EXAMEN DE LAB BIOPROCESOS III - UNIDAD
1. Por qu la medicin de una enzima se realiza en tiempos cortos de
reaccin?
La actividad de la enzima disminuye con el tiempo.
2. Como se mide la actividad de una enzima?qu es IU de invertasa?
Se obtiene diferentes curvas haciendo variar la concentracin del caldo crudo.
IU de invertasa, es la cantidad de enzima que es capaz de trasformar 1 umol de
sustrato en un minuto de reaccin. Expresa la actividad enzimtica de la enzima.
3. El mtodo de investigacin usado fue un mtodo fsico....
Las ventajas fueron.
Atrapamiento
4. En el rango de linealidad de invertasa Cul fue el objetivo de emplear un
blanco?
El objetivo fue de obtener el valor que se va usar para restar a todos las muestras
tomadas a diferentes tiempos, para hacer el primer punto 0.
5. Una enzima esta siendo analizada a una concentracin de sustrato de 10 -6M
con un K=3x10-3y en un minuto el 2% del sustrato pasa a producto.
Determinar Vmax. Exprsalo.
6. Para que te ha sido til obtener el perfil X vs ket/K para el reactor con
inulinasa inmovilizada?
Para determinar la conversin de sustrato en productos en funcin de la
velocidad mxima de reaccin, el tiempo y la constante de saturacin; la grafica
x Vs (Ket/k) presenta un comportamiento casi ideal en comparacin a los curvas
caractersticas de un reactor enzimtico por lote.
Permite elaborar un esquema que prefiere el comportamiento real de un reactor
agitado a diferentes [ ] de sustrato.
7. Por qu es importante e indispensable en el experimento determinar los
valores de los parmetros cinticos de una enzima soluble y/o inmovilizada?
Cules son los parmetros cinticos?
Para predecir el comportamiento del sistema enzimtico. , Vmax y Km
La importancia del estudio de la cintica enzimtico reside en dos principios
bsicos. En primer lugar, permite explicar cmo funciona una enzima, y en
segundo lugar, permite predecir cmo se comportar esa enzima in vivo. Las
constantes cinticas definidas anteriormente, Km y Vmax, son los pilares
fundamentales a la hora de intentar comprender el funcionamiento de las
enzimas en el control del metabolismo.
La velocidad V indica el nmero de reacciones por segundo que son catalizadas
por una enzima
las enzimas pueden ser caracterizadas por la concentracin de sustrato a la cual
la velocidad de reaccin es la mitad de la velocidad mxima. Esta concentracin
de sustrato se conoce como constante de Michaelis-Menten (KM). Es la
constante de disociacin (la afinidad del complejo enzima-sustrato (ES) por el
sustrato). Valores bajos indican que el complejo ES est unido muy fuertemente
y raramente se disocia sin que el sustrato reaccione para dar producto.
8. En tu experiencia de Biocatlisis, en el caso que se hubiera determinado los
parmetros cinticos de la inulinasa inmovilizada Podras intuir que sus
valores fueron equivalentes o semejantes a los obtenidos con inulinasa
soluble? Por qu?
No. Debido a que siempre existe una disminucin del poder cataltico de la
enzima cuando se realiza la inmovilizacin, esto puede ser debido a diversos
factores como: restricciones difusionales.
No son semejantes: porque los parmetros cinticos de la enzima soluble son
mayores que en la enzima inmovilizada, la inmovilizada puede limitar el acceso
del sustrato al centro activo de la enzima, volviendo la actividad.
Efecto particin, cuando la [ ] del sustrato es diferente en la superficie del
soporte.
9. Ventajas y Desventajas de enzimas inmovilizadas.
Ventajas
Facilidad para parar rpidamente la reaccin.
El producto no se mezcla con la enzima.
Usos repetitivos.
Posibilidad de trabajar en continuo.
Desventajas
Alteracin de la conformacin de la enzima respecto a su estado nativo.
Prdida de la actividad de la enzima durante su inmovilizacin.
Resulta ser ms caro.
ventaja desventaja
Generalmente aumenta la La rapidez de reaccin es
actividad dentro de las clulas funcin del tamao de
inmovilizadas, sin embargo es partculas y la densidad
mucho menor que la actividad celular.
de clulas suspendidas Es mas costoso
Fase heterogenea
Retiene la capacidad cataltica
en el tiempo
El producto que se obtiene es
mas limpio
10. Como hallar el Vmx y el Kmx?
Se puede determinar utilizando las representacin de elineweaver-burk, esta
representacin se realiza con las inversas de los valores de V y S
11. Cul es el verdadero parmetro cintico que determina la eficiencia de la
enzima?
Es la divisin de Vm/km, demuestra la eficiencia cataltica
12. Procedimiento para obtener el rango de linealidad y Enzimas
inmovilizadas?
13. Por qu se calienta el alginato de sodio?
Porque el alginato de sodio a T ambiente es un gel y tiene que calentar para
volverse lquido y poder covinarse con el caldo crudo.
El alginato es un polisacrido que se puede polimerizar a T ms baja, 25 C. El
alginato de sodio tiene poder gelificante y estabilizante.
Para cambiar su estado, de solido a una disolucin acuosa.
