Micorrizas
• Definición
• Tipos de micorrizas
MICORRIZAS • Endomicorrizas
– Características
– Proceso de colonización
– Formación del arbúsculo
– Intercambio de nutrientes
– Aplicaciones, inoculación
CURSO MICROBIOLOGÍA 2010 • Ectomicorrizas
– Características
FACULTAD DE AGRONOMÍA
– Aplicaciones, inoculación
,
os
ad
El término micorrizas lo introdujo Albert Frank en 1885,
am
bon
r
bie
literalmente significa hongo- raíz s ca
nte
to
le
ue
fís
sq
ico
e
Es una interacció
interacción simbió
simbiótica
SIMBIOSIS
entre hongos y
las raí
raíces de las plantas
pro tencia
resis
ua
te de
ag
tecc
en n
sy
tri ció
ión,
nu sor
ab
Micorrizas
• Definición
• Tipos de micorrizas
MEJOR DESARROLLO VEGETAL PRINCIPALMENTE
POR MAYOR SUPERFICIE DE ABSORCIÓN DE NUTRIENTES
Tipos de micorrizas Ecto, Endo, Ectendo, Arbutoide,
Micorrizas
Monotropoid, Ericoide, Oquideáceas • Definición
• Tipos de micorrizas
Ectomicorriza
• Endomicorrizas
– Características
– Proceso de colonización
– Formación del arbúsculo
Ectendomicorriza
Endomicorriza – Intercambio de nutrientes
– Aplicaciones, inoculación
Raíz no micorrizada
Hongos endomicorrí
endomicorrícicos
ENDOMICORRIZAS
Se asocian a la mayoría de los vegetales (97%)
Han estado ligados a las plantas desde los inicios de la
colonización de la superficie terrestre
Endófitos obligados
Asociaciones simbióticas entre los hongos Glomeromycota
y Grupo monofilético-Phylum Glomeromycota (Schuβler et al., 2001)
las raíces de la mayoría de los vegetales
Poseen micelio cenocítico
Esporas asexuales (blásticas formadas en el extremo de la hifa seguido por
engrosamientos de componentes estructurales de la pared)
Penetran las células de la corteza radical formando dos
estructuras características: arbúsculos y/o vesículas
Proceso de colonizació
colonización de la raí
raíz
1- Activación del micelio externo
2- Crecimiento y ramificación del micelio hasta contactar la raíz
de la planta hospedera
Diálogo molecular
• Comienza antes del contacto hongo-raíz
• Proceso complejo aun no totalmente
conocido
• Exudados radicales
ESPORAS MICELIO • Planta produce estrigolactona
• Hongo produce factor Myc
ARBÚSCULOS Y VESÍCULAS
Proceso de colonizació
colonización de la raí
raíz
Arbúsculos
1- Activación del micelio externo
2- Crecimiento y ramificación del micelio hasta contactar la raíz
de la planta hospedera
3- Formación de apresorios y
penetración de la raíz
4- Penetración de las células
desde la epidermis hasta la
corteza en forma intercelular
5- Penetración intracelular,
ruptura de la pared de la célula
y formación del arbúsculo
6- Algunos hongos desarrollan también vesículas
Vesículas Proceso de colonizació
colonización de la raí
raíz
1- Activación del micelio externo
2- Crecimiento y ramificación del micelio hasta contactar la raíz
3- Formación de apresorio y penetración de la raíz
4- Penetración de las células desde la epidermis hasta la
corteza en forma intercelular
5- Penetración de la pared de la célula cortical y formación del
arbúsculo por división dicotómica
6- Algunos hongos desarrollan también vesículas
7- Además del desarrollo en el interior de la raíz, fuera de la
raíz se desarrolla un micelio externo y esporas asexuales
Esporas Morfotipo glomoide (espora en el ápice de la hifa sustentora)
La identificación taxonómica de las especies de Glomeromycota
está basada en la morfología de las esporas, y en características
fenotípicas e histoquímicas de sus paredes
MORFOLOGÍA: forma, color y
dimensiones de la hifa
esporógena (hifa de
sustentación) y de las esporas, Espora de Glomus intraradices Esporas fuera de la raíz
color, espesor y estructura de
la(s) pared(es) de la espora
REACCION HISTOQUÍMICA de
las láminas de las paredes
(reactivo de Melzer). Esta
directamente relacionada con
la composición química de las
láminas Esporas dentro de la raíz
Morfotipo gigasporoide (hifa sustentora con base globosa)
Morfotipo acaulosporoide (a partir de un sáculo esporífero o
vesícula madre)
Espora de Gigaspora margarita
Formació
Formación del arbú
arbúsculo Intercambio de nutrientes
intercambio de nutrientes
En las membranas de ambos simbiontes existen proteínas
transportadoras encargadas del control del intercambio de
nutrientes
Pared vegetal
Hifa intracelular La permeabilidad de la membrana periarbuscular y arbuscular
está aumentada por la presenica de proteínas aquaporinas
Membrana plasmática vegetal
Arbúsculo Matriz Célula
Membrana interfacial vegetal
fungica Existen ATP-asa fúngicas y vegetales que son responsables del
transporte de H+ hacia la matriz interfacial, hace que el espacio
interfacial esté fuertemente acidificado y que exista un
gradiente de H+ que posibilita el funcionamiento de los
transportadores
Matriz o espacio interfacial
Membrana periarbuscular
arbúsculo
Intercambio de nutrientes Intercambio de nutrientes Fósforo
PO4
1- El micelio externo explora el suelo y toma
Fósforo PO4 inorgánico o es capaz de hidrolizar PO4
Nutriente esencial para el crecimiento vegetal orgánico (fosfatasas)
Limitante en el suelo
Insoluble, secuestrado por cationes 2- El PO4 es transferido a las vacuolas fúngicas
En la agricultura se utilizan fertilizantes fosfatados donde es polimerizado para formar cadenas
PO4 de poli-fosfato
Costo elevado
PO4 3- Las vacuolas son transportadas a las hifas
Contaminación
internas donde se lisas y liberarn el PO4 en el
PO4 arbúsculo
PO4 Poli-P vacuola Micelio 4- El PO4 se libera al espacio interfacial
externo mediante trasporte pasivo
Las micorrizas aumentan la toma y asimilación del fosfato por los vegetales
Poli-P
arbúsculo 5- Las proteínas Pht-1 de la membrana
? periarbuscular transportan el PO4 desde el
H+ Matriz
H+ PO4 interfacial espacio interfacial hacia el citosol
6- Una vez en el citosol el PO4 es traslocado al
H+ PO4 ATP ADP+ Pi Citosol cel. sistema vascular y distribuído a la planta
Pht-1 vegetal
Intercambio de nutrientes Intercambio de nutrientes Nitrógeno
NH4
Nitrógeno 1- El micelio externo explora el suelo y toma
NH4 (transportadores de alta afinidad por NH4
(AMT1)
na
ni
gi
ar 2- El N es transportado en forma de aa, arginina
(aa más abundante en el micelio exterior)
na NH4
ni
gi
ar 3- La arginina es transportada a las hifas internas
NH4 donde se libera el NH4 en el arbúsculo ( ureasas
y ornitina-aminotransferasa)
NH4 4- El NH4 se libera al espacio interfacial
mediante trasporte pasivo
NH4 Micelio
NO3 arginina 5- El NH4 es transportado desde el espacio
externo
interfacial hacia el citosol.
Los hongos micorrícicos exploran el suelo y absorben NH4, NO3 y también aa ADP ATP
Aumentan la toma y asimilación del nitrógeno por los vegetales H+ NH4 arginina arbúsculo Se hipotetizan 2 mecanismos:
? H+ Matriz • proteínas transportadoras de la membrana
H+ H+ NH4 NH4 interfacial periarbuscular H+ : NH4
• transporte facilitado por aquaporinas
NH4 NH4 ATP ADP+ Pi Citosol cel.
vegetal
Intercambio de nutrientes
Inoculantes con hongos endomicorrícicos
Carbono
Los Glomeromycota son simbiontes obligados toman el C del vegetal
El hongo toma el C como hexosas
En la planta el C es traslocado como sucrosa, por lo que se necesita una
invertasa
El mecanismo por el cual la hexosa se libera al espacio interfacial y luego al
arbúsculo es desconocido Son endófitos obligados
Hay poca evidencia de la existencia de proteínas exportadoras de hexosas No se pueden aislar ni cultivar en cultivos puros
Una vez en las hifas la mayoría del C es convertido a lípidos (triglicéridos)
reserva
sust. respiración
Inoculantes con hongos endomicorrícicos planta trampa
Aislamientos de esporas
Agregar agua y centrifugar 5 min
Suelo es lavado con agua a 2000 RPM
Descartar el sobrenadante
Resuspender el pellet en 50% sacarosa
y centrifugar 1 min a 2000 RPM
Las esporas colectadas del Las esporas de un
suelo son separadas bajo determinado tipo son
el microscopio inoculadas a una
planta hospedera en
Descartar el pellet
un sustrato estéril
Lavar el sobrenadante y tamizar en 50 uM
Observar las esporas
sobre papel de filtro
Micorrizas
• Definición
• Tipos de micorrizas
• Endomicorrizas
– Características
– Proceso de colonización
– Formación del arbúsculo
– Intercambio de nutrientes
– Inoculación, aplicaciones
• Ectomicorrizas
– Características
– Inoculación, aplicaciones
Efecto de la inoculación temprana con Glomus
intraradices sobre el crecimiento de Palmeras.
ECTOMICORRIZAS
carpóforos
micelio
Raíces micorrizadas
Hongos ectomicorrícicos Cambios morfológicos en la raíz
• Se asocian simbióticamente solo a especies arbóreas
•Mayoritariamente Basidiomycetes y algunos Ascomycetes.
• Gran diversidad de especies en ambientes naturales (6000 sp)
•Especificidad, hay 3 categorías:
Especificidad alta- micorrizan una determinada especie
vegetal de un determinado género
Ej. Boletus betulicola
Especificidad media- micorrizan varias especies de un género
Especificidad baja- micorrizan especies de varios géneros
Ej.: Pisolitus arhizus
Manto fúngico y red de Hartig Aislamiento y cultivo de hongos ectomicorrícicos
Cultivos puros
Mantenimiento de los aislamientos Inoculantes con hongos ectomicorrícicos
Suelo o mantillo de
un bosque
Micelio Vegetativo
Inoculante granular
Inoculante líquido (hifas y esporas)
Aplicación de los inoculantes
Inoculantes con hongos ectomicorrícicos
Micelio inmovilizado
En viveros
Efecto de hongos micorrícicos sobre el crecimiento
de olivos propagados vegetativamente.
Bibliografía
ENDOMICORRIZAS vs ECTOMICORRIZAS
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Manto fúngico
Arbúsculos y en algunos vesículas Red de hartig
Powell J. and Klirnomos J. 2007. The Ecology of plant-microbial
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Estructuras fúngicas solo observables Cambios morfológicos observables en
al microscopio (tinción) la raíz a simple vista o con lupa
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