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Segundo Informe de Microbiologia Sanitaria I

Este documento describe el uso del microscopio compuesto en un laboratorio de microbiología sanitaria. Explica las partes del microscopio, como el ocular, platina, objetivo y condensador. También describe los diferentes tipos de microscopios como el de campo claro y electrónico, y cómo se usan para observar muestras microscópicas como la trichoderma. El objetivo es que los estudiantes aprendan a identificar y usar correctamente un microscopio compuesto.

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Segundo Informe de Microbiologia Sanitaria I

Este documento describe el uso del microscopio compuesto en un laboratorio de microbiología sanitaria. Explica las partes del microscopio, como el ocular, platina, objetivo y condensador. También describe los diferentes tipos de microscopios como el de campo claro y electrónico, y cómo se usan para observar muestras microscópicas como la trichoderma. El objetivo es que los estudiantes aprendan a identificar y usar correctamente un microscopio compuesto.

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL

USO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO

PRIMER LABORATORIO DEL CURSO MICROBIOLOGÍA SANITARIA - SA323F

CANO FELIX NIELS HENRIK- 20160498A

DOCENTE: ING. JORGE GILBERTO TELLO CEBREROS

Lima, Perú
2018
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
INDICE:
Resumen 2
Introducción 2
Objetivos 2
Marco Teórico 2
Resultados 15
Discusión de resultados 16
Conclusiones 16
Recomendaciones 17
Cuestionario 17
Fuentes de información 19
Anexos 19
Apéndice 21

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RESUMEN:

En el presente informe “Uso del microscopio compuesto” se realizó con el fin de


conocer las partes de un microscopio compuesto además de distinguir y
diferenciar ciertas muestras específicas como son la trichoderma.

INTRODUCCIÓN:

El microscopio surgió con la idea de combinar más de un lente para observar


objetos de forma aumentada. Acorde con esta definición, la historia del
microscopio empezaría a finales del siglo XVI, con el diseño de Zacharias
Janssen.

OBJETIVOS:

 Conocer las partes y funcionamiento del microscopio.


 Tomar conocimiento del cuidado, manejo y utilidad de un microscopio en
el laboratorio de microbiología.
 Aprender a ver una muestra a través de un microscopio compuesto.

MARCO TEÓRICO:

CONCEPTOS:
 Los microscopios ópticos emplean lentes de vidrio para desviar y enfocar
los rayos de luz, produciendo imágenes aumentadas de objetos pequeños.
La resolución de un microscopio óptico se determina por la apertura
numérica de su sistema de lentes y la longitud de onda de la luz empleada;
la resolución máxima es de aproximadamente 0.2 u.m.
 Los tipos más comunes de microscopios ópticos son los de campo claro,
campo oscuro, contraste de fases y de fluorescencia. Cada uno de ellos
ofrece una imagen distintiva y pueden emplearse para observar aspectos
diferentes de la morfología microbiana.
 Como la mayoría de los microorganismos son incoloros y, por ello, difíciles
de observar con el microscopio de campo claro, se suelen fijar y teñir antes
de su observación. Se puede emplear una tinción simple o diferencial para
aumentar el contraste. Algunas estructuras bacterianas específicas, como
cápsulas, endosporas y flagelos pueden también teñirse selectivamente.

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 El microscopio electrónico de transmisión alcanza una gran resolución
(aproximadamente, 0.5 nm), al utilizar haces de electrones de longitud de
onda muy corta, en lugar de luz visible. Aunque los microorganismos
pueden prepararse para su observación de otras formas, se suelen
estudiar cortes finos de muestras incluidas en polímeros y tratadas con
metales pesados para mejorar el contraste.
 Se pueden apreciar características externas con gran detalle por medio del
microscopio electrónico de barrido, que genera una imagen al escanear la
superficie de las muestras con un haz fino de electrones, en lugar de
proyectar electrones a través de las mismas.
 Nuevos métodos de microscopía están mejorando nuestra capacidad para
observar microorganismos y moléculas. Dos ejemplos de estos nuevos
sistemas son la microscopía con focal de barrido por láser y la microscopía
con sonda de barrido.

PARTES DE UN MICROSCOPIO:

 OCULAR: donde acercas los ojos para ver.


 PLATINA: es esa especie de pequeño plato, donde se coloca el
portaobjeto, donde está lo que quieres observar.
 FOCO: Este control sirve para enfocar el objetivo, para tener mejor nitidez
y observar los detalles.
 CONDENSADOR: Es el lente que está debajo de tu objetivo, sirve para
concentrar la luz sobre el mismo.
 LENTES: Están justo encima del objetivo. Según el modelo de microscopio
puede tener un revolver, con distintos valores de aumentos para
seleccionar.
 REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar,
cambiar los objetivos. La esfera se suele llamar CABEZAL Y contiene los
sistemas de lentes oculares (monoculares o binoculares (2 lentes)).
 BRAZO: Es una pieza metálica de forma curvada que puede girar; sostiene
por su extremo superior al Tubo Óptico y en el inferior lleva varias piezas
importantes.

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 OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de
ésta.
 PINZAS DE SUJECION: Parte mecánica que sirve para sujetar la
preparación. La mayoría de los microscopios modernos tienen las pinzas
adosadas a un carro con dos tornillos, que permiten un avance longitudinal
y transversal de la preparación.
 CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la
preparación. El condensador de la parte de abajo también se llama FOCO
y es el que dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
 TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que aproxima el enfoque y
micrométrico que consigue el enfoque correcto.
 BASE: Sujeción de todo el microscopio.

LIMITES Y DESVIACIÓN DE LA LUZ:

Para comprender cómo funciona un microscopio óptico, es preciso entender la


forma en que las lentes desvían y enfocan la luz para formar imágenes. Cuando
un rayo de luz pasa de un medio a otro, se produce una refracción, es decir, el
rayo se desvía en la interfase.

Figura 1. Desviación de la luz por un prisma. Las líneas normales (líneas


perpendiculares a la superficie del prisma) se indican con puntos discontinuos. Al entrar la
luz en el vidrio, se desvía hacia la primera normal (el ángulo Ɵ 2 es inferior al Ɵ1). Cuando
la luz deja el vidrio y vuelve al aire, se desvía de la segunda normal (Ɵ 4 es superior a Ɵ3).
Como consecuencia, el prisma desvía la luz que pasa a su través.

El índice de refracción es una medida de la intensidad con que una sustancia


disminuye la velocidad de la luz, de tal forma que la dirección y la magnitud de la
desviación se determinan por los índices de refracción de los dos medios que

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forman la interfase. Cuando la luz pasa del aire al vidrio, un medio con un índice
de refracción superior disminuye su velocidad y se desvía hacia la normal, línea
perpendicular a la superficie (Figura 2.1). A medida que la luz deja el vidrio para
volver al aire, un medio con un índice de refracción inferior acelera su velocidad y
se desvía de la normal. En consecuencia, un prisma desvía la luz porque ésta
incide sobre la superficie del vidrio en ángulo, y el vidrio tiene un índice de
refracción diferente al del aire. Las lentes actúan como un conjunto de prismas
que funcionan como una unidad. Cuando la fuente de luz está alejada, de forma
que rayos paralelos de luz inciden sobre la lente, una lente convexa enfocará estos
rayos en un punto específico, el punto focal (F, en la Figura 2). La distancia entre
el centro de la lente y el punto focal se denomina distancia focal (f, en la Figura2).

Figura 2. Función de una lente. Una lente funciona como un conjunto de


prismas. Los rayos de luz de una fuente distante se enfocan en un punto focal
F. El punto focal queda a una distancia/, distancia focal, del centro de la lente.

El ojo humano no puede enfocar objetos a una distancia inferior a 25


cm, aproximadamente (Tabla 2.1). Esta limitación se puede superar

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utilizando una lente convexa como lupa de aumento simple (o
microscopio) y manteniéndola cerca de un objeto. Una lupa de vidrio
ofrece una imagen clara a una distancia mucho más próxima y el objeto
parece mayor. La potencia de una lente está relacionada con la
distancia focal; una lente con una distancia focal corta aumentará un
objeto más que otra con una distancia focal más larga.
MICROSCOPIO ÓPTICO:
Los microbiólogos utilizan diversos microscopios ópticos en su trabajo; de campo
claro, de campo oscuro, de contraste de fases y de fluorescencia son los tipos de
microscopios más empleados. Los microscopios modernos son todos
compuestos. Es decir, la imagen aumentada que forma la lente del objetivo es
ampliada por una o más lentes adicionales.

MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO:

El microscopio ordinario se denomina microscopio de campo claro porque forma


una imagen oscura frente a un fondo claro. Este microscopio está formado por un
cuerpo o soporte de metal compacto, compuesto por una base y un brazo, donde
se fija el resto de las partes (Figura 3). En la base hay una fuente de luz —espejo
o iluminador eléctrico—En el brazo hay dos dispositivos giratorios para enfocar,
de ajuste fino (micrométrico) y ajuste grueso (macrométrico), que pueden mover
la platina o el portaobjetivos para enfocar la imagen. La platina está situada hacia
la mitad del brazo, donde se colocan los portaobjetos, sujetados con pinzas
sencillas o con pinzas sobre la platina mecánica. Una platina mecánica permite al
especialista mover un portaobjetos lentamente durante su observación, utilizando
los dispositivos de control de la platina. El condensador se monta dentro o por
debajo de la platina, y enfoca un cono de luz sobre el portaobjetos. Su posición es
a menudo fija en microscopios sencillos, pero puede ajustarse verticalmente en
modelos más modernos.

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Figura 3. Microscopio de campo claro. Partes de un microscopio de campo claro


moderno. El microscopio descrito es algo más sofisticado que los de un laboratorio de
estudiantes. Por ejemplo, es binocular (tiene dos oculares) y tiene una platina
mecánica, un condensador inferior ajustable y un iluminador incorporado.

La parte curvada superior del brazo soporta el conjunto del cuerpo del
microscopio, al que se ajustan un portaobjetivos y uno o más oculares. Los
microscopios más modernos tienen un ocular para cada ojo y se denominan
binoculares. El cuerpo contiene una serie de espejos y prismas de manera que la
parte que contiene el ocular puede inclinarse para conseguir una mejor
observación (Figura 4). El portaobjetivos sostiene de tres a cinco objetivos con
lentes de diferente poder de aumento, que pueden girarse para colocar cualquiera
de los objetivos en posición de observación. Idealmente, un microscopio debe ser
parafocal —es decir, que mantenga la imagen enfocada, aunque se cambie de
objetivo.

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La trayectoria de la luz a través de un microscopio de campo claro se muestra en
la Figura 4. La lente del objetivo forma una imagen real aumentada en el
microscopio, y la lente del ocular magnifica aún más esta primera imagen. Cuando
se mira por un microscopio, la imagen de la muestra aumentada, denominada
imagen virtual, parece que se encuentra justo detrás de la platina, a
aproximadamente 25 cm. El aumento total se calcula multiplicando los aumento
del objetivo y del ocular. Por ejemplo, si se utiliza un objetivo de 45x con un ocular
de 10x, el aumento total de la muestra será de 450x.

Figura 4. Trayectoria de la luz en un microscopio óptico. Se muestran la


trayectoria de la luz en un microscopio de campo claro moderno y la localización
de la imagen virtual.
ILUMINACIÓN:
Una iluminación adecuada de la muestra es también muy importante para
determinar la resolución. Un microscopio equipado simplemente con un espejo
cóncavo entre la fuente de luz y la muestra iluminaría el portaobjetos con un
cono de luz demasiado estrecho y tendría una apertura numérica pequeña. La
resolución puede mejorarse con un condensador bajo la platina y una lente
grande receptora de luz que proyecte un cono ancho de luz a través del
portaobjetos y que pase por la lente del objetivo, aumentando con ello la
apertura numérica.

RESOLUCIÓN DE UN MICROSCOPIO:

Las células vivas no pigmentadas no son claramente visibles con un microscopio


de campo claro porque hay poca diferencia entre las células y el agua. Por ello,
los microorganismos a menudo se fijan y tiñen antes de su observación para
aumentar el contraste y crear variaciones de color entre las estructuras celulares.

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Las células y organismo vivos no coloreados pueden observarse simplemente
cambiando la forma en que se iluminan. Se enfoca un cono hueco de luz sobre
la muestra, de manera que no penetren en el objetivo rayos no reflejados y no
refractados. Solamente la luz que haya sido reflejada o refractada por la muestra
puede formar una imagen (Figura 5). De esta forma, el campo que rodea la
muestra aparecerá negro, mientras que el objeto quedará iluminado
intensamente (Figura 6a, b); como el fondo es oscuro, se denomina microscopio
de campo oscuro. Muchas estructuras internas pueden verse en
microorganismos eucariotas grandes (Figura 6b). Incluso, este tipo de
microscopio se emplea para identificar bacterias como Treponema pallidum, que
presenta un diámetro tan pequeño que difícilmente puede visualizarse mediante
un microscopio de campo claro (Figura 8 (7).

Figura 5. Microscopía de campo oscuro. La forma más sencilla de transformar un


microscopio en uno de campo oscuro es colocar (a) un diafragma de campo oscuro debajo
de (b) un sistema de lentes-condensador (Abbé). Este condensador produce un cono
hueco de luz de forma que sólo entra en el objetivo la luz que procede de la muestra.

MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES:

Otra alternativa al microscopio de campo oscuro para la observación de células


vivas no teñidas es el microscopio de contraste de fases, que convierte diferencias
pequeñas en el índice de refracción y la densidad celular, en variaciones en
intensidad de luz fácilmente detectables (Figura 6c-e).

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El condensador de un microscopio de contraste de fases tiene un diafragma
anular, disco opaco con un anillo transparente fino, que produce un cono hueco
de luz (Figura 7). Al atravesar este cono de luz una célula, algunos rayos se
desvían debido a variaciones en la densidad y el índice de refracción de la
muestra, retrasándose en casi 'A de longitud de onda. La luz difractada se enfoca
para formar una imagen del objeto. Los rayos de luz no difractados inciden sobre
un anillo de fase en una placa cambiadora de la fase, disco óptico especial situado
en el objetivo, mientras que los rayos difractados (porque pasaron por la muestra)
no son retenidos por el anillo, atravesando la placa. Si el anillo de fase se
construye de tal forma que la luz no difractada pase a través del mismo avanzando
'A de su longitud de onda, las ondas difractadas y no difractadas tendrán una
diferencia de fase de [h de la longitud de onda y se anularán entre sí cuando se
junten, formándose una imagen. El fondo, formado por luz no difractada, es claro,
mientras que el objeto no teñido aparece oscuro y bien definido. Este tipo de
microscopía se denomina microscopía de contraste de fase oscura. A menudo, se
emplean filtros de color para mejorar la imagen (Figura 6c, <f). La microscopía de
contraste de fases es especialmente útil para detectar componentes bacterianos
como endosporas y cuerpos de inclusión que contienen poli-(3-hidroxibutirato,
polimetafosfato, azufre u otras sustancias.
Estas sustancias son claramente visibles (Figura 6d) porque poseen índices de
refracción notablemente diferentes al del agua. Los microscopios de contraste de
fases se emplean también frecuentemente para estudiar las células eucariotas.

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Figura 6. Ejemplos de microscopía de campo


oscuro y de contraste de fases, (a) Treponema
pallidum, espiroqueta que causa la sífilis;
microscopía de campo oscuro (x500). (b) Volvox y
Spirogyra; microscopía de campo oscuro (xl75).
Obsérvense las colonias hijas dentro de la colonia
madura de Volvox (centro) y los cloroplastos
espirales de Spirogyra (izquierda y derecha), (c)
Spirillum vohitans, bacteria muy grande con haces de
flagelos; microscopía de contraste fases (x210). (d)
Clostridium botulinum, bacteria responsable del
botulismo, con endosporas ovales subterminales;
microscopía de contraste de fases (x600). (e)
Paramecium teñido para mostrar un macronúcleo
central grande con un micronúcleo esférico pequeño
en un lado; microscopía de contraste de fases x100).

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Figura 7. Microscopía de contraste de fases. Óptica de un microscopio de contraste


de fase oscura.

CARACTERISTICAS TEORICAS DE LAS MUESTRAS TOMADAS EN


LABORATORIO:

PULEX IRRITANS:

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Las dimensiones de las especies de pulgas varían entre 1-4 mm, su coloración es
pardo-rojiza, más o menos oscura.
La cabeza es trapezoidal y con el vértice frontal romo, posee dos ojos simples,
intensamente pigmentados y situados en zonas medias laterales, que faltan en
algunas especies. Por detrás de los ojos y alojadas en un surco o pliegue cuticular
están las antenas formadas por artejos.
Las piezas bucales, situadas en el borde genal comprenden un labro, un par de
maxilas que actúan como órganos perforantes de la piel de sus hospedadores, las
lacinias maxilares y un corto labio inferior provisto de dos palpos labiales de 3-4
artejos.
El tórax tiene tres segmentos libres, insertándose en cada uno de ellos un par de
patas. En esta especie hay un peine pronotal. Las patas metatorácicas son mucho
más robustas y largas que las dos patas anteriores. Son estas patas las que al
desplegarse bruscamente, y gracias a una proteína elástica que es la resilina, les
permite dar sus grandes saltos de hasta 40 cm de longitud y 30 cm de altura.

El abdomen está formado por 7 segmentos aparentes. La disposición de los


segmentos abdominales les permite una gran dilatación de esta parte corporal
cuando su tubo digestivo está repleto con la sangre ingerida de los hospedadores.

El dimorfismo sexual del abdomen es muy aparente. En las hembras, las


curvaturas dorsal y ventral del mismo son semejantes y el contorno del abdomen
es ovoide. Cerca de su extremo posterior se encuentra el pigidio, dotado de cerdas
sensitivas. También se distingue la espermoteca o reservorio seminal. En los
machos el contorno abdominal es claramente asimétrico, debido al encurvamiento
dorsal de su extremo posterior. Cerca de este extremo se distingue la parte de
las pinzas genitales.
Fuente: Biología sanitaria. (27/10/2013). Pulex irritans. 11/04/2018, de Atlas
parasitologíabiologiasanitariaSitioweb:
http://atlasparasitologiabiosanis.blogspot.pe/2013/10/pulex-irritans.html

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TRICHODERMA:

Trichoderma es un hongo anaerobio facultativo. La mayoría de las colonias de


Trichoderma en su inicio tienen color blanco, después se torna a verde oscuro o
amarillento, como consecuencia de una densa esporulación.

Trichoderma, produce tres tipos de propágalos: hifas, clamidosporas y esporas


“conidias”. Las esporas son los más viables de los propágulos empleados en
programas de biocontrol.

Estos cuerpos especializados se caracterizan por poseer una gruesa pared


exterior, constituida por tres capas (endospora, epispora y perispora) que
protegen el interior del conidio (protoplasto). Esta gruesa pared se diferencia de
la pared celular de las células vegetativas del hongo (hifas y clamidosporas), las
cuales son mucho más delgadas y no está formada por capas constitutivas como
las esporas. La ventaja del conidio de poseer una pared celular gruesa es la
posibilidad de aislarlo de su medio natural y que sobreviva a condiciones
adversas, Manteniéndolo en dormancia hasta que las condiciones sean propicias
para la geminación.

Fuente: Silvia Nancy y Susana Alvarez. (2015). Caracteristicas del Trichoderma.


11/04/2018, de Biblioteca Agroecológica Fundesyram Sitio web:
http://www.fundesyram.info/biblioteca.php?id=5127

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RESULTADOS:
Los resultados son los siguientes:
Grupo Muestra Ocular Objetivo Aumento Descripción
observada
N°5 Trichoderma 10x 10x 100x Se observó
filamentos
con forma
irregular y
delgados
que salen
de otro más
grueso de
color verde
oscuro
Pulex 10x 10x; 43x; 100x; 430x; Con el
irritans 50x 500x objetivo de
10x se
observó el
escamoso
cuerpo
entero del
artrópodo de
color rojizo.
Con el
objetivo de
43x y 50x se
logró ver los
pelos de las
patas

Figura 8. Muestra de trichoderma vista a través del microscopio compuesto. El


aumento que se utilizó fue de 100x

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Figura 9. Una pulga vista a través del microscopio compuesto. El aumento de la imagen
mostrada es de 100x

DISCUSIÓN DE RESULTADOS:
TRICHODERMA:
A pesar de que la forma del trichoderma no parecía tener una capa gruesa como
lo indican las características teóricas si poseía su singular color verde oscuro con
filamentos delgados de forma irregular.

PULEX IRRITANS:

La muestra vista en el laboratorio de microbiología indica las mismas


características teóricas del organismo. Posee un color rojizo con dos simples
ojos. Mide aproximadamente entre 1-4 mm.

CONCLUSIONES:
Con respecto a la “TRICHODERMA”:

A diferencia de la siphonapteras, a la trichoderma solo es posible visualizarla y/o


reconocerla mediante el uso de un microscopio compuesto debido a las formas
tan variadas que adoptan las colonias de trichoderma.

Con respecto a la “PULEX IRRITANS”:

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Este singular organismo es posible diferenciarla a simple vista dado a su forma
tan particular, sin embargo, es necesario el uso de un microscopio compuesto
para presenciar con exactitud el cuerpo detallado.

RECOMENDACIONES:
Con respecto a la “TRICHODERMA”:

 Manejar con calma el objetivo, placa y los tornillos micrométricos y


macrométricos al utilizarlos para observar la presencia de Trichoderma,
ya que al inicio se debe ajustar los tornillos micrométrico y macrométrico
en un punto preciso para antes de observar el organismo.

Con respecto a la “PULEX IRRITANS”:

 Se recomienda utilizar el objetivo de 97x para observar detalladamente


cada parte del Pulex irritans ya que el objetivo 10x es ineficaz para un
estudio cuantitativo para el organismo ya antes mencionado.

CUESTIONARIO:
1. Establecer la diferencia entre el poder de resolución y apertura
numérica.

La apertura numérica y el poder de resolución se diferencian en que la apertura


numérica es un número adimensional definido como la medida de su capacidad
para colectar la luz y poder examinar los detalles del espécimen; mientras que el
poder de resolución de un microscopio óptico se define como la distancia más
pequeña entre dos puntos del espécimen que todavía puede distinguirse como
dos formas separadas.

Modos de cálculo:

𝐴. 𝑁 = 𝑛 sin 𝜃
𝑙𝑜𝑛𝑔𝑖𝑡𝑢𝑑 𝑑𝑒 𝑜𝑛𝑑𝑎
𝑃𝑜𝑑𝑒𝑟 𝑑𝑒 𝑟𝑒𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 =
𝐴𝑁(𝑜𝑏𝑗𝑒𝑡𝑖𝑣𝑜) + 𝐴𝑁(𝑐𝑜𝑛𝑑𝑒𝑛𝑠𝑎𝑑𝑜𝑟)
Donde:
A.N: Apertura numérica
Fuente:

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 Históptica. (2009). Apertura numérica. 11/04/2018, de Históptica Sitio
web: https://histoptica.com/apertura-numerica-an-o-na/
 Históptica. (2009). Resolución en microscopios. 11/04/2018, de
Históptica Sitio web: https://histoptica.com/resolucion-en-microscopios/
2. Completar la siguiente tabla

Partes del microscopio Función(es)


Ocular Magnificar la imagen que ha sido
previamente aumenta por el objetivo.
Objetivo Formar la calidad de la imagen
primaria que puede producir un
microscopio.
Condensador Concentra la luz generada por la
fuente de iluminación hacia la
preparación.
Diagrama de iris Permite el aumento o la disminución
de luz en el portaobjeto.
Tornillo de ajuste fino Desplaza muy lentamente la platina,
acercando o separando la
preparación al objetivo, hacia arriba o
hacia abajo.
Tornillo de ajuste grueso Sube y baja la platina rápidamente;
sólo se usa con los lentes objetivos
de 4x y 10x.
Fuente:

 MundoMicroscopio. (2004). El ocular del microscopio. 11/04/2018, de


MundoMicroscopio Sitio web: https://www.mundomicroscopio.com/ocular/
 Históptica. (2009). Objetivos de microscopios. 11/04/2018, de Históptica
Sitio web: https://histoptica.com/objetivos-de-microscopios/
 SalonHogar. (2015). Condensador. 11/04/2018, de SalonHogar Sitio web:
http://www.salonhogar.com/ciencias/microscopio/condensa.htm
 Karl Wallulis. (2008). Que es un diafragma en un microscopio.
11/04/2018, de techlandia Sitio web:
http://www.cva.itesm.mx/biblioteca/pagina_con_formato_version_oct/apa.
htm
 Francisco Rodriguez. (13/11/2016). El microscopio Óptico. 11/04/2018,
de Francisco Rodriguez Sitio web: https://www.franrzmn.com/el-
microscopio-optico/

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 Quizlet. (2015). Partes del microscopio. 11/04/2018, de Quizlet Sitio web:
https://quizlet.com/96177970/partes-del-microscopio-flash-cards/

FUENTES DE INFORMACIÓN:

 Wikipedia. (2007). Siphonaptera. 12/04/2018, de Wikipedia Sitio web:


https://es.wikipedia.org/wiki/Siphonaptera
 Históptica. (2009). Apertura numérica. 11/04/2018, de Históptica Sitio
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 MundoMicroscopio. (2004). El ocular del microscopio. 11/04/2018, de
MundoMicroscopio Sitio web: https://www.mundomicroscopio.com/ocular/
 Históptica. (2009). Objetivos de microscopios. 11/04/2018, de Históptica
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 Karl Wallulis. (2008). Que es un diafragma en un microscopio.
11/04/2018, de techlandia Sitio web:
http://www.cva.itesm.mx/biblioteca/pagina_con_formato_version_oct/apa.
htm
 Francisco Rodriguez. (13/11/2016). El microscopio Óptico. 11/04/2018,
de Francisco Rodriguez Sitio web: https://www.franrzmn.com/el-
microscopio-optico/
 Quizlet. (2015). Partes del microscopio. 11/04/2018, de Quizlet Sitio web:
https://quizlet.com/96177970/partes-del-microscopio-flash-cards/
 Silvia Nancy y Alvarez Susana. (2015). Caracteristicas del trichoderma.
12/04/2018, de Biblioteca agroecologica Fundesyram Sitio web:
http://www.fundesyram.info/biblioteca.php?id=5127

ANEXOS:
1. RECONOCIMIENTO PREVIO:
 Reconocer en el microscopio todas las partes de importancia.

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
 Cerciorarse del número de aumentos marcado en el ocular. Comparar
con otros oculares de diferentes aumentos.
 Observar los objetivos del microscopio y los aumentos de cada uno de
ellos.
 Calcular con las diferentes combinaciones de lentes, los aumento que se
puede obtener en el microscopio.
2. ENFOQUE:
 Buscar el objetivo de menor aumento, 10x y ponerlo en el tope del
revolver; el objetivo hará su ruido característico al estar en posición
correcta.
 Acomodar la cara del espejo (plana para luz natural y cóncava para luz
artificial), a fin de iluminar la totalidad del campo que se observa por el
ocular.
 Preparar el objeto que se va a observar (lámina)
 Poner la lámina sobe la abertura de la platina, y centre el objeto que se
va a mirar.
 Mirando por el costado bajar el objetivo utilizando el tornillo macrométrico
hasta que esté muy cerca de la lámina.
 Mirando por el costado bajar el objetivo utilizando el tornillo macrométrico
hasta que esté muy cerca de la lámpara.
 Mirar a través del microscopio y levantar el objetivo usando siempre el
tornillo macrométrico hasta ver la imagen.
 Usar el tornillo micrométrico para enfocar con más nitidez.
 Abrir o cerrar el diafragma para mejorar la calidad de la imagen.
3. PARA CAMBIAR DE AUMENTO:
 Centrar cuidadosamente la parte que va a ser examinada.
 Levantar el tubo portalentes por medio del tornillo macrométrico, cambiar
el objetivo
4. PARA OBSERVAR CON EL OBJETIVO DE INMERSIÓN:
 Centrar la preparación y levantar el tubo portalentes por medio del tornillo
macrométrico y girar el revolver para colocar el objetivo de inmersión
(97x)
 Colocar una gota de aceite de cedro sobre la preparación.

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
Facultad de Ingeniería Ambiental
 Mirando por el costado descender el objetivo con el tornillo macrométrico
hasta que toque la gota de aceite.
 Mirar por el ocular. Enfocar cuidadosamente utilizando el tornillo
macrométrico, afinando con el micrométrico.
 Recordar que se mirar a través del microscopio requiere no solamente el
uso de los ojos, sino también de las dos manos. Unir el tornillo
micrométrico y la otra en la platina para mover la preparación.
5. CUIDADOS PARA EL USO DEL MICROSCOPIO:
 El microscopio debe llevarse siempre agarrándolo con las dos manos,
una de ellas en el brazo, y la otra con la palma hacia arriba sosteniendo
la base o pie.
 Los tornillos (macrométrico y micrométrico) y el revolver deben moverse
siempre con cuidado y sin apresuramiento, para evitar que los lentes se
rompan o caigan.
 No se debe usar la luz solar directa como fuente de iluminación.
 Nunca se debe bajar el tubo portalentes mientras se observe por él.
 Para limpiar los lentes se deberá usar solo papel lente, puesto que otro
material puede rayarlos.
 Ningún líquido debe mojar alguna pieza del microscopio. Las láminas que
se colocan en la platina se deberán estar siempre secas.
 Después de usar el objetivo de inmersión se deberá limpiarlo con el papel
lente humedecido con alcohol isopropílico.

APÉNDICE:

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Facultad de Ingeniería Ambiental

Fotografías de la misma muestra de trichoderma vista a través del microscopio de


laboratorio de microbiología. El aumento utilizado en la imagen fue de 100x

La misma muestra de siphonaptera vista a través del microscopio de laboratorio de


microbiología. El aumento utilizado en la imagen fue de 100x

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