PRACTICA 03
ESTUDIO DEL CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS: SEGUIMIENTO DEL
CRECIMIENTO DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE
I. INTRODUCCIN
El comportamiento microbiano se ve afectado por diversos factores intrnsecos y
extrnsecos. Sin embargo, generalmente los ms importantes y los que controlan o
definen el crecimiento o sobrevivencia son: temperatura, pH, y actividad de agua. La
evaluacin de la respuesta microbiana bajo la combinacin de esos factores permite la
descripcin, modelado y prediccin de diferentes situaciones. Las expresiones
matemticas permiten predecir la respuesta microbiana ante condiciones no evaluadas
dentro del intervalo de los niveles de los factores o variables estudiadas. Los modelos
microbianos son una herramienta de vital importancia ya que proveen de manera rpida,
informacin necesaria para la toma de decisiones, anlisis de riesgos, aseguramiento de la
calidad, desarrollo de productos y procesos, anlisis de datos, planeacin de ensayos de
laboratorio, entre otros (la importancia de estos puntos se explica con detalle en la
revisin bibliogrfica). El modelado microbiano tiene sus inicios hacia 1920 con el
estudio cintico de los tratamientos trmicos. Con la llegada de los computadores el
inters por los modelos microbianos creci ya que se facilit el manejo de los modelos
multifactoriales. La respuesta microbiana puede predecirse con base en la respuesta que
se obtiene a un solo factor presente.
La clula microbiana es esencialmente una maquinaria de sntesis capaz de duplicarse a s
misma. El proceso de sntesis para el crecimiento bacteriano involucra unas 2000
reacciones qumicas de una amplia variedad. Una vez sintetizados los polmeros, el
crecimiento contina con el ensamblaje y formacin de nuevas estructuras celulares que
finalizan con la divisin en dos clulas hijas. En un medio apropiada fsica y
nutricionalmente, un cultivo se reproduce continuamente como clulas vegetativas, los
nutrientes absorbidos y metabolizados permiten crecer al microorganismo.
II. OBJETIVOS
Determinar la curva de crecimiento en microorganismos como levaduras cultivados en
aerobiosis utilizando diferentes fuentes de carbono.
Estudiar la curva de crecimiento de Saccahromyces cerevisiae
III. MARCO TERICO
3.1. Crecimiento Microbiano
El crecimiento microbiano hace referencia al aumento del nmero de microorganismos a lo
largo del tiempo y no al aumento de tamao de un microorganismo. El aumento del nmero
de microorganismos permite la formacin de colonias o de poblaciones. Es por eso que en
microbiologa el crecimiento se estudia por poblaciones y no en microorganismos
individuales. Las bacterias se reproducen generalmente por fisin binaria. El resultado de la
fisin binaria son dos clulas hijas por cada clula madre, as, una clula se divide en dos,
dos en cuatro y cuatro en ocho y as sucesivamente. Cuando se siembran microorganismos en
un medio de cultivo apropiado, los mismos comienzan a dividirse activamente empleando los
nutrientes que le aporta el medio de cultivo para "fabricar" nuevos microorganismos. Este
proceso contina hasta que algn nutriente del medio de cultivo se agota (sustrato limitante)
y el crecimiento se detiene. Tambin puede detenerse el crecimiento por acumulacin de
alguna substancia inhibidora formada por los mismos microorganismos, pero supngase por
ahora que ste no es el caso y que la primera alternativa es la vlida. Luego hay dos aspectos
claramente diferenciables que hacen al crecimiento microbiano: uno estequiomtrico, por el
cual la concentracin final de microorganismos obtenidos depender de la concentracin y
composicin del medio de cultivo, y el otro cintico, el que dir con qu velocidad se lleva a
cabo el proceso. (Prescott y col.,1999).
La microbiologa predictiva est relacionada con la compleja dinmica del comportamiento
de la poblacin microbiana , tal como fue observado por monod (1949), el crecimiento de
los cultivos bacterianos a pesar de la inmensa complejidad del fenmeno ,generalmente
obedece a leyes relativamente sencillas, las cuales hacen posible definir ciertas caractersticas
cuantitativas del ciclo del crecimiento, esencialmente las tres constantes del crecimiento:
crecimiento total ,tasa del crecimiento exponencial y crecimiento latente. Estas definiciones
no son puramente arbitrarias y corresponden a elementos fisiolgicos distintos del ciclo de
crecimiento (McMeekin y ros, 2002).
3.2. Curva De Crecimiento
La curva de crecimiento de un cultivo microbiano puede ser subdividida en cuatro partes
distintas denominadas fase de latencia, fase exponencial, fase estacionaria y fase de muerte.
De las cuatro fases de la curva de crecimiento, habitualmente la fase de crecimiento
exponencial o logartmico es la que presenta mayor inters por ser la fase en la que el
incremento del nmero de microorganismos es mximo. Durante esta fase el tiempo de
generacin (g) de los microorganismos (el tiempo que la poblacin de microorganismo
necesita para duplicar su nmero) se mantiene constante.
Grafico 1: curva de crecimiento microbiano
3.2.1. Fase de latencia
La fase de latencia, es el periodo de ajuste que las clulas experimentan al ser transferidas de
un medio al otro antes de iniciar su crecimiento. En esta fase se producen las enzimas
necesarias para que ellos puedan crecer en un nuevo medio ambiente. En esta fase no hay
incremento en el nmero de clulas, pero hay gran actividad metablica, aumento en el
tamao individual de las clulas, en el contenido proteico, ADN y peso seco de las clulas.
(Penfold ,1914).
3.2.2. Fase exponencial o fase logartmica
la fase exponencial o logartmica es aquella durante la cual los microorganismos crecen y se
dividen hasta el nivel mximo posible, en funcin de su potencial gentico ,tipo de medio y
condiciones en que crece .en este periodo hay una relacin lineal entre el logaritmo del
nmero de clulas (o cualquier otra propiedad medible de la poblacin) y el tiempo .los
microorganismos se dividen y duplican en nmero en intervalos regulares .como cada clula
se divide en un momento ligeramente diferente del resto, la curva de crecimiento aumenta
suavemente, en lugar de realizar discretos saltos. (Robinson y col .,1998)
3.2.3. Fase estacionaria
La fase estacionaria es resultado del agotamiento de los nutrientes disponibles o del efecto de
acumulacin de productos txicos de metabolismo que tienen como consecuencia la
disminucin de la velocidad del crecimiento .la transicin entre la fase exponencial y la fase
estacionaria se caracteriza por un crecimiento desequilibrado, durante el cual los diversos
componentes celulares son sintetizados a diferentes velocidades (Buchanan y Solberg.,
1972).
3.2.4. Fase de muerte
La fase de muerte es consecuencia de diversos factores: uno importante es el agotamiento de
las reservas celulares de energa. Al igual que el crecimiento, la muerte tambin asume una
fusin exponencial que puede ser representada por una disminucin lineal del nmero de las
clulas viables a loa largo del tiempo (Madigan y col., 1999)
3.3. Influencia De Los Factores Fsicos, Qumicos Y Ambientales Sobre El Crecimiento
Microbiano
Los alimentos son ecosistemas complejos .los ecosistemas estn constituidos por el medio
ambiente y los organismos que viven en l. El ambiente de un alimento est constituido por
factores intrnsecos inherentes al alimento (el pH, la actividad de agua y los nutrientes) y
factores extrensicos a l (la temperatura, la composicin del aire o la presencia de otras
bacterias) (Montville,2000).
El crecimiento bacteriano est influido notablemente por la naturaleza qumica y fsica de su
ambiente. El conocimiento de estas influencias ambientales permite controlar el crecimiento
microbiano y estudiar la distribucin ecolgica de los microorganismos. (Prescott y col
.,1999).Numerosos factores afectan el crecimiento de los microorganismos en los alimentos,
y , a menudo ,sus interacciones tienen un efecto significativo sinrgico o antagnico sobre el
crecimiento . Estos interactivos pueden ser muy importantes en los sistemas alimentarios, en
los cuales el crecimiento bacteriano puede verse favorecido o inhibido por los mltiples
ingredientes, condiciones de almacenamiento o constituyentes alimentarios (Eifert y
col.,1996).
3.3.1. Temperatura
El control de la temperatura se encuentra entre los factores ms crticos precisos para el logro
de un suministro alimentario que rena las propiedades sanitarias y organolpticas correctas.
Probablemente sea la temperatura el ms importante de los factores ambientales que afectan
a la viabilidad y el desarrollo microbiano (ICMSF,1983). El factor que ms influye sobre el
efecto de la temperatura en el crecimiento es la sensibilidad de las reacciones catalizadas por
enzimas a determinadas temperaturas .en condiciones de baja temperatura , un aumento eleva
la velocidad de crecimiento , porque la velocidad de una reaccin catalizada por enzimas ,
como de cualquier reaccin qumica casi se duplicara por cada incremento de [Link] la
velocidad de cada reaccin aumenta ,el metabolismo en general es ms activo a temperatura
altas , y el microorganismo crece ms rpidamente . a partir de cierto punto ,un mayor
incremento de la temperatura disminuye la velocidad de crecimiento ocasionan daos a los
microorganismos al desnaturalizar las enzimas, las protenas transportadoras y otras protenas
(Prescott y col ., 1999; Montville, 2000).
Cada microorganismo tiene una temperatura de crecimiento adecuada. Si consideramos la
variacin de la velocidad de crecimiento en funcin de la temperatura de cultivo, podemos
observar una temperatura mnima por debajo de la cual no hay crecimiento; a temperaturas
mayores se produce un incremento lineal de la velocidad de crecimiento con la temperatura
de cultivo hasta que se alcanza la temperatura ptima a la que la velocidad es mxima. Por
encima de esta temperatura ptima, la velocidad de crecimiento decae bruscamente y se
produce la muerte celular (Madigan y col.,1997).
3.3.2. Actividad de agua (aw)
La actividad de agua (aw) de una solucin es el 1% de su humedad relativa (cuando se
expresa en %).equivale tambin a la relacin entre la presin de vapor de solucin (Psol) y la
del agua pura (Pagua). La actividad de agua de una solucin o un slido puede establecerse
aislando la muestra en un cmara y midiendo la humedad relativa despus de que el sistema
haya alcanzado el equilibrio (Prescott y col.,1999).
La actividad de agua esta inversamente relacionada con la presin osmtica. La mayora de
los microorganismos, incluyendo las bacterias patgenas, crecen ms rpidamente a niveles
de aw de [Link] aw de la mayora de los medios de cultivo utilizados en el
laboratorio es de 0.999-0.990. A valores de aw inferiores a estos, la velocidad de crecimiento
y la poblacin estacionaria o la masa celular final disminuye, y la fase de latencia. A una aw
suficientemente baja, la cual es difcil de definir con precisin, la fase de latencia se hace
infinita, es decir el crecimiento cesa (ICMSF, 1983).
La gran mayora de los microorganismos requiere valores de actividad de agua muy altos
para poder crecer. Los valores mnimos de actividad para diferentes tipos de
microorganismos son, a ttulo orientativo, los siguientes: bacterias aw>0.90, levaduras
aw>0.85, hongos filamentosos aw>[Link] puede verse, los hongos filamentosos son
capaces de crecer en substratos con actividad de agua menor (ms secos) de la que permite el
crecimiento de bacterias o de levaduras. Por esta razn se puede producir deterioro de
alimentos de baja actividad de agua (por ejemplo, el queso o almbares) por mohos (hongos
filamentosos) y no por bacterias. En funcin de su tolerancia a ambientes con baja aw, los
microorganismos que pueden crecer en estas condiciones se clasifican en halotolerantes,
halfilos y xerfilos segn toleren o requieran condiciones salinas o hipersalinas,
respectivamente (Prescott y col., 1999).
3.3.3. pH
Cada especie tiene un intervalo definido de pH para su crecimiento y un pH ptimo para su
crecimiento .Aunque los microorganismo crecen a menudo en medios en un amplio de
intervalo pH, su tolerancia tiene un lmite .variaciones intensas en el pH pueden daar a los
microorganismos alterando la membrana plasmtica o inhibiendo la actividad de las enzimas
y protenas transportadoras. Los cambios en el pH externo pueden modificarse tambin la
ionizacin de las molculas de nutrientes, disminuyendo, por ello, su disponibilidad para el
organismo (Prescott y col., 1999).
El pH interno en la mayora de los microorganismos est en el rango de 6,0 a 8,0. Los rangos
de pH tolerables por diferentes tipos de microorganismos son, tambin, distintos. Hay
microorganismos acidfilos que pueden vivir a pH=1.0 y otros alcalfilos que toleran
pH=10.0.
3.3.4. Nutrientes
Los microorganismos requieren para su desarrollo los siguientes elementos: agua, fuentes de
energa, fuente de nitrgeno, vitaminas y otros factores de crecimiento y minerales. Los
hongos tienen las necesidades de agua ms reducidas, seguidos de las levaduras, bacterias
gram negativas y bacterias gram positivas. Los microorganismos pueden utilizar azcares,
alcoholes y aminocidos como fuente de energa. Algunos de ellos son capaces de emplear la
energa de carbohidratos complejos, como almidones y celulosa, ya que tienen la capacidad
de degradar estos compuestos hasta azcares sencillos. Tambin las grasas son utilizadas
como fuentes de energa, aunque slo un nmero relativamente pequeo de los
microorganismos de los alimentos son capaces de degradarlos. Los aminocidos constituyen
la fuente primaria de nitrgeno para los organismos heterotrficos. Un gran nmero de otros
compuestos nitrogenados tambin pueden cumplir esta funcin con relacin a las diversas
clases de organismos. Por ejemplo, ciertos microorganismos son capaces de utilizar
nucletidos y aminocidos libres, mientras que otros emplean pptidos y protenas
(McMeekin y Ross, 2002).
En general, la mayora de los microorganismos utilizan compuestos simples como los
aminocidos, antes de tener que desdoblar compuestos ms complejos, como las protenas de
alto peso molecular. Ocurre lo mismo con los polisacridos y grasas.
3.4. Oxgeno
Los microorganismos aerobios utilizan el oxgeno molecular con el cual producen ms
energa a partir de los nutrientes. Sin embargo existen microorganismos anaerobios
facultativos que utilizan el oxgeno disponible, pero si no lo hay pueden crecer mediante
procesos de fermentacin o respiracin anaerbica. La bacteria Escherichia coli muchas
levaduras son anaerobios facultativos. Existen adems los anaerobios obligados para los
cuales el oxgeno es perjudicial y por consiguiente no lo utilizan. En este caso los tomos de
oxgeno de sus componentes celulares los obtiene normalmente del agua. Es comprensible
entonces el uso del in perxido para el control bacteriano ya que en este caso es una forma
txica de oxgeno.
[Link] de azcares por levaduras
Bajo condiciones de crecimiento estrictamente anaerbicas, la fosforilacin a nivel del
substrato en la gluclisis es la nica fuente de ATP en Saccharomyces cerevisiae y posibilita
un rendimiento neto de 2 ATP por cada molcula de glucosa convertida en dos molculas de
piruvato. La disimilacin de glucosa a piruvato va la gluclisis est unida a la reduccin de
NAD+ en la reaccin catalizada por la gliceraldehdo-3-fosfato-deshidrogenasa. Un balance
redox cerrado en disimilacin es logrado por descarboxilacin de piruvato a acetaldehdo, el
cul (NAD+) subsecuentemente acta como un aceptor de electrones para la reoxidacin de
NADH2.1
El NADH2 y el NADPH tienen diferentes funciones en la red metablica de Saccharomyces
cerevisiae. El NADPH es preferentemente usado en vas asimilatorias. La gluclisis juega un
rol esencial en la disimilacin de azcar, pero tambin genera bloques constituyentes para la
biosntesis. Adems, aunque muchas reacciones biosintticas usan NADPH como un
reductor, algunas reducciones unidas a NADH ocurren en la conversin de metabolitos
centrales (piruvato, oxalacetato, acetil CoA) a monmeros celulares, por ejemplo en la
biosntesis de aminocidos. Durante el crecimiento de Saccharomyces cerevisiae sobre
azcar, la preferencia del NADH en reducciones disimilatorias (en la reduccin de
acetaldehdo a etanol y la reduccin del pool de quinona de la cadena respiratoria) es muy
fuerte.
En Saccharomyces cerevisiae, el mantenimiento de las condiciones de cultivo aerbico no es
suficiente para lograr metabolismo respiratorio de azcar. Incluso cultivos totalmente
aerbicos exhiben un metabolismo mixto respiro-fermentativo, a menos que ellos sean
desarrollados con un suplemento limitado de azcar a tasas bajas de crecimiento especfico.2,
3 Este fenmeno de fermentacin aerbica (frecuentemente referido como efecto de la
glucosa o Crabtree) es parcialmente debido a la represin de la sntesis de enzimas
respiratorias por exceso de glucosa.4, 5
Durante el crecimiento respiratorio sobre azcares, la reoxidacin del NADH2 formado en la
gluclisis puede ocurrir va respiracin mitocondrial, de esta manera rinde ATP adicional va
fosforilacin oxidativa. Adems por otra parte, la reoxidacin respiratoria de NADH2
glucoltico implica que el piruvato no tiene que ser convertido en acetaldehdo (aceptor de
electrones), pero puede ser posteriormente oxidado. La oxidacin de piruvato a acetil
coenzima-A, ocurre predominantemente va el complejo mitocondrial piruvato-
deshidrogenasa, y subsecuentemente el acetil-CoA es oxidado a CO2 y H2O por las enzimas
del ciclo del cido tricarboxlico (TCA).6 Los anlisis cuantitativos de culturas respiratorias,
han concluido que la eficiencia in vivo de este proceso en Saccharomyces cerevisiae es
menor que en muchos otros microorganismos, esta baja estequiometra de fosforilacin
oxidativa est relacionado con la ausencia de un protn de translocacin NADH
deshidrogenasa en Saccharomyces cerevisiae, la disimilacin respiratoria completa de
glucosa rinde aproximadamente 16 ATP por molcula de glucosa (cuatro ATP desde la
fosforilacin a nivel del substrato y cerca de 12 a partir de la fosforilacin oxidativa).
Gay-Lussac fu el primero en mostrar que la fermentacin de la glucosa rinde
aproximadamente pesos iguales de etanol y CO2 (45 partes de glucosa rinden 23 partes de
alcohol y 22 partes de CO2). Pasteur encontr que 100 partes de sucrosa rinden 105.4 partes
de azcar invertida, el cual fu fermentada a 51.1 partes de etanol, 49.4 partes de CO2, 3.2
partes de glicerol y 1.7 partes de cido succnico.
El rendimiento de etanol en fermentaciones de vinos no alcanza el valor terico, el cual debe
ser 51.1% por peso basado en glucosa fermentada. Este rendimiento se debe a la formacin
de sub-productos durante la fermentacin alcohlica y a la asimilacin de azcar por la
levadura, adems de esto el rendimiento es afectado por diversas variables incluyendo la
temperatura, pH, cantidad de inculo y presencia ausencia de O2, en la prctica 47.0 47.5
gramos de etanol son usualmente obtenidos por cada 100 gramos de azcar fermentado.
(gua de practica)
IV. EQUIPOS, REACTIVOS Y MATERIALES
Cuadro 1: materiales, reactivos y equipos utilizados para la determinacin del
crecimiento microbiano
Levadura (Saccharomyces 10 g Bagetas 02
cerevisiae)
Glucosa, sucrosa 20g c/u Pinzas 01
Extracto de levadura 5.0 g/L Chapitas 30
KH2PO4 4 g/L Espectrofotmetro 01
MgSO4.7H2O 2 g/L Balanza analtica 01
(NH4)2SO4 5 g/L Potencimetro 01
Agua destilada 5L Algodn 01 rollo
HCl al 10% 50ml Cinta mazkin 01
Matraces Erlenmeyer de 1L 02 Rotulador 01
Matraces Erlenmeyer de 06 Papel aluminio 01 rollo
250ml
Pipetas de 10, 5 ml 02 c/u Tijera 01
Vasos de precipitacin de 04 Pabilo 01 rollo
200 ml
Pizetas 02
V. METODOLOGIA, PROCEDIMIENTO Y MEDICIONES
5.1. Metodologa
Preparacin de inculo: Preparar 100 ml de una solucin que contenga: Lactosa 10 g,
extracto de levadura 10 g, KH2PO4 0.5 g, MgSO4.7H2O 0.04 g, ajustar el pH a 3.8. Luego
de esterilizarlo a 121 C por 20 minutos a 15 libras/pulg2, inocular aspticamente con la
levadura Saccharomyces cerevisiae usando una asa de siembra y cultivar por 24 horas en
agitacin a 28C.
Medio de fermentacin: Preparar 250 ml de una solucin que contenga: Lactosa10 g, extracto
de levadura 0.25 g, (NH4)2SO4 0.5 g, KH2PO4 1.0 g, MgSO4.7H2O 0.1 g.
5.2. Procedimiento
En cada uno de 3 matraces Erlenmeyer de 400 ml se adicionan 250 ml de medio de
fermentacin de composicin citada anteriormente, el pH se ajusta a 3.8 4 con HCl al 10%.
Luego se esteriliza a 121 C por 20 minutos a 15 libras/pulg2, seguidamente se deja enfriar
hasta alcanzar los 28 C (temperatura de cultivo con Saccharomyces ncerevisiae). Luego
aspticamente se inocula con el 5% del inculo cultivado anteriormente. El inculo a utilizar
debe centrifugarse previamente a 3 000 rpm x 10min., y enjuagado con agua destilada antes
de inocular al medio de fermentacin.
5.3. Mediciones
Para determinar la curva de crecimiento en el cultivo aerobio se realizar por dos mtodos
indirectos:
1) Determinacin del crecimiento por gravimetra: Con una pipeta se extrae aspticamente 2
3 ml de medio cada 4 horas, se centrifuga y las clulas se vierten en una placa metlica
previamente tarada. Seguidamente la biomasa centrifugada se coloca en la estufa para
secarlo durante 1hora a 100 C. Con los datos obtenidos: peso seco de las clulas y el
intervalo de tiempo en el que se tomo la muestra se construye una grfica tiempo peso
seco de biomasa (mg de biomasa seca/ml). Luego se determinar la tasa de crecimiento
especfico al inicio de la fase logartmica con la siguiente formula:
Ln X1 Ln Xo
= ----------------------
t1 to
2) Determinacin del crecimiento por densidad ptica: Se tomar muestras del medio de
fermentacin (2ml aprox.) cada 4 horas para medir la densidad ptica del medio a 620nm.
Con estos datos se construye una curva de crecimiento de la levadura ploteando densidad
ptica y tiempo de toma de muestras.
Para controlar el tiempo de fermentacin (en anaerobiosis), se toma el peso inicial del
medio de cultivo correspondiente a 250ml (no olvidar descontar el peso del matraz y el
tapn) y cada 4 horas se vuelve a pesar el matraz para determinar la velocidad de
fermentacin, se anota el intervalo en que se toma cada medida y el peso neto del medio
de cultivo en ese instante, y se construye una grfica tiempo peso.
Se determinar el etanol producido al final de la fermentacin por picnometra, con los
datos obtenidos se calcular la eficiencia de cada fermentacin.
VI. RESULTADOS
tiempo (h) vaso + muestra humeda vaso + muestra seca peso final
0 0 14.451 14.036 -0.415
1 3 14.735 14.898 0.163
2 6 14.434 14.586 0.152
3 21 14.586 14.723 0.137
4 24 14.154 14.302 0.148
5 27 14.456 14.612 0.156
6 30 14.677 14.842 0.165
7 48 14.453 14.612 0.159
8 51 14.715 14.876 0.161
9 54 14.788 14.951 0.163
10 57 14.545 14.707 0.162
Grafica 1: curva de crecimiento
0.3
0.2
biomasa seca (g) 0.1
0
0 10 20 30 40 50 60
-0.1
peso final
-0.2
-0.3
-0.4
-0.5
tiempo (h)
VII. DISCUSIONES
Con respecto a la velocidad especifica: Fabio Rafael Tarntola 2003, menciona que
la velocidad especifica del Sacharomyces es de 0.124h-1 , en los resultados obtenidos
se tuvo para la absorbancia un resultado de 0.4h-1 y para la medicin del peso de
0.5h-1 , es probable que se haya cometido erroes en la toma de datos al momento de
medir la absorbancia y quiza no estuvo calibrado el espectrofotmetro.
BULOCK, 1987 establece el valor de velocidad mxima de crecimiento para la
saccharomyces cerevisiae 0,45 h-1, el valor encontrado es menor a comparacin de
este resultando 0,0023 h-1
Marison, 1996 determino un valor para la constante de saturacin (Ks) para la
saccharomyces cerevisiae de 25 mg/l (0,025g/l) resultando nuestro valor muy
superior de lo encontrado por Marison resultando 36g/l
VIII. CONCLUSIONES
Es el perodo de la curva de crecimiento en el cual el microorganismo crece
exponencialmente, es decir que cada vez que pasa un tiempo de generacin la poblacin
se duplica. Bajo condiciones apropiadas la velocidad de crecimiento es mxima. Las
condiciones ambientales (temperatura, composicin del medio de cultivo, etc.) afectan a
la velocidad de crecimiento exponencial.
Los resultados obtenidos para cada muestra se calcularon sus respectivas ecuaciones para
determinar la biomasa en funcin al tiempo y la biomasa inicial.
De la misma forma para cada concentracin se le realizo su respectiva curva de crecimiento
microbiano observndose que para cada concentracin exista un crecimiento de biomasa
mas que las otras concentraciones
IX. RECOMENDACIONES
X. CUESTIONARIO
Cmo est caracterizada la fase exponencial de crecimiento microbiano?
Qu es la fase lag y que factores influye en su duracin?
Realice una discusin respecto a los valores encontrados de produccin de etanol y
biomasa bajo condiciones aerobias y anaerobias.
Suponga que un cultivo de levadura se duplica su poblacin cada 4 horas, si la
poblacin inicial es de 100, calcule
XI. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
C.G. Sinclair, 1987 department of chemical engineering, university of Manchester
institute of science and technology. PO Box 88
Jhon bulock, 1987. Biotecnologa bsica. Editorial Acribia, S.A
Crecimiento Microbiano (Prescott y col., 1999). (McMeekin y ros, 2002).
Curva de Crecimiento ; Microbiologa ((Penfold ,1914), (Buchanan y Solberg., 1972)
Erika Fajardo Trujillo2007, Evaluacin De Melaza De Caa Como Sustrato Para La
Produccin De Saccharomyces cerevisiae PONTIFICIA UNIVERSIDAD
JAVERIANA-FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS- MICROBIOLOGA
INDUISTRIAL BOGOT D.C.
Fabio Rafael Tarntola 2003, Diseo Y Puesta En Marcha De Un Sistema
Semicontinuo De Fermentacion Para La Produccion De Etanol A Partir De Materias
Primas Renovables Mediante Saccharomyces cerevisiae. UNIVERSIDAD
NACIONAL DEL CUYO MENDOZA-ARGENTINA.
Tiempo de Latencia (Swinnen y col., 2004),(Montville, 2000), (Swinnen y col.
,2004).
Tiempo de Generacin (Segn Stanier y col., 1989) ( Madigan y col .,1997).
Velocidad de Crecimiento(Madigan y col .,1999),( Stanier y col., 1989)
