INSTITUCIÓN: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA: LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

PERÍODO ACADÉMICO: ABRIL – AGOSTO 2017

DOCENTE: Mgs. XIMENA ROBALINO
ASIGNATURA: HEMATOLOGÍA II
SEMESTRE: CUARTO
FECHA DE LA PRÁCTICA: NÚMERO DE LA PRÁCTICA: 3
01 de noviembre de 2017
HORA: 10:00 – 13:00 horas DURACIÓN: 3 HORAS

GRUPO N° 2

NOMBRE DE LOS OROZCO COELLO KARLA LISSETE

ALUMNO

SERIE ROJA
TITULO DE LA
UNIDAD:
RECUENTO DE RETICULOCITOS
TEMA DE LA
PRÁCTICA:
Identificar los reticulocitos presentes en una muestra de sangre
OBJETIVO GENERAL:

Saber la utilización de azul cresil brillante en esta practica

OBJETIVOS Observar la relación entre la cantidad presente de estas células, con respecto a 1000 eritrocitos.
ESPECÍFICOS:

Analizar el resultado obtenido y verificar si se encuentra o no dentro del rango normal.

FUNDAMENTO TEÓRICO O CONTENIDO CIENTÍFICO:

RETICULOCITOS
Los reticulocitos son eritrocitos que contienen restos de ARN(ribosomas)que es un compuesto que precipita en presencia de ciertos
colorantes vitales, como son el azul de cresil brillante (ACB) o el azul de metileno nuevo(AMN), los cuales dan lugar a imágenes
filamentosas fácilmente visibles mediante el microscopio óptico. Esto sucede siempre que la preparación no haya sido sometida
previamente a un proceso de fijación. No todos los reticulocitos presentan el mismo grado de madurez. Así, los más inmaduros
poseen abundantes precipitados citoplasmáticos, mientras que los más maduros, por el contrario poseen un fino y escaso
precipitado, que muchas veces puede pasar inadvertido.

El recuento de Reticulocitos es la prueba más simple actualmente disponible para valorar la actividad eritropoyética de la médula
ósea. Así cuando una anemia se acompaña de un elevado número de reticulocitos circulantes (reticulocitosis) se considera
Regenerativa, mientras que cuando el número es normal o disminuido se denomina Arregenerativa. Por ello, y desde siempre, el
recuento de reticulocitos se ha considerado una técnica Complementaria en el estudio de las Anemias, en especial de las que
cursan con reticulocitosis (Anemias Hemolíticas).

Recientemente, el empleo cada vez más extendido de agentes citotóxicos(quimioterapia, radioterapia) o el Trasplante de Médula
ósea (TMO)en el tratamiento de numerosas Neoplasias ha hecho aún más necesarias poder disponer de un método simple como
es el recuento de reticulocitos para evaluar la capacidad de respuesta medular frente a éstas agresiones.

En condiciones normales los reticulocitos permanecen en la médula durante 2-3 días y terminan su maduración en 24 horas,
aproximadamente una vez ya en la sangre periférica.

RECUENTO DE RETICULOCITOS

El recuento de reticulocitos debe realizarse a partir de sangre total con anticoagulante (EDTA) y a ser posible, dentro de las 24
primeras horas de extracción cuando la sangre se conserva a temperatura ambiente. Si se mantiene a 4°C el recuento puede
realizarse hasta 48 horas después de la extracción. El recuento de reticulocitos puede efectuarse mediante dos procedimientos:

1.- Tinción Vital y microscopio óptico (ACB)

2.-Citometría de Flujo

Lamentablemente el método manual (visual) habitualmente empleado en la práctica clínica para el diagnóstico de las anemias,
adolece de escasa fiabilidad, lo que limita su empleo para valorar la capacidad de respuesta medular frente a terapéuticas agresivas.

Esta escasa fiabilidad obedece a los factores propios de toda técnica morfológica manual (calidad de tinción, tamaño de la muestra,
y distribución de las células sobre el portaobjetos) pero sobre todo también a los de índole subjetiva debido al diferente criterio que
cada observador tiene de lo que es un reticulocito. Con el fin de mejorar la fiabilidad el ICSH (Comité Internacional de
Standardización Hematológica) ha desarrollado un método de referencia basado en el empleo del Retículo de Miller y que ha sido
recientemente adoptado por la OMS.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS MUESTRA: SANGRE con EDTA

Materiales
1. Sangre total anticoagulante EDTA
2. Solución de azul cresil brillante
3. Microscopio óptico con objetivo de inmersión
4. Portaobjetos limpios
5. Tubos de ensayo
6. Baño María
7. Cronómetro o reloj
8. Pipetas volumétrica

PROCEDIMIENTO:

1. Extraer una muestra de sangre en tubo tapa lila por cada mesón de trabajo.
2. Mediante una pipeta se añade a un tubo 0,5 mi de sangre anticoagulada y 0,5 mi de solución colorante de azul cresil brillante
se mezcla bien. En caso de valores muy bajos de hematocrito debe colocarse doble cantidad de sangre total que de solución
colorante.
3. La suspensión sangre colorante se deja en baño María durante 20 minutos.
4. Transcurrido este tiempo se toma una pequeña gota de la suspensión
5. Se extiende sobre un portaobjetos no hace falta contrateñir por lo que una vez seca la extensión puede ser observada al
microscopio.
6. Para el recuento de los reticulocitos se emplea el objetivo de inmersión de 100x. Mediante el objetivo de inmersión se busca
en primer lugar el área más adecuada para realizar el recuento y que corresponde a la zona de la extensión donde los eritrocitos
se hallan bien distribuidos e individualizados. Se realiza el recuento en 1000 eritrocitos y se reporta en porcentaje.

Reticulocitos (%) = # de reticulocitos contados x 100

# Eritrocitos

Reticulocitos (%) = # de reticulocitos contados x 100

1000

GRÁFICOS Y RESULTADOS:

Azul cresil brillante Mezcla cresil brillante y sangre EDTA

Frotis para observación de reticulositos Observación de reticuloscitos 100x

VALORES DE REFERENCIA:

Valor Valor
relativo (%) absoluto
(x 107L)

Valores de referencia

Recién nacido

(sangre del cordón) 3,2-6,0 110-330

Niños y adultos jóvenes

(4-19 años) 0,2-2,2 25-89

Adultos (20 - 50 años)

Hombres 0,5-2,8 32-97

Mujeres 0,2-2,5 25-86

CÁLCULOS

Reticulocitos (%) = # de reticulocitos contados x 100

1000

Reticulocitos (%) = 20 x 100

1000
Reticulocitos (%) = 2%

CONCLUSIONES

• Identificamos los reticulocitos presentes en una muestra de sangre, los cuales tuvieron un aspecto azulado, granuloso,
siendo así fácil de identificarlos ya que los eritrocitos se caracterizan por “tener una boca” en su centro y su color rojo
característico
• El azul cresil brillante, da lugar a precipitados de restos de ARN, los cuales se observan como filamentos azul intenso en
el interior celular. El reticulocito presentará cuatro grados diferentes de maduración, atendiendo al retículo presente en su
interior, yendo desde un ovillo denso en el caso de los más inmaduros, hasta gránulos escasos, en los más maduros
• Observamos la relación entre la cantidad presente de estas células, con respecto a 1000 eritrocitos, siendo esto esto útil
para nuestro posterior cálculo.
• El resultado obtenido fue de 20 eritrocitos por cada 1000 eritrocitos, en tanto que, el cálculo de eritrocitos fue de 2,0%,
estando así nuestra paciente dentro de los rangos normales.

RECOMENDACIONES

• Realizar la solución y disolverla bien ya que el frotis,no se podía realizar correctamente la extensión, al no ser disuelto en su
totalidad.
• Contar los reticulocitos de la muestra en forma de zig-zag y separando la muestra en secciones con reticulocitos.

BIBLIOGRAFÍA:
• CAMPAL, Faustina. Fundamentos y Técnicas de Análisis Hematológicos y Citológicos. Thompson-Paraninfo
[Link].35,36
• GARCÍA ESPINOZA, Benjamín. Hematología II, Citología, Fisiología y Patología de hematíes y leucocitos. Paraninfo.
• VIVES CORRONS, Joan Lluís. Manual de Técnicas en Laboratorio de Hematología. Tercera edición. Masson.

• Ascrib, C. (s.f.). Scribd. Obtenido de [Link]

• Curso de BIOQUIMICA. (s.f.). Obtenido de Curso de BIOQUIMICA:
[Link]

Mgs. Ximena Robalino Lic. Franklin Ramos

MsC. Patricia Miño Orbe DOCENTE RESPONSABLE DEL LABORATORIO
DIRECTOR DE CARRERA
 Joselyn Velín

21 de noviembre 2017

REENCUENTRO DE RETICULOCITOS

Reticulocitos 0,2-2,5 2,0 %