Universidad Andina del Cusco
Facultad de Ciencias de la Salud
CARRERA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
Blga. Olga Libia Cjuno Huanca
BIOLOGIA
BIOLOGIA CELULAR VIII
MOLECULAR II
FUNCIN BIOLGICA DEL ADN
ADN es el almacn de la informacin gentica y la molcula encargada de
transmitir a la descendencia las instrucciones
necesarias para construir todas las protenas presentes en un ser vivo
Las 3 funciones bsicas del ADN pueden resumirse en:
EXPRESAR
ALMACENAR TRANSMITIR
REPLICACIN DEL ADN
Repaso
TRANSCRIPCION
El proceso de sintesis de ARN a partir de
ADN constituye la TRANSCRIPCION de la
informacin gentica.
La transcripcin es muy similar en la gran
mayora de organismos .
El ADN se encuentra en el nucleo celular y
la sntesis de protenas tiene lugar en el
citoplasma, (hialoplasma). Por eso la
informacin contenido en la estructura
primaria del ADN debe transcribirse a una
molcula de ARNm. Tambin se sintetizan
en el ncleo ARNr y ARNt necesarios para
sntesis de protenas.
CARACTERISTICAS DE LA
TRANSCRIPCION
- El resultado de transcripcin es la sintesis de diferentes
ARN (ARNr, ARNt, ARNm, ARNhn).
- Cada ARN es sintetizado individualmente a partir de la
UNIDAD DE TRANSCRIPCION.
- Es un proceso selectivo. (zonas concretas, con inicio y fin)
- No todos los genes se transcriben simultneamente y con
la misma frecuencia.
- Es un proceso reiterativo.
- Posee mecanismos reguladores que determinan cuando y
con que frecuencia se transcribe.
- Es un proceso conservativo del ADN, no se modifica luego
de ser transcrito.
COMPONENTES PARA TRANSCRIPCION
- Una cadena de ADN
T=A molde
GC - Una Holoenzima = ARN
A=T Polimerasa
GC - 4 ribonucleotidos Hebra -
Unidad de 1 gen Hebra +
transcripcin
T=A actina trifosforidados: ATP, GTP,
CG CTP, UTP. (Aportan
GC Energa y nucletidos
A=T mono fosfato.
GC - El proceso de
A=T transcripcin se divide en
CG 1 gen tres fases: iniciacin,
insulina
T=A elongacin y terminacin.
GC
A=T
GC
TRANSCRIPCION EN CELULAS
PROCARIONTES
UBICACIN:
La sintesis de ARN en los procariontes se
realiza a nivel del citoplasma.
COMPONENTES:
- ARN polimerasa (450Kd) dependiente del
ADN. Formada por dos unidades ( y , y
factor ) Transcribe los genes bacterianos
dando ARNr, ARNt, ARNm.
- Una cadena de ADN molde
- Una Holoenzima = ARN Polimerasa
- Ribonucleotidos trifosforidados: ATP, GTP,
CTP, UTP. (Aportan Energa y nucletidos
mono fosfato.
INICIACION:
- El primer paso consiste en la asociacin de la ARN
Polimerasa con el ADN en el promotor (contiene
informacin que determina cual de las dos
cadenas del ADN ser transcrita) y el sitio del inicio
de la transcripcin en sentido 3-5 , formando
el complejo cerrado del promotor, donde el ADN
mantiene su conformacin de doble helice y la
polimerasa esta en contacto con las regiones -
35(secuencia consenso o TTGACA) y -10 (secuencia
consenso TATAAT), denominadas Cajas TATA TATA Girasa
box, situada en posicin -10 se conoce como caja (desenrrolladora)
de Pribnow encargada de identificar
ribonucletido preciso que activa la transcripcin. promotor
Burbuja de trans
- La holoenzima se une al promotor formando un
complejo cerrado y favorece la apertura parcial de
las dos cadenas de ADN (burburja de transcripcin
o complejo abierto).
- La ARN Polimerasa puede adicionar nucletidos
trifofatados en una cadena del ARN pero no inicia
la sntesis.
Factor TF II
5 3
TATA
TBP
Caja TATA
PROMOTOR
La ARN Polimerasa sin el factor empiezan a
catalizar la formacin de enlaces fosfodiester
entre los GTP, CTP, UTP, ATP en la direccin 5
3, el primer nucleotido conserva sus 3P,
sirviendo como marcador de inicio de cadena.
ARN POLIMERASA UNIDA AL PROMOTOR
EN CELULA PROCARIOTA
ELONGACION:
Una vez que 10-12 ribonucletidos se han incorporado de
manera satisfactoriamente al transcrito, a partir de aqu
se elonga o crece la cadena, llevada a cabo por la ARN
polimerasa, tras la liberacin de la subunidad .
A medida que avanza la ARNpolimerasa, el ARN
sintetizado se despega del ADN, volvindose a formar la
cadena doble de ADN, la tensin torsional es aliviada solo
por la topoisomerasa I.
TERMINACION:
- La transcripcin continua hasta el punto de la terminacin, donde cesa el
crecimiento de la cadena y se produce la separacin de la ARN polimerasa y el
ARN sintetizado o transcrito primario del ADN
- Existen dos mecanismos de terminacin:
Uno dependiente de la proteina semejante a un anillo denominado Factor Rho
(polipetido que al unirse a la ARNpolimerasa detiene de inmediato el proceso) , en
una regin rica en G,C,
El otro mecanismo es independiente de los factores [Link] terminadores
independientes del Factor Rho, contienen caractersticas importantes (secuencia
rica en G,C, seguida de una serie de 5-6 residuos de Adenina y as evitando la
continuacin de la enzima.
Luego el ARN se desglosa del ADN, porque principalmente , los puentes de
A=U son muy inestables y permiten que las cadenas complementarias del
ADN vuelvan a formar una doble hlice, manteniendo la informacin
codificada.
Existe solo un ARN polimerasa en procariontes que transcribe los
diferentes tipos de ARN.
Estas enzimas tienen gran afinidad por las secuencias promotoras del
ADN. A diferencia del ADN polimerasas. Las ARN polimerasas no pueden
editar o corregir equivocaciones en la molcula que van sintetizando, de
modo que cualquier error en la lectura pasa a la protena.
Asi mismo las ARN polimerasas inician la sntesis de cadenas nuevas de
ARN sin la necesidad de un primer o iniciador.
Las unidades de transcripcin en procariontes estan formadas por ms de
un gen, por lo que el ARNm resultante es POLICISTRONICO (lleva
informacin para la sintesis de 2 ms cadenas polipeptdicas diferentes).
La transcripcin en procariontes es regulada por factores de control
positivo y negativo que estimulan o disminuyen la transcripcin de un gen.
TRANSCRIPCION EN CELULAS
EUCARIONTES
UBICACIN:
La sinteis de ARN en los eucariontes se realiza dentro del ncleo a
nivel del nucleolo y del nucleoplasma.
COMPONENTES:
- 3 ARN polimerasas nucleares distintas: ARN Polimerasa I
(nucleolo), Polimerasa II polimerasa III(Nucleoplasma) .
- Para la transcripcion en eucariontes son necesarias las siguientes
modificaciones.
- Perdida de la estructura de fibra de 30 nm. Mediante separacin
de la Histona H1 y adquisicin de la estrucrura de 10nm
(nucleosoma)
- Formacin del complejo de transcripcin que abarca al menos
dos decenas de protenas incluida la ARN polimerasa y en su
forma funcional incluye un centenar de protenas.
- Factores moduladores de transcripcin (estado de legibilidad).
- Ribonucleotidos trifosforidados: ATP, GTP, CTP, UTP. (Aportan
Energa y nucletidos mono fosfato.
ARN POLIMERASAS
ARN POLIMERASA procariota
ARN POLIMERASAS Eucariotas
Factores de transcripsin
TBP, B, F, E y H
El sitio promotor es reconocido en eucariontes
por una variedad de protenas ARN polimerasaII sntesis del ARNm
RNA polimerasas eucariotas Estn conformadas por 8 a 14
cadenas polipeptdicas.
Estas enzimas son protenas aparecen como agregados de 500 5 subunidades son comunes.
kDa. Las RNA polimerasas de mitocondrias y cloroplastos de
menor tamao y se asemejan a la bacteriana.
La unin de RNA polimerasas a los moldes de DNA es
eucariotas depende de numerosas protenas que
modulan el reconocimiento de los promotores y el inicio
de la transcripcin.
Las 3 ARN pol son similares a las
subunidades de la ARN pol
procariota.
RNA POLIMERASA I
Se localiza en el nuclolo, transcribe los principales genes de
RNA ribosmico (un solo transcrito, el RNAr 45s, precursor del
RNAr 18s, 28s, y 5.8s).
Contiene 13 subunidades
Necesita al menos 2 factores de transcripcin para iniciar el
proceso.
_UBF1 es un polipptido que se une a una regin rica en
G-C tanto en el ncleo del promotor como en UCE.
_SL1 est formada por 4 protenas, una de estas es la
TBP (binding protein), esta protena se une a la
secuencia TATA.
RNA POLIMERASA II
Se encuentra en el nucleoplasma y sintetiza el RNAhn (RNA
heterogneo nuclear), el precursor del RNAm, tambin sintetiza
algunos RNAsn.
Transcribe genes estructurales (los que se traducen a protenas)
ESTRUCTURA: Contiene entre 8 y 12 subunidades. Dos grandes
subunidades de 240 kD = RPB1 () y 140 Kd = RPB2 ().
_ La subunidad (mltiples repeticiones YSPTTSPS en el COOH de
reconociminto de seales de activacin), muestra un alto grado de
homologa con la subunidad de la RNA polimerasa bacteriana.
_La subunidad , es similar a la subunidad bacteriana.
_Otras dos subunidades llamadas RBP3 y RBP11 semejantes a las 2
subunidades de la ARNpol bacteriana.
ARN pol ll utiliza al menos 7 factores de transcripcin: TFIIA, TFIIB,
TFIID (se une a la caja TATA), TFIIE, TFIIF, TFIIH y TFIIJ.
Los promotores de la RNApol lI se localizan en el extremo 5 del centro
de iniciacin de la transcripcin
La ARN polimerasa II es la nica responsable de la transcripcin de los genes
que codifican protenas (sntesis del ARNm).
Factores de transcripcin de RNA polimerasa II
Peso
Numero de
molecular Funcin
Factor subunidades
(kDa)
TFIID Reconocimiento del centro del promotor TATA;
TBPs 1 38 reclutamiento de TFIIB
TAFs 12 15-250 Reconocimiento del centro del promotor (elementos no
TATA) ; funciones reguladoras positivas y negativas
Estabilizacin de la unin TBP; estabilizacin de
TFIIA 3 12, 19, 35
interacciones TAF-DNA; funciones antirrepresoras
Reclutamiento de RNA pol II-TFTIIF, seleccin del lugar
TFIIB 1 35
de comienzo de la RNA pol II
Direccionamiento de la pol II al promotor,
TFIIF 2 30, 74 desestabilizacin de las interacciones inespecficas RNA
pol II-DNA
Funciones catalticas en la sntesis de RNA;
RNA pol II 12 10-220
reclutamiento de TFIIE
Reclutamiento de TFIIH, modulacin de las actividades
TFIIE 2 34, 57 helicasa, ATPasa y quinasa de TFIIH, potenciacin
directa de la fusin del promotor
Fusion del promotor utilizando la actividad helicasa;
TFIIH 9 35, 89
depuracin del promotor por la actividad CTD quinasa
RNA polimerasa III
Se encuentra en el nucleoplasma del ncleo.
Transcribe los principales genes de RNA de transferencia, RNA ribosomal 5s y
RNA pequeos nucleares (RNAsn).
Contiene 14 subunidades.
Utiliza los factores transcripcionales:
_ TFIIA: protena con motivos de dedos de cinc.
_ TFIIB: complejo formado por 3 protenas, una TBP y dos protenas ms.
_ TFIIC: complejo protenico de mas de 500 kDa.
En los eucariotas cada gen tiene su propio promotor
El mecanismo de la transcripcin eucariota tambin
requiere muchos ms factores de transcripcin
La ARN polimerasa II eucariota no se une directamente al
promotor, sino que primero se une a una docena o ms de
factores de transcripcin, en un orden especfico, para
reconocer al promotor y despes unirse a ste
El ncleo de muchos promotores de eucariotas es la
denominada caja TATA, ubicada a 30 bps hacia arriba del
sitio de inicio de la transcripcin, con un motivo consenso
TATA(A/T)A(A/T). Sin embargo, no todos los promotores de
eucariotas contienen la caja TATA
TRANSCRIPCIN EUCARIOTA
Ocurre en el ncleo y no esta acoplada a la traduccin
Requiere de la remodelacin de la cromatina
En la regulacin intervienen secuencias potenciadoras (intensificadoras
enhancers) y silenciadoras aparte de las promotoras.
Todas las ARNpol eucariotas necesitan Factores de transcripcin basales (TF) para
reconocer los promotores e iniciar la transcripcin. Los factores de transcripcin se
unen a secuencias del ADN y modulan la fijacin de la ARNpol al promotor.
El uso de promotores alternativos permite regular la expresin gnica.
DNA: estructura
Regin reguladora: inicio de transcripcin
Regin codificante
Exn
Intrn
Seales de terminacin.
Regulacin de la transcripcin en
eucariotas
Est determinada por factores de transcripcin
Basales y por factores de transcripcin
Especificos o especializados (activadores o silenciadores/represores).
En los genes eucariotas hay 3 tipos de secuencias gnicas reguladoras:
[Link] promotor
[Link] secuencias potenciadoras (intensificadoras enhancers).
[Link] secuencias silenciadoras (silencers)
1. Promotor
Es la regin ms prxima al inicio de la transcripcin.
Los genes de eucariotas,
precisan de promotores para
iniciar la transcripcin.
Secuencias de
reconocimiento especfico
para Factores de
Transcripcin que ayudan a
la ARN pol a colocarse en el
sitio de iniciacin del gen.
Estructura modular
Regin promotora:
Secuencias adicionales para
una alta actividad promotora
-120
-80
2. Secuencias potenciadoras (intensificadoras
enhancers)
Entre estas se intercalan secuencias silenciadoras. Son bidireccionales y no tienen una localizacin
precisa respecto al sitio de iniciacin entre -200 -1000 (secuencia arriba secuencia abajo o en
medio de un gen).
Pueden ejercer su efecto sobre promotores situados a miles de pares de bases de distancia. A ellas
se unen los factores activadores de la transcripcin. Existen 2 tipos de Factores de transcripcin
basales:
a) Remodelan la cromatina: Modifican las histonas por acetilacin (histone acetyle transferases = HATs),
metilacin, fosforilacin, entre otras.
b) Los que interaccin con RNA pol II
Transactivadores: son protenas de unin a Secuencias Potenciadoras. Aumentan la frecuencia de
iniciacin de la ARNPol II va CO-ACTIVADORES, tienen dos dominios:
1. Dominios de unin al DNA de secuencias potenciadoras (enhancers)
2. Dominios de unin a factores Transcripcionales Co-activadores.
Coactivatores: son necesarios para el ensamblaje del Aparato bsico de la Transcripcin. Permiten la
comunicacin entre RNA pol II y Transactivadores. Integran seales de los activadores y represores de la
transcripcin e interaccionan con los factores de transcripcin basales.
3. Secuencias silenciadoras
(silencers):
Las estn intercaladas entre las activadoras y a ellas se unen los represores
(impiden la funcin de los factores activadores, disminuyendo la velocidad de
transcripcin).
Regulacin de la transcripcin en Eucariotas
Las protenas enumeradas con el peso molecular son las subunidades de la ARN pol ll.
Complejo de transcripcin en Eucariotas
Contiene 4 componentes:
1) Protenas de unin TATA, es un complejo de
protenas que actan como los factores de
transcripcin basales que se unen al promotor
central.
2) Factores de transcripcin basales llamados
A,B,F,E y H.
3) Activadores y represores que regulan los factores basales.
4) Protenas coactivadoras que comunican a los factores basales y a los activadores.
1. Activacin de la Transcripcin
En eucariotas los nucleosomas reprimen la transcripcin de todos los
genes. Solo los genes activados son transcritos
Los factores activadores de la
transcripcin, que cumplen las
funciones:
1) Desempaquetar la cromatina
al disgregar los nucleosomas,
y consiguen desenrollar la
doble vuelta del ADN, para
que la regin promotora
quede accesible.
2) Facilitan, a travs de los
coactivadores, el
acoplamiento de los factores
basales con la ARN
polimerasa II.
3) Incrementar la velocidad de
transcripcin
Paso 1: DNA-binding transactivators (DBTs)
se unen a las secuencias intensificadoras.
Paso 2: DBTs unen a los coactivatores con
actividad HAT(Histona Acetil Transferasa)
permitiendo la remodelacin de la
cromatina.
Paso 3: DBTs tambin interactan con el
TFIID permitiendo que la TBP se una a la
TATA box.
Paso 4: Unin de la RNA pol II y formacin
del complejo bsico de transcripcin.
Paso 5: Iniciacin de la transcripcin
2. Inicio de la transcripcin en eucariotas
La unin se realiza a travs de la TBP (TATA Binding Protein) una
subunidad del complejo TFIID. Provocando cambios
conformacionales en la estructura del ADN.
El complejo de preiniciacin solamente proporciona unos niveles de
transcripcin basales. Para alcanzar niveles de transcripcin elevados se
requieren otros factores de transcripcin que se denominan activadores
y que estimulan la actividad del promotor
3. Elongacin:
La sintesis contina en direccin 53, Para alargar el ARNm la ARN polimerasa
II necesita dedos factores adiciones de elongacin llamados SII y SIII, este ltimo
denominado ELONGIDA (heterotrimero formado por elonginas A, B, y C).
Se estima que la fase de alargamiento la ARN polimerasa II le agrega a la
molcula de ARN uno s 50nuc/seg.
ARNpolimerasa
T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G
4. Terminacin.
En los genes que codifican ARNm, an no han sido identificadas las secuencias de
nucletidos que provocan la terminacin de la transcripcin.
El ARN recien sintetizado se denomina TRANSCRITO PRIMARIO y se conoce como
ARN heterogneeo [Link] transtritos no se encuentran libres en el ncleo,
sino asociados con diversas protena bsicas que se recombinan con los ARN apenas
sintetizados.
La ARNpol II sigue transcribiendo mas all de la seal de terminacin pasando a
travs de varias regiones AATAAA.
Endonucleasa reconoce la secuencia TTATTT, que determina el final de la transcrip
cin y la separacin de la cadena de preARNm recin sinte-
tizada de la hebra molde de ADN.
El pre-RNAm que transporta esta seal en forma de AAUAAA se rompe por una
endonucleasa que reconoce la seal y corta entre 11 y 30 residuos hacia el extremo
3.
5. Maduracin.
El ARN obtenido en la transcripcion se denomina
ARNhn, este es procesado por diferentes enzimas para
poder formar ARNm. El proceso de maduracin
consiste en retirar los intrones del ARNhn y unir los
exones que constituyen el ARNm a travs de la ligasa.
Este proceso comprende de 3 pasos.
1. Corte y empalme (sprincing).
2. CAP o Encapuchamiento 5.
3. Poliadenilacin 3.
Posteriormente el ARNm, sale del ncleo a travs de
los poros nucleares con direccin a los ribosomas del
citoplasma.
1. Corte y Empalme (Splincing)
Puede ocurrir por dos
procesos:
Splinceosoma: Las
proteinas que cortan
exones y unen y remueven
intrones.
Autosplicing: Los intrones
se cortan entre ellos.
Se cortan los intrones y se empalman los exones del
DNA: (5% exones y 95.5% intrones ms promotores de
genes, 70% son extragenmicos no protenicos).
2. CAP O Encapuchamiento
Consiste en la modificacin qumica del extremo 5del
transcrito primario mediante adicin enzimtica de un
nucletido modificado o nucletido metilado, la
metiguanosina, que se liga al nucelsido trifosfato del extremo
5del ARNm naciente.
3. Poliadenilacin
Endonucleasas cortan la Sec. Seal
molcula de preARNm y una
polimerasa poliA aada unos
AAUAAA
200 nuclotidos de A. TTATTT
poliA-polimerasa
m-GTP U G C U C G U G U A G A A A A A
ARNm precursor
Se aade una cola poli-A de 100-200pb mediante una
polimerasa especial que no esta dirigida por un molde, el
ARNm al aadirsele la cola poliA, es llamado = ARNm
precursor. La cola poli-A, se mantiene tambin en el ARNm
que se exporta al citoplasma, por lo que su funcin es:
transportar al ARNm al citoplasma, permite estabilidad en
la molcula de ARNm y a la vez ayuda con la traduccin.
ENHANER O SITIOS DE REGULACION DE LA
TRANSCRIPCION
Regula la tasa de transcripcin de genes responsables de la sintesis
proteca en la clula y estimula la necesidad ya sea en mayor o menor
cantidad de una protena, cuando alcanza niveles altos se une al
represor activndolos. Los represores se unen al operador y los genes
estructurales y suprimen la sntesis de protena.
Principio general: ECONOMA
Regulacin en procariotas:
Modelo del opern.
Ejemplo de opern inducible: opern LAC
Ejemplo de opern reprimible: opern triptfano.
Regulacin en eucariotas:
Regulacin hormonal
REGULACION EN PROCARIONTAS
MODELO DEL OPERON:
Es un modelo de regulacin de la expresin
gnica xJacob y Monod en Escherichia coli.
CONCEPTOS:
Promotor.
Genes estructurales. ARN policistrnico
Operador
Gen regulador
OPERN LAC
Regula los enzimas implicados en el
metabolismo de la lactosa.
Es INDUCIBLE: la existencia de lactosa en
el medio induce la sntesis de enzimas
para su metabolismo.
En
ausencia
de
LACTOSA
49
En ausencia de lactosa
el represor est unido a
promotor y no hay
transcripcin.
Cuando hay lacotsa:
En el medio se forma
alolactosa.
sta se une al represor
El represor libera al
promotor
50
Cuando hay lactosa:
El promotor queda libre, y a
l se une la ARN polimerasa
Comienza la transcripcin
de genes de enzimas
implicadas en la
degradacin de la lactosa.
As slo se producen los
enzimas necesarios en el
momento preciso.
51
OPERN TRIPTFANO
Es un opern reprimible.
Cuando el producto final
es excesivo se reprimen
los genes de los enzimas
que dan lugar a su
sntesis.
En este caso, el represor
slo es activo cuando se
une al triptfano.
52
OPERN TRIPTFANO (2)
Cuando hay suficiente
cantidad de triptfano,
ste se une al represor y lo
activa.
Triptfano = correpresor.
El represor se une al
promotor y se bloquea la
transcripcin de los genes
para la sntesis de
triptfano.
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53
18/09/2015 Twitter - GTalk - Buzz
REGULACIN EN EUCARIOTAS
Es ms complejo.
Diversidad de funciones a pesar del tener
todas el mismo genoma.
Contienen:
Promotores cercanos
Secuencias activadoras ms lejanas a los genes:
los enhancers
Ambos son lugares de unin a protenas
reguladoras.
54
55
INHIBIDORES TRANSCRIPCIONALES
Pueden ser considerados dos tipos fundamentales de
inhibidores de este proceso: los que impiden la separacin
de las cadenas de ADN, que por lo general son tambin
inhibidores de la replicacin, y los que actan de forma
directa sobre las polimerasas.
Entre ellos se encuentra el antibitico rifampicina, que
acta sobre la ARN polimerasa impidiendo la fase de
iniciacin. Una sustancia denominada -amanitina que
inhibe la sntesis de ARm en organismos eucariotas pues
acta sobre la ARN polimerasa II.
Estos inhibidores presentan importantes aplicaciones
teraputicas y un inapreciable valor en el
Diferencias entre la transcripcin
procariota y eucariota
preARNm
Diferencias entre la transcripcin
procariota y eucariota
procariota eucariota
ARNm policistrnico transcripcin y ARNm monocistrnico
traduccin acopladas ARN Polimerasa transcripcin y procesamiento
nica acoplados 3 ARN Polimerasas diferentes
La ARN pol Procariota La ARN pol Eucariota
Factores de transcripsin
TBP, B, F, E y H
El sitio promotor es reconocido en eucariontes
por una variedad de protenas ARN polimerasaII sntesis del ARNm
EL CODIGO GENETICO
El ARNm tiene una estructura primaria complementaria de una de las
cadenas del ADN. Esta disposicin de bases nitrogenadas en el ARN, es la
que codifica lasecuencia de aminocideos de protena. Crick demostr que
los aminoacios en las protenas van ha estar codificadas por secuencias de
3 bases nitrogenadas consecutivas de las cadenas de ARNm a partir de la
secuencia AUG. Cada una de estas 3 secuencias de bases se llaman
TIPLETES O CODONES.
Debe tenerse en cuenta al haber en las protenas 20 aminocidos
distintos, una de las dos bases seran suficientes para codificarlos.
A tener los cidos nuclecos 4 BN (A,G,C,y U) existiran 64 codones o
combinaciones de tres bases y como solamente hay 20 aminocios
distintos se deduce que varios tripletes codifican un mismo aminocido.
Este codigo que relaciona la secuencia de bases del ARN con secuencias de
aminocidos en las protetinas recibe el nombre de CODIGO GENETICO.
MECANISMO DE LA TRADUCCION
La traduccin o sntesis de protenas,
sucede en los ribosomas de una
forma muy similar en procariotas y
eucariotas.
Consiste en la unin de los
aminocidos mediante enlaces
peptdicos, segn una secuencia que
corresponde a la de nucletidos en el
ARNm.
La correspondencia entre las
secuencias de nucletidos de los
ARNm y la de los aminocidos de las
protenas se establece mediante el
cdigo gentico.
COMPONENTES:
- Una Cadena de ARNm
- Molculas de ARNt (especficos para transporte de aminocidos).
- 20-22 aminocidos.
- Energa (ATP, GTP).
- Cofactor enzimtico Mg++
- Ribosomas 70s (procariontas)
- Ribosomas 80s (eucariontas)
- Aminoacil sintetaza ARNt
- Peptidil transferasa (cataliza la formacin de enlace peptidico entre
aminocidos)
- Factores Protecos:
Iniciacin: IF-I,IF-2,IF-3
Prolongacin: EF-T, EF-G
Liberacin: R1, R2, R3.
ETAPAS
1. Activiacin.
2. Iniciacin.
3. Elongacin (prolongacin).
4. Terminacin y Liberacin.
5. Plegamiento y procesamiento.
1. ACTIVACIN DE LOS AMINOCIDOS
Antes de la polimerizacin, es necesaria la activacin de los aminocidos,
que consiste en la unin de cada aminocido a su ARNt especfico, gracias
a las enzimas aminoacil-ARNt-sintetasas ya la energa aportada por el ATP,
mediada por el Mg++ como activador.
Mg++
aa1 + ARNt1 + ATP ---- Aminoacil- ARNt1aa1 + AMP +2Pi
2. INICIACIN
Intervienen una serie de protenas catalizadores denominadas factores de
iniciacin.
Fac tores de Iniciacin IF-1, IF-2, IF-3
Suceden los siguientes procesos:
Una molcula especial de ARNt iniciador,
reconoce el codn AUG del ARNm y
transporta el aminocido metionina, se
coloca en la subunidad pquela del
ribosoma.
Esta subunidad pequea del ribosoma se
une al ARNm, apareando el ARNt iniciador
al codn de iniciacin AUG.
Se une la subunidad grande, consumiendo
la energa aportada por la hidrlisis del
GTP a GDP y Pi. Esta subunidad grande de
ribosoma tiene dos sitios: el peptidil (P) y
el aminoacil (A). El sitio P es ocupado por
el ARNT iniciador unido a metionina. As se
forma el complejo de iniciacin.
3. ELONGACIN
Despus de formarse el complejo de iniciacin se van aadiendo los
aminocidos, segn el orden correspondiente a los codones del ARNm.
Intervienen una serie de protenas denominadas factores de elongacin, y
se distinguen tres etapas que se repiten cclicamente:
Factores de prolongacin EF-T, EF6
1.- Unin del 2.- Formacin del enlace peptdico.
aminoacil-ARNt El primer enlace peptdico se
correspondiente al forma entre la metionina del sitio
codn del sitio A, P y el aminocido del aminoacil-
mediante enlaces de ARNt situado en el sitio A,
hidrgeno. Se mediante una reaccin catalizada
hidroliza un GTP para por la enzima peptidil transferasa,
proporcionar la localizada en la subunidad grande
energa necesaria para del ribosoma. Se forma as un
situar el aminoacil- dipeptidil unido al sitio A, y el
ARNt en la posicin ARNt descargado queda unido al
correcta. sitio P.
Transposicin. El
ribosoma se traslada al
nuevo codn del ARNm
y, simultneamente, el
peptidil-ARNt pasa del
sitio A al sitio P.
Intervienen unas
protenas denominadas
factores de elongacin, y
molculas de GTP que
suministran energa.
4. TERMINACIN.
La terminacin est sealizada por uno de
los tres codones especiales de terminacin
(stop) del ARNm.
Cuando se aade el ltimo aminocido, el polipptido queda unido
covalentemente por su extremo carboxilo al ARNt, que est situado en el
sitio A del ribosoma.
El polipeptidil-ARNt se separa del ribosoma con la intervencin de los
factores de liberacin, que se unen al ribosoma para provocar un
desplazamiento del polipeptidil-ARNt desde el sitio A al P.
-Una enzima peptidil transferasa hidroliza el enlace ster entre la cadena
polipeptdida y el ARNt. El polipptido, el ARNt, y el ARNm se separan del
ribosoma, que de disocia en sus dos subunidades.
Factores polipeptidicos de liberacin: R1, R2, y R3.
En eucarontes: Cuando el Codn del ARNm llega
a seal de alto UAG es leido por le factor de
liberacin (RF), libera la cadena de proteinas y
termina la sntesis.
En procariontas: Cuando el codn ARNm llega a
seal de UAG UGA los Factores de liberacin
se unen
PLEGAMIENTOS
Proteina lineal no funcional:
Adopcin de formas tridimencionales.
REQUERIMIENTOS:
1. Grupo de proteinas: CHAPERONAS (HSP) o Chaperoninas: asegura
el proceso de plegamiento: Puentes de hidrgeno, fuerzas de
VanDerwalls, -S-S-, ionicas, hidrofbicas.
2. Las Protenas van pasando de estructura 1ria-2daria-3ria-
4ternaria.
3. Las protenas oligomricas adquieren estructura 4teraria.
2. Modificaicones Post Traduccionales de las
Protenas (MPT): consiste en la incorporacin de
grupos funcionales: PO4, CH3, OH-, acetilos,
carboxilos, aminos, coenzimas, glucidos, lpidos,
unin a cofactores, a grupos prostticos
metales, etc.
ejemplos:
