en varias clases de tamaño y por lo tanto se conoce como distribución de tamaño de
intensidad.
Si la distribución por intensidad es un solo pico bastante suave, entonces no tiene mucho sentido
hacer la conversión a una distribución de volumen usando la teoría de Mie.
Si los parámetros ópticos son correctos, esto sólo proporcionará un pico de forma ligeramente
diferente. Sin embargo, si la gráfica muestra una cola sustancial, o más de un pico, entonces la teoría
de Mie puede hacer uso del parámetro de entrada del índice de refracción de la muestra para
convertir la distribución de intensidad en una distribución de volumen. Esto dará entonces una visión
más realista de la importancia de la cola o el segundo pico presente. En términos generales se verá
que: d (intensidad) > d (volumen) > d (número)
FIGURA 7: PORCENTAJE RELATIVO VS NÚMERO, VOLUMEN E INTENSIDAD
FUENTE: Dynamic Light Scattering: An Introduction in 30 Minutes, 2010
Interpretación del Correlograma
El tiempo en el que la correlación de la señal comienza a decaer, da información sobre el diámetro
medio.
El ángulo de decaimiento brinda información da información sobre la poli-dispersidad de la
distribución.
La línea base proporciona información sobre la presencia de grandes partículas / agregados
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FIGURA 8: PORCENTAJE RELATIVO VS NÚMERO, VOLUMEN E INTENSIDAD
FUENTE: Dynamic Light Scattering: An Introduction in 30 Minutes, 2010
VII. Aplicaciones de la técnica
La técnica DLS se utiliza ampliamente para la caracterización de tamaño de partícula de proteínas,
polímeros y dispersiones coloidales, micelas, carbohidratos y nanopartículas. Si el sistema no se
dispersa en tamaño, se puede determinar el diámetro efectivo medio de las partículas. Esta medida
depende del tamaño del núcleo de partícula, el tamaño de las estructuras superficiales, la
concentración de partículas y el tipo de iones en el medio.
Estimaciones de poblaciones de agregados grandes y pequeños, para moléculas pequeñas,
proteínas o liposomas
Comprobar la calidad de las biomoléculas antes de realizar análisis costosos como SPR o
SANS
Analizar la estabilidad térmica y la desnaturalización química, diferenciando el despliegue
puro de la agregación
Determinar los tamaños de nanopartículas metálicas o puntos cuánticos
Cuantificar los procesos de auto-ensamblaje de polipéptidos o ADN
Evaluar la estabilidad coloidal como precursor de la agregación y la precipitación
VIII. Experimento de caracterización con DLS
En el artículo de revista Distribución del tamaño de partícula por dispersión dinámica de luz de la
tetracarboxifenilporfirina de cobre (II) anclada al dióxido de titanio del año 2013, los autores
trabajaron en el estudio de la distribución del tamaño de partícula mediante la técnica de dispersión
dinámica de luz.
El tamaño de partícula en suspensión fue determinado mediante la técnica de DLS, con un equipo
Zetasizer versión 6.2 de Malvern Instruments Ltda. Para el análisis se tomó 1g/L de TCPPCu/TiO2
a pH=5 en agua como dispersante. La distribución de intensidad vista en el programa DLS se obtuvo
por el análisis de la función de correlación por el análisis del menor de los cuadrados no negativo.
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FIGURA 9, COEFICIENTE DE CORRELACIÓN DE LA INTENSIDAD DE LUZ DISPERSADA
FUENTE: Días Uribe, Vallejo & Puello Polo, 2013
La figura 9 muestra el coeficiente de correlación de la intensidad de luz dispersada por las partículas
de TCPPCu/TiO2 a pH 5. El punto en que la correlación de la señal empieza a caer proporciona
información del diámetro promedio y el ángulo de caída permite observar la ´dispersidad´ de la
distribución de las partículas. Se obtiene un ángulo similar y una línea de base corta, regular y con
poco ruido, lo que permite inferir la baja polidispersidad.
La figura 10 muestra la calidad del ajuste de cumulantes (autocorrelación) a los datos medidos
indicando que el diámetro calculado y la dispersidad obtenida para las partículas medidas son
fiables. En ellas se puede ver que la función de auto-correlación de la intensidad de luz dispersada
disminuye más rápidamente después de los 1000 ms.
FIGURA 10, FUNCIÓN DE AUTOCORRELACIÓN DE LUZ DISPERSADA
FUENTE: Días Uribe, Vallejo & Puello Polo, 2013
El análisis de DLS correspondiente a la intensidad muestra una banda (figura 11), el cual sugiere la
formación de un solo grupo de partículas con un diámetro promedio de 211.1 nm.
FIGURA 11, ESTUDIO DE DLS EN INTENSIDAD
FUENTE: Días Uribe, Vallejo & Puello Polo, 2013
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En la Figura 12 se muestra la gráfica del tamaño de partícula en función del número de partículas.
Se puede observar un solo tipo de partícula indicando que a este valor de pH no hay lixiviación de
la tetracarboxifenilporfirina.
FIGURA 12, DISTRIBUCIÓN DEL NÚMERO DE PARTÍCULAS
FUENTE: Días Uribe, Vallejo & Puello Polo, 2013
La gráficas de volumen en función del tamaño de partícula confirman que a pH=5 solo hay un
mismo tipo de partícula. La figura 13 muestra la variación del porcentaje en volumen con respecto
al tamaño de las partículas presentes
FIGURA 13 DISTRIBUCIÓN DEL VOLUMEN EN FUNCIÓN DEL TAMAÑO DE PARTÍCULA
FUENTE: Días Uribe, Vallejo & Puello Polo, 2013
Mediante la técnica de dispersión dinámica de luz, se encontró un solo tipo de partícula a pH=5 del
sistema tetracarboxifenilporfirina de cobre (II) anclada al dióxido de titanio en dispersión acuosa,
esto indica la estabilidad de la porfirina sobre el TiO2 a este valor de pH. Este resultado indica que
el sistema TCPPCu/TiO2 puede ser utilizado en diferentes procesos de fotocatálisis para oxidación
de colorantes sin que se presente lixiviación del sensibilizador. Finalmente, los resultados indican
que la técnica de dispersión dinámica de luz es adecuada para determinar la estabilidad de estos
sistemas.
4.- Conclusiones
Se logró explicar el DLS como técnica de caracterización de tamaño de partículas
mediante una investigación bibliográfica, se resaltaron las aplicaciones, los costos,
las ventajas y desventajas frente a otras técnicas de caracterización de tamaño de
partícula.
Las aplicaciones más importantes del DLS son: .
Se sentaron de manera superficial las bases teóricas de la dispersión de luz, teorías
de Rayleigh, Mie, diámetro hidrodinámico y movimiento browniano lo suficiente
como para que la explicación del mecanismo de funcionamiento de un equipo de
DLS quede claro.
Se realizó la lectura de un artículo en una revista científica de Colombia en donde
utilizaban la técnica DLS para caracterizar el tamaño de partículas de
tetracarboxifenilporfirina de cobre (II) anclada al dióxido de titanio, en cuyo trabajo
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llegaron a la conclusión que la técnica DLS fue la adecuada para alcanzar el objetivo
que perseguían. Esto brinda la visión de que la técnica no es algo que gente de
Latinoamérica no tenga al alcance por la complejidad o por los altos costos, más bien
nos indica que cada vez el mundo se va abriendo hacia nuevas tecnologías, y que este
tipo de técnicas sofisticadas son un escalón, una ayuda y una herramienta que nos
permite alcanzar grandes objetivos en el campo de la investigación y el desarrollo de
nuevos materiales. Como latinoamericanos no debemos cerrarnos en un mundo del
siglo pasado, debemos adentrarnos hacia el futuro, no temer los nuevos avances sino
adueñarnos de ellos ya que esto nos llevará al desarrollo científico que tanto
buscamos.
5.- Bibliografía
Berne, B., & Pecora, R. (1976). Dynamic light scattering. With applications to chemistry,
biology, and physics (1era ed.). New York,N.Y.: Wiley.
Días Uribe, C., Vallejo, W., & Puello Polo, E. (2013). Distribución del tamaño de partícula
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titanio. ITECKNE, 10(2), 224-228. Recuperado a partir de
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