[E.A.

P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

Facultad de ingeniería industrial

E.A.P Ingeniería textil y de confecciones

UNMSM

Laboratorio de Química Orgánica

Día: 15/10/16 Hora: 08:00a.m.

N° de práctica: 04

CROMATOGRAFÍA DE
Nombre de práctica:
COMPUESTOS ORGÁNICOS|
Profesor: Gustavo Ruiz

Fecha de entrega: 20/10/16

INTEGRANTES:
ALBORNOZ FLORES SADAN JOSYIN……………………....15170225
CUADROS GÓMEZ SANDRA LISSETTE……………………..15170230
GÓMEZ AYVAR JULIO………………………………………..15170320
OLAZABAL BRANDOM JHORDAN.…………………...……15170093
RIVERA AYALA ROMINA DANIELA………………………...15170252

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 1

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

ÍNDICE

Introducción…………………………………………………………..………Pág. 3

Objetivos…………….…………………………………………………………Pág.4

Marco teórico…………………..…………………………………….………Pág.5

Resumen del experimento……………………...……….…………………Pág.10

Discusión de resultados……………………………………………..………Pág. 14

Conclusiones……………….…………………………………………………Pág.18

Bibliografía………….…………………………………………………………Pág.19

Fichas de seguridad ...……………………………….…….………………Pág. 20

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 2

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

INTRODUCCIÓN
La cromatografía es una técnica para separación de los distintos
componentes de una mezcla, permite la separación de trozos de
impurezas o bien de las fracciones importantes. El fundamento de la
cromatografía es la separación de diferentes tipos de moléculas
cuando desciende por una columna o atraviesa una delgada capa de
material inerte. En ambos casos existe una sustancia que proporciona
una superficie elevada y que interacciona físicamente con el
compuesto a analizar. Si las moléculas son adsorbidas por la superficie,
el fenómeno se llama cromatografía de adsorción y si se disuelve en
una delgada superficie liquida, cromatografía de reparto.

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 3

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

OBJETIVOS
 Conocer las técnicas de cromatografía y su importancia.

 Comprender y utilizar la cromatografía en capa fina.

 Comparar y analizar el resultado de la práctica anterior.

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 4

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

MATERIALES

 Capilares

 Producto obtenido en la
práctica anterior

 Mechero

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 5

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

 Cromatoplaca

 Cuba

 Tubo con pico

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 6

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

MARCO TEÓRICO
La cromatografía es un procedimiento físico-químico que consiste en
separar los componentes o sustancias integrantes de una mezcla en
movimiento por medio de reparto o adsorción sobre una superficie
estacionaria o inmóvil. Es un conjunto de técnicas basadas en el
principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos
componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las
cantidades de dichos componentes. La razón por la que es posible
conseguir separaciones difíciles de lograr por otros métodos estriba en
que diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos
da como resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria
y, por tanto, una separación efectiva en función de los tiempos de
retención de cada componente de la mezcla.

Se pueden establecer dos mecanismos:

1. Reparto o participación: Es la distribución de una sustancia

o mezcla de sustancias entre la fase móvil y la fase
estacionaria soportada sobre un sólido adecuado.

2. Adsorción: Fenómeno de superficie que consiste en el

aumento de concentración de una sustancia en la
superficie que consiste en el aumento de la concentración
de una sustancia en la superficie del sólido. El proceso
inverso, es decir la separación de las moléculas adsorbidas
en la superficie del sólido, se llama desorción.

Además la cromatografía puede cumplir dos funciones básicas:

 Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más

puros y que puedan ser usados posteriormente, en etapa final de
muchas síntesis.

 Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad

analítica). En este caso, las cantidades de material empleadas
son pequeñas.

La cromatografía es importante porque una vez separada la muestra en

sus componentes cromatográficamente, cada uno de ellos puede ser
caracterizado e identificado. También es posible determinar la cantidad

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 7

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

de cada componente en la muestra, lo que hace que la cromatografía

sea una herramienta analítica tanto cualitativa como
cuantitativamente.

Existen diferentes tipos de cromatografía, según la posición que adopte

la fase estacionaria, y se pueden dividir en:

 Cromatografía plana: Es en donde la fase estacionaria

se sitúa sobre una placa plana o un papel. A su vez
existen dos tipos de cromatografía plana:

 Cromatografía en papel

 Cromatografía en capa fina

 Cromatografía en columna: Es aquella en donde la fase

estacionaria se sitúa dentro de una columna. Además,
según el tipo de fluido empleado como fase móvil se
puede subdividir en:

 Cromatografía de líquidos

 Cromatografía de gases

 Cromatografía de fluidos supercríticos

Nosotros utilizaremos la cromatografía plana, específicamente la

cromatografía en capa fina.

Existen términos importantes en cromatografía que deben ser tomados

en cuenta, como por ejemplo:

 Fase móvil (eluyente): Lo constituyen los solventes, que

son sustancias fluidas de diferente polaridad, ejemplo:
metanol, cloroformo, etanol, etc. La polaridad de la fase
móvil está relacionada con su capacidad de elución o
desorción. Los solventes deben tener elevado grado de
pureza.

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 8

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

 Fase estacionaria o soporte (adsorbente): Lo constituyen

las sustancias adsorbentes que generalmente se
depositan sobre la placa de vidrio o columna de vidrio,
para nuestro caso: gel de sílice o silical gel.

 Revelador: Si todos los compuestos son coloreados,

bastará la inspección ocular para distinguir las manchas,
pero en la mayoría de los casos los compuestos son
incoloros y, por ello, invisibles en el cromatograma,
siendo necesario utilizar métodos físicos (como la luz
ultra violeta) o químicos (como rociar Cl 3Fe en nuestro
caso) u otros reactivos especiales que permitan hacerlos
visibles.

 Relación de flujo (Rf): Es una constante física

característica de cada compuesto, siempre que se
efectúe la determinación en las mismas condiciones. Es
la relación que existe entre la distancia alcanzada por la
muestra problema (frente de soluto) y la distancia
recorrida por el solvente (frente de solvente).

𝑫𝒊𝒔𝒕𝒂𝒏𝒄𝒊𝒂 𝒓𝒆𝒄𝒐𝒓𝒓𝒊𝒅𝒂 𝒑𝒐𝒓 𝒍𝒂 𝒔𝒖𝒔𝒕𝒂𝒏𝒄𝒊𝒂

𝑹𝒇 =
𝑫𝒊𝒔𝒕𝒂𝒏𝒄𝒊𝒂 𝒓𝒆𝒄𝒐𝒓𝒓𝒊𝒅𝒂 𝒑𝒐𝒓 𝒆𝒍 𝒔𝒐𝒍𝒗𝒆𝒏𝒕𝒆

 Frente de soluto: Distancia recorrida por la muestra

problema en una cromatografía.

 Frente de solvente: Distancia recorrida por la fase móvil

en una cromatografía.

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 9

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

RESUMEN DEL EXPERIMENTO

 El proceso comenzó calentando el tubo de capilar en el mechero para
obtener dos de la mitad de tamaño.

 Después se procede a echar unas gotas de alcohol al producto del

experimento anterior (cristales) para disolverlos.

 Seguidamente utilizamos uno de los capilares para sembrar 5 veces la

muestra patrón o muestra estándar en el cromatofolio (cromatoplaca),
teniendo el cuidado de que sea en el mismo punto (a unos 0.5 cm del
borde) y de dejarla secar cada vez.

 Repetimos lo mismo pero con nuestro producto de la clase anterior (MP,

muestra problema) y sembramos 10 veces en otro punto a igual
distancia del borde, teniendo la precaución de dejar secar después de
cada aplicación.

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 10

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

 Introducir el cromatograma en la cámara de saturación (en la cuba)

en el que a su vez contiene 2 ml del sistema de solventes.

 Cuando el solvente este por llegar al borde superior retirarla de la

cámara, marcar el frente de solvente.

 Dejamos secar la cromatoplaca a temperatura ambiente y luego

con ayuda de un secador.

 Para revelarla usamos vapores de yodo y así podemos determinar el

Rf de ambas sustancias.

Realizamos los cálculos para hallar el Rf correspondiente a cada

sustancia.

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 11

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

 Como vimos en el experimento es un procedimiento

físico-químico que consiste en separar los componentes
o sustancias integrantes de una mezcla en movimiento
por medio de reparto o adsorción sobre una superficie
estacionaria móvil.
 Vimos en nuestro experimento que la relación de flujo
entre la ACETANILIDA (ST) Y ACETANILIDAD CRISTALIZADA
(MP) fue tan solo de 0.5 esto quiere decir la pureza de
nuestra reacción es alta debido a que la constante para
la ACETANILIDA (ST) Y ACETANILIDAD CRISTALIZADA (MP)
es de 0.5.
 Con esto demostramos que nuestro trabajo lo realizamos
de la manera más óptima y siguiendo todas las
indicaciones tal cual como nos dijeron para alcanzar un
relación en ambos de 0.5.
 Este método de cromatografía es la más usada y se
puede decir con que se puede alcanzar mejor la
separación de sustancias.

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 12

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

CUESTIONARIO

1. ¿Qué es una serie eulotropica?

Una serie eluotrópica es un listado de varios compuestos

ordenados según su poder de elución para un adsorbente
dado. Tales series son útiles para determinar los disolventes
necesarios en la cromatografía de una mezcla de
compuestos químicos. Normalmente tales series comienzan
con disolventes no-polares, como el n-hexano, y finalizan en
disolventes polares como metanol o agua. El orden de
disolventes en una serie eluotrópica depende a la vez de la
fase estacionaria así como del compuesto empleado para
determinar el orden.

2.- Mencione las aplicaciones de la cromatografía

por HPLC y la cromatografía de gases.

En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que

fluye a través de una columna que contiene a la fase fija. La
separación cromatográfica en HPLC es el resultado de las
interacciones específicas entre las moléculas de la muestra
en ambas fases, móvil y estacionaria

A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía

de líquidos de alto rendimiento (HPLC, de high-performance
liquid chromatography) no está limitada por la volatilidad o la
estabilidad térmica de la muestra.

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 13

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies

iónicas, productos naturales lábiles, materiales poliméricos y
una gran variedad de otros grupos polifuncionales de alto
peso molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro
parámetro se encuentra disponible para la selectividad, en
adición a una fase estacionaria activa.

La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo

que permite una mayor gama de estas interacciones
selectivas y más posibilidades para la separación.

HPLC preparativa

Es la técnica escogida para aislamiento y

purificación de productos de valor en las industrias químicas y
farmacéuticas así como en la biotecnología y la
bioquímica. La cromatografía preparativa comprende un
amplio rango de aplicaciones, desde el aislamiento de 1µg
de muestra para identificación espectroscópica hasta el
aislamiento de un compuesto puro de una mezcla de 100 g.

Aplicaciones

Campos de Aplicación de HPLC

 Fármacos: Antibióticos, sedantes esteroides, analgésicos

 Bioquímica: Aminoácidos, proteínas, carbohidratos,

lípidos

 Productos de alimentación: Edulcorantes artificiales,

antioxidantes, aflatoxinas, aditivos
LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 14
 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

 Productos de la industria química: Aromáticos

condensados, tensoactivos, propulsores, colorantes

 Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB

 Química forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre,

narcóticos

 Medicina clínica: Ácidos biliares, metabolitos de drogas,

extractos de orina, estrógenos.

Algunas aplicaciones importantes de la HPLC preparativa

 Separación y purificación de metabolitos

 Separación y purificación de los metabolitos de las

drogas procedentes de muestras de orina

 Purificación y separación de enantiómeros

 Purificación de compuestos naturales

 Purificación y caracterización de enzimas y proteínas

3.-Diga que es la electroforesis y cuál es su

fundamento

La electroforesis es una técnica para la separación

de moléculas según la movilidad de éstas en un campo
eléctrico.1 La separación puede realizarse sobre la superficie
hidratada de un soporte sólido (p. ej., electroforesis en papel
o en acetato de celulosa), a través de una matriz porosa
(electroforesis en gel), o bien en disolución (electroforesis

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 15

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

libre). Dependiendo de la técnica que se use, la separación

obedece en distinta medida a la carga eléctrica de las
moléculas y a su masa.

Su funcionamiento consiste en que La gran mayoría

de macromoléculas están cargadas eléctricamente y, al
igual que los electrolitos, se pueden clasificar en fuertes y
débiles dependiendo de la constante de
ionización de grupos ácidos y básicos. Por ejemplo los ácidos
nucleicos son poliácidos fuertes.

Por lo general, para caracterizar la molécula se determina la

velocidad a la que esta se mueve en un campo eléctrico y se
utiliza para determinar, en el caso de proteínas, la masa
molecular o para detectar cambios de aminoácidos y separar
cuantitativamente distintas especies moleculares; en el caso
de ácidos nucleicos se determina su tamaño, medido en
pares de bases.

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 16

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

FICHA DE SEGURIDAD

INSUMO NRO VIAS DE PROPIEDADES

PELIGROS TOXICOLOGÍA
QUIMICO CAS EXPOSICIÓN FISICOQUIMICAS
-En caso de
103- inhalación,
-No es -En la piel no
84-4 proporcionar -Forma granulado.
explosivo produce
aire fresco. -Color marrón oscuro
Acetanilida ni irritaciones
-en caso de -Punto de ebullición
inflamable -en los ojos no
los ojos lavar 302°c
. produce
con -Estabilidad química.
irritaciones.
abundante
agua.
103- -Este compuesto es
84-4 levemente soluble
-En caso de en caliente. Tiene la
inhalación, capacidad de auto
-En la piel no
proporcionar inflamarse si alcanza
-No es produce
aire fresco. una temperatura de
Acetanilida explosivo irritaciones
-en caso de más de 400 °C, pero
recristalizada ni -en los ojos no
los ojos lavar de lo contrario es
inflamable produce
con estable bajo la
irritaciones.
abundante mayoría de
agua. condiciones. Los
cristales puros son de
color blanco
 57- -En caso de
88- -Los ser ingerido -Peso molecular
5 niveles de pasara a ser 386,65
colesterol digerido o a - Es
-Al contacto
alto en el impregnar en un lípido derivado
con la piel
organismo los tejidos del del ciclopentanoper
colesterol solamente la
pueden cuerpo hidrofenantreno (o e
deja más lisa y
traer -en caso de sterano), constituido
grasosa
problemas tener por cuatro carboxilos
cardiovas contacto con condensados o
culares los ojos lavar fusionados
con agua

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 17

 [E.A.P INGENIERIA TEXTIL Y DE CONFECCIONES] QUIMICA GENERAL

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
 Química general de CHANG
 Química de Lumbreras
 Manual de Vancouver
 De los Ángeles, María. (2008). Diferencias entre Compuestos
Orgánicos e inorgánicos.

SITIOS WEB
 «Cromatografía en columna | La Guía de Química». Accedido 23 de octubre de 2015.
http://quimica.laguia2000.com/general/cromatografia-en-columna.

 «Cromatografía». Wikipedia, la enciclopedia libre, 1 de octubre de 2015.

https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Cromatograf%C3%ADa&oldid=85511226.

 «cromatografia en pael - Buscar con Google». Accedido 23 de octubre de 2015.

https://www.google.com.pe/?gfe_rd=cr&ei=7L4pVrK4M7Cw8wfDzbzQBA&gws_rd=ssl#q=cr
omatografia+en+pael.

 «Cromatografía en capa fina». Wikipedia, la enciclopedia libre, 4 de junio de 2015.

https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Cromatograf%C3%ADa_en_capa_fina&oldid=82
956157.

LABORATORIO DE QUIMICA GENERAL Página 18