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Ajuste Preciso de Iluminación Köhler

Este documento describe el proceso de ajuste de la iluminación Köhler en un microscopio. La iluminación Köhler permite iluminar con precisión una zona determinada de una muestra bajo el microscopio. El proceso consiste en 7 pasos: 1) abrir el diafragma de apertura de la condensadora, 2) enfocar una zona de la muestra, 3) cerrar el diafragma de campo para ver el foco luminoso, 4) enfocar la imagen de la condensadora, 5) centrar el foco luminoso, 6) abrir el diafragma

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Ajuste Preciso de Iluminación Köhler

Este documento describe el proceso de ajuste de la iluminación Köhler en un microscopio. La iluminación Köhler permite iluminar con precisión una zona determinada de una muestra bajo el microscopio. El proceso consiste en 7 pasos: 1) abrir el diafragma de apertura de la condensadora, 2) enfocar una zona de la muestra, 3) cerrar el diafragma de campo para ver el foco luminoso, 4) enfocar la imagen de la condensadora, 5) centrar el foco luminoso, 6) abrir el diafragma

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Mendoza Sánchez Ana 4 semestre

AJUSTE DE LA ILUMINACIÓN KÖHLER

En una imagen microscópica, sólo puede reproducirse una zona determinada de una muestra
(campo de imagen). La iluminación Köhler permite iluminar con precisión dicha zona. El fondo para
la precisa iluminación del campo de imagen es el siguiente: Cuando la zona iluminada es menor
que el campo de imagen, el cono de luz que percibe el objetivo y la apertura numérica también
son menores. Dado que el poder resolutivo óptico depende directamente de la apertura numérica,
al reducirse la iluminación también se reduce el poder resolutivo, lo cual no es deseable en la
mayoría de los casos.

Cuando la zona iluminada es mayor que el campo de imagen esto amplía la luz parásita. Esto, a su
vez, conlleva una disminución del contraste de la imagen, lo que puede provocar que no se
observen las estructuras de la imagen microscópica analizada ópticamente.

La iluminación Köhler alcanza un punto intermedio entre el contraste máximo y el poder


resolutivo máximo. Los objetivos de microscopios más potentes alcanzan con frecuencia su mejor
comportamiento óptico sólo cuando la iluminación Köhler se ajusta con precisión.

Consiste en igualar el diámetro del diafragma de campo con el diámetro del campo de visión.

1. Abrir el diafragma de apertura de la condensadora, hacia la derecha.

2. Enfocar con nitidez una zona de la muestra que parezca interesante. Aún no es necesario tener
en cuenta la calidad de la imagen.

3. Cerrar el diafragma de campo, hacia la izquierda. De esta forma se oscurecen la mayor parte de
las zonas del campo de la imagen. Se ve un foco luminoso impreciso y desenfocado. Si este foco
luminoso desaparece del campo de visión al cerrar el diafragma de campo, debe centrase éste
último.

En este caso, se abre el diafragma hasta que pueda ver el foco luminoso del borde del campo
visual. En el caso de que no pueda ver el foco luminoso, es probable que la condensadora esté
colocada a una altura incorrecta. En ese caso, se ajusta la altura de la condensadora hasta que se
pueda ver el diafragma de campo.

4. Enfocar la imagen de la condensadora, es decir, el borde del foco luminoso, utilizando la rueda
de foco de la condensadora hasta que la imagen de la apertura sea nítida.

5. Centrar en el campo visual el foco luminoso usando los tornillos de centrado. El centrado es más
sencillo si se abre un poco el diafragma de campo para aumentar el tamaño del foco luminoso.

6. Abrir el diafragma de campo (hacia la derecha) justo hasta que desaparezca del campo de
visión.

7. Cerrar el diafragma de apertura de la condensadora (hacia la izquierda) hasta que se alcance el


contraste deseado. Si es necesario, bajar la intensidad de la luz con la rueda del lateral izquierdo
del microscopio.

Una apertura de condensadora muy cerrada aumenta el contraste, pero disminuye la resolución,
no se debe usar para graduar la cantidad de luz que recibe la muestra. La posición más adecuada
suele ser 2/3 de apertura.

El ajuste de la iluminación Köhler debe hacerse para cada objetivo.

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