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Análisis Microbiológico de Coliformes en Leche Cruda

Este documento describe los materiales y métodos utilizados para realizar pruebas de coliformes totales en leche cruda. Se utilizaron medios de cultivo, agua peptonada, leche cruda e incubadora. Se realizaron pruebas presuntiva y confirmatoria incubando muestras en caldo lactosado y siembra en agar EMB. La prueba presuntiva fue positiva pero la confirmatoria negativa, indicando ausencia de coliformes en la leche analizada.

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Análisis Microbiológico de Coliformes en Leche Cruda

Este documento describe los materiales y métodos utilizados para realizar pruebas de coliformes totales en leche cruda. Se utilizaron medios de cultivo, agua peptonada, leche cruda e incubadora. Se realizaron pruebas presuntiva y confirmatoria incubando muestras en caldo lactosado y siembra en agar EMB. La prueba presuntiva fue positiva pero la confirmatoria negativa, indicando ausencia de coliformes en la leche analizada.

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MATERIALES Y MTODOS

Materiales

Medio de cultivo (Bilis verde brillante lactosa con Durhan)


Medio de cultivo (agar EMB)
Agua peptona 0,1%
Leche cruda
Incubadora
Pipetas de 1 y 10mL
Asa bacteriolgica
Gradilla
Tubos de ensayo

Mtodos

La experiencia fue realizada en el Laboratorio de Microbiologa de Alimentos de la


Universidad de Crdoba, Sede Berastegui.

Para coliformes totales se realizaron dos pruebas (Presuntiva y Confirmativa).

Prueba Presuntiva: Primero, se mezcl el alimento y se realizaron tres diluciones;


segundo, se pipeteo 1 mL de cada una de las diluciones en tubos (contenan 10 ml de
Bilis verde brillante lactosa), utilizando tres tubos por dilucin; tercero, se mezcl y
seguidamente se incubo por 48 horas a 35C, y por ltimo se leyeron los tubos (positivos
o negativos).

Prueba Confirmativa: Primero, se sembr por estra una asada de los tubos positivos en
agar EMB; segundo, se incubo a 35C por 24 horas y por ltimo se anotaron resultados
de la prueba confirmatoria.

RESULTADOS

Prueba Presuntiva

Para coliformes totales la prueba Presuntiva fue positiva en las tres diluciones
realizadas, cuyo resultado positivo se pudo evidenciar por la presencia de gas y turbidez
en los tubos.
Prueba Confirmativa

La prueba confirmativa resulto negativa, debido a que no se report crecimiento de


colonias en el agar EMB dando as la no existencia de colonias fermentadoras de la
lactosa; por lo tanto cabe afirmar que no se determin la presencia poblacional de
coliformes totales en la leche cruda.

DISCUSIN

Las caractersticas nutricionales que hacen de la leche un alimento completo para la


dieta de los seres humanos, tambin lo hacen un medio de cultivo ideal para el
crecimiento de una gran variedad de microorganismos (Alais 1984).

Los coliformes totales conocidos como microorganismos Gram negativos, no


esporulados, aerobios o anaerobios que fermentan la lactosa con produccin de gas y
acido, aunque algunos pueden ser fermentadores tardos o no fermentadores (Camacho
et al. 2009).

Comparando lo relatado en el prrafo anterior con los resultados obtenidos en la


experiencia realizada, existe una coincidencia, la cual radica en que la prueba
confirmativa de coliformes totales no se report crecimiento en agar EMB, por lo cual se
puede inferir que no existan colonias fermentadoras de la lactosa, desistiendo as del
resultado positivo en la prueba presuntiva ya que la prueba confirmativa es la indica la
presencia o no de coliformes.

As, en base al decreto 1880 de 2011 el cual tiene por objeto sealar los requisitos para
la comercializacin de leche cruda para consumo humano en el territorio nacional, la
leche debe contar con un seguimiento sanitario, saneamiento, y con unos requisitos
para la comercializacin de leche cruda para consumo directo, es decir debe ser inocua
libre de microorganismos que puedan afectar la salud del ser humano.

BIBLIOGRAFAS

Alais, CH. Ciencia de la Leche. Editorial Continental. 5ta Edicion. Mexico DF, Mexico.
1984.
Camacho, A., M. Giles, A. Ortegn, M. Palao, B. Serrano y O. Velzquez. 2009.
Tcnicas para el Anlisis Microbiolgico de Alimentos. 2 ed. Facultad de Qumica,
UNAM. Mxico.

[Link]

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